硫芥诱导Hela细胞发生凋亡及坏死

目的 研究硫芥诱导的Ｈｅｌａ细胞凋亡的作用。方法 生长在ＤＭＥＭ培养基中的Ｈｅｌａ细胞与不同浓度的硫芥作用３小时,凋亡用电镜,电泳及流式术检测。结果 低浓度硫芥（１μｍｏｌ．Ｌ＾－１）抑制细胞生长;较高浓度（１－１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）俣细胞主要在Ｇ１期阻滞,发生典型的凋亡形态改变,提了细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳,出现“ＤＮＡＬａｄｄｅｒ”,流式术观察表明硫芥处理３小时后,细胞撤药培养１２小时     

硫芥诱导HeLa细胞坏死和凋亡的超微结构变化

硫芥是一种细胞毒药物，能烃化生物体内一系列大分子物质，其中核酸是硫芥作用最敏感的靶分子．它还是首次证实有致突变的化学物质［１］．硫芥损伤的短期效应是引起ＤＮＡ断裂，细胞死亡；长期效应是致畸，致癌，致突变．硫芥对人体各种组织都有损伤作用，对皮肤，眼睛，...     

乙酰半胱氨酸及还原型谷胱甘肽对抗硫芥引起的细胞凋亡及坏死

本文在细胞水平上研究了 N-乙酰 L-半胱氨酸 ( NAC)及还原型谷胱甘肽 ( GSH)对抗硫芥致细胞坏死及凋亡的效应 .结果表明 :NAC和 GSH均可部分地对抗硫芥 1 0 0 0μmol· L-1引起的细胞坏死 ,可明显提高细胞的存活率 ,二者的有效浓度为0 .1 - 1 0 mmol· L-1. NAC( 5mmol· L-1)和 GSH( 5mmol· L-1)还均可对抗硫芥 ( 1 0 0 μmol·L-1)引起的细胞凋亡 ,使 DNA的降解片段明显减少 .流式细胞术检测表明 ,硫芥 1 0 0 μmol· L-1作用 1 2 h的 Hela细胞凋亡百分率为 37.2 % ,而 NAC和 GSH保护组的细胞凋亡百分率分别为 5.2 % ,8.2 % .谷氨酰胺也有对抗硫芥细胞毒的作用 ,但保护效果不及 NAC和 GSH.     

银杏叶提取物对三氯乙烯诱导的人角质形成细胞凋亡的影响

目的研究体外培养条件下银杏叶提取物(ginkgo biloba leaf extracts,EGb)对三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)诱导的正常人表皮角质形成细胞(normal human epidernis keratinocyte,NHEK)凋亡的影响。方法体外培养条件下,用中性红吸附试验(NRU)测定TCE对NHEK的中性红吸附减少50%的质量浓度(NR50值)和EGb的最低有效保护质量浓度。用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察细胞凋亡形态学改变,流式细胞仪(flow cytometer,FCM)测定细胞DNA含量并计算凋亡发生率。结果TCE对NHEK的NR50值为4.53(3.92~5.13)mmol/L;用10、50、100、150和200 mg/L EGb预孵育NHEK 2 h时,由2.0 mmol/L TCE引起的细胞活力的下降随EGb剂量的增加逐渐恢复,且150 mg/L为最低有效保护剂量。TCE可引起NHEK的超微结构呈凋亡改变,凋亡发生率呈剂量依赖式增加。与0.125、0.5和2.0 mmol/LTCE暴露组相比,150 mg/L EGb预孵育组,细胞超微结构恢复到正常对照组水平,凋亡发生率明显减少。结论体外培养条件下,EGb可以抑制TCE诱导的NHEK的细胞凋亡。     

硫芥的小鼠致畸作用

目的 研究硫芥对小鼠的胚胎毒性和致畸毒性。方法 将60只孕鼠随机分为6组,即阴性对照组、溶剂对照组、硫芥5.0, 1.0和0.2 mg·kg^-1染毒剂量组和阳性对照组,每组10只。于孕第7天开始定时腹腔注射给药,连续6 d,每天1次。于妊娠第18天处死孕鼠进行胎鼠检查。结果 硫芥1.0和5.0 mg·kg^-1组孕鼠体重增长受抑,与溶剂对照组相比差异显著;硫芥对胎鼠外观的影响主要表现为导致胎鼠出现血肿,各染毒组与溶剂对照组相比均差异显著(P<0.01);硫芥对胎鼠骨骼的影响主要表现为椎体缺失、胸骨二分化、胸骨残余、椎弓分离、颈肋等。硫芥0.2, 1.0和5.0 mg·kg^-1组畸形（变异）率分别为22.45%, 29.17%和18.00%,硫芥0.2和1.0 mg·kg^-1组与溶剂对照组相比差异显著(P<0.01)。结论 硫芥可导致小鼠胚胎外观和骨骼畸形,有一定致畸性。     

银屑病角质形成细胞凋亡抑制的机制研究进展

银屑病角质形成细胞存在的凋亡抑制现象是该病重要的病理特征之一,关于此现象的发生机制和治疗研究不断深入.本文从影响凋亡的膜死亡受体/配体、凋亡抑制蛋白分子的表达等方面对近期的相关研究成果进行综述,并对关键节点的治疗研究进行分析,以期为寻找治疗银屑病的新的药物作用靶点和方法提供参考.     

氧化苦参碱上调角质形成细胞Fas抗原介导细胞凋亡

目的：探讨苦参碱上调角质形成细胞Fas抗原表达，治疗银屑病的机制。方法：采用流式细胞仪定量分析不同浓度氧化苦参碱对角质形成细胞Fas抗原表达的影响。结果：当氧化苦参碱浓度≥100mg/L时，可上调角质形成细胞Fas抗原表达，随着浓度升高，表达量增加，结论：一定浓度的氧化苦参碱可上调角质形成细胞Fas抗原表达，继而诱导角质形成细胞凋亡，这可能是苦参治疗银屑病的重要机制之一。     

中波段紫外线对角质形成细胞凋亡的诱导和钙信号的影响

目的　观察中波段紫外线 (UVB)照射诱导人永生化角质形成细胞 (HaCaT细胞 )的凋亡和对细胞静息Ca2 + 及thapsigargin和adrenaline引起的Ca2 + 运动影响。方法　采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)染色法分析受UVB照射后细胞存活率的变化 ,用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和Hoechst332 5 8核染色法观察UVB对HaCaT细胞凋亡的影响 ,采用Fura 2 /AM荧光分光光度法测定胞浆游离Ca2 + 浓度的变化。结果　在 1 2 5～ 6 2 5J·m-2 的UVB照射剂量之间和照射后培养时间 2 4h内的条件下 ,UVB照射以剂量和时间依赖的方式抑制细胞的存活率 ;在照射后培养时间 1 8h内以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡 ;2 5 0J·m-2 UVB照射后 ,细胞的静息钙迅速下降 ,在照射后第 6h静息钙降至最低 ,且thapsigargin(1 0μmol·L-1 )和adrenaline(1 0 μmol·L-1 )所引起的钙释放及由此产生的钙内流也随照射后培养时间的延长而逐渐减少。结论　UVB照射可诱导HaCaT细胞的凋亡及引起细胞钙稳态的失衡。     

硫芥诱导Hela细胞发生凋亡及坏死(英文)

目的:研究硫芥诱导Hela细胞凋亡的作用,方法:生长在DMEM培养基中的Hela细胞与不同浓度的硫芥作用3小时,凋亡用电镜,电泳及流式术检测.结果:低浓度硫芥(I μmol·L~(-1))抑制细胞生长;较高浓度(1-100 μmol·L~(-1))使细胞主要在G_1期阻滞,发生典型的凋亡形态改变,提取细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳,出现“DNA Ladder”.流式术观察表明硫芥处理3小时后,细胞撤药培养12小时,凋亡率达33％,S期的细胞最敏感,硫芥1000 μmol-L~(-1)使Hela细胞发生明显的坏死,结论:硫芥诱导Hela细胞发生两种不同的损伤:坏死及凋亡,硫芥的细胞毒有浓度依赖性。     

硫芥中毒小鼠微量血细胞DNA损伤的检测

目的　为探讨硫芥对小鼠外周血细胞DNA损伤的剂量 效应和时间 效应关系 ,为寻找硫芥中毒早期亚临床损伤的诊断指标 ,提供动物体内实验的数据。方法　昆明种小鼠 ,硫芥纯度 97.3% ,用1,2 丙二醇稀释成所需浓度 ,在颈背部皮下注射。随机分为丙二醇溶剂组 ,硫芥中毒组 (自身对照 ) :18mg·kg- 1(LD50 ) ,2 4mg·kg- 1(LD70 ) ,30mg·kg- 1(LD90 ) ,正常观察组和中毒观察组 ,每组 10只小鼠(18mg·kg- 1组除外 )。剪尾采血 5 μL ,采血时间为0 ,2 ,4 ,8,2 4 ,72和 12 0h。应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术进行制片、铺胶、裂解、电泳、染色。荧光显微镜下目镜测微尺测量 ,彗星细胞DNA迁移度(μm)和彗星细胞DNA迁移率 (% ) ,统计分析用SPSS10 .0分析软件及卡方检验。结果　①硫芥中毒后受损细胞 (即拖尾细胞 )DNA迁移率 4h达到峰值 ,低、中、高 3个剂量组分别为 35 .3% ,5 7.8% ,72 % ,显著高于自身对照 (P <0 .0 1) ,8h后逐渐降低 ,72h后低剂量组接近正常值 (P >0 .0 5 )。②DNA迁移度 (拖尾长度 ) 4h达到第一个峰值 ,低、中、高 3个剂量组分别为 (16 .0 0± 1.99) ,(2 2 .0 5± 1.0 0 ) ,(35 .90± 1.2 9) μm ,显著高于自身对照 (P <0 .0 1) ,2 4h出现第二个峰值 ,其后随时间延长逐渐下降。上述结果提示硫?     

猪硫芥皮肤染毒防治实验

目的　为硫芥皮肤染毒防治筛选有效的治疗药物。方法　采用与人的皮肤结构相似的猪皮肤作为实验模型 ,作者选用了云南产的小香猪为实验动物 ,用不同浓度的硫芥染毒皮肤 ,染毒剂量为 5 μL硫芥 (0 .5mg·cm2 )和 10 μL硫芥 (1mg·cm- 2 )。观察皮肤损害情况及其病理变化。治疗药物选用皮肤科常用的抗炎药物烧伤宁、钙调蛋白拮抗剂三氟拉嗪、NO合酶抑制剂L 硝基精氨酸甲基酯、ADP 核糖聚合酶抑制剂尼克酰胺。结果　实验发现治疗组和对照组的红斑、水肿和糜烂出现的时间、程度和范围无明显差别。染毒后 1周 ,对照组创面表皮结构破坏 ,部分表皮纤维化 ,部分表皮坏死 ,真皮胶原肿胀变性 ,弹力纤维断裂 ,并有大量炎性细胞浸润。药物治疗组可见表皮纤维化 ,真皮层有少量炎性细胞浸润 ,染毒后用药时间组间无明显差异。染毒后 3周 ,对照组和治疗组的表皮均明显纤维化 ,部分表皮恢复 ,对照组的表皮下仍可见有少量炎性细胞浸润 ,而治疗组的皮肤结构已基本恢复。结论小香猪的皮肤为黑色 ,影响红斑、水肿症状的观察 ;且与断乳小猪相比其皮肤相对较厚 ,相同的染毒剂量对其皮肤造成的损伤也较轻。 4种治疗药物对硫芥皮肤损伤的恢复有一定的促进作用 ,但与对照组相比差异不显著 ,因此只能作为皮肤损伤后对症综合治疗措?     

硫芥对小鼠造血干细胞自我更新和分化功能的影响

用2次移植法测定不同剂量硫芥sc小鼠骨髓CFU_0的自我更新和分化功能。硫芥小剂量(15mg/kg)杀伤下,约半数剩余的CFUs的更新潜能仍保持正常。加大硫芥剂量(25mg/kg)使CFUs严重耗竭,残存的CFUs仅为正常值的8％,但其自我更新能力却高达正常的2.5倍,并历时30d而不减退。在上述剂量作用下,不论近期或远期测定,残存的CFUs主要表现为向粒系分化的提高和向巨核系分化的减少。硫芥作用下残存的CFUs具有良好的自我更新功能,是其染毒后造血功能得以迅速恢复的根本原因。然而,造血干细胞向巨核系分化的相对减少,可能影响血小板的生成量是应该引起注意的问题。     

烟酰胺治疗大鼠硫芥中毒的实验评价

目的　为评价多 (ADP核糖 )聚合酶 (PAD PRP)抑制剂烟酰胺 (尼克酰胺 )对SD大鼠硫芥全身中毒的治疗效果。方法　雄性SD大鼠 30只 ,体重190～ 2 30g ,分为正常对照组、中毒对照组和烟酰胺治疗组。 4mg·kg- 1硫芥中毒。中毒对照组和烟酰胺治疗组动物腰背部皮下注射硫芥 ,正常对照组给予等容量的丙二醇。中毒后 0 .5hip 5 0mg·kg- 1烟酰胺 ,每日 1次 ,连续 8d。实验动物在中毒前测 1次体重 ,以后每天定时测 1次。观察动物食欲及腹泻情况 ,记录动物死亡时间。中毒后d 4 ,d 8各测 1次血常规 ,d 8全部活杀 ,取胫骨上段做骨髓涂片 ,重点观察骨髓的细胞学分类及增生程度。结果　①中毒对照组腹泻率为 70 % ,但未见死亡 ;烟酰胺治疗组的腹泻率为 80 % ,并且在d 5出现动物死亡 ,死亡率为 10 % ,但统计学上均无显著差异。中毒对照组和治疗组动物之间体重变化无明显差异 ,而与正常对照组相比自中毒后d 3起均明显下降。②血常规变化 ,中毒后d 4 ,治疗组与中毒对照组相比 ,结果均无显著差异 ,但这两组与正常对照组相比 ,白细胞总数 (WBC)、淋巴细胞分类 (LYM )、粒细胞分类(GRAN)和血小板总数 (PLT)均明显下降 ,尤其以WBC ,LYM和GRAN为显著 ,而红细胞总数 (RBC)和血红蛋白量 (HGB)均无显著变化。中毒后d 8,治疗组与?     

莱菔硫烷诱导人肝癌 HepG-2 细胞凋亡的 p38MAPK 途径研究

目的：探讨莱菔硫烷（sulforaphane, SFN）诱导人肝癌 HepG-2 细胞凋亡过程中,p38MAPK 途径的作用。方法：流式细胞仪检测 SFN 对 HepG-2 细胞凋亡率的影响,Western Blotting 方法检测细胞内 p38 及 p-p38 蛋白表达。结果：SFN可明显诱导 HepG-2 细胞凋亡,10、20、40 μmol/L SFN 作用 48 h 后,对 HepG-2 细胞的抑制率分别达到 27.42 %、46.53 %、58.92 %;10、20、40 μmol/L 的 SFN 可上调 HepG-2 细胞内 p-p38 蛋白的表达,而对 p38 的表达无明显影响。结论：SFN 可诱导 HepG-2细胞的凋亡,而且这一过程与阻断 p38MAPK 途径有关。     

硫芥对兔眼视网膜和脉络膜的影响

目的　研究硫芥全身吸收中毒可能对视功能造成的影响。方法　健康灰兔和新西兰白兔各 5只 ,各 4只给予 1个致死剂量的硫芥 (0 .0 94 %硫芥 ,1mL·kg- 1sc) ,余下各 1只给予生理盐水作对照。中毒 2d后 ,im 15 %噻胺酮麻醉动物 ,托品酰胺 /去氧肾上腺素 (美多丽 )眼液扩瞳 ,暗适应 30min ,1%丁卡因点眼 2次 ,用LKCUTAS E 2 0 0 0型视觉电生理记录仪行ERG检查 :记录暗视ERG、混合ERG、振荡电位、明视ERG和闪烁ERG。作用电极放置于角膜表面 ,参考电极和地电极分别刺入前额正中和耳背皮下。ERG检查后处死动物 ,取眼球 ,左眼作病理检查 ,右眼作透射电镜检查。结果　无论是白兔还是灰兔 ,实验组和对照组的ERG检查 5种反应均无显著差异。病理检查白兔的视网膜、脉络膜组织完整 ,未见增厚和变薄 ,锥体、杆体层未见溶解 ,外节未见变短 ,细胞核数目未见明显减少 ,色素上皮细胞少见 ,脉络膜结构未见异常。灰兔的视网膜色素上皮细胞排列整齐 ,数目未见变少 ,可见脉络膜色素颗粒 ,其余结构同白兔。光镜下 ,灰、白兔与对照组均无明显差异。电镜检查视网膜内外节盘膜排列整齐 ,密集 ,核区未见异常 ,色素上皮细胞内线粒体轻度肿胀 ,有空泡化趋势 ,但未见核固缩 ,滑面内质网未见明显扩张 ,粗面内质网未见脱粒 ;节细胞胞核?     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的p38MAPK途径研究

目的:探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡过程中,p38MAPK途径的作用。方法:流式细胞仪检测SFN对HepG-2细胞凋亡率的影响,Western Blotting方法检测细胞内p38及p-p38蛋白表达。结果:SFN可明显诱导HepG-2细胞凋亡,10、20、40μmol/LSFN作用48h后,对HepG-2细胞的抑制率分别达到27.42%、46.53%、58.92%;10、20、40μmol/L的SFN可上调HepG-2细胞内p-p38蛋白的表达,而对p38的表达无明显影响。结论:SFN可诱导HepG-2细胞的凋亡,而且这一过程与阻断p38MAPK途径有关。     

硫芥中毒复合四肢火器伤的初步实验研究

目的　通过对硫芥中毒复合枪弹伤伤情观察 ,了解硫芥中毒复合伤伤情特点。方法　动物分为假手术组、中毒组、中毒复合枪伤骨折、中毒复合骨折中毒急救、中毒复合骨折中毒急救及手术救治。将兔四肢关节伸展位固定在架上 ,枪击点位于右大腿中下 1/ 3前外侧 ,皮肤硫芥染毒 5min后 ,枪击造成兔右股骨开放性粉碎性骨折 ,立即进行中毒急救及手术救治。假手术组动物以生理盐水替代硫芥 ,相同部位行假手术 (即切开显露股骨 ,不作骨折固定 )。观察 2 4h存活率及伤情变化。结果　假手术组及单纯中毒组 2 4h死亡率均为 0 % ,中毒复合骨折动物未经救治死亡率为 10 0 % ,经手术急救后死亡率为 2 5 %。死亡兔与创伤重及骨折部位大出血有关。结论　硫芥中毒复合火器伤骨折 ,先挽救危及生命的骨折出血 ,同时洗消解毒     

硫芥对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的毒效应及机制

目的 建立硫芥(SM)染毒的神经细胞损伤模型,研究SM的神经细胞毒性效应及潜在机制。方法 采用SM 0(溶剂,0.2%乙醇),0.1,1.0,10,50,100,200,400和800μmol·L^-1孵育人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞30 min,而后去除药物,换用正常培养基孵育24 h。应用IncuCyte ZOOM长时间动态活细胞成像及数据分析系统观察细胞融合率和细胞形态;CCK-8法检测细胞活力;SM 0,1.0,10,25,50,100和400μmol·L^-1以同样方式处理细胞,calcein-AM/PI荧光染色检测活细胞比例和死细胞比例;试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)-488细胞增殖试剂盒检测细胞增殖;免疫荧光法测定细胞DNA双链断裂标志物γ-H2AX。SM 0,1.0,10和100μmol·L^-1以同样方式处理细胞后,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)相对含量;试剂盒检测细胞内NAD⁺/NADH和ATP含量;SM 10μmol·L     

辣椒素对培养的人角质形成细胞Fas/Fasl表达及凋亡的研究

目的：通过研究辣椒素（CAP）对培养的正常人角质形成细胞（KC）的作用前后Fas／Fasl的表达及其与凋亡的关系，进一步探讨其对银屑病的作用机制。方法：不同浓度的CAP作用于培养的正常人KC后，进行免疫细胞化学研究，观察其对KC增殖及KC Fas／Fasl蛋白表达的影响。结果：辣椒素对体外培养的KC的生长具有明显的抑制作用，并且促使KC凋亡；CAP作用KC后Fas／Fasl均有较强表达。结论：CAP抑制KC的过度生长，上调培养的正常人KC Fas／Fasl蛋白表达，并促进KC凋亡。     

复方软膏制剂对家兔硫芥皮肤染毒预防作用

目的　为筛选预防硫芥皮肤中毒的有效药物。方法　以家兔为动物模型 ,从创面形态学和组织病理学变化来观察分别含有半胱氨酸、甲壳胺、烟酸、乙二胺四乙酸 (EDTA)这 4种药物成分的软膏制剂对硫芥皮肤染毒的预防作用。结果　从创面形态学看 ,甲壳胺组、半胱氨酸组比对照组损伤面积小、恢复时间快、毛发再生早 ;从病理组织学变化看 ,这两组的创面表皮基底层基本完好 ,真皮充血、水肿、炎细胞渗出程度相对较轻。结论　甲壳胺和半胱氨酸有一定的保护作用 ,而烟酸和EDTA的效果不明显