长链非编码RNA HMMR-AS1促进肺腺癌的恶性进展

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)HMMR-AS1对肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)增殖转移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)检测LUAD细胞系中HMMR-AS1及其正义链HMMR的表达水平;通过小干扰RNA敲减HMMR-AS1的水平,并利用RT-qPCR检测转染效率及其对HMMR水平的影响;采用CCK-8法、克隆形成实验、细胞凋亡实验、划痕实验、Transwell侵袭实验等表型实验检测干扰HMMR-AS1的表达对A549和H1299细胞生物学功能的影响;western blot检测该两种细胞中HMMR-AS1水平降低对HMMR蛋白表达水平的影响。结果与正常肺上皮细胞BEAS-2A相比,LUAD细胞系A549和H1299中HMMR-AS1的表达水平分别上调了3.06倍和5.02倍(P0.05);转染小干扰RNA后A549和H1299细胞中HMMR-AS1的表达水平明显下降(P0.05),并且明显抑制HMMR的转录和蛋白质表达水平(P0.05);表型实验结果显示,与阴性对照组比较,敲减HMMR-AS1能够抑制LUAD细胞的生长、迁移和侵袭能力,并促进凋亡。结论 LncRNA HMMR-AS1能够促进LUAD细胞的生长、迁移和侵袭能力,影响肺腺癌的恶性进展。     

长非编码反义RNA FMR1-AS1及其正义RNA FMR1在宫颈癌中的表达

目的：通过整合计算多中心样本研究长非编码反义RNA FMRP翻译调节因子1反义RNA 1 (FMRP translationalregulator1antisenseRNA1,FMR1-AS1)与相应正义RNAFMR1在宫颈癌中的表达。方法：从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库检索并下载宫颈癌相关高通量数据集。箱图和独立样本t检验用于比较宫颈癌组织与非癌宫颈组织中FMR1-AS1、FMR1的表达差异。整合计算标准化均数差(standard mean difference,SMD)用于综合探究FMR1-A S1、FMR1在宫颈癌中的表达水平。使用Pearson相关分析研究FMR1-AS1与FMR1表达的相关性。基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)用于研究相关的信号通路。结果：合并SMD的结果显示FMR1-AS1在宫颈癌组织中高表达(SMD=0.63,95%CI:0.15～1.11)。同时,合并1018例样本(678例宫颈癌组...     

氧浓度对肺腺癌A549增殖、侵袭特性及长链非编码RNA FOXD3-AS1表达的影响

目的 探讨氧浓度对肺腺癌增殖、侵袭转移的影响,评价不同氧浓度状态下FOXD3-AS1的表达情况。方法 收集2022年1月至2023年1月中国人民解放军中部战区总医院心胸外科肺腺癌手术68例患者的临床资料,术中活体组织标本采用液氮固定,用于提取RNA。人肺腺癌A549细胞株采用不同浓度的氧气培养,分别采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞的侵袭能力;采用qRT-PCT和Western-blot方法检测FOXD3-AS1基因和蛋白的表达情况。结果 肺腺癌组织中FOXD3-AS1的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。qRT-PCR检测结果表明肺腺癌A549细胞中FOXD3-AS1的表达也高于正常支气管上皮细胞16HBE(P<0.05)。随着氧浓度的提高,肺腺癌A549细胞的增殖侵袭能力明显受到抑制,FOXD3-AS1基因和蛋白的表达水平呈现下降趋势(P<0.05)。结论 FOXD3-AS1在肺腺癌组织中表达水平高于癌旁组织,其高表达与淋巴结转移阳性及肿瘤分期显著相关。随着氧浓度的升高,肺腺癌A549细胞增殖侵袭受到明显抑制,FOXD3-AS1基因和蛋白...     

长链非编码RNA OIP5-AS1在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与肿瘤的发生发展密切相关。LncRNA反义Opa反应蛋白5RNA(Opa interacting protein 5-antisense RNA 1,OIP5-AS1)在多种肿瘤中不仅异常表达,还发挥癌基因的作用,是潜在的肿瘤治疗靶点,并有望成为肿瘤诊断和预后新的标志物。本文就近年来OIP5-AS1在肿瘤中作用的相关研究作一综述,以期为OIP5-AS1的临床应用提供依据。     

RNA干扰长链非编码RNA 肺腺癌相关转录本1影响BIU-87细胞的增殖

目的探讨RNA干扰长链非编码RNA肺腺癌相关转录本1(lncRNA MALAT1)是否通过抑制基质金属蛋白酶的表达水平,影响膀胱癌细胞系BIU-87的增殖。方法构建MALAT1-RNAi表达载体,以转染膀胱癌细胞系BIU-87作为转染组,以不转染BIU-87细胞作为空白对照组,以转染空载体BIU-87细胞作为阴性对照组。采用MTT试验及细胞划痕试验分析各组BIU-87细胞的增殖情况;western blot法检测各组基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9及其基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)和TIMP2的表达水平。结果与空白对照组相比,转染组BIU-87细胞的迁移能力明显降低(P<0.05);增殖能力受到明显抑制,且随着作用时间的延长,其抑制率明显升高(P<0.05);此外,与空白对照组和阴性对照组相比,转染组BIU-87细胞基质MMP2和MMP9蛋白及其抑制剂TIMP1和TIMP2蛋白的表达水平均明显降低(P均<0.05)。结论RNA干扰MALAT1主要通过抑制基质金属蛋白酶的表达,从而影响膀胱癌细胞系BIU-87的增殖。     

宫颈癌组织中长链非编码RNA ZNF667-AS1的表达及临床意义

目的 探讨宫颈癌组织中长链非编码RNA ZNF667-AS1(lncRNA ZNF667-AS1)的表达及临床意义.方法 选取2019年1月至2020年12月该院收治的80例宫颈癌患者,收集术后宫颈癌组织及癌旁组织,另选取行全子宫切除术的80例子宫肌瘤患者作为对照,收集术后正常宫颈组织,应用荧光定量PCR(RT-qPCR)法分别检测标本组织中lncRNA ZNF667-AS1的表达,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA ZNF667-AS1诊断宫颈癌的临床价值.结果 宫颈癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的相对表达量明显低于癌旁组织及正常宫颈组织(P<0.01);癌旁组织中lncRNA ZNF667-AS1的相对表达量低于正常宫颈组织,但差异无统计学意义(P>0.05);在不同FIGO分期、分化程度及淋巴结转移情况的宫颈癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的相对表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,lncRNA ZNF667-AS1诊断宫颈癌的曲线下面积为0.834(95％CI:0.739～0.968),诊断的灵敏度为92.35％,特异度为81.12％.结论 宫颈癌组织中lncRNA ZNF667-AS1呈低表达,其表达水平与FIGO分期呈负相关,可能成为预测宫颈癌的生物学标志物及潜在治疗靶标.     

c-Myc转录上调长链非编码RNA ZEB1-AS1促进结直肠癌细胞增殖

目的探讨长链非编码RNA ZEB1-AS1在结直肠癌中高表达的机制及其在结直肠癌中的作用。方法实时荧光定量PCR检测结直肠癌细胞和组织中ZEB1-AS1的表达,分析其表达量与患者预后的相关性。生物信息学预测ZEB1-AS1转录因子结合位点,双荧光素酶报告基因进行转录因子验证。MTS方法检测ZEB1-AS1对结直肠癌细胞增殖能力的影响。结果ZEB1-AS1在结直肠癌细胞和组织中高表达,且与结直肠癌患者较差的预后正相关。转录因子c-Myc在ZEB1-AS1启动子上有一个结合位点。过表达c-Myc转录上调ZEB1-AS1的表达,反之亦然。MTS结果显示过表达ZEB1-AS1促进结直肠癌细胞增殖,而敲低ZEB1-AS1则抑制该细胞的增殖能力。结论c-Myc转录上调ZEB1-AS1,进而促进结直肠癌进程。c-Myc/ZEB1-AS1或许可作为结直肠癌治疗的潜在靶标。     

长链非编码RNA LINC00222对肺腺癌细胞增殖、 迁移、侵袭和凋亡的影响及作用机制的研究

目的 检测肺腺癌组织及细胞系中LncRNA LINC00222表达,探究其对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和相关作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和Western blot实验检测肺腺癌组织及细胞中LINC00222表达;构建LINC00222过表达载体,验证其转染效率;采用CCK-8法...     

长链非编码RNA MALAT1在宫颈癌中作用的研究进展

宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤,严重威胁女性健康.长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA,在真核细胞内广泛参与基因的表达与调控.肺腺癌转移相关转录子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcr...     

FEZF1-AS1在子宫内膜癌中的表达及其与患者临床特征的相关性

目的 探讨FEZ家族锌指1反义RNA 1(FEZF1-AS1)在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)中的表达及其与临床病理的相关性.方法 选取2010年1月～2018年1月安康市人民医院收治的172例EC患者为研究对象,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q...     

肝癌组织中lncRNA-PRR34-AS1的表达特性及其对肝癌细胞增殖、迁移的影响和潜在分子机制

目的　分析长链非编码RNA-PRR34-AS1在肝癌组织中的表达特性,探究其对肝癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子作用机制。方法　收集2020年6月～12月于榆林市第二医院行手术治疗的30例肝癌患者癌组织及其对应癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR实验（RT-qPCR）检测组织中LncRNA-PRR34-AS1相对表达水平。通过转染siRNA介导敲低PRR34-AS1基因表达,利用细胞增殖实验和细胞迁移实验验证PRR34-AS1对肝癌细胞增殖、迁移的影响;通过生物信息学数据库网站预测PRR34-AS1与JAK1结合的基因位点,双荧光素酶报告基因实验验证两者靶向关系,探究其在肝癌发生发展中的调控作用。结果　30例临床肝癌组织中PRR34-AS1表达显著高于癌旁正常组织（5.714±0.612 vs 2.981±0.572),差异有统计学意义(t=17.870,P=0.000）,PRR34-AS1具有高表达预后差的临床特征。敲低PRR34-AS1后,转染24,48和72 h时siRNA-PRR34-AS1#1组和siRNA-PRR34-AS1#2组细胞增殖率较对照组明显降低,差异均有统计学意义（F=83.440～89.297,均P<0.001）;siRNA-PRR34-AS1#1组（38.451±4.263）和siRNA-PRR34-AS1#2组（42.106±3.512）细胞愈合迁移速率较对照组（83.247±6.205）显著减慢,差异均有统计学意义（F=83.357,P＜0.001）。JAK1是PRR34-AS1的靶基因,siRNA-PRR34-AS1#1组（0.453±0.019）和siRNA-PRR34-AS1#2组（0.476±0.022）细胞中JAK1相对表达较对照组相比（1.002±0.003）明显降低,差异均有统计学意义（F=716.287,P＜0.001）。转染敲低JAK1表达后,各转染时间点siRNA-JAK1#1组和siRNA-JAK1#2组细胞增殖速率较对照组明显减缓,差异均有统计学意义（F=45.465~76.548,均P<0.05）。30组临床肝癌组织中JAK1表达显著高于癌旁正常组织（5.963±1.214 vs 4.052±0.876),差异有统计学意义(t=6.992,P=0.000）,PRR34-AS1与JAK1表达呈显著正相关（r=0.907,P<0.05）。在敲低PRR34-AS1表达的肝癌细胞中回补JAK1后,肝癌细胞增殖、迁移速率又回归到正常水平。结论　肝癌中PRR34-AS1显著高表达,其可能通过正向调控JAK1表达影响JAK/STAT信号通路,进而调控促进肝癌细胞的增殖和迁移。     

LRP15基因的表达谱分析及其在白血病细胞中的表达

为检测LRP15基因在肿瘤细胞以及处于不同发育阶段造血细胞的表达状况 ,探讨其在肿瘤发生、发展以及在白血病分型预后中可能具有的作用 ,利用NCBI提供的SAGE文库及NCI提供的正常组织及肿瘤细胞基因表达数据库 ,分析比较了LRP15基因在多种肿瘤组织、细胞系和正常组织中的表达谱 ;采用RT PCR方法检测了该基因在正常血细胞及原代白血病细胞中的表达状况。结果显示 ,LRP15在人类多种正常组织及肿瘤细胞中有表达 ;在幼稚细胞中表达阳性率高于成熟细胞 (P <0 .0 1) ,在急性髓细胞白血病中M1、M2 和M3 表达的阳性率高于其它亚型 (P <0 .0 1) ;难治组LRP15表达的阳性率有高于初治组的趋势。结论 ,LRP15基因与急性白血病及其它多种肿瘤的发生、发展密切相关 ,对急性白血病的临床分型具有重要的意义 ,可能对判断急性白血病的预后具有一定价值。     

小鼠间充质干细胞培养扩增后生物学特性研究

本研究目的是分离富集小鼠骨髓间充质干细胞（mMSC）,鉴定其生物学特性和多向分化潜能。取4-5周龄雄性C57BL/6小鼠骨髓细胞,采用全骨髓贴壁法和单克隆培养法分离、纯化和扩增mMSC;分析细胞免疫表型、生长曲线、细胞周期;进行多向分化潜能鉴定;传代培养达30代后,进行成瘤性检测。结果表明：建立的小鼠间充质干细胞系在体外可连续传代培养达30代,细胞仍保持多向分化潜能,细胞高表达CD29、CD44、Sca-1、MHC-Ⅰ,中度表达CD13、CD90.2,不表达CD117、CD45、Flk-1、MHC-Ⅱ类抗原。mMSC体外能诱导分化成骨、脂肪、软骨细胞。结论：全骨髓贴壁法和集落培养法富集可获得mMSC,其在体外连续传代30代以上仍能维持生物学特性稳定,具有高度的增殖和多向分化潜能,无成瘤性。     

长链非编码RNA ELFN1-AS1在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)ELFN1-AS1在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义.方法 选取50例未予手术和放化疗治疗的结直肠癌患者作为结直肠癌组,另选取40例健康志愿者作为对照组;提取两组研究对象血清总RNA,实时定量PCR法检测结直肠癌组和对照组血清中lncRNA ELFN1-AS1相对表达水平;分...     

长链非编码RNA ZEB1-AS1在儿童脑肿瘤中表达及对化疗药物敏感性影响的实验研究

目的 探讨lnc-ZEB1-AS1在儿童脑肿瘤化疗耐药中的作用。方法 通过荧光定量PCR检测lnc-ZEB1-AS1在2016年1月～2018年9月收集于榆林市第一医院18例儿童脑肿瘤组织标本中的表达; 通过CCK-8实验检测lnc-ZEB1-AS1对脑肿瘤细胞增殖的影响; 通过Transwell实验检测其对迁移和侵袭的影响; 通过化疗药物干预检测其对化疗药物敏感性的影响。结果 lnc-ZEB1-AS1在儿童脑肿瘤中高表达(0.014 5±0.021 3 vs 0.002 0±0.003 1,P=0.034); 干扰lnc-ZEB1-AS1能够抑制脑肿瘤细胞增殖(P<0.05)、迁移93.4±6.7 vs 51.2±9.4(P<0.001)和侵袭64.1±6.3 vs 31.1±4.2(P<0.01); 干扰lnc-ZEB1-AS1后脑肿瘤细胞对化疗药物敏感性增加(P<0.05)。结论 lnc-ZEB1-AS1在儿童脑肿瘤中高表达,且干扰lnc-ZEB1-AS1后能够抑制脑肿瘤细胞增殖、转移和侵袭,并增加脑肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。     

BRMS1对乳腺癌细胞生物学特性影响的体外研究

为探讨乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）对乳腺癌细胞生物学特性影响,利用已建立的高表达BRMS1基因的乳腺癌细胞MDA-MB-231,研究了BRMS1基因对MDA-MB-231细胞的增殖活性、浸润迁移能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡的影响.结果 表明：BRMS1基因通过乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭能力而抑制肿瘤细胞的转移能力;而对MDA-MB-231细胞增殖活性、浸润迁移能力以及细胞周期和凋亡无影响.     

人类尿液来源干细胞的体外培养和生物学特性分析

目的从人类尿液中直接分离能够体外大量扩增且具有多向分化潜能的干细胞,并研究其生物学特性。方法收集志愿者尿液100~200ml,经离心后使用完全培养基重悬,接种于培养板中;克隆贴壁生长后换液。大量扩增后通过流式细胞术检测其表面标志物,使用成骨、成软骨诱导培养基对其进行诱导分化,通过茜素红染色、阿利新蓝染色检测诱导分化结果。结果每100ml尿液经14d培养能够直接分离得到3~10个克隆,传代培养至第5代时可扩增至2~10×10~7个尿液来源干细胞,能够满足细胞治疗需要。尿液来源干细胞表面标志物CD29,CD44,CD73,CD90为阳性,CD34,CD45,HLA-DR为阴性,与间充质干细胞一致。经诱导培养后,尿液干细胞能够能够成骨、成软骨分化。结论尿液来源干细胞具有间充质干细胞特性,可以作为细胞治疗、组织工程中的种子细胞。     

PHA 诱导的 CIK 细胞的生物学特性及其对 K562 细胞杀伤活性影响的研究简

本研究探讨植物血凝素（PHA）诱导的细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）与传统方法制备的CIK细胞的体外增殖能力、效应细胞含量和对K562细胞杀伤活性影响并分析其差异.分离健康人外周血单个核细胞（PBMNC）,分甲、乙两组,其中甲组用传统培养方法从PBMNC制备的传统CIK细胞,乙组采用PHA诱导单个核细胞制备获得的新型CIK细胞.在培养过程中,每3d统计各组细胞培养体系中细胞活率和细胞绝对值,并在培养至第15天时,用流式细胞仪分别检测两组细胞免疫表型,统计CD3＋ CD56＋、CD3＋ CD8＋和CD3＋ CD4＋细胞占各培养体系总细胞数的比例;同时用CCK-8试剂盒分别检测两组细胞在不同效靶比时对K562细胞的杀伤活性.结果表明：采用PHA诱导制备新型CIK细胞的方法比传统方法更能促进细胞增殖（P＜0.05）,且细胞活率都保持在90％以上.两组CD3＋ CD8＋、CD3＋ CD56＋细胞比例都显著升高.与传统方法比,新方法的CD3＋ CD8＋细胞升高比例存在显著差异（P＜0.05）,CD3＋ CD56＋细胞提升比例不存在差异,同时CD3＋ CD4＋下降的比例也不存在差异.效靶比为5：1、10：1、20：1、40：1时,PHA诱导制备的新型CIK细胞比传统方法制备的CIK细胞对K562细胞的杀伤活性更强（P＜0.05）,且随着效靶比的升高两种效应细胞对K562细胞的杀伤活力的差异明显性也增加.结论：与传统方法相比,PHA可明显提高CIK细胞的增殖能力,调高CD3＋ CD8＋细胞的比例,增强CIK细胞对K562细胞的杀伤活性,这为白血病及其他肿瘤的细胞免疫治疗提供一种新来源的CIK细胞和可靠依据.