天参益智方对老年痴呆模型学习记忆能力及Aβ1-40的影响

目的研究天参益智方（TSYZ）对AD大鼠模型学习记忆障碍的保护作用，探讨其对AD大鼠脑内Aβ1-40沉积的影响。方法以慢性铝中毒法复制AD大鼠模型，用Moriss水迷宫法检测AD大鼠学习记忆能力；采用免疫组化法检测AD大鼠海马和皮质Aβ1-40。水平。结果天参益智方治疗组逃出水迷宫的时间及搜索距离显著低于模型对照组（P〈0．05，P〈0．01），大鼠海马和皮质的平均灰度值显著升高（P〈0．01），Aβ1-40水平明显低于模型组。结论天参益智方明显减少AD大鼠脑组织中Aβ1-40沉积，这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能作用机制之一。     

天参益智方对老年性痴呆模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

目的研究天参益智方(TSYZ)对AD模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用和抗氧化作用。方法以慢性铝中毒法复制老年性痴呆模型大鼠,用TUNEL法观察模型大鼠海马和皮质内细胞凋亡水平,并检测脑线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果模型组大鼠海马和皮质具有典型的细胞凋亡特征,T-SOD活性降低,MDA含量升高;而天参益智方治疗组海马和皮质神经细胞凋亡数减少,T-SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论天参益智方具有明显抑制神经细胞凋亡作用和抗氧化作用,其改善AD大鼠学习记忆功能可能是通过多个环节整体治疗来实现的。     

银杏内酯对拟AD模型大鼠海马Aβ1- 40和nNOS表达的影响

目的:研究银杏内酯对拟AD模型大鼠的作用及作用机理。方法:大鼠海马CA1区微量注射冈田酸(Okadaicacid,OA)建立拟AD大鼠模型,银杏内酯腹腔注射30mg/kg·d,连续3周,水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察大鼠海马β-淀粉样蛋白(β-amyloidprotein,Aβ)及神经元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)的表达。结果:与拟AD模型组相比,银杏内酯组大鼠Morris水迷宫定向航行试验中平均逃避潜伏期明显缩短,空间探索试验中撤去站台后原站台象限活动时间明显延长(P<0.01);同拟AD模型组相比,银杏内酯组大鼠海马CA1区Aβ1-400免疫阳性神经元明显减少或消失,nNOS免疫阳性神经元明显增多。结论:银杏内酯能显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力,其机理可能是抑制海马Aβ1-40的形成,促进nNOS表达和NO递质的合成,减轻OA对大鼠海马神经元的病理损害,保护海马神经元。     

补肾益智方对Alzheimer病模型大鼠脑内β-淀粉样前体蛋白的影响

目的：观察补肾益智方对Alzheimer病（AD）模型大鼠脑内β－淀粉样前体蛋白（β－APP）的影响。方法：以D－半乳糖致亚急性衰老合并Meynert核损毁作为AD大鼠模型,用免疫组织化学检测及体视学分析方法观察大鼠脑内β－APP的变化。结果：补肾益智方能显著降低AD模型大鼠脑内顶叶皮质、海马CA1区、齿状回β－APP免疫阳性神经元的细胞数、积分光密度值（P＜0.05,P<0.01)。结论：补肾益智方能减少或抑制β－APP的过度产生,这可能是其减少β淀粉样蛋白（β-AP)沉积,改善AD模型大鼠学习记忆的作用机制之一。     

调心方对杏仁核注射Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病模型大鼠的影响

目的 研究调心方(HBR)对杏仁核注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠相关病理变化的作用。方法 单侧杏仁核注射Aβ25-35造成AD大鼠模型，采用Morris水迷宫法、放射免疫法、免疫组化法、RT—PCR法，以Aricept为对照，观察HBR对AD模型大鼠的空间学习记忆能力、胆碱能系统、Aβ1-40沉积、tau蛋白异常磷酸化及脑额叶皮层内APPmRNA表达的影响。结果 HBR可显著改善Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆障碍，提高模型大鼠的胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性及M受体结合容量(Rt)值，减少APPmRNA的表达和Aβ1-40的沉积，抑制tau蛋白的异常磷酸化。结论 HBR对Aβ25-35诱导的AD大鼠空间学习记忆障碍及胆碱能系统损害具有显著改善作用，可以明显减轻Aβ1-40的沉积和tau蛋白的异常磷酸化。     

清心开窍方及皂苷对AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方及其皂苷成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响.方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和皂苷组,每组8只.采用双侧杏仁核注射Aβ25-35(10g·L-1)制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申(1.67 mg·kg-1)、清心开窍方水煎剂(12.67 mL· kg-1)、皂苷(6.30 mg·kg-1)及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究脑组织Caspase-3,Aβ及βAPP的表达.结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01);清心开窍方组、皂苷组大鼠大脑皮层、海马区Caspase-3,Aβ及βAPP表达水平降低,与模型组比较差异非常显著(P＜0.01,P＜0.05).结论:清心开窍方及其皂苷能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Caspase-3,Aβ及βAPP表达发挥作用.     

基于APP调控探讨补肾化痰益智法对Aβ1-42致AD模型大鼠认知障碍的改善及分子机制

目的 探讨补肾化痰益智法（BSHTYZ）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease， AD）样模型大鼠认知障碍的改善及分子机制。方法 通过对Sprague Dawley（SD）雄性大鼠侧脑室内注射Aβ_1-42构建AD大鼠模型，分别用低（12.5g/kg·d，BSHTYZ-L）、中（25 g/kg·d，BSHTYZ-M）、高（50 g/kg·d，BSHTYZ-H）剂量的补肾化痰益智方水煎液灌胃，分2次灌服，同时设置对照组、模型组和阳性治疗组，4周后利用Morris水迷宫和改良Highman刚果红染色分别观察AD模型大鼠空间学习记忆能力和Aβ在大脑皮层和海马的分布情况，同时利用Western blot检测补肾化痰益智法对AD模型大鼠海马区APP、pAPP668及其α、β、γ分泌酶和降解酶IDE等蛋白表达的影响。结果 通过大鼠侧脑室注射Aβ_1-42，可诱导出大鼠AD样空间学习记忆障碍、大脑皮层和海马的海马Aβ沉积增加及pAPP668表达增加，同时可见α分泌酶和IDE降解酶减少、β分泌酶的水平上升，中高剂量的补肾化痰益智方干预后均能显著逆转上述现象，同时高剂量补肾化痰益智方还能降低γ分泌酶的水平。结论 补肾化痰益智法能有效改善Aβ_1-42引起的AD样模型大鼠的学习记忆能力减退，其保护机制可能通过减少Aβ的生成、增加Aβ的降解从而缓解Aβ在脑内的聚集来调控APP的代谢有关。     

新型阿尔茨海默病大鼠模型的建立及其行为学研究

目的:运用Aβ25-35联合D-半乳糖诱导建立大鼠新型复合AD模型并观察其行为学变化.方法:双侧海马内一次性注射Aβ25-35,联合长期颈部皮下注射 D-半乳糖50天制作大鼠AD动物模型.以Mortis水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力变化.结果:Aβ25-35联合D-半乳糖诱导的大鼠新型复合AD模型的学习记忆和空间识别能力明显障碍,与正常组比较差异有显著意义(P<0.05~0.01).结论:Aβ25-35联合D-半乳糖建立的新型大鼠复合损伤 AD模型具有明显的痴呆行为学特征.     

清心开窍方多糖对AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探讨清心开窍方多糖成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和多糖组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起及灌胃给药2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,免疫组化方法研究脑组织Caspase-3、Bax、Bcl-2及βAPP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力(P<0.05,P<0.01);清心开窍方组、多糖组大鼠大脑皮层、海马区Bax、Caspase-3、βAPP表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Bax、Caspase-3、βAPP表达而发挥作用。     

固本健脑液对阿尔兹海默症大鼠生物钟基因Clock、Bmal1及海马Aβ的影响

目的:通过观察固本健脑液对AD大鼠学习记忆、生物钟基因及海马Aβ含量的影响,探索该方改善学习记忆和睡眠障碍的可能机制。方法:实验大鼠随机分为正常组、模型组、药物高、中、低剂量组。自主活动分析仪检测各组大鼠的自主活动情况;Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;ELISA检测大鼠海马Aβ1-40和Aβ1-42含量;免疫组化检测SCN中Bmal1和Clock的蛋白表达水平。结果:自主活动结果显示模型组大鼠活动时间较空白组呈现出显著的增加(P<0.01);各给药组出现活动时间减少(P<0.05)。Morris水迷宫结果显示,模型组大鼠较空白组逃避潜伏期显著延长,目标象限游泳时间百分比显著下降(P<0.01);各观察组逃避潜伏期显著缩短,目标象限游泳时间百分比显著上升(P<0.01,P<0.05);ELISA结果显示,模型组大鼠海马Aβ1-40和Aβ1-42含量较空白组显著增多(P<0.01),固本健脑液中、高剂量组海马Aβ1-40和Aβ1-42含量显著下降(P<0.01)。免疫组化结果:模型组大鼠SCN中Bmal1和Clock表达水平较空白组下降(P<0.01),给药后,各组大鼠SCN中Bmal1和Clock表达上升(P<0.05)。结论:结果显示AD大鼠存在一定程度的昼夜节律紊乱且生物钟节律基因表达降低,固本健脑液干预后可改善痴呆大鼠的昼夜节律紊乱及海马Aβ的异常表达,其机制则可能与固本健脑液上调Bmal1、Clock表达有关。     

通天草提取物对拟阿尔茨海默氏病模型大鼠学习记忆能力及其海马区组织相关蛋白表达的影响

目的:探讨通天草提取物对拟阿尔茨海默氏病(AD)模型大鼠学习记忆能力影响.方法:先对大鼠海马微量注射Aβ1-40,再用通天草提取物灌胃.利用水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力以及免疫组化观察大鼠脑内各种蛋白的表达.结果:通天草提取物能明显改善Aβ1-40所致的AD模型大鼠学习记忆障碍、显著降低AD模型大鼠Aβ表达、抑制海马区星形胶质细胞中GFAP和S100β蛋白过度表达.结论:通天草提取物可能通过抗氧化系统和NF-κB/IκB信号转导通路,抑制海马区星形胶质细胞中GFAP和S100β 蛋白过度表达,从而改善学习记忆障碍,起到防治AD的作用.     

红景天对阿尔茨海默病大鼠行为学和脑组织抗氧化能力的影响

目的 探讨红景天对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的干预效果和作用机理.方法 采用腹腔注射D-半乳糖(用生理盐水配成浓度为10 mg/mL)和灌胃AlCl3(用蒸馏水配成浓度为20 mg/mL),并一次性注射东莨菪碱建立AD动物模型.通过Morris水迷宫测试系统检测大鼠学习记忆能力变化,抗超氧阴离子和总抗氧化能力测定检测各组大鼠脑组织抗氧化水平,常规HE染色和免疫组化测Aβ1-40的表达,观察大鼠海马及皮质的形态学改变.用红景天以灌胃方式对实验大鼠进行干预,并以喜得镇做对照观察其干预效果.结果 模型组大鼠记忆功能明显减退,神经细胞破坏明显,海马和皮质出现β-淀粉样蛋白沉积及老年斑.中药组、西药组及空白组大鼠在水迷宫测试中,逃避潜伏期明显缩短,原平台象限比、跨平台次数明显增加,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);模型组抗超氧阴离子和总抗氧化能力活性较其他组明显降低(P<0.05).结论 红景天可以有效改善AD大鼠空间学习记忆能力损害,同时在清除自由基和抗氧化损伤方面有显著功效,具有神经保护作用.     

电针对Aβ_(25-35)所致AD大鼠海马NOS活性的影响

观察电针对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法:12月龄雄性SD大鼠40只,按随机数字表分为4组,即正常组、假手术组、模型组、电针组,各10只.采用双侧海马一次性注射凝聚态Aβ25-35制备AD大鼠模型,电针组选取双侧"肾俞"穴、"内关"穴和"大椎"穴,接G6805-II型电针治疗仪治疗.采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力的变化;采用分光光度法检测各组大鼠海马NOS活性的变化.结果:与模型组相比,电针能显著提高大鼠的学习记忆能力(P<0.05),抑制海马NOS活性(P<0.05).结论:电针改善AD大鼠学习记忆能力的机制之一可能是通过抑制NOS活性,减轻大鼠海马神经元的损伤实现的.     

吴茱萸碱对AD模型小鼠的保护作用及学习记忆能力的调节作用

目的观察吴茱萸碱对Aβ_(1-40) 诱导的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马神经细胞的保护作用和对小鼠学习记忆能力的调节作用。方法 Aβ_(1-40) ICV(侧脑室)显微注射建立AD小鼠模型。流式细胞分析技术检测小鼠海马神经细胞凋亡,免疫印迹法检测p53和p-p53蛋白的表达,水迷宫定位实验检测小鼠学习记忆能力。结果吴茱萸碱作用后,AD模型小鼠海马神经细胞凋亡率明显降低(P 0.05),p53和p-p53蛋白的表达降低,水迷宫定位航行平均潜伏期缩短(P 0.05)。结论吴茱萸碱通过抑制海马神经细胞凋亡的发生,保护AD小鼠脑组织,提高小鼠学习记忆能力。     

固本健脑法对老年性痴呆模型大鼠SorLA、VPS35的影响

目的:探讨固本健脑法干预老年性痴呆即阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制。方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ_(1-42)制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理申组为对照。4周后,Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力,Westen Blot检测SorlA、VPS35、APP的表达,ELISA法检测Aβ_(1-42)的表达。结果:通过大鼠双侧海马注射Aβ_(1-42),可诱导出大鼠AD样学习记忆能力减退模型。水迷宫检测显示固本健脑液中剂量能改善大鼠学习记忆能力。Westen Blot显示固本健脑液高剂量能提高海马区SorlA的表达量。ELISA显示给药后各给药组Aβ_(1-42)含量降低,固本健脑液高剂量Aβ_(1-42)含量最低。结论:固本健脑法可通过影响SorLA、VPS35的表达,影响APP的转运,减少Aβ_(1-42)的生成,加速Aβ_(1-42)的清除。     

氧化损伤类阿尔茨海默病大鼠模型的建立及调心方的作用

目的：建立一种简便、经济、实用的氧化损伤类阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠模型,探讨调心方对该模型大鼠空间学习记忆能力和β-淀粉样蛋白质(β-amyloid protein,Aβ)沉积的影响。方法：采用二羟延胡索酸(DHF)加三氯化铁-二磷酸腺苷(FeCl3-ADP)左侧脑室注射的方法,建立氧化损伤型类AD大鼠模型;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;免疫组化法观察大脑皮层Aβ沉积及调心方的作用。结果：与对照组比较,模型鼠空间学习记忆能力显著下降,皮层Aβ广泛沉积,皮层Aβ阳性细胞数和免疫组化着色平均光密度显著增高;调心方对模型鼠上述指标变化有明显的改善作用。结论：氧化损伤模型既能较好地表达AD的临床特征(近期记忆损害),又能部分反应AD的病理变化(Aβ沉积),是一经济实用的氧化损伤类AD大鼠模型;调心方具有改善氧化损伤类AD大鼠空间学习记忆障碍、降低Aβ沉积的作用。     

天泰1号对Aβ25-35联合D-半乳糖诱导老年性痴呆模型的干预作用研究

目的:观察Aβ25-35联合D-半乳糖诱导大鼠阿尔茨海默病(AD)动物模型认知功能变化及天泰1号的干预作用.方法:应用脑立体定位仪双侧海马内一次性注射Aβ25-35,联合长期颈部皮下注射D-半乳糖制作大鼠AD动物模型,注射24 h后灌胃给药,连续30 d,以morris水迷宫进行认知行为学检测.结果:与正常对照组、假手术组比较,AD模型组大鼠水迷宫行为学检测潜伏期明显延长,中药组给药后与给药前相比较,潜伏期明显缩短.结论:本方法建立的AD模型大鼠学习记忆功能显著障碍,天泰1号对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病大鼠模型的学习记忆能力具有显著的改善作用.     

调心方有效部位TX0201对类AD模型大鼠学习记忆和细胞凋亡相关基因的影响

目的：观察调心方有效部位TX0201对Aβ1-40双侧杏仁核注射所致的类阿尔茨海默病(AD)大鼠模型学习记忆和皮层、海马细胞凋亡相关基因的影响。方法：应用β-淀粉样蛋白1-40片段(Aβ_1-40)注射入大鼠双侧杏仁核建立类AD的动物模型；实验设正常对照组、类AD模型组、TX0201组、调心方组、阳性药安理申组,均采用灌胃给药20 d；用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力；RT-PCR法检测大鼠脑部皮层和海马的细胞凋亡相关基因Bax mRNA,Bcl-2 mRNA。结果：TX0201、调心方和安理申均能够改善类AD大鼠的学习记忆能力,调心方能全面改善模型鼠脑部皮层和海马异常表达的Bax mRNA和Bcl-2 mRNA,TX0201可改善模型鼠皮层和海马异常表达的Bax mRNA,安理申组改善模型鼠皮层异常表达的Bax mRNA。结论：TX0201可通过改善模型鼠脑内的Bax mRNA来抑制细胞凋亡,从而改善模型鼠的学习记忆。     

地黄饮子对AD模型大鼠定位航行学习记忆的影响

目的:观察中医古方地黄饮子改善老年性痴呆模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用强度.方法:应用Morris水迷宫检测地黄饮子对D-半乳糖致亚急性衰老合并右侧海马CA1区注射凝聚态Aβ1-40所致AD模型大鼠定位航行学习记忆改善情况.结果表明:地黄饮子能够改善模型大鼠的定位航行学习记忆能力,缩短模型大鼠在水迷宫中定位航行实验逃避潜伏期,提示地黄饮子对AD模型大鼠的定位航行学习记忆能力有一定的改善作用.     

调心方有效部位和EGb761对Aβ双侧杏仁核注射致痴呆大鼠APPmRNA、Aβ阳性神经元和乙酰胆碱脂酶作用比较

[目的]研究调心方有效部位(TX0201)和达纳康(EGb761)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)所致类老年性痴呆(AD)模型大鼠胆碱能系统作用的异同。[方法]采用双侧杏仁核注射Aβ25-35造成类AD大鼠模型,观察大鼠Morris水迷宫空间记忆能力、乙酰胆碱(AchE)活性,并分别通过逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法研究类AD大鼠淀粉样前体蛋白(APP)mRNA表达和Aβ阳性神经元。[结果]1)类AD模型大鼠Morris水迷宫测试出现空间记忆能力下降,海马AchE含量降低,皮层、海马APPmRNA的表达上调,Aβ阳性神经元增加;2)TX020和EGb7611可以改善类AD大鼠空间记忆能力;下调海马APPmRNA的表达。[结论]TX0201和EGb761显著改善Aβ诱导的痴呆模型大鼠学习记忆障碍,可能是通过降低海马APPmRNA表达发挥作用。