北京部分地区仔猪大肠杆菌病血清型调查

近年来,由于致病性大肠杆菌血清型的不断变化,致使猪大肠杆菌病的防治越来越困难。为了解目前北京地区仔猪大肠杆菌的血清型情况,为该地区仔猪大肠杆菌病的有效预防和治疗提供技术指导,笔者从北京部分地区发生疑似仔猪黄白痢的猪场,无菌采集死亡仔猪的肝脏等组织样品,对其进行病原菌的分离培养与鉴定,现报道如下。     

一株致病性兔大肠杆菌的分离与鉴定

从某兔场分离出一株疑似大肠杆菌的菌株,对其进行了分离培养、生化鉴定、血清型鉴定及免疫原性试验,结果表明该菌为致病性大肠杆菌,其血清型为O101,且具有好的免疫原性。     

皖西地区仔猪源致病性大肠杆菌分离鉴定与血清学分析

为探明当前皖西地区规模化猪场大肠杆菌病的病原及流行菌株血清型,本研究对该地区的12个规模化猪场典型病例进行了病原分离和血清型鉴定,报告如下.     

新疆北疆地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性

为研究确定新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛腹泻病原性大肠杆菌的优势血清型、致病性及毒力因子特征。采用细菌学、免疫学及分子生物学的方法对从新疆呼图壁、石河子、奎屯3个主要奶牛生产基地14个规模化奶牛场10日龄内腹泻犊牛直肠棉拭子样品进行了大肠杆菌的分离与鉴定、O血清群、黏附素及肠毒素的测定。结果从302份样品中分离并经生化鉴定获得180株呈β溶血的大肠埃希菌,其中94株对小鼠有致病性;对其中53株代表菌株的O血清型、黏附素及肠毒素测定,结果为8株携带K99菌毛及STa毒素基因,6株携带F41茵毛基因,6株产生LT毒素;28株分离株分布于16个O血清型,其中O101,O6,O114,O78为优势血清型,占被测菌株的50％。结果表明,新疆北疆主要奶牛养殖区致犊牛腹泻大肠杆菌是以携带K99、F41和产ST的溶血性大肠杆菌为主,其研究结果为犊牛大肠杆菌性腹泻的免疫防治提供病原学依据。     

宠物犬源致病性大肠杆菌鉴定血清型检测与耐药性分析

为了分析安徽池州地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,使用无菌肛门拭子采集26家宠物医院腹泻宠物粪便样品63份进行细菌分离鉴定,获得了30株大肠杆菌。对分离的30株大肠杆菌用灌胃方式攻毒小鼠验证其致病性,结果显示,20株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别测定20株致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性,结果显示,20株致病性大肠杆菌分离株共有10种血清型,以O8和O13为优势血清型; 20株致病性大肠杆菌分离株均对头孢克肟、头孢曲松、恩诺沙星、丁胺卡那霉素4种药物高度敏感;对其他药物存在不同程度的耐药。本试验为该地区的宠物犬大肠杆菌病的防治提供基础。     

江苏某奶牛场健康奶牛体内产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及其对小鼠致病性的研究

通过对江苏省某奶牛场连续6个月的定群、定畜跟踪调查,获得产志贺毒素大肠杆菌(STEC)在该牛场分布的广泛性、持续性和血清型多样化的资料,并对一些重要血清型分离株作致病性的鉴定.基于本实验室已经建立的多重PCR方法对stx1、stx2、eaeA、ehxA共4个基因进行检测,对检测出的阳性样品,非O157 STEC采用多重PCR结合CT-SMAC平板的分离方法,而O157 STEC通过免疫磁珠结合O157显色平板的分离方法.结果表明,该奶牛场STEC的初筛率为16.1%(112/696),分离率为11.1%(77/696).分离株属于35种O血清型和60种O:H血清型.该场的优势血清型为O4、O26和O93,O157在该场存在,但并非优势血清型.77个分离株中,stx2基因的检出率为68.8%,远远高于其它毒力基因,如stx1(19.5%)、eaeA(11.7%1)和ehxA(20.8%).该场分离到一些O157和O26血清型的菌株,对小鼠具有较强的致病性.奶牛是STEC的天然宿主,可健康带菌.除了O157STEC外,非O157 STEC中一些高致病力菌株对人类的健康也存在威胁.     

腹泻水貂检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌

为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验。用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果：从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别为078、029和038的大肠杆菌,对3个血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua。3个血清型078、029和038的大肠杆菌均使小鼠发病死亡。结果表明水貂腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森茵HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该茵对水貂的健康具有潜在的威胁。     

吉林地区仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定

<正>为探明导致仔猪黄白痢的大肠杆菌的主要血清型及主要血清型的分布情况,并为研制与吉林地区血清型一致的菌苗提供科学依据,在流行病学调查的基础上,对从吉林地区分离到的43株致病性大肠杆菌用大肠杆菌O抗原定型单因子血清进行血清型鉴定。结果表明,其中有35株能定型,分布在8个血     

四川省部分规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型鉴定与耐药性分析

为了解四川省规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型和耐药性,试验采集四川省部分规模化肉牛养殖场腹泻犊牛的肛拭子、粪便等样品151份,采取细菌分离与鉴定,生化试验,PCR鉴定、测序与同源性分析,致病性试验等方法分离致病性大肠杆菌,并采用凝集试验和药敏纸片法分别检测致病性大肠杆菌的血清型和耐药性。结果表明:共分离到72株大肠杆菌,其中50株为致病性大肠杆菌,属于10个血清型,以O_(101)、O_(36)、O_(126)、O_(26) 4种血清型为流行的优势血清型。分离的50株致病性大肠杆菌对头孢克肟、头孢曲松、头孢他啶等的耐药率为14.0%～28.0%,对林可霉素、环丙沙星、丁胺卡那霉素等的耐药率为30.0%～64.0%,对强力霉素、磺胺间甲氧嘧啶、多黏菌素等的耐药率为72.0%～96.0%。说明致犊牛腹泻大肠杆菌流行的血清型复杂,耐药现象严重,且呈现多重耐药现象。     

我国华东地区大肠杆菌、沙门氏菌分离和血清学鉴定

作为我国兽医临床耐药性监测计划的一个起步,对目前畜禽耐药菌株流行情况调查分析.2001年在华东地区选择了5个鸡场和1个孵化厂,进行3次追踪采样和抗菌药使用情况调查,共得到样品254份(泄殖腔拭子165份,饲料、水、尘土57份、饲养员粪便32份).分离到大肠杆菌80株,其中泄殖腔拭子有72株,分离率为43.6%;饲料、水和尘土有4份,分离率为7.0%,饲养员粪便有4株,分离率为12.5%.大肠杆菌0抗原血清型有35种,优势型不明显,O15型最多有8株,占10%.多为每个血清型有1～2株.共分离到沙门氏菌2株,血清型均为O9.所有鸡场采样前均使用过抗菌药.这次调查初步了解该地区抗菌药使用情况及两种细菌在该地区的存在状况和血清型分布,为下一步耐药性检测打下基础.     

桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了了解桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型分布与耐药性,从桂林地区不同养猪场中采集患腹泻仔猪肝脏、肛拭子及粪便等病料中分离到67株大肠杆菌。致病性试验结果显示,在67株大肠杆菌中52株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法对52株致病性大肠杆菌进行血清型鉴定和耐药性分析,结果表明,52株致病性大肠杆菌共属于12个血清型,以O149、O109和O9为流行的优势血清型;52株致病性大肠杆菌呈现多重耐药,对阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、新霉素3种药物的耐药率高达100%,对环丙沙星、恩诺沙星、氨苄西林等9种药物的耐药率在51.9%～98.1%之间;对其他药物的耐药率在23.1%～48.1%之间。本试验为该地区致仔猪腹泻大肠杆菌防控提供了参考依据。     

新疆克拉玛依地区奶牛源致病性大肠杆菌的血清型、系统进化群及MLST分析

试验对新疆克拉玛地区106头健康成年荷斯坦奶牛的新鲜粪便进行了致病性大肠杆菌的分离鉴定、分型及遗传进化分析,初步掌握了调查地区奶牛致病性大肠杆菌的流行情况。参考USDA检测法,对106份粪便样品选择性增菌,分别利用麦康凯和伊红美蓝琼脂培养基对大肠杆菌进行分离纯化鉴别,通过PCR方法鉴定,获得55株大肠杆菌分离株,对这些分离株进行致病性大肠杆菌血清型鉴定、系统进化群及多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）分析,利用goeBURST和Mega 7.0生物学软件进行聚类和进化研究,并进行流行病学分析。结果显示,106头健康荷斯坦奶牛的新鲜粪便中大肠杆菌的检出率为51.89%,55株大肠杆菌分离株共鉴定出9种与致病性相关的血清型,检出率为54.55%,其中肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）和肠产毒性大肠杆菌（ETEC）血清型检出率分别为21.82%、18.81%和14.55%,优势血清型为O142∶K86（B）和O124∶K72（均为10.91%）,前者属于肠致病性大肠杆菌,后者属于肠侵袭性大肠杆菌,而肠出血性大肠杆菌（EHEC）血清型检出率为0;系统发育群结果表明,55株大肠杆菌中B1群所占比例最高,为70.91%,其次为A群,占21.82%,D群所占比例较少,占7.27%,B2群未检测出;MLST分析可知,分离株中存在24个ST型,其中优势ST型为ST154（18.18%）;进化树分析显示有7个进化分支。结果表明,新疆克拉玛依地区健康成年奶牛粪便大肠杆菌多样性丰富,不仅存在多种致病性大肠杆菌,而且大肠杆菌菌株之间还存在一定的进化关系。因此,健康成年奶牛粪便也具有潜在的安全风险,应加强对奶牛粪便致病性大肠杆菌的检测和监控。     

山西省致病性猪大肠杆菌分离及生物特性研究

研究从山西省主要养猪区80多个养猪场(户)的病死猪及疑似大肠杆菌病猪粪便、肠道、肛门等部位采集病料接种于营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美蓝培养基等纯化培养,将疑似菌落革兰氏染色、镜检;对初步分离菌经生化试验、致病性试验、大肠杆菌O抗原血清型鉴定等,对山西省流行的猪大肠杆菌病病原进行生物学特性研究。研究结果表明,病原菌纯化、镜检结果有123株疑似菌株符合猪大肠杆菌形态特征;生化试验中有8株病原菌产生H2S,有5株病原菌VP试验、枸橼酸盐利用试验是阳性,这13株病原菌不符合猪大肠杆菌的生化特性,其余110株病原菌符合大肠杆菌生化特性;致病性研究结果表明有97株病原菌是致病性猪大肠杆菌;大肠杆菌O抗原血清型鉴定结果:94株血清型分属于36个血清型,其中O138、O101、O9、O107、O141有35株,共占所鉴定分离菌株的37.2%,这几种血清型均为山西这80多个猪场目前流行的优势血清型,通过鉴定摸清了流行在山西省猪致病性大肠杆菌血清型特点、优势血清型菌株及分布状况。这一研究结果为山西省制定猪大肠杆菌病防治策略提供了依据。     

河南省濮阳市犊牛腹泻大肠杆菌分离鉴定及生物学特性分析

为了解河南省濮阳市致犊牛腹泻大肠杆菌的致病性、血清型、生物被膜形成能力及耐药性等生物学特性,对2018—2020年采集的243份腹泻犊牛肛拭子以及粪便、肝脏等病料样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、玻板凝集试验以及结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法,对分离的致病性大肠杆菌进行相关特性检测。结果显示：从243份病料样品中分离到87株致病性大肠杆菌,致病性大肠杆菌分离率为35.8%（87/243）;分离的致病性大肠杆菌分属于14种血清型,其中O101（18.4%）、O38（17.2%）和O142（14.9%）为优势血清型;分离的致病性大肠杆菌中,被膜形成能力强的24株（26.6%）,中等的34株（43.6%）,弱的17株（19.5%）,不形成的12株（15.4%）;分离的致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、链霉素10种药物的耐药率较高,均在49.4%以上。结果表明：致病性大肠杆菌在濮阳市可能呈地方性流行,O101、O38、O142为犊牛源优势血清型;该地的致病性大肠杆菌外界生存能力较强,且对多种临床常用药物产生了耐药性。因此,应采取综合防控措施,科学使用敏感抗菌药物,研制优势血清型多价疫苗,加强犊牛大肠杆菌性腹泻的防控。     

鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验

从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜栓及生理生化鉴定,分离出29株鸡致病性大肠杆菌.有14株分离株被鉴定出血清型,其中O<,1>4株、O<,2>3株、O<,78>7株,未定型15株,O<,1>、O<,2>,和O<,78>血清型占分离株总数的48.3%.用29株分离菌株接种供试雏鸡后,发病症状及剖检病变均符合大肠杆菌病特征,其中高致病性菌株有13株,中度致病菌株有9株,低致病性菌株有7株,分别占试验菌株总数的44.8%、31.0%、24.2%.采用Kirby-Bauer纸片法,用22种药敏纸片对29株分离菌进行药敏试验,结果表明,分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍,仅对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高.     

貉致病性大肠杆菌分离鉴定及HPI、LEE毒力岛检测

为了解致病性大肠杆菌引起貉腹泻的机理,采用了貉致病性大肠杆菌分离鉴定、检测毒力岛基因HPI(irp2、fyuA)与LEE(ler、eaeA),小鼠腹腔注射检测菌株毒力的方法。结果表明:从腹泻貉体内分离出血清型分别为O_(29)、O_(38)、O_(78)和O_(107)的大肠杆菌,4个血清型中有2个血清型(O_(38)、O_(78))携带有irp2和fyuA,4个血清型均未检测到ler和eaeA;4个血清型的大肠杆菌均可使小鼠不同程度发病,其中以携带irp2和fyuA的菌株毒力较强,可见该菌对貉的健康存在危害。     

河南省鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定

从河南省32个县市的典型大肠杆菌病病变的病、死鸡中,分离到致病性大肠杆菌93株,分别对各菌株进行致病性试验、生化鉴定和血清型鉴定。结果表明:本省致病性大肠杆菌的优势血清型为O78、O1、O2,分别占定型菌株的35.14%、18.92%、13.51%,菌株生化鉴定的结果与其致病力强弱和血清型无一定的相关性。     

临床腹泻肉羊源大肠杆菌流行病学调查及耐药性分析

为了了解江苏省肉羊腹泻源致病性大肠杆菌毒力基因分布情况,并与相应的大肠杆菌O抗原型进行比较和分析其耐药性,试验采集江苏省部分地区24个肉羊养殖场临床腹泻样品75份,运用PCR技术、玻板凝集试验和药敏纸片琼脂扩散法对56株致病性大肠杆菌分离株进行毒力基因、血清型及耐药性分析。结果表明:56株分离株可分为11种不同毒力因子组合,O73为优势血清型。致病性大肠杆菌分离株对磷霉素、多黏菌素B比较敏感,敏感比例分别为85.71%、76.79%。耐药性最强的是强力霉素,耐药比例为94.64%;其次是四环素,耐药比例为78.57%。说明目前江苏省规模化肉羊养殖场致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。     

大肠杆菌0157的分离鉴定

0157为大肠杆菌的一种血清型,该血清型于1982年首次被鉴定为人发生该病的病因[1],在此之前这种血清型很少分离到.这种血清型归类为肠出血性大肠杆菌(EHEC),可以引起血痢和产生强毒素.据有关文献介绍,在采集的牛肉、猪肉和禽肉产品检测后曾有0157大肠杆菌的阳性报道.     

禽大肠杆菌的分离与血清型鉴定

收集来自兴化、东台地区共25个样品,用疑似大肠杆菌感染病死家禽的肝脏组织进行分离培养,经形态观察、生化特性实验,共鉴定出8株大肠埃希氏菌。血清型鉴定表明,两株血清型为O78,其余O6、O83、O9、O143血清型各一株;抗生素敏感性实验表明,8株大肠杆菌对呋喃妥因、乙基西梭高度敏感,对复方新诺明、卡那霉素中度敏感,对其它药物则低敏或耐药。