内皮素A型受体（ET＿A－R）基因在大鼠心血管系统细胞中的表达

应用改良的Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定了大鼠ＥＴＡ型受体（（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ－Ａｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＴＡ－Ｒ）ｍＲＮＡ在心血管系统细胞中的分布。结果证明，ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ广泛地分布在心血管系统细胞中．其中以平滑肌细胞中含量最高。内皮素及其受体的配基可以促进血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）中ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ的表达。此外，还发现在自发性高血压动物的血管平滑肌细胞中ＥＴＡ－Ｒ基因的高表达可能是高血压血管高反应性的一个重要机制。     

自发性高血压大鼠内皮素不同组织分布及其意义

为探讨内皮素(ET)在自发性高血压大鼠(SHR)与正常血压大鼠(WKY)体内分布规律及其意义。本文选用SHR和WKY大鼠各10只,用放免法测定其血浆、脑组织和主动脉血管组织中内皮素含量的变化。发现SHR血浆、脑和主动脉中ET量均显著高于WKY组(P分别<0.01);WKY组脑较血管组织含量低(P<0.01),SHR组两者无显著性差异(P>0.05)。认为内皮素不同组织分布的变化可能与高血压的发生发展及并发症有关。     

自发性高血压大鼠心肌内皮素受体的变化

观察自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）心肌组织细胞膜内皮素受体的变化。     

自发性高血压大鼠血管紧张素Ⅱ－1型受体基因的表达

应用反转录一聚合酶链式反应（ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，亚克隆出大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ－１型受体（ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡＴｙｐｅ－１Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＴＲ１）ｃＤＮＡ，并以此为探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和定量ＰＣＲ方法，测定大鼠不同组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ的分布，证明ＡＴＲ１ｍＲＮＡ广泛存在于不同组织中，其中以肾脏含量为最高，其次为心脏和小脑；自发性高血压大鼠（ＳｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＲａｔ，ＳＨＲ）肾、心组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ较正常对照大鼠（Ｗｉｓｔａｒ－ＫｙｏｔｏＲａｔ，ＷＫＹ）明显下隆。     

中西医结合对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ 1型受体mRAN和蛋白表达的影响

目的观察降压胶囊联合尼莫地平对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并探讨其对大鼠心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体蛋白和mRAN基因表达的影响。方法将66只SHR大鼠随机分为6组,即模型组、降压胶囊大剂量联合尼莫地平组(联合大剂量组)、降压胶囊小剂量联合尼莫地平组(联合小剂量组)、降压胶囊大剂量组(中药大剂量组)、降压胶囊小剂量组(中药小剂量组)、尼莫地平组。连续灌胃8周,每日1次,正常饲料喂食。8周末,动物麻醉取血和分离心脏组织,放射免疫法测定AngⅡ含量,逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法测定各组大鼠心肌mRNA的含量,采用Western免疫印迹(Western Blot)法测定各组大鼠心肌AT1R受体的蛋白表达。结果与模型组比较,联合大、小剂量组,中药大、小剂量组和尼莫地平组SHR大鼠血压、血浆AngⅡ含量均显著下降(P0.05或P0.01)。与模型组比较,联合大、小剂量组,中药大剂量组和尼莫地平组对大鼠心肌AT1受体蛋白表达和mRNA基因表达均显著降低(P0.05或P0.01);且联合大、小剂量组对AT1受体蛋白表达及联合大剂量组mRNA基因表达较尼莫地平组显著降低(P0.05或P0.01)。结论降压胶囊联合尼莫地平可抑制血中AngⅡ水平,降低大鼠血压,其治疗机理与抑制心肌AngⅡAT1受体mR-NA含量的增加和降低其蛋白的表达有关,其降低水平和治疗作用优于单纯用中药和单纯用西药。     

自发性高血压大鼠血中内皮素、一氧化氮、丙二醛水平及其意义

为探讨内皮素(ET)、一氧化氮(NO)在高血压发病中的作用及相互关系。选用自发性高血压大鼠(SHR)和对照WKY大鼠各10只,分别测定血浆中NO(?)/NO (?),MDA及ET水平,分析血压与ET、NO及MDA与NO的关系。结果SHR血浆中的NO(?)/N0(?)、ET、MDA水平明显高于对照组(P<0.01),同时SHR血压与ET水平独立相关,偏相关系数为0.8855(P<0.01),MDA与NO(?)/NO(?)正相关(r=0.8714,P<0.01)。结果提示,ET水平升高在高血压发病中起重要作用,血浆NO升高是一种代偿反应,但NO过度升高参与高血压的发展,并可能与高血压的并发症有关。     

充血性心力衰竭患者外周血中内皮素受体基因的表达及意义

目的 研究内皮素受体基因(ETA、ETB)在充血性心力衰竭(简称心衰)患者外周血中的表达,探讨其临床意义,并建立外周血ETA、ETB基因的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法.方法 在48例心衰患者和25例健康对照组中分别采用放免法测定血浆内皮素(ET-1)水平,应用RT-PCR技术检测外周血中ET受体基因表达水...     

健胃愈疡颗粒对复发胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素-1 A受体mRNA表达的影响

目的观察健胃愈疡颗粒对胃溃疡大鼠胃黏膜组织中内皮素-1A受体(endothelin-1A receptor,ETAR)mRNA表达的影响及其抗溃疡复发作用的机制.方法拟Okabe改良法制作SD大鼠胃溃疡模型,腹腔注射白介素-1β(IL-1β)制作胃溃疡复发模型.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测大鼠胃黏膜组织中ETARmRNA的表达.结果①在灌胃第10天后,健胃愈疡组(JG)ETARmRNA的相对表达量显著低于模型组(MG)(P＜0.05),与正常组(NG)、假手术组(POG)、雷尼替丁组(RG)、中西药结合组(CTWG)无明显差异;②在灌胃第92天后,JG ETAR mRNA相对表达量显著低于RG、模型复发组(MRG),具有显著性差异(P＜0.01～0.05);JG在灌胃第10天、第92天后诱发胃溃疡复发,胃黏膜组织中ETARmRNA的表达无明显增加.结论健胃愈疡颗粒可显著抑制胃溃疡和胃溃疡复发大鼠胃黏膜组织中ETAR mRNA的表达,是其修复溃疡和抗溃疡复发机制之一.     

易卒中型自发性高血压大鼠心肌组织肾上腺髓质素受体的表达上调

1993年发现肾上腺髓质素（AM）具有降压的作用还有利钠和利尿作用.对于AM受体,McLatchie等已经报道了新的受体联合体,包括降钙素受体类似受体（CRLR）,受体活性修饰蛋白（RAMP）.RAMP1/CRLR联合体成为降钙素基因相关肽特异性受体;RAMP2/CRLR和RAMP3/CRLR联合体成为AM特异性受体.Totsune等报道在充血性心力衰竭的大鼠心脏AM、RAMP2和CRLR基因表达上调.因此,AM受体联合体成分表达的上调是在不同病理状态下进行的.然而,在高血压导致LVH的AM受体特征还未完全清楚.     

自发性高血压大鼠血液及心血管组织内皮素的测定及意义

目的：探讨内皮素在高血压发生和发展中的作用。方法：以内龄ＷＫＹ大鼠为正常对照，观察ＳＨＲ高血压发生前后，不同周龄大鼠血浆、左心室和主动脉组织局部内皮素（ＥＴ）水平及左心室和主动脉组织ＥＴｍＲＮＡ基因表达情况。ＥＴ水平的测定用放射免疫法；组织局部ＥＴｍＲＮＡ基因的相对表达量用ＲＮＡｄｏｔｂｌｏｔ杂交检测。结果：血浆ＥＴ水平在各周龄ＳＨＲ均无显著增高，左心室和主动脉组织局部ＥＴ水平及ＥＴｍＲＮＡ基因表     

用mRNA差异显示法比较SHR和WKY大鼠肾脏组织的基因表达

目的用ｍＲＮＡ差异显示技术观察ＳＨＲ与ＷＫＹ大鼠肾脏组织在ｍＲＮＡ表达水平上的差异。方法取１２周龄的ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠，提取肾脏总ＲＮＡ，用含１２个寡聚核苷酸的Ｔ１１Ａ或Ｔ１１Ｇ引物进行逆转录，用Ｔ１１Ａ、ＡＰ１～３，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ６，Ｔ１１Ｇ、ＡＰ７～８引物对逆转录产物进行多聚酶链式反应，反应产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影。结果每一种引物组合在单一电泳泳道上可显示７０～１００条基因表达条带，其中绝大多数代表肾脏基因表达的条带是相同的，但其中显示的４条ＳＨＲ大鼠肾脏基因表达的条带与相对应的ＷＫＹ大鼠肾脏基因表达的条带出现了差异。讨论ｍＲＮＡ差异显示技术对于快速筛选ＳＨＲ及ＷＫＹ大鼠肾脏组织的差异表达基因是适用的。     

长生降压液对自发性高血压大鼠血压和血浆去甲肾上腺素的影响

观察长生降压液对自发性高血压大鼠的血压、血浆去甲肾上腺素(NE)、心脏重量指数和红细胞膜渗透脆性的影响。高血压大鼠分为对照组和服药组,WKY大鼠组为血压正常组。结果表明:对照组的血压继续升高(25.7kPa),与起始值(22.4 kPa)相比有显著统计学差异(p<0.05);而服药组大鼠的血压只在起始值(22.8 kPa)上下波动,心脏重量指数(4.44 mg/g)也明显低于对照组(4.68 mg/g)。此外,WKY组血浆NE水平(1.63pmol/ml)和红细胞膜渗透脆性(0.06)明显低于对照组(p<0.05)),而服药组与对照组相比仅有降低的趋向。结果提示长生降压液有阻止自发性高血压大鼠血压继续升高的作用;该药还有改善左室心肌肥厚的作用     

一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的半定量检测及其应用

参照Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，建立一种灵敏、简捷、特异的半定量ＮＯＳｍＲＮＡ测定方法；证明了ＮＯＳｍＲＮＡ不仅存在于脑组织，亦广泛分布于心、肾、肺和肝组织中，其中以脑组织含量最高，肾、心次之，除内皮细胞以外平滑肌细胞中亦有ＮＯＳ基因的表达；此外，本工作还观察到自发性高血压大鼠的脑、肾、肝和平滑肌细胞中ＮＯＳｍＲＮＡ水平下降，表示ＮＯＳ基因表达受抑，可能与高血压的病因密切相关。     

自发性高血压大鼠主动脉内皮细胞形态和通透性变化研究

应用血管内皮细胞平铺技术、SEM及三级切片技术,动态观察了自发性高血压大鼠主动脉内皮细胞在不同血压下的形态改变。用伊文思蓝活体染色、辣根过氧化酶反应等方法观察了不同血压下动脉内膜通透性变化。实验结果表明,高血压因素能直接损伤动脉内皮细胞,导致动脉内膜通透性增强。研究认为高血压是引起动脉内皮细胞损伤的重要因素之一,内皮细胞的损伤是动脉粥样硬化发生的起点。     

内皮素基因在大鼠不同器官中的表达

目的：定量检测内皮素ｍＲＮＡ在大鼠心、肝、肺、肾等器官及培养的肾小球系膜细胞（ＭＣ）的表达。方法：半定量逆转录－多聚酶链反应（Ｓ＿ｑＲＴ－ＰＣＲ）技术及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交方法。结果：内皮素ｍＲ－ＮＡ在上述器官及ＭＣ中均有表达，其表达水平从高到低依次为肺、心、肾、肝。结论：内皮素基因在不同器官有着不同表达；除血管内皮细胞外，ＭＣ是产生内皮素的又一种细胞。     

中枢5-HT_(1A)受体激动剂可改善自发性高血压大鼠的红细胞变形性

给戊巴比妥钠麻醉的正常大鼠侧脑室注射(i.c.v.)5-BT_(1A)R高选择性激动剂8-OH-DPAT,可产生剂量依赖的降压效应;而给自发性高血压大鼠(SHR)i.c.v.8-OH-DPAT(20μg/10μl)却观察到在血压升高的同时,RBC变形性有明显改善。另外直接作用于RBC膜的因素不是5-HT或8-OH-DPAT。本工作首次证明,中枢神经系统(CNS)不仅对血液动力学状态,而且对血液流变学状态也具有调节作用。     

幼年SHR肾髓质间质细胞内抗高血压之脂质颗粒的观察

为探讨ＳＨＲ肾髓质问质细胞（ＲＩＣ）内所含颗粒的减少是否由于机体处于高血压状态下促进颗粒释放增加所致，抑或有先天遗传特征。选用未发生高血压的ＳＨＲ幼鼠，通过形态学观察和图像分析测定，证实ＳＨＲ幼鼠在未发生高血压之前，其ＲＩＣ内所含颗粒的数量及体积大小均少于和小于对照ＷＫＹ鼠，其数量和体积分别少于３９％和小于４９．３％。说明确系遗传的特征。     

大鼠肝前型门脉高压模型的建立

本工作以分期门脉阻断法制备大鼠肝前型门脉高压模型,并以正常大鼠为对照就模型动物的一般情况、门静脉压变化、肝组织学变化等情况进行了动态观察。结果表明分期门脉阻断法制备大鼠门脉高压模型具有方法简单、制备周期短、诱发门脉高压成功率高、动物死亡率低等优点,适用于门脉高压症各领域的研究,值得推广。     

自发性高血压大鼠肝阳上亢证模型肾上腺组织的酪氨酸羟化酶基因表达研究

目的：研究自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）肝阳上亢证模型的酪氨的酸羟化酶（ＴＨ）基因表达水平及潜阳方对其影响。方法：采用免疫组织化学方法和原位杂交法分别测定该模型上腺组织ＴＨ蛋白质及ｍＲＮＡ表达。结果：ＳＨＲ肝阳上亢证模型ＴＨ蛋白质及ｍＲＮＡ表达均明显增强,经用具有平肝熄风作用的潜阳方治疗后,其表达水平下降。提示：ＳＨＲ肝阳上亢证模型具有肾上腺组织ＴＨ表达增强的特点。