PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变

目的分析PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变的敏感性。方法应用PCR-SSCP检测36例肺癌标本的突变情况并与其它文献进行比较。结果在36例肺癌标本中，有11例存在突变，突变率为30.6％（11／36），其中男性2例，女性9例。结论PCR-SSCP检测肺癌EGFR基因突变具有较高的敏感性，与其它文献报道一致。     

江西地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨江西地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变类型、突变率及其与临床特征的关系。方法收集2014年3月至2015年6月南昌大学第一附属医院非小细胞肺癌患者石蜡包埋组织78例,采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应(ARMS-PCR)方法,对非小细胞肺癌患者肿瘤组织EGFR基因18~21外显子突变进行检测,并分析其突变类型、突变发生率及其与临床特征之间的关系。结果在78例非小细胞肺癌患者中,共有27例发生EGFR基因突变,总突变率为34.6%。其中,第18、19、20、21号外显子突变率分别2.6%(2/78),12.8%(10/78),3.9%(3/78),14.1%(11/78)。一例既有21号外显子突变,又有20号外显子突变,其中,19号外显子的突变均为第746~750密码子的碱基缺失,21号外显子突变类型以L858R为主,且19号外显子的突变率与21号外显子的突变率无统计学差异(P0.05),女性EGFR基因的突变率显著高于男性,不吸烟者显著高于吸烟者,腺癌患者显著高于鳞癌患者(P0.05),而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期无相关性(P0.05)。结论江西地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21号外显子为主,常见于女性、不吸烟、腺癌的非小细胞肺癌患者。     

非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中检测EGFR基因突变

目的检测非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中表皮生长因子受体(EGFR)基因19和21外显子的突变情况,并与相应的肿瘤组织检测结果进行比较,探讨非小细胞肺癌患者应用外周血游离DNA检测EGFR突变的临床意义。方法应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测32例非小细胞肺癌患者术后肿瘤组织和术前外周血游离DNA中EGFR基因19和21外显子的突变,所有扩增标本均经基因测序法验证。结果 32份外周血标本中,共检测到13份EGFR基因突变,突变率达40.6%,肿瘤组织中有16份EGFR基因突变,突变率达50.0%,外周血和肿瘤组织EGFR基因同时突变的有13份,两者突变一致性达到81.2%,两者间差异无统计学意义(P0.05)。结论外周血游离DNA代替肿瘤组织进行EGFR基因突变检测具有可行性,为无法取得肿瘤组织的非小细胞肺癌患者提供一种更快捷、简便的EGFR基因突变检测方法,其检测结果可为临床选择靶向药物治疗提供依据。     

Adx-ARMS法与PCR-Sanger测序法检测非小细胞肺癌微小标本EGFR基因突变的比较

目的比较ADx-ARMS法和PCR-Sanger测序法检测肺癌微小标本EGFR基因突变的差异,评价微小标本用于非小细胞肺癌(NSCLC)患者EGFR突变检测的临床应用价值。方法收集2012~2013年95例NSCLC患者98份微小标本;用ADxARMS法和PCR-Sanger测序法检测上述标本EGFR基因18、19、20、21外显子基因突变,分析其与患者临床、病理特征的关联性。结果 ADx-ARMS法突变总检出率为51.0%(50/98),PCR-Sanger测序法突变总检出率为25.3%(24/95)。突变多见于女性(65.1%)、非吸烟(64.0%)、腺癌(51.9%)患者。EGFR-TKI疗效研究结果表明,ADx-ARMS法和PCR-Sanger测序法检测结果均为野生型患者的无进展生存期(PFS)为2.0个月,明显短于两种方法检测均为突变型和仅ADx-ARMS法检测为突变型患者的9.1个月和10.0个月(P0.01)。结论对于难以获得手术切除标本的患者,微小标本可作为其进行EGFR突变检测的适用材料;ADx-ARMS法较PCR-Sanger测序法更适用于微小标本的基因检测。     

宁夏某医院225例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测结果分析

目的分析宁夏某医院非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测结果。方法选择2014年1月至2017年12月在宁夏医科大学总医院住院的NSCLC患者225例进行回顾性分析,用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应(ARMS-PCR)检测EGFR基因突变情况。结果 EGFR基因总突变率50.22%(113/225),最常见突变位点为19外显子19-del及21外显子L858R,突变率分别为21.33%及17.78%,20外显子T790M耐药突变率及20-Ins插入突变(非敏感突变)的突变率分别为3.56%及1.33%;EGFR各外显子双突变共10例;EGFR基因突变率在性别、年龄、民族、季节、标本类型之间差异无统计学意义(P>0.05),在年份、病理类型之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ARMS-PCR可有效应用于临床病理石蜡标本基因突变检测,EGFR基因在19和21外显子存在较高的突变率,其突变亚型能指导小分子表皮生长因子酪氨酸酶抑制剂(EGFR-TKI)的肿瘤靶向治疗。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与扩增的比较及其与血清CEA水平的关系

目的 比较分析非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与扩增的关系,并探讨其与血清癌胚抗原(CEA)水平有无相关性. 方法 对270例确诊非小细胞肺癌的肺组织标本(包括手术切除及经纤支镜活检取得)用实时荧光定量PCR法技术检测EGFR基因突变状态,用荧光原位杂交技术检测EGFR基因的扩增情况.治疗前抽取患者静脉血,用化学发光法检测血清CEA水平. 结果 270例NSCLC中EGFR基因突变率为31.11％,EGFR基因扩增率为20％,基因突变并扩增的占10.74％.基因突变组、基因扩增组、基因突变并扩增组和基因无突变无扩增组血清CEA平均水平分别为[3.03(1.68-6.22)] ng/mL、[3.19(1.8-17.17)]ng/mL、[3.39(1.85-20.87)] ng/mL和[2.54(1.5-4.62)] ng/mL.基因突变组与基因扩增组、基因突变组与基因无突变无扩增组血清CEA比较无显著性差异(P＞0.05).基因扩增组与基因无突变无扩增组、基因突变并扩增组与基因无突变无扩增组血清CEA比较有显著性差异(P＜0.05).EGFR基因突变、基因扩增及基因突变并扩增与血清CEA水平有明显相关性. 结论 在NSCLC中EGFR基因突变率大于扩增率,其机制有待进一步阐明.EGFR基因与血清CEA水平有明显相关性.血清CEA水平有可能成为指导非小细胞肺癌EGFR靶向治疗的指标.     

非小细胞肺癌EGFR基因突变检测的临床应用进展

非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与肿瘤细胞增殖、血管生长、肿瘤浸润转移和细胞凋亡抑制相关,在NSCLC中突变率为46%。国内外指南均推荐对NSCLCL患者检测EGFR基因,EGFR基因突变阳性的患者应接受酪氨酸激酶抑制剂(TKI)药物的治疗,可较传统化疗方案延长EGFR基因突变阳性NSCLC患者的无进展生存(PFS)时间和总生存(OS)时间。EGFR基因检测以组织作为金标准,但鉴于组织固有异质性及有创性,多种液体活检标本也可辅助用于EGFR基因状态的检测。该文将对NSCLC患者EGFR基因突变检测在临床中的应用研究进展及检测过程应注意的问题作一简要综述。     

实时荧光定量PCR法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的总结分析

目的:采用实时荧光定量PCR法检测临床送检的非小细胞肺癌(NSCLC)标本中表皮生长因子受体(EGFR)基因的突变情况,分析其突变率、突变特征及其与临床病理间的相关性。方法:将101例石蜡包埋NSCLC标本行显微切割后抽提DNA,采用实时荧光定量PCR法检测EGFR基因酪氨酸激酶编码区第19和21号外显子的突变。结果:101例NSCLC标本中共检出EGFR基因第19号、第21号外显子突变21例(20.8%),突变率分别为61.9%(13/21)和38.1%(8/21),其又以19 del-E746-A750和21 L858R为主要突变类型,发生率分别为42.9%(9/21)和38.1%(8/21)。EGFR基因总突变率与年龄无关(P>0.05);但女性患者中EGFR基因突变率(27.3%,12/44)高于男性患者(15.8%,9/57;P     

非小细胞肺癌靶向治疗的相关分子检测

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是成年人常见的恶性肿瘤之一。随着NSCLC分子生物学和新药开发研究的不断深入,基于分子标志物的靶向治疗已从实验室走到了临床,并在晚期NSCLC患者的治疗中取得了显著的效果。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因、间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因、KRAS基因、BRAF基因是目前NSCLC靶向治疗研究的重要靶点,针对EGFR和ALK基因的靶向药物已相继被用于临床。     

基于PASS技术的EGFR基因突变比例检测方法的建立与评价

目的 近期临床研究发现EGFR-TKI并非对所有EGFR基因激活突变的NSCLC患者都有效,提示EGFR-TKI的治疗效果也可能与NSCLC患者中EGFR基因突变比例相关。本研究基于平行等位基因特异性测序(Parallel Allele-Specific Sequencing, PASS)方法,建立一个稳定可靠的EGFR突变基因比例检测平台。方法 构建野生型和突变型EGFR基因重组质粒,建立EGFR基因突变比例检测的PASS平台,从灵敏度、精密度以及准确度对PASS检测平台进行性能评价。结果 建立的PASS平台可用于EGFR基因点突变和缺失突变的检测,能够检测到的最小基因拷贝数为1,能够稳定检测到的最小基因拷贝数为10,在野生型基因中最低能检测出0.01%的突变基因。线性回归分析显示,检测到的突变型/野生型比例与预期的突变型/野生型比例呈良好的线性相关(R₂=0.9962)。结论 该方法的建立能够对EGFR基因突变比例进行灵敏、准确测定,这对其在临床中的应用奠定了良好的技术基础,对于评价EGFR基因突变比例与EGFR-TKI靶向治疗NSCLC患者疗效的关系也具有重...     

EGFR mutations and EGFR tyrosine kinase inhibition in non-small cell lung cancer

OBJECTIVES: To discuss selected molecular targets and new clinical variables that can serve as both predictive and prognostic markers for outcome in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) treated with EGFR-TKIs. DATA SOURCES: Research and journal articles. CONCLUSION: In the near future, treatment for NSCLC will rely ever increasingly on molecular targets rather than empirically chosen cytotoxic chemotherapy for some patients. This will improve outcomes for patients with NSCLC. IMPLICATIONS FOR NURSING PRACTICE: An understanding of the molecular targets and clinical variables that are predictive and prognostic of outcome in NSCLC will help nurses better care for these patients.     

非小细胞肺癌EGFR基因少见突变分析

在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)中,表皮生长因子受体(EGFR)经典突变类型患者的治疗已从EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的使用中获益,而携带少见EGFR突变的非小细胞肺癌患者约占所有EGFR突变的10%,其临床意义还不清楚,特别是对EGFR-TKIs的反应。本文综述少见EGFR突变的发生率,并对EGFR-TKIs治疗结果进行总结。     

表皮生长因子受体基因在非小细胞肺癌中的突变情况及蛋白表达情况

目的本研究旨在探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况,分析EGFR蛋白表达情况对吉非替尼治疗的指导意义。方法收集140例非小细胞肺癌患者新鲜组织,采用荧光定量PCR法检测EGFR基因突变的状态;同时采用免疫组化SP法检测EGFR蛋白的表达。结果 140例患者中,46例患者发生了EGFR基因突变,其基因突变率为33%,主要发生在19号外显子(20例,43.5%)和21号外显子(23例,50.0%)。腺癌突变发生率为50.6%,腺鳞癌突变发生率为87.5%,鳞癌突变发生率为2.5%,大细胞癌突变发生率为5.3%(P=0.000),无吸烟史患者突变率为50%,有吸烟史患者的突变率为20.0%(P=0.005),女性患者突变率为50.0%,男性患者突变率为23.3%(P=0.001)。EGFR蛋白表达阳性组患者的中位无疾病进展生存时间为9个月(95%CI:7.3¹0.6个月),EGFR蛋白表达阴性组患者的中位无疾病进展生存时间为5个月(95%CI:3.510.6个月),EGFR蛋白表达阴性组患者的中位无疾病进展生存时间为5个月(95%CI:3.5⁶.4个月)。结论 EGFR基因突变和EGFR蛋白表达情况联合检测对于筛选EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗敏感人群有帮助,并且也能够帮助预测吉非替尼对于晚期NSCLC的疗效及预后。     

EGFR mutations in non-small cell lung cancer: an audit from West China Hospital

Objectives: To discover the incidence and characteristics of EGFR mutations in non-small cell lung cancer (NSCLC) in a single, large cohort as a part of routine diagnostic investigations.

Methods: We reviewed EGFR mutations investigated by Amplification Refractory Mutation System (ARMS) PCR (covering 29 known mutations) using DNA samples from FFPE tissue or cell clot specimens in a total of 3894 cases of NSCLC analysed between 2012-2014.

Results: EGFR mutations are preferentially associated with adenocarcinomaand adenosquamous histology, particularly those well to moderately differentiated, and were significantly more common in female than male patients irrespective of histological subtypes. Exon 19 deletion (45.7%) and exon 21 L858R (45.6%) accounted for the vast majority of the EGFR mutations detected, with the remaining mutations being infrequent (<2%). Compound mutations were seen in 51 (3%) of the mutant cases, the combination of these compound mutations could be classified into three subgroups according to the potential impact of individual mutations on EGFR TKI therapy. Accordingly, 7 cases had both sensitive mutations, 4 cases harboured one sensitive and one less responsive /uncertain mutation, 19 cases contained one sensitive and one resistant change, and a further 21 cases had two less responsive /uncertain mutations.

Conclusion: Our data represents the largest EGFR mutation survey based on routine clinical diagnostic laboratory data from a single institution, it confirms the incidence and characteristics of EGFR mutations in NSCLC seen in Asian patients, and also unravels the combinatorial nature of rare compound EGFR mutations.     

非小细胞肺癌的EGFR表达与EGFR基因突变的比较

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）免疫组化表达与EGFR基因突变的关系及其临床意义。方法对130例手术切除的非小细胞肺癌组织应用免疫组化方法检测EGFR表达,同时应用基因测序方法检测EGFR基因突变,研究EGFR表达与EGFR基因突变的关系。结果130例NSCLC中有38例EGFR基因突变,突变率为29．2％。EGFR阳性率为67．7％。EGFR表达与基因突变无关（P〉0．05）,结论EGFR免疫组化表达与EGFR基因突变无关,不能作为筛选EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗NSCLC的指标。     

非小细胞肺癌EGFR和KRAS基因突变和临床病理特征分析

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中表皮生长因子受体(EGFR)和鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)突变状态及其与临床病理特征的关系.方法 回顾性收集2019年1月至2021年6月首都医科大学大兴教学医院183例病理确诊NSCLC患者临床病理资料,采用扩增阻滞突变系统(ARMS)法检测肿瘤组织中EGFR和KRAS基因的突...     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变和EML4-ALK融合基因表达的研究

目的研究广西地区非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因表达的情况。方法分别采用扩增耐突变系统(ARMS-PCR)法和实时荧光定量PCR扩增检测119例NSCLC患者EGFR基因外显子18~21的突变和9种EML4-ALK融合突变体,同时分析其与临床病理特征的关系。结果 119例NSCLC患者共检出44例EGFR基因突变,检出率为37.0%,检出7例EML4-ALK融合基因阳性表达,检出率为5.9%。其中EGFR基因突变主要见于腺癌、女性、不吸烟患者;EML4-ALK融合基因表达可能与不吸烟有关,而在性别、年龄、肿瘤病理类型、淋巴转移方面比较,差异无统计学意义(P0.05);EGFR基因突变与EML4-ALK融合基因不共存。结论广西地区NSCLC患者的EGFR基因突变率与EML4-ALK融合基因阳性表达率与中国其他地区总体水平接近,均具有一定临床病理特征。     

Overcoming erlotinib resistance in EGFR mutation-positive non-small cell lung cancer cells by targeting survivin

Loss of PTEN was recently shown to contribute to resistance to epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase inhibitors (TKI) in EGFR mutation-positive non-small cell lung cancer (NSCLC) through activation of the protein kinase AKT. We previously showed that downregulation of the expression of the antiapoptotic protein survivin by EGFR-TKIs contributes to EGFR-TKI-induced apoptosis in EGFR mutation-positive NSCLC cells. We have now investigated the role of survivin expression in EGFR-TKI resistance induced by PTEN loss. The EGFR-TKI erlotinib did not affect survivin expression or induce apoptosis in EGFR mutation-positive NSCLC cells with PTEN loss. Downregulation of survivin either by transfection with a specific short interfering RNA or by exposure to the small-molecule survivin suppressor YM155 reversed erlotinib resistance in such cells in vitro. Furthermore, combination therapy with YM155 and erlotinib inhibited the growth of tumors formed by EGFR mutation-positive, PTEN-deficient NSCLC cells in nude mice to a greater extent than did treatment with either drug alone. These results thus indicate that persistent activation of signaling by the AKT-survivin pathway induced by PTEN loss underlies a mechanism of resistance to erlotinib-induced apoptosis in EGFR mutation-positive NSCLC. They further suggest that the targeting of survivin has the potential to overcome EGFR-TKI resistance in EGFR mutation-positive NSCLC.