新疆雪莲黄酮类化学成分的研究

 目的研究新疆雪莲中的黄酮类化学成分。方法对新疆雪莲全草乙醇提取物的各个萃取部位进行反复柱色谱,根据光谱数据和理化性质确定化合物结构。结果从新疆雪莲干燥全草中分离得到7个化合物,分别为4′,5,7-三羟基-3′,6-二甲氧基黄酮(1)、4′,5,7-三羟基-6-甲氧基黄酮(2)、泽兰黄素(3)、槲皮素(4)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(5)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、芦丁(7)。结论其中3和6为首次在该植物中分离得到的黄酮类化合物。     

白花曼陀罗悬浮培养细胞生长和生物碱活性成分合成

目的 研究白花曼陀罗细胞悬浮培养合成生物碱。方法 在MS液体培养基上悬浮培养细胞生产生物碱，以碳源、pH值、接种量等为影响因子进行研究。结果 蔗糖为最佳碳源，细胞接种量以鲜重1.5～2.0g／L、培养液初始pH值5．5～6．0对曼陀罗悬浮培养细胞生长和生物碱合成最有利，加入苯丙氨酸能促进生物碱的合成。结论 白花曼陀罗细胞悬浮培养能有效地合成生物碱。     

HPLC法建立新疆雪莲指纹图谱研究

目的：对7种不同产地的新疆雪莲药材进行指纹谱比较研究。方法：以乌鲁木齐南山产新疆雪莲药材为分析对象，选择适宜的色谱条件，建立了7个不同产地的新疆雪莲药材样品的指纹图谱。结果：方法学考察表明，本研究建立的分析方法有比较好的重现性；不同产地的新疆雪莲药材共有峰相对保留时间基本一致，但其相对面积存在一定的差异。结论：指纹谱分析方法可简便、快速的鉴别和区分不同产地的新疆雪莲药材。     

新疆雪莲的香豆素类化学成分的研究

 目的研究新疆雪莲(Saussurea involucrate Kar.et Kir)的化学成分。方法应用各种柱色谱的方法进行分离;应用化学和各种光谱分析的方法鉴定化合物。结果从新疆雪莲的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个香豆素类成分,它们分别为蛇床子内酯(osthol),佛手内酯(bergapten),异茴芹内酯(isopimpinellin),爱得尔庭(edultin),叶鞘二醇二乙酸酯(vaginidiol di-acetate),别异因波拉托内酯(alloisoimperatorin),噢洛内酯(oroselol),花椒香豆素(xanthotoxol)。结论这8个香豆素均为首次从新疆雪莲中分离得到。     

新疆雪莲的应用基础研究

雪莲水液 (SWS) ,依肌内注射液工艺制成 ,每mL含 0 .1 5g生药。离体子宫用 1 .2 5g/L和 2 .5 0g/L浓度 ,全身给药小鼠ig0 .4 5、0 .9、1 .8g/kg,大鼠ig0 .3、0 .6、1 .2g/kg·qd× 3- 2 2天不等 ,具有下述药理作用 :(1 )使大鼠AA模型急性炎症、继发性炎症明显减轻 ,血清IL - 1、IL - 6减少。 (2 )减轻角叉莱胶致大鼠足跖肿。 (3)抑制大鼠棉肉芽肿的形成。 (4)减少ip乙酸致小鼠的扭体次数。 (5 )抑制小鼠腹腔毛细血管的渗出。 (6 )使小鼠耳廓细动脉、细静脉扩张 ,毛细血管开放量增加。 (7)使离大鼠子宫收缩幅下降 ,并能对抗缩宫素的子宫收缩作用 ,使收缩时间间隔延长。 (8)以雌激素与缩宫素制作小鼠痛经模型 ,使痛经小鼠扭体反应明显减少。 (9)使血清雌二醇含量、子宫与卵巢重量增加。     

新疆雪莲产业化发展对策

介绍了新疆雪莲资源分布与特点和应用现状，分析了目前存在的问题，并提出了相应的对策。     

雪莲注射液中黄酮类成分的定性定量分析

目的：对单方制剂雪莲注射液中黄酮类成分进行定性，定量分析。方法：采用化学试剂法，荧光法，薄层色谱（TLC）法进行定性，利用分光光度法，芦丁做对照品，在500nm进行定量测定。结果：测得总黄酮含量为26.4μg/ml，回收率=100%，RSD=1.59%(n=7)。结论：方法简便、结果准确，重现性好。     

培养条件对西洋参悬浮细胞生物量和 活性成分的影响

目的:研究主要理化因子对西洋参细胞悬浮培养的影响.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb1以及西洋参多糖含量的影响.结果:当接种量为25 g·L~(-1)时,西洋参细胞的干重增殖倍数显著增加;通过考察Ms,SH,B_5 3种培养基对西洋参细胞的影响,结果表明MS培养基最有利于西洋参细胞生长,B_5培养基最有利于人参皂苷和西洋参多糖的合成.3种培养基中西洋参细胞多糖含量均高于栽培西洋参;pH变化对西洋参细胞生长影响不大,pH 6.0时,最有利于人参皂苷Re和西洋参多糖的合成;光照培养显著促进西洋参细胞次生代谢物的合成,但对多糖合成没有太大影响.结论:接种量、培养基种类、基质pH和光照条件对西洋参悬浮细胞生长,人参皂苷Re,Rb_1以及西洋参多糖合成有显著影响.     

新疆雪莲胚芽的组织培养和植株再生

目的:以新疆雪莲胚芽为外植体,建立一套新疆雪莲快速繁殖技术。方法:以MS培养基为基本培养基,通过研究植物生长物质BA和NAA对丛生芽的分化、丛生芽的增殖和生根的影响找出相应的最佳生长物质组合。结果:在附加NAA0.02-0.1mg·L^-1和BA2mg·L^-1的MS培养基上,所有的胚芽都可在45d内诱导出丛生芽;丛生芽切成小块后接入含NAA0.1-0.2mg·L^-1和BA2-3mg·L^-1的培养基中,都可在30d快速增殖;在含0.4mg·L^-1NAA的大量元素减半的MS培养基中,92%的不定芽可在25d内生根;再生植株移栽后,生长较好,成活率达70%。结论:新疆雪莲的胚芽可通过不定芽途径高频率的形成植株。     

波浪式WAVE生物反应器悬浮培养枇杷细胞生产熊果酸的研究

采用波浪式WAVE生物反应器放大培养枇杷悬浮细胞,研究细胞生长及熊果酸(UA)的累积情况.摇瓶和反应器中,以细胞的干重和UA的含量为指标进行对比试验;反应器中1 L和5 L工作体积下,以培养液中元素代谢、细胞的干重、UA的含量为指标进行对比试验;生物反应器中,1 L的工作体积下,以接种量、转速、转动角度为因素开展正交试验筛选最佳的组合.反应器中细胞的干重增长及UA含量比摇瓶中高出了105.5%,27.65%;生物反应器中不同的工作体积下,培养液中元素的代谢、细胞的干重及UA的累积情况相似;生物反应器中,接种量为80 g,转速为26 r·min^-1,角度为6°是最佳组合,接种后100 h收获,细胞的干重为19.01 g·L^-1,UA质量分数为27.750 mg·g^-1.结果表明WAVE生物反应器比摇瓶更适合枇杷细胞悬浮培养,并且可实现1 L到5 L的培养放大.     

三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养及黄酮积累的比较研究

目的比较三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养细胞生长及其次生代谢产物黄酮的积累情况。方法将三叶青叶诱导的愈伤组织在不同外源植物激素种类和配比的培养基上多次继代培养,筛选获得松散型和致密型愈伤组织,分别建立相应悬浮细胞体系,研究了两种悬浮培养细胞生长和总黄酮积累的动态。结果三叶青松散型愈伤组织悬浮培养的继代周期为8 d,增加质量倍数最高达到3.68倍,黄酮积累的最大值11.7 mg/g,较最初接种时的浓度增加34.5%,该悬浮系继代4～5次后生命力衰退且褐化加重;而致密型愈伤组织悬浮培养的继代周期为20 d,增加质量倍数最高达到2.65倍,黄酮积累的最大值40.9 mg/g,较最初接种时的浓度增加212.2%,该悬浮系继代多次细胞无明显变化。结论与松散型愈伤组织悬浮培养相比,致密型愈伤组织悬浮培养更有利于继代培养和次生代谢产物的积累。     

大苞雪莲总黄酮体外抗氧化活性

目的:研究大苞雪莲总黄酮体外自由基清除能力及抗氧化活性。方法:采用体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·),2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐阳离子自由基(ABTS+·),超氧阴离子(O-2·),羟基自由基(·OH),一氧化氮(NO),以及测定金属螯合能力、还原力、总抗氧化能力共8种方法对大苞雪莲总黄酮的自由基清除能力及抗氧化活性进行了评价。每组实验平行3次。结果:大苞雪莲总黄酮在一定浓度下能够有效地清除DPPH·,ABTS+·,O-2·,·OH,NO,对DPPH·,ABTS+·,·OH,NO的半数清除质量浓度分别为52.52,71.71,60.38,203.95 mg·L-1,对超氧阴离子的半数清除质量浓度为271.06 mg·L-1,小于维生素C(VC,380.10 mg·L-1),半数金属螯合质量浓度为184.52 mg·L-1,并且具有一定的还原力和总抗氧化能力。结论:大苞雪莲总黄酮具有较强的体外自由基清除能力及抗氧化活性,是一种具有较高研究价值和潜力的天然抗氧化物质。     

霍山石斛细胞悬浮培养及条件优化

目的利用细胞悬浮培养技术生产霍山石斛单细胞,解决石斛药用植物资源短缺问题。方法以霍山石斛叶片等外植体为实验材料,通过不同的制备方法获得霍山石斛单细胞,研究霍山石斛细胞培养的多种影响因素,应用正交设计优化霍山石斛细胞悬浮培养的条件。结果在蔗糖35 g/L,NH4NO3 1.3 g/L,pH 5.6,激素IAA 0.4 mg/L,6-BA 1.0 mg/L,培养时间14～18 d,在此条件下培养的霍山石斛细胞数为9.42×105个/mL。结论经过4次继代培养后石斛细胞多为圆状或椭圆状,细胞碎片减少。应用优化的细胞悬浮培养条件,能获得较大量的霍山石斛细胞。     

雪莲组织中蛋白质提取方法比较

目的:比较雪莲组织中蛋白质的提取方法.方法:采用酚法、TCA/丙酮法、尿素法提取雪莲组织中蛋白质,所得蛋白质进行一维SDS-PAGE和双向电泳检测,通过比较电泳图谱确定雪莲组织中蛋白质的最佳提取方法.结果:酚法提取的雪莲组织蛋白质杂质量最少、纯度最高,一维SDS-PAGE和双向电泳图谱显示其具有较多的蛋白质点,且蛋白质种类较多.结论:3种提取方法均有一定的蛋白质损失,建议采用酚法从雪莲组织中提取蛋白质,为雪莲蛋白质组学研究提供参考.     

秦艽细胞悬浮培养研究(Ⅰ)

目的建立秦艽细胞悬浮培养体系。方法通过小细胞团法优选细胞系并考察不同培养基、细胞种龄、初始pH值、培养温度、摇床转速对秦艽悬浮细胞生长及龙胆苦苷积累的影响。结果适于秦艽细胞悬浮培养条件为:MS培养基为基本培养基,用15d种龄的细胞接种,初始pH7、25℃,110r/min,摇瓶培养。结论通过摇瓶培养建立了良好的秦艽细胞悬浮培养体系。不同培养基对细胞生长及龙胆苦苷积累的显著影响提示某些无机离子有重要的调控作用。     

天山雪莲水提取物对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 观察天山雪莲水提取物(ES)对电离辐射损伤小鼠的保护作用。方法 小鼠ig ES0．75，1．5，3．0g/kg，14d后接受8和2．5Gy的照射，观察8Gy照射小鼠的平均生存时间和生存率及2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量。结果 ES能显著延长8Gy照射小鼠的平均生存时间(P＜0．05)，并提高生存率；显著提高2．5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量(P＜0．05，0．01)，改善免疫功能。结论ES具有抗辐射损伤作用。     

怀牛膝愈伤组织悬浮培养及其多糖含量的初步研究

目的：研究怀牛膝悬浮培养条件及其对愈伤组织中ABPS含量的影响。方法：采用正交试验和单因素试验，研究接种时间、接种量、碳源添加及pH对细胞生长量及多糖含量的影响。结果和结论：适宜ABPS生产的培养基是1/4MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 1.0 mg·L-1+蔗糖2%+葡萄糖2%+果糖1%，pH 6.0，培养时间50 d，接种量7 g·L-1。     

长鞭红景天细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件.方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响,建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系.结果 MS培养基+BA5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件.结论 对培养条件进行优化,为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础,为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径.