一种新的红细胞源降压因子对大鼠血管的保护作用

探讨了一种新的人红细胞源降压因子（erythrocyte-derived depressing factor,EDDF)对大鼠血管的保护作用，应用离体血管环生物灌流法，双光子激发荧光扫描显微镜及透射电子显微镜，观察了正常Wistar大鼠，钙超载大习和左旋硝基精氨酸（L－NNA）诱导的高血压大鼠的血管收缩功能以及EDDF的影响，结果显示，钙超载大鼠及L－NNA高血压大鼠离体主动脉环对苯肾上腺素的收缩反应明显增强，EDDF（10^-3g/mL)灌流1h可以明显降低正常大鼠及钙超载大鼠血管的收缩反应，并通过减轻核损伤，改善线粒体肿胀以及其他细胞器异常，从而减轻钙超载大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）的损伤，而EDDF对L－NNA高血压大鼠血管的收缩反应无明显影响，这提示EDDF通过影响胞内钙离子转运，减轻VSMC损伤，从而保护血管，进一步证实了EDDF是通过NO／EDRF－cGMP通路舒张血管和降低血压的。     

一种新的红细胞源性降压因子的作用机制

研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子（ＥＤＤＦ）的降压机制,重点探讨其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响,以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐静脉ＶＳＭＣ（ＨＵＶ）,钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）和正常对照Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜培养的ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）「Ｃａ＆２＋」ｉ及（「Ｃａ＾２＿」ｎ）的变化;用流式细胞仪测定     

CNTF非经典信号传导途径的神经保护功能

先前我们曾提出, 在已知的CNTF信号传导通路上游可能存在新途径介导其神经保护作用. 运用原代培养大鼠海马神经元、活细胞连续照相、活细胞计数、活细胞内游离[Ca²⁺]测定及gp130免疫组化等方法, 以Glu离子型受体激动剂L-NMDA诱发海马神经元损伤为细胞损伤模型, 用JAK/STATs阻断剂PTPi-2阻断CNTF已知的经典信号传导途径, 观察CNTF非经典信号传导途径的神经保护功能, 并探讨其可能机制. 结果表明, L-NMDA可引起海马神经元的损伤反应, CNTF可有效抑制L-NMDA对神经元的毒性作用; 使用PTPi-2阻断已知的CNTF经典信号传导途径中JAK/STATs后, CNTF保护海马神经元抵抗L-NMDA的损伤作用仍然存在. L-NMDA可引起海马神经细胞内游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i)迅速升高, CNTF可显著减弱L-NMDA引起的[Ca²⁺]_i升高, 阻断CNTF的经典信号传导途径中JAK/STATs并不影响L-NMDA引起的[Ca²⁺]_i升高, 表明除了已知的经典信号传导通路, CNTF发挥保护海马神经元作用还有其他信号传导途径, 这一途径与胞内[Ca²⁺]有关.     

Aβ1~40对神经细胞膜通透性及胞内游离Ca2+的影响

利用激光共聚焦显微镜技术研究了可溶和纤维化的Aβ_1~40 对神经细胞膜通透性及胞内游离Ca²⁺的影响. 结果表明: ①可溶和纤维化的Aβ_1~40 对细胞膜通透性的影响均是浓度依赖的. 可溶的Aβ_1~40 只有当其浓度达到3 mmol/L时才能使膜的通透性增加, 而纤维化的Aβ_1~40 的毒性作用远远强于可溶性的Aβ_1~40 , 当浓度为1 mmol/L时, 即有明显作用. 当其浓度达到3 mmol/L时, 不但细胞膜的通透性大大增加, 而且核膜也有严重破损. ②高浓度可溶的和纤维化的Aβ_1~40 均能使胞内Ca²⁺升高, 升高的幅度呈浓度依赖的. 纤维化的Aβ_1~40 诱导的胞内Ca²⁺的上升比较同步, 且反应很快. 这提示高浓度可溶的和纤维化的Aβ_1~40 神经毒性与细胞膜物理化学性质的改变及胞内Ca²⁺平衡失调有一定的相关性.