溶血磷脂酸及其受体在神经系统中的作用

溶血磷脂酸(1ysophosphatidic acid，LPA)是一种结构简单且有活力的介质。最常见的LPA是1-酰基-sn-甘油-3-磷酸盐，它在细胞膜磷脂生物合成过程中自然产生，也可由活化血小板、白细胞、内皮细胞、神经细胞及肿瘤细胞产生，并释放到细胞外。其他从哺乳动物中分离的LPA包括烯基溶血脂质、烷基溶血脂质和环磷脂。     

胰腺癌中三种血管生长因子受体的表达研究

目的：胰腺癌能依赖多种血管生长因子及受体的多步骤调控导致肿瘤血管大量生长。探讨血管内皮生长因子受体（flt-1)，碱性成纤维细胞生长因子受体（bFGFR)及血小板衍生生长因子受体（PDGFR）与胰腺癌生物学行为的关系及受体之间相互关系。方法：应用免疫组化方法检测51例胰腺癌及32例急慢性胰腺炎患者病变组织中，flt-1、bFGFR、PDGFR的表达。结果：flt-1、bFGFR、PDGFR在胰腺癌患者中的阳性率为52．9％，54．9％和45．1％，在胰腺炎中的阳性率为18．8％，18．8％和21．9％，差异均有显著性（P＜0．05或P＜0．01），它们的高表达与胰腺癌的分化程度呈负相关（P＜0．05或P＜0．01），与肿瘤大小无关（P＞0．05）。flt-1、bFGFR、PDGFR在胰腺癌中阳性表达呈相关密切关系（P＜0．05），它们在胰腺癌的发生、浸润、转移中可能存在相互诱导，相互诱导协同或互补作用。结论：flt-1、bFGFR、PDGFR的阳性表达可作为胰腺癌生长，转移及预后的重要判定指标，三种血管生长因子受体可作为胰腺癌抑血管生成治疗的有效靶点。     

溶血磷脂酸及其受体与脑血管病

溶血磷脂酸(LPA)是一类结构最简单的天然磷脂,为正常细胞膜成分和脂质代谢中间体.最近的研究表明,LPA是一种重要的细胞内外信号分子,与特异性受体结合后发挥作用,与神经发生、髓鞘形成、血管发生、创伤愈合、肿瘤演进等重要生物学过程有关.文章就LPA及其受体与脑血管病关系的研究进展做了综述.     

胰腺癌胆囊收缩素受体蛋白表达的研究

目的探讨胆囊收缩素受体在正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中的表达,以明确胆囊收缩素受体与胰腺癌的关系.方法应用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中胆囊收缩素受体A、B亚型的表达.结果在正常胰腺组织中缺乏胆囊收缩素受体A、B亚型的表达;在胰腺癌组织、人胰腺癌细胞株SW1990中也不表达胆囊收缩素受体A亚型,但可见胆囊收缩素受体B亚型的表达;胆囊收缩素受体在癌细胞株SW1990中的表达主要位于细胞膜上,细胞质内也可见.结论胆囊收缩素受体B在胰腺癌组织、腺癌细胞株SW1990中表达;胆囊收缩素受体B亚型主要位于细胞膜上;胆囊收缩素受体B亚型在胰腺癌细胞生长中可能发挥重要作用.     

生长抑素2型受体基因转染对胰腺癌细胞蛋白表达的影响

目的 探讨生长抑素2型受体(hSSTR2)基因转染对胰腺癌细胞PANC1蛋白表达的影响,以寻找新的胰腺癌敏感治疗靶点.方法 利用前期构建的腺病毒载体Ad.CMV.hSSTR2.GFP将hSSTR2全长cDNA导入胰腺癌细胞PANC1.采用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)技术分离并筛选转染hSSTR2的实验组、空载体对照组以及空白组胰腺癌细胞之间差异表达蛋白,用反射式基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)技术对差异蛋白进行鉴定.结果 hSSTB2成功地转染了胰腺癌细胞,获得了hSSTR2阴性和阳性表达的PANC1荧光差异蛋白表达图谱,经DeCyder v6.5软件分析,共有18个差异在1.3倍以上的蛋白质点,经质谱鉴定得到13个蛋白质.低表达的蛋白7个,为GMP合酶、磷酸化应激诱导蛋白、谷氨酸脱氢酶、Septin-11、波形蛋白、异柠檬酸脱氢酶α亚基、线粒体内膜易位酶;高表达蛋白6个,为真核延长因子1α1、丙酮酸激酶异构体M2型、烯酰-CoA水合酶、转录调节因子1-β、Mitofilin、HSP105.结论 hSSTR2基因转染胰腺癌细胞PANC1后引起蛋白表达发生变化,这些差异蛋白功能涉及到糖、脂肪、核酸代谢以及细胞生长调节和细胞凋亡等,从而为寻找新的胰腺癌敏感治疗靶点奠定基础.     

胰腺癌的当代治疗

胰腺癌是消化系统常见肿瘤,在西欧和美国,胰腺癌位居恶性肿瘤死亡的第四位.在我国胰腺癌的发病率原来很低,近年来逐年增多,据上海、天津统计,胰腺癌的死亡率在15 a前占第10位,近年来升到第5位.几乎所有患者在诊断明确的同时已是晚期或有转移.胰腺癌的特点是病程短,进展快,死亡率高.文献报道该病五年生存率＜4%,中位或平均生存期4mo～6 mo[1].     

Toll样受体9在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的 检测Toll样受体9(TLR9)在胰腺癌组织中的表达,探讨其临床意义.方法 采用实时定量PCR法、蛋白质印迹法及免疫组化法检测30例胰腺癌及其相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中TLR9的表达,分析胰腺癌组织TLR9表达与临床病理参数的关系.结果 以正常胰腺组织作为对照,胰腺癌组织TLR9 mRNA表达倍数为2.32(1.41～3.22),癌旁组织为1.23(1.18～1.28),两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).胰腺癌组织TLR9蛋白阳性表达率为73.3%(22/30),癌旁组织为33.3%(10/30),正常胰腺组织为20.0%(2/10),三者的TLR9相对表达量分别为0.780±0.026、0.400±0.018、0.173±0.043,三组间比较差异有统计学意义(P值均＜0.01).胰腺癌组织TLR9高表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈正相关.结论 胰腺癌组织高表达TLR9,它可能参与胰腺癌的恶性转化过程.     

胰腺癌组织中胆囊收缩素B受体的表达

检测20例胰腺癌组织（观察组）和4例正常胰腺组织（对照组）中的胆囊收缩素B（CCKB）受体的表达情况,分析其与临床分期和病理分级之间的关系。结果观察组CCKB受体mRNA阳性17例,对照组均为阴性;观察组CCKB受体蛋白阳性15例,阳性颗粒主要分布在癌细胞的胞膜和胞质中,对照组均为阴性。不同病理学、组织学分级间CCKB受体阳性表达率无统计学差异（P均〉0.05）。表明CCKB受体在肿瘤的发生发展过程中具有一定作用,可用于胰腺癌临床诊断和治疗。     

Toll样受体4与胰腺癌的关系

Toll样受体4(TLR4)是固有和适应性免疫反应的关键调节因子。TLR4在胰腺疾病方面的作用是近年的研究热点,已经有大量研究证明了TLR4与胰腺癌密切相关。主要探讨了TLR4在胰腺癌中的异常表达、调控机制,及其治疗癌症方面的潜力,以期为认识胰腺癌的发病机制和治疗提供新的启示。     

CXCR-4在胰腺癌中的表达及临床意义

应用免疫组化技术检测胰腺癌组织中趋化因子受体(CXCR)-4的表达情况.结果:正常胰腺组织中CXCR-4呈低表达,在慢性胰腺炎中表达略有增加,其阳性率分别为14.3%,28.6%;在胰腺癌中阳性率为60.0%.与前两者比较,P=0.0141、0.0402.CXCR-4与肿瘤的发生部位、分化程度无关,与TNM分期、有无转移灶有关(P=0.0239、0.0253).认为CXCR-4与胰腺癌的发生、发展有关.     

胰腺癌细胞系血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达的研究

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1）在胰腺癌细胞中的表达。方法：用免疫细胞化学染色检测胰腺癌细胞系SW1990、PaTu8988s和PANC－1中AT1蛋白的表达。结果：胰腺癌细胞系SW1990、PaTu8988s和PANC－1中均有AT1蛋白的表达，结论：AT1在胰腺癌细胞生长中可能发挥重要作用，应用AT1拮抗剂对防治胰腺癌似乎有一定意义。     

锌指蛋白2在胰腺癌中的表达

目的对锌指蛋白2(HZF2)在胰腺癌中的表达及意义进行初步的探讨。方法收集20例手术病理证实的胰腺癌标本,应用RT-PCR检测锌指蛋白基因HZF2 mRNA的表达,并分析该表达与胰腺癌临床病理特征的关系。结果胰腺癌组织中HZF2 mRNA表达值平均为143.1±12.2,较相应癌旁组织表达值82.2±7.6高1.40~2.34倍(P<0.01)。HZF2 mRNA的表达与TNM分期呈正相关,而与性别、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度无关。结论锌指蛋白2在胰腺癌中高表达,在胰腺癌的发生发展中可能起一定作用。     

胰腺癌胆囊收缩素受体蛋白表达的研究

目的探讨胆囊收缩素受体在正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中的表达，以明确胆囊收缩素受体与胰腺癌的关系。方法应用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测正常胰腺组织、胰腺癌组织、胰腺癌细胞株SW1990中胆囊收缩素受体A、B亚型的表达。结果在正常胰腺组织中缺乏胆囊收缩素受体A、B亚型的表达；在胰腺癌组织、人胰腺癌细胞株SW1990中也不表达胆囊收缩素受体A亚型，但可见胆囊收缩素受体B亚型的表达；胆囊收缩素受体在癌细胞株SW1990中的表达主要位于细胞膜上，细胞质内也可见。结论胆囊收缩素受体B在胰腺癌组织、腺癌细胞株SW1990中表达；胆囊收缩素受体B亚型主要位于细胞膜上；胆囊收缩素受体B亚型在胰腺癌细胞生长中可能发挥重要作用。     

RADIL基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胰腺癌组织中RADIL基因的表达及其与临床病理特征之间的相关性.方法 采用实时定量PCR方法检测40例胰腺癌及相应癌旁组织和5例正常胰腺组织中RADIL mRNA相对表达量,分析RADIL mRNA表达与胰腺癌临床病理特征之间的相关性.结果 RADIL mRNA在胰腺癌组织、癌旁组织及正常胰腺组织中均有表达,相对表达量分别为2.263±3.826、5.425±8.858和8.559±4.214,三组之间存在显著差异(P＜0.05).癌组织中RADIL mRNA高表达与肿瘤远处转移、分化程度呈负相关(r为-0.312和-0.294,P值均＜0.05),与肿瘤部位、肿瘤大小,血清CA19-9浓度、TNM分期及患者的性别和年龄均无显著相关性.结论 RADIL基因对胰腺癌可能具有一定的抑制作用.     

胰腺癌组织中GABA和GAD的表达

目的研究γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸脱羧酶(GAD)65和GAD67在胰腺癌组织中的表达及其意义。方法收集34例胰腺癌、12例慢性胰腺炎和10例正常胰腺组织标本,应用ABC法检测三者GABA、GAD65和GAD67的表达。结果胰腺癌GABA、GAD65和GAD67表达染色强度分值(2.41±0.49,2.09±0.29.2.10±0.30)及阳性细胞数分值(4.34±0.77,3.0±0.87,3.86±0.76)明显高于慢性胰腺炎(1.55±0.83.1.22±0.63,1.44±0.68;2.77±0.78,2.35±0.83,1.88±0.78)和正常胰腺组织(1.17±0.69,0.83±0.37,1.25±0.62;1.92±0.83,1.60±1.11,1.41±0.74),差异显著(P<0.05或P<0.01)。慢性胰腺炎GABA和GAD65的表达明显高于正常胰腺组织(P<0.05)。低分化腺癌GABA和GAD65明显高于高分化腺癌(P<0.05)。胰腺癌的GABA与GAD65表达呈正相关(r=0.67,P<0.01)。结论GABA、GAD65和GAD67的表达与胰腺癌的发生、发展及生物学行为有密切关系,可能是潜在的胰腺癌标志物之一。     

DNA甲基转移酶3b在人胰腺癌组织中的表达及其意义

目的 检测人胰腺癌组织中DNA甲基化转移酶3b( DNMT3b)的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用蛋白质印迹法检测12例配对人胰腺癌和癌旁组织中DNMT3b的表达;免疫组织化学法检测59例胰腺癌组织中DNMT3b的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的相关性结果 蛋白质印迹法结果显示,胰腺癌及癌旁组织DNMT3b蛋白表达量分别为0.69 ±0.13和0.14 ±0.03,癌组织的表达量明显高于癌旁组织(t=4.464,P＜0.05).免疫组化结果显示,胰腺癌组织DNMT3b阳性高表达率为59％,癌旁组织阴性表达.肿瘤组织DNMT3b表达强度与TNM分期和淋巴结转移相关.结论 DNMT3b在胰腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的恶性生物行为有关.     

TMPRSS4在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4( TMPRSS4)在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用实时PCR法和蛋白质印迹法检测16例胰腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4 mRNA和蛋白表达;采用免疫组织化学法检测61例胰腺癌标本、26例配对癌旁组织、4例正常胰腺组织TMPRSS4蛋白的表达,分析其与临床病理特征的相关性.结果 胰腺癌组织TMPRSS4mRNA和蛋白表达明显高于配对癌旁组织(9.09±7.01比1.27±0.72;1.223±0.125比0.667 ±0.106,P值均＜0.01),胰腺癌组织TMPRSS4蛋白阳性表达率为67.2％ (41/61),显著高于癌旁组织3.8％ (1/26)的阳性表达率(P＜0.01).正常胰腺组织未见TMPRSS4蛋白表达.胰腺癌TMPRSS4表达与患者年龄、性别及肿瘤部位、肿瘤大小无关,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P值均＜0.05).结论 胰腺癌组织高表达TMPRSS4,其表达与肿瘤的恶性程度相关.     

Intervention on toll-like receptors in pancreatic cancer

Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDA)is a devastating disease with pronounced morbidity and a high mortality rate.Currently available treatments lack convincing cost-efficiency determinations and are in most cases not associated with relevant success rate.Experimental stimulation of the immune system in murine PDA models has revealed some promising results.Tolllike receptors(TLRs)are pillars of the immune system that have been linked to several forms of malignancy,including lung,breast and colon cancer.In humans,TLRs are expressed in the pancreatic cancer tissue and in several cancer cell lines,whereas they are not expressed in the normal pancreas.In the present review,we explore the current knowledge concerning the role of different TLRs associated to PDA.Even if almost all known TLRs are expressed in the pancreatic cancer microenvironment,there are only five TLRs suggested as possible therapeutic targets.Most data points at TLR2 and TLR9 as effective tumor markers and agonists could potentially be used as e.g.future adjuvant therapies.The elucidation of the role of TLR3 in PDA is only in its initial phase.The inhibition/blockage of TLR4-related pathways has shown some promising effects,but there are still many steps left before TLR4 inhibitors can be considered as possible therapeutic agents.Finally,TLR7 antagonists seem to be potential candidates for therapy.Independent of their potential in immunotherapies,all existing data indicate that TLRs are strongly involved in the pathophysiology and development of PDA.     

胰腺癌细胞株HOXA7基因表达及其启动子区甲基化状态

目的 检测HOXA7 mRNA在胰腺癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,探讨两者的相关性.方法 采用RT-PCR法检测人胰腺癌细胞株BxPC3、CFPAC1、PANC1和SW1990细胞的HOXA7 mRNA的表达水平.采用重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite sequencing PCR,BSP)和结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA)检测启动子区域甲基化状态.应用去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine,5-aza-dC)处理各细胞株,检测处理前后细胞HOXA7 mRNA表达和甲基化状态的变化.结果 胰腺癌细胞株BxPC3、CFPAC1和SW1990细胞均表达HOXA7 mRNA,而PANC1细胞不表达HOXA7 mRNA.CFPAC1、BxPC3、PANC1和SW1990中HOXA7启动子甲基化率分别为93.16%、90.65%、90.09%、52.30%,SW1990细胞的HOXA7甲基化率较其他三株细胞均明显降低(P值均＜0.01).经5-aza-dC处理后,PANC1细胞的HOXA7 mRNA重新表达,BxPC3的HOXA7 mRNA表达增强;而CFPAC1和SW1990细胞的HOXA7 mRNA在5-aza-dC处理前后无明显变化.结论 胰腺癌细胞株BxPC3和PANC1细胞的HOXA7mRNA表达与启动子区甲基化状态密切相关,而CFPAC 1和SW1990细胞两者无明显相关性.