柱前衍生高效液相色谱法测定尼莫地平注射液中的甲醛和乙醛

建立柱前衍生高效液相色谱测定尼莫地平注射液中甲醛和乙醛含量的方法.以2,4-二硝基苯肼为衍生化试剂,室温反应30 min,采用高效液相色谱法检测,色谱柱为Waters XBridge C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈–水(体积比为50:50),等度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃...     

快速柱前衍生HPLC法检测曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶

以邻苯二甲醛(OPA)和3-巯基丙酸为衍生试剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶含量的分析方法。(R)-3-氨基哌啶与衍生剂在碱性(p H 10.5)条件下于室温反应30s,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析。采用YMC-Triart C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相采用0.05 mol/L乙酸钠(p H 6.0)-甲醇溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长331 nm,柱温30℃。(R)-3-氨基哌啶质量浓度在0.08~2.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9993),定量限为1.6 ng,加标回收率在98.0%~10⁶.9%之间,相对标准偏差(RSD)为2.8%。该方法可用于曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶含量测定。     

1,3,5,7-四甲基-8-丙酰肼-二氟化硼-二吡咯甲烷柱前衍生高效液相色谱测定白酒中的脂肪醛

以合成的1,3,5,7-四甲基-8-丙酰肼-二氟化硼-二吡咯甲烷(BODIPY-丙酰肼)作为柱前荧光衍生试剂,用于高效液相色谱分离荧光法检测甲醛、乙醛、丙醛、丁醛、戊醛、己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛、十一醛、十二醛等12种脂肪醛.通过对衍生条件和分离条件进行优化,建立了测定脂肪醛的HPLC/FD新方法.衍生反应以H3P...     

新型荧光衍生试剂用于脂肪胺的反相高效液相色谱-荧光检测分析

利用新型荧光试剂4-(1H-菲并[9,10-d]咪唑-2-)苯甲酸(PIBA)进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱(HPLC)分离和在线质谱定性。激发和发射波长分别为ex=261nm,em=443nm。80℃下在吡啶溶剂中用N-乙基-N’-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)做催化剂,衍生反应10min后获得稳定的荧光产物。在EclipseXDB-C8色谱柱(4.6150mm,5mm)上,梯度洗脱对12种游离脂肪胺衍生物进行了优化分离。采用大气压化学电离源(APCI)正离子模式,实现了各种脂肪胺衍生物的测定。多数脂肪胺的线性回归系数大于0.9999,检测限为10.5～53.4fmol。     

2-(11H-苯[a]咔唑)-乙酸在脂肪胺的高效液相色谱分离及质谱鉴定中的应用

采用新型荧光衍生试剂2-(11H-苯[a]咔唑)-乙酸(BCA)进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行高效液相色谱(HPLC)分离和质谱定性.衍生物荧光激发和发射波长为λex=285 nm,λem=384 nm.60 ℃下在乙腈溶剂中用N-乙基-N′-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)作催化剂, 衍生反应15 min后获得稳定的荧光产物.在Hypersil BDS C18 (4.0 mm×200 mm, 10 μm) 色谱柱上, 采用梯度洗脱对12种脂肪胺衍生物进行了优化分离.采用大气压化学电离源(APCI Source)正离子模式进行质谱定性, 实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定.脂肪胺的线性回归系数不小于0.999 8 , 检出限(S/N=3)为5.73 ～31.3 fmol.     

OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定氨基酸含量

建立了邻苯二甲醛（ＯＰＡ）手动柱前衍生反相高效液相色谱法测定样品中氨基酸含量的方法。以邻苯二甲醛（ＯＰＡ）／３－巯基丙酸（３－ＭＰＡ）为衍生试剂进行衍生,ＯＤＳ柱分离,３４０ｎｍ检测,在４０ｍｉｎ内１８种氨基酸全部得到基线分离。测定牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的氨基酸组成和小鼠血清中的游离氨基酸,取得满意的结果。     

高效液相色谱法测定烯草酮合成废液中4-二甲氨基吡啶含量

采用高效液相色谱法测定烯草酮合成废液中4-二甲氨基吡啶含量,使用BDS Hypersil C18不锈钢柱(250mm×4.6mm),以甲醇∶水∶磷酸=60∶39.75∶0.25为流动相,使用紫外检测器,在波长254nm下进行测定。实验测定4-二甲氨基吡啶加标回收率为97.7%,变异系数为3.33%,线性相关系数为0.9994。     

衍生液提取-高效液相色谱法测定食品中甲醛

提出了高效液相色谱法测定了几种食品中甲醛含量。以衍生液2,4-二硝基苯肼乙腈溶液-pH 5的磷酸盐缓冲溶液(1+1)的混合溶液为提取剂对样品进行提取,以Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,以甲醇-水(70+30)溶液为流动相分离。甲醛的测定下限(10S/N)为5.0 mg.kg-1。以鲜香菇、鲜鱿鱼、奶粉和面粉样品为基体,分别添加5.0,10.0,20.0 mg.kg-1甲醛标准溶液,回收率在73.3%~97.7%之间,相对标准偏差(n=6)在1.4%~5.0%之间。     

脂肪胺荧光衍生物的高效液相色谱分离及质谱鉴定

采用新型荧光衍生试剂2-(9-吖啶酮)-乙酸(AAA)进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱(HPLC)分离和在线质谱定性.衍生物荧光激发和发射波长为λex=404nm,λem=440nm.30℃下在乙腈溶剂中用N-乙基-N′-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)做催化剂,衍生反应20min后获得稳定的荧光产物.在HypersilBDSC18(4.6mm×100mm,5μm)色谱柱上,采用梯度洗脱对12种脂肪胺衍生物进行了优化分离.采用大气压化学电离源(APCISource)正离子模式进行在线柱后质谱定性,实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定.该方法具有良好的重现性,多数脂肪胺的线性回归系数大于0.9996,检测限为12.09~25.52fmol.     

柱前荧光衍生脂肪醇的高效液相色谱分离及质谱鉴定

利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙酸（BCAA）作为柱前衍生化试剂,以乙腈为溶剂,1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）环己碳二亚胺（EDAC）作为缩合剂,4-二甲氨基吡啶（DMAP）为催化剂,55℃下衍生反应25 min后获得稳定的荧光产物。在Eclipse XDB-C8色谱柱上,通过梯度洗脱对12种游离脂肪醇进行了分离和在线质谱定性。激发和发射波长分别为λex=333 nm,λem=390nm。采用大气压化学电离源（APCI）正离子模式,对洗发水（含十二烷基硫酸钠）中游离脂肪醇进行定性及测定。脂肪醇的线性回归相关系数大于0.9997,检出限在9.40-25.32 fmol。     

高效液相色谱–光电二极管阵列法测定虾青素的含量

建立虾青素含量测定的高效液相色谱–光电二极管阵列法。采用Purospher STAR RP 18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇–水(体积比为95∶5)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长为482 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。在所选定的液相色谱条件下,虾青素主峰与其它杂质峰分离良好,虾青素在0.2~16μg/mL范围内线性良好,线性相关系数r=0.999 9,检出限为0.01μg/mL,测定结果的相对标准偏差为0.42%(n=6),平均回收率为100.4%。该法分析快速准确、灵敏度高、重现性好。     

High-performance liquid chromatographic determination of cocaine and benzoylecgonine by direct injection of human blood plasma sample into an alkyl-diol-silica (ADS) precolumn

A column-switching high-performance liquid chromatographic method with UV detection for the determination of cocaine (COC) and benzoylecgonine (BZE) in human blood plasma samples is described. The method uses an alkyl-diol-silica ADS-C18 extraction precolumn. A 50- micro L plasma sample was introduced to the ADS precolumn in order to separate the analytes from proteins and endogenous compounds. The fraction containing COC and BZE was back-flushed and transferred to an Alltech mixed-mode C(18)/cation-exchange analytical column for final separation. The validation of the method revealed quantitative recoveries from 95.0 to 99.0% for COC at three different concentrations (0.5, 1.0 and 2.0 micro g mL(-1)), and from 96.0 to 99.0% for BZE at the same concentration levels with coefficients of variation <4.00% (n=5). The detection limit (signal to noise ratio (S/N)>3) was 0.03 micro g mL(-1) for all the compounds with an injection volume of 50 micro L. However, it was possible to enhance the sensitivity further by injecting larger plasma volumes, up to 200 micro L, at the same optimal conditions. The overlap of sample preparation, analysis and reconditioning of the extraction column, increase the overall sample throughput to 5 samples h(-1). The developed method has been applied to human blood plasma samples from subjects suspected of cocaine abuse.     

整体柱高效液相色谱法测定草甘膦原药中甲醛含量

建立了衍生化-高效液相色谱法对草甘膦原药中痕量甲醛含量进行测定的方法。样品中残留甲醛经超声波水浴提取，与2，4-二硝基苯肼衍生反应，生成的2，4-二硝基苯腙用反相整体柱色谱进行快速分离，在360nm紫外波长下检测，外标法定量。该分析方法在2．0～200mg/L浓度范围呈良好线性，添加回收率在88％～105％之间，相对标准偏差小于5％。样品中甲醛的最小检测浓度为0．5mg/kg。比较了整体色谱柱和常规C18反相柱分离效果，表明整体色谱柱可在1．5min内实现衍生化产物的快速分离并进行定性定量，同时发现相对于常规柱，采用整体柱提高了检测灵敏度约10倍。     

高效液相色谱法测定洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚

建立高效液相色谱仪同时测定洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚含量的方法。采用Shim-pack Scepter C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇–0.1%磷酸水溶液(体积比为70∶30),流量为1.0 mL/min,柱温为室温,检测器为岛津SPD–M20A二极管阵列检测器,检测波长为280 nm。水杨酸和对氯间二甲苯酚与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性范围分别为40~400 μg/mL,20~200 μg/mL,相关系数均为r^2=0.999 9。方法的检出限为0.1 μg/mL,水杨酸和对氯间二甲苯酚测定结果的相对标准偏差分别为0.79%,1.39%(n=5),加标回收率为96.9%~99.8%。该方法方法简便、快速、灵敏度高、重现性好,能同时准确检测洗手液中水杨酸和对氯间二甲苯酚的含量。     

高效液相色谱法测定葛根芩连片中的葛根素

建立高效液相色谱测定葛根芩连片中葛根素含量的方法。以体积分数50%的甲醇为提取液对样品超声提取20 min,采用DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇–乙腈–水(体积比8∶12∶80)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30.0℃,进样量体积10μL。在最佳实验条件下,葛根素与其它物质能完全分离,葛根素的质量浓度在5.43~543.2μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性,线性相关系数r=0.999 9,方法检出限为3.50μg/mL(S/N=3)。方法加标回收率为100.0%,测定结果的相对标准偏差为1.6%(n=6)。该方法简单、快速、重现性好,适用于葛根芩连片中葛根素的测定。     

柱前衍生-超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定茶叶中乙撑硫脲的残留

建立了茶叶中乙撑硫脲残留的柱前衍生-超高效液相色谱-串联四极杆质谱检测方法。样品采用乙腈提取,提取液经QuEChERS基质分散固相萃取净化后采用9-芴基甲基氯甲酸酯（FMOC-CL）柱前衍生;衍生溶液经BEH-C18色谱柱（100 mm×2.0 mm,1.7 μm）分离后进入串联四极杆质谱仪检测,采用同位素内标法定量;流动相为0.1%（v/v）甲酸-乙腈。该方法对茶叶样品检出限为1.3 μg/kg,定量限为4.2 μg/kg;加标回收率在97.7%~107.5%之间,相对标准偏差（RSD,n=6）在2.1%~10.0%之间;在1.0~203.4 μg/L范围内线性回归系数r为0.9993。该方法灵敏度高,重现性好,定性定量准确,可有效满足对茶叶中乙撑硫脲残留检测的要求。     

离子色谱法同时测定那屈肝素钙中氯离子和硫酸根离子的含量

建立了一种抑制电导检测器离子色谱法同时测定那屈肝素钙中氯离子和硫酸根离子含量的方法.采用强阴离子交换柱,3 mmol/L碳酸钠溶液为流动相,流速2.0 mL/min,柱温30℃,进样量25μL,检测器为配有化学抑制器的电导检测器.结果表明,氯离子和硫酸根离子在1～20μg/m L浓度范围内线性关系良好,氯离子线性方程为...     

Study on a new precolumn derivatization method in the determination of metformin hydrochloride

Metformin hydrochloride is successfully determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography with a new precolumn derivatization method using 9,10-anthraquinone-2-sulfonyl chloride as the derivatization agent. Several derivatization systems are tried to optimize the derivatization conditions, and a new post-derivatization treatment method is established. The derivatization product is analyzed on a Lichrosper C18 column (6.0 mm x 150 mm, 5 microm) at 256 nm with methanol-water (70:30, v/v) as the mobile phase. The calibration curves of the derivatives for the UV detector (0.01-4 mg/L) are linear with respect to peak area. The detection limit (peak area) for the metformin hydrochloride is 0.01 mg/L for a signal-to-noise ratio of 3:1. In human plasma, the detection limit is 0.02 mg/L. This assay is rapid, sensitive, and highly reproducible.     

衍生化-气相色谱-三重四极杆质谱法测定泼尼松龙中联氨

泼尼松龙是一种广泛用于临床治疗的肾上腺糖皮质激素药物,其中联氨的残留会直接影响用药安全,但目前国内外还没有出台相应的法律法规和标准来管控药物中联氨的残留限值。联氨具有强极性和强还原性,理化性质很不稳定,易被氧化,又因缺少发色团,相对分子质量太小,检测起来难度很大,需引入一种衍生化试剂,降低其极性,生成相对分子质量较大且理化性质稳定的衍生产物。该研究通过优化衍生化试剂、色谱-质谱条件、溶剂体系和衍生化条件,建立了衍生化-气相色谱-三重四极杆质谱法(GC-MS/MS)测定泼尼松龙中联氨残留的方法,并进行了方法学验证,结果满意。称取1 g泼尼松龙样品置于10 mL具塞离心管中,加入稀释溶剂(甲醇-二氯甲烷(14∶23, v/v))至刻度线,涡旋振荡至样品完全溶解后,吸取100 μL置于进样小瓶中,再加入丙酮900 μL,涡旋振荡混匀,样品在丙酮-稀释溶剂(9∶1, v/v)中同时完成稀释和衍生化反应后,再经GC-MS/MS检测分析。该研究的衍生化反应无需在添加冰乙酸和超声条件下进行,也无需再添加其他试剂进行萃取操作,联氨与丙酮可瞬间发生衍生化反应,直接实现泼尼松龙中联氨的快速测定。结果表明,联氨在1~12 μg/L范围内线性关系良好,线性相关系数(r²)为0.9999;检出限、定量限分别为0.03和0.10 mg/kg;进样精密度(relative standard deviation, RSD)为1.10%。加标回收率和重复性良好,加标水平分别为1、6、12 μg/L时的回收率为96.15%~96.46%,对应的RSD值为1.77%~2.12%。中间精密度良好,不同时间、不同人员在同一台仪器上测定结果的RSD值为1.77%。方法耐用性良好,通过改变色谱条件来研究检测结果受影响程度大小,在原条件、初始柱温±5 ℃、升温速率±2 ℃/min、柱流量±0.1 mL/min的条件下分别对加标6 μg/L的样品溶液中的联氨含量进行检测,检测结果的RSD值为2.58%。应用建立的方法测定泼尼松龙市售标准品和某药企提供的9个不同批次的泼尼松龙样品,均未检出联氨。该方法操作简便、准确可靠、灵敏度高、选择性好,可用于泼尼松龙中联氨的检测。     

3,3′-二氨基联苯胺柱前衍生高效液相色谱法测定酒中双乙酰

以3,3′-二氨基联苯胺(DAB)为衍生化试剂,建立了柱前衍生高效液相色谱测定酒中双乙酰含量的分析方法。双乙酰与衍生化试剂DAB在室温条件下反应10 min进行柱前衍生,并采用Shim-pack VP-ODS色谱柱(250mm×4.6 mm,4.6μm)对衍生化产物进行分离分析,以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,并采用配有二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪测定,检测波长为254 nm。该法在双乙酰浓度为0.20~180μmol/L的范围内呈现良好的线性关系,相关系数(R2)为0.999,检出限(S/N=3)为0.09μmol/L,定量限(S/N=10)为0.20μmol/L,日内精密度(RSD)为1.28%(n=6)。实际酒样品的加标回收率为92.0%~103.6%,RSD为0.69%~3.45%(n=3)。该法简便快捷,结果准确,稳定性好,可以用于白酒及红酒中双乙酰含量的测定。