美洲大蠊提取物对脂多糖诱导人牙周膜成纤维细胞炎症的抑制作用

目的 探究美洲大蠊提取物对脂多糖(LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)炎症的抑制作用。方法 采用原代培养法获得HPDLFs细胞,经免疫组化鉴定为牙周膜成纤维细胞。分别以600、300、150、75、37.5、18.25μg/mL美洲大蠊水提物和醇提物进行处理,采用MTT法检测12、24、36、48 h HPDLFs细胞存活率,选择合适的实验时间及剂量。建立LPS诱导牙周膜成纤维细胞炎症模型,相应剂量药物给药,RT-qPCR法检测IL-1β、IL-6 mRNA相对表达,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS水平,Western blot法检测p-NF-κB、NF-κB、p-p38、p38蛋白表达。结果 与对照组比较,在36 h、150μg/mL剂量以下,美洲大蠊水提物、醇提物组细胞存活率随剂量升高而增加(P<0.05,P<0.01)。与LPS组比较,美洲大蠊水提物和醇提物组细胞IL-6、IL-1β mRNA表达,TNF-α、IL-6水平,p-NF-κB、NF-κB、p-p38、p38蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论 ...     

槲皮素对糖尿病大鼠肾脏氧化应激和血清炎症相关因子的影响

目的:研究槲皮素对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其相关的抗氧化应激和抗炎机制。方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性对照组(骁悉11 mg/kg)、槲皮素25 mg/kg、槲皮素50mg/kg,8周后测定各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、24h尿蛋白并处死取双肾,计算各组大鼠肾脏肥大指数。光镜下观察肾小球病理形态学变化,Western blot测定肾组织核因子-κB P65(NF-κB P65)的含量;测定肾脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清白细胞介素8(IL-8)、转化生长因子-β(TGF-β)、纤维连接蛋白蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)。结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠血清BUN,Scr含量、24 h尿蛋白、肾脏肥大指数均显著升高,糖尿病模型组血清IL-8,TGF-β,FN,PAI-1水平及肾内MDA含量和NF-κBP65表达显著升高,肾脏GSH-Px活性显著降低。与模型组比较,槲皮素25、50mg/kg组大鼠血清BUN,Scr含量、24 h尿蛋白、肾脏肥大指数均显著降低。槲皮素25、50mg/kg组血清IL-8、TGF-β、FN、PAI-1水平及肾内MDA含量和NF-κBP65表达量显著降低,肾脏GSH-Px活性显著升高,且明显改善肾小球病理变化。结论:槲皮素对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与降低NF-κB P65达到抗氧化、抗炎的作用有关。     

红参对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的:探讨红参水提物对哮喘小鼠气道炎症的治疗作用及其机制。方法:把60只雌性BABL/c小鼠随机数字表法分为6组,每组10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、红参水提物200 mg/kg剂量组、红参水提物100 mg/kg剂量组、红参水提物50mg/kg剂量组、地塞米松0.5 mg/kg组。在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行HE染色,观察哮喘模型组肺组织炎症浸润情况,用酶联免疫吸附法(ELISA)观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞的总数和各种炎症细胞计数的变化以及白细胞介素-4(Interleukin 4,IL-4)、IL-5含量;取右肺组织用Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达情况。结果:哮喘模型组小鼠与对照组相比较BALF中的炎症细胞计数、IL-4、IL-5水平增高,肺组织中的NF-κB p65表达水平显著高于对照组;红参水提物组有效剂量(100~200 mg/kg)和地塞米松组小鼠与哮喘组小鼠相比炎症细胞计数、IL-4、IL-5以及NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低,具有显著的差异。结论:红参水提物在体内可能主要通过抑制NF-κB p65等核转录因子来调节Th2反应,以此来抑制气道炎症反应。     

槲皮素对TNF-α损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的:用TNF-α诱导血管内皮细胞(ECV-304)损伤,观察槲皮素对ECV-304的保护作用.方法:采用MTT法观察槲皮素对ECV-304活性的影响:硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;用比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量;免疫细胞化学法观察内皮细胞核转录因子-κB(NF-κB)的表达.结果:TNF-α对ECV-304具有损伤作用,槲皮素能显著抑制TNF-α诱导ECV-304内NO和MDA释放和NF-κB的表达;并能提高TNF-α诱导ECV-304内SOD活性.结论:槲皮素对TNF-α诱导ECV-304损伤具有保护作用,其机制可能与其减少NO释放和抗氧化作用有关,而抗氧化作用主要是通过调节NF-κB的表达.     

槲皮素对脂多糖刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响

目的 观察槲皮素对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定不同浓度槲皮素对RAW264.7细胞活性的影响.将细胞分为五组:A组(对照组)、B组(LPS干预组)、C组(LPS+槲皮素50 μmol/L)、D组(LPS+槲皮素150 μmol/L)和E组(LPS+槲皮素250μmol/L).real-time测定各组细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(Myd88)、NF-κB (p65) mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平.结果 槲皮素在0～250 μmol/L浓度范围内对RAW264.7细胞活性没有影响.同对照组相比,槲皮素可有效降低LPS引起的TLR4、MyD88、NF-κB (p65)的mRNA表达和细胞上清液中IL-6、TNF-α分泌水平,并呈剂量依赖性(P＜0.01).结论 槲皮素可能通过抑制TLR-Myd88-NF-κB传导通路的活化,减少巨噬细胞炎症因子的分泌.     

血塞通注射液对体外OGD/R损伤的BV2细胞炎症反应的影响

该研究通过对小鼠神经小胶质细胞(BV2)体外模拟脑缺血再灌注(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤探讨血塞通注射液(XST)抗炎症反应的作用及可能的作用机制。BV2细胞OGD损伤4 h后,通过测定细胞存活率(MTS法)确定复氧时间及血塞通给药浓度,采用ELISA法检测细胞上清中炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6及IL-10的分泌水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测细胞中p-ERK,p-JNK,p-p38蛋白表达水平的变化,免疫荧光法检测NF-κB p65的核转位水平。结果显示XST 25 mg·L-1可显著提高OGD 4 h/R 6 h引起的细胞活力的下降,并抑制TNF-α,IL-1β,IL-6及IL-10的分泌水平的增高,同时XST能下调OGD/R诱导的p-JNK,p-p38蛋白表达的升高,并逆转NF-κB p65的核转位。以上研究结果表明XST对OGD/R损伤的BV2细胞炎症反应具有显著的抑制作用,其作用机制可能与抑制前炎症因子的分泌,调节MAPK信号通路及核转录因子NF-κB p65有关。     

恒古骨伤愈合剂对肌筋膜疼痛综合征大鼠的干预作用

目的：明确恒古骨伤愈合剂对肌筋膜疼痛综合征(MPS)模型大鼠的干预作用,并从抗炎角度初步探索其缓解慢性疼痛的药理机制。方法：60只SD大鼠设立分组,分别为正常组、模型组、恒古骨伤愈合剂低、中、高剂量组(0.66、1.31、2.63 mL·kg^-1),塞来昔布组(21 mg·kg^-1),通过打击结合离心运动法建立MPS大鼠模型,造模同时灌胃给予恒古骨伤愈合剂和塞来昔布,SMALGO爪压力测痛仪检测大鼠激痛点压痛阈值,Von-Frey针和丙酮刺激法分别检测足底机械痛敏阈值和冷痛敏刺激反应;模型8周和10周,肌电图仪测定激痛点自发放电状态及抽搐反应;CatWalk步态分析仪检测大鼠步态变化;酶联免疫吸附测定法检测血清及激痛点中P物质(SP)、缓激肽(BK)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MPS大鼠激痛点中核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化(p)-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65的蛋白表达水平;免疫荧光法检测激痛点中...     

消痰和胃方干预胃癌前病变大鼠NF-κB通路的研究

目的:检测消痰和胃方对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织NF-κB通路的影响,探讨该方干预胃癌前病变的机制。方法:清洁级Wistar雄性大鼠,空白对照组和模型组,模型组采用以化学干预为主的多因素造模方法,共32周。模型组再分为模型对照组、维酶素组、消痰和胃方组。干预6周后采用Western blot检测大鼠胃黏膜组织中p-NF-κB p65蛋白表达的差异。结果:与模型对照组相比,消痰和胃方组p-NF-κB p65表达降低(P<0.05),维酶素组无统计学意义(P>0.05),并且消痰和胃方能改善胃癌前病变大鼠整体情况,较维酶素更优。结论:消痰和胃方防治胃癌前病变的机制有可能通过干预NF-κB通路实现的,值得进一步深入研究。     

内异方调控NF-КB p65改善大鼠子宫内膜异位症的机制研究

目的:探讨内异方改善大鼠子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)的作用机制。方法:构建大鼠EM模型,随机分成假手术组、模型组、内异方24. 8 g/kg、49. 6 g/kg、99. 2 g/kg组、孕三烯酮0. 25 mg/kg组,灌胃21天后剖解观测内异灶,ELISA法检测腹腔冲洗液中TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的水平,qP CR、Western-blot法检测NF-κB p65基因、蛋白表达和磷酸化,免疫组化法检测NF-κBp65入核情况。结果:EM大鼠给予内异方治疗后,明显抑制內异灶的生长,改善盆腔粘连;显著降低了腹腔冲洗液TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6的含量;明显抑制NF-κB p65的基因、蛋白表达和磷酸化;显著抑制NF-κB p65核表达。结论:內异方可能通过抑制NF-κB p65的表达和活化,进而抑制炎症反应,抑制异位内膜的生长和黏附而改善EM。     

灯盏乙素对痴呆大鼠脑组织神经炎性反应的干预作用

目的:观察灯盏乙素对痴呆模型大鼠脑组织中几种炎性因子表达的影响,探讨其可能的抗炎治疗机制.方法:Wistar大鼠42只,随机分为5组,正常对照组、假手术组、学习记忆损伤模型组、灯盏乙素处理组和脑复康处理组.用双侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)联合ip D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型;造模后次日分别用28 mg· kg-1灯盏乙素和365 mg·kg-1脑复康连续ig 20 d;实时定量聚合酶链法(RT-PCR)测定大鼠脑组织核因子(nuclear factor,NF)-κB p65表达的变化;免疫组织化学方法检测大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果:与正常组和假手术组相比,模型组大鼠脑组织中NF-κB p65 mRNA表达水平上升了27％和31％ (P ＜0.05),IL-1β,IL-6,TNF-α表达的阳性细胞分值正常组(1.3±0.5,1.6±0.5,1.6±0.69)和假手术组(1.5±0.5,1.6±0.7,2.0±0.7).模型组明显上升(2.9±0.7,3.2±0.8,3.0 ±0.82),P＜0.05.灯盏乙素处理后NF-κB p65的mRNA表达水平下调了20％ (P ＜0.05),IL-1β,IL-6和TNF-α表达的阳性细胞分值明显下降(2.1±0.67,2.3±0.70,2.2±0.53),P＜0.05.结论:灯盏乙素可阻断痴呆大鼠脑组织中NF-κB p65的活化,抑制炎性因子释放,改善学习记忆能力,通过减轻神经炎症损伤起到神经保护的作用.     

槲皮素的抗癌作用

槲皮素具有较强的抗癌活性,从清除氧自由基、抑制癌细胞增殖、对抗到癌因子和抗癌经增敏作用等几个方面,简要介绍槲皮素抗癌作用的研究情况。     

槲皮素抗大鼠速发型过敏反应

目的研究槲皮素对免疫球蛋白E(Ig E)介导的速发型过敏反应大鼠Ig E和白三烯(LT)水平、嗜酸性粒细胞(EOS)数量及肺组织炎症面积的影响。方法大鼠随机分为模型组,孟鲁司特钠组,槲皮素高(40 mg/kg)、低(10 mg/kg)剂量组。除空白组(未处理大鼠)给予生理盐水外,其他各组大鼠腹腔注射含氢氧化铝和卵白蛋白(OVA)的生理盐水,14 d后,尾静脉注射卵白蛋白(15 mg/kg)以诱发速发型过敏反应(3 d,1次/d)。大鼠血清中LT和Ig E水平采用ELISA法确定,肺泡灌洗液(BALF)和全血中EOS的数量通过细胞计数法统计,肺组织炎症面积采用病理学检查进行评价。结果槲皮素高、低剂量组大鼠血清中LT和Ig E含有量、BALF和全血中EOS的数量及肺组织炎症面积均明显低于模型组(P0.05,P0.01)。结论槲皮素可能通过抑制炎性介质释放、降低炎性反应而发挥抗速发型过敏反应的作用。     

Anti-proliferative effect of the extract of Guangzao (Fructus Choerospondiatis) on cultured rat cardiac fibroblasts

OBJECTIVE: To ascertain if total flavonoids of Guangzao(Fructus Choerospondiatis)(TFFC) extracted from Guangzao(Fructus Choerospondiatis) can inhibit angiotensin Ⅱ-induced proliferation of cardiac fibroblasts(CFs).METHODS: CFs were cultured by the differential attachment method. A model of cell proliferation was established by stimulation with Ang Ⅱ. Cardiac fibroblasts growth was determined using a hemocytometer. Cell proliferation was detected by methyl thiazole tetrazolium. Lactate dehydrogenase activitywas measured by chemical colorimetric method.RESULTS: Proliferation of TFFC-treated(25, 50,100 mg/L) fibroblasts was significantly less than that of cells in the angiotensin Ⅱ group(P 0.01),and TFFC inhibited proliferation in a dose-dependent manner. These inhibitory effects were partly blocked by pretreatment with NG-nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME) and 1H-[1,2,4]-oxadiazole-[4,3-a]-quinoxalin-1-one(ODQ).CONCLUSION: TFFC inhibited angiotensinⅡ-induced proliferation of cardiac fibroblasts via a mechanism that probably involves activation of the NO-cyclic guanosine monophosphate signaling pathway.     

槲皮素对白血病细胞杀伤作用的研究

目的:研究槲皮素对白血病细胞的杀伤作用以及诱导的凋亡研究。方法:CCK-8试剂盒检测不同浓度的槲皮素(0~100μM)对白血病K562和HL-60细胞活性的影响;Hoechst33342染色技术观察40u M槲皮素处理细胞24和48小时后细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;caspase8、9、3(半胱天冬酶)特异性抑制剂预处理K562细胞后,检测药物对细胞活性的影响;40u M槲皮素处理细胞24和48小时后,Western blot检测细胞中caspase家族蛋白8、9、3的表达情况。结果:0~100u M的槲皮素能够引起K562和HL-60细胞剂量依赖型的活性下降,40u M的槲皮素处理细胞24和48小时后,K562细胞核明显发生皱缩,引起凋亡,随着处理时间增长,凋亡率增加,处理24和48小时后细胞的凋亡率分别为(45.8±2.06)%和(83.6±1.89)%。caspase 9、3抑制剂预处理K562细胞后,槲皮素能够引起细胞活性的增加,而caspase 8抑制剂预处理后,槲皮素没有引起细胞活性的上升。Western blot检测结果表明40μM的槲皮素处理细胞后能够上调caspase 9、3蛋白的表达,而没有引起caspase 8蛋白表达量的上升,随着处理时间的增长,caspase 9、3的表达量更高。结论:槲皮素对白血病细胞具有很强的杀伤作用,并诱导细胞caspase 9、3蛋白参与的内源性通路介导的凋亡。     

具有抗肿瘤活性的槲皮素衍生物研究进展

槲皮素是黄酮类天然产物,具有多种药理活性,近年来其优良的抗肿瘤活性受到了国内外学者的关注,但由于特殊的分子结构导致其水溶性较差,影响了其临床应用价值,因此对其结构进行化学修饰以改善生物利用度或提高抗肿瘤活性成为了研究的热点。对近年来具有抗肿瘤活性的槲皮素酯类衍生物、金属配合物、醚类衍生物及其他衍生物的研究进展进行综述,以期为槲皮素抗肿瘤新药的开发提供科学依据。     

槲皮素对Alzheimer病大鼠的脑保护作用及其机理研究

目的：观察Alzheimer病模型大鼠的影响和机理的初步分析。方法：用立体定位技术对海马CA1区微量注射喹啉酸造成Alzheimer病模型；Y形迷宫检测大鼠学习记忆水平；原子吸收分光光度计检测海马组织钙离子浓度；分离血清检测SOD，LPO值。结果：槲皮素可明显提高喹啉酸所致痴呆大鼠学习记忆水平；显著降低海马组织钙含量及血清自由基水平；结论：提示槲皮素对AD大鼠的脑保护作用与清除自由基，钙拮抗有关。     

脱氢紫堇碱对高糖培养心肌成纤维细胞Wnt信号通路的影响

目的采用体外高糖培养心肌成纤维细胞(CFs)的方法,观察脱氢紫堇碱(DHC)对高浓度葡萄糖培养的心肌成纤维细胞Wnt信号通路的影响。方法采用体外高糖诱导心肌成纤维细胞增殖模型,western blot法检测β-catenin,GSK-3β以及P-GSK-3β的蛋白表达水平;ELISA法观察细胞分泌TGF-β1蛋白的能力。结果脱氢紫堇碱可以抑制β-catenin的表达(P0.01),上调P-GSK-3β的表达(P0.05),减少TGF-β1的合成(P0.01)。结论脱氢紫堇碱能抑制Wnt信号通路的异常表达,具有潜在的抗心肌纤维化作用。