灵芝菌丝液体深层发酵种子培养条件研究

利用液体深层发酵方法进行灵芝菌丝最佳培养基和菌种最适种龄的确定.通过单因素实验和正交实验,研究了不同培养基对液体深层发酵灵芝菌丝生长及多糖含量的影响,确定了灵芝液体深层发酵的培养基配方为:玉米粉3%,豆粉3%,KH2PO40.15%,MgSO40.15%;并且通过研究菌种种龄对液体深层发酵灵芝菌丝生物量及漆酶活性的影响,确定了灵芝液体深层发酵所需菌种的最适种龄为4d.     

灵芝液体发酵产纤维素酶的提取及性质分析

通过对比实验,找出了较适合灵芝液体发酵并产生纤维素酶的PDY培养基：马铃薯200g,葡萄糖20g,酵母膏5g,加水至1000mL,并对纤维素酶的酶活力进行了测定。发酵液经过硫酸铵盐析,纤维素酶被纯化了1．61倍,通过快速液相色谱的分离纯化,酶被纯化了1．96倍,酶活分别达到5．68和6．89。经过快速液相色谱分离纯化,有6个组分峰。其中第一、第二峰分离较好,含量较高。对灵芝纤维素酶的氨基酸组成进行了分析,灵芝纤维素酶并经紫外-可见光吸收光谱和红外吸收光谱对纤维素酶进行了分析。     

灵芝菌丝体液体发酵培养产灵芝多糖的动态研究

对灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）摇瓶发酵培养产灵芝多糖的过程进行了研究．通过研究发酵过程中ｐＨ,总糖、还原糖、氨基酸态氮等的变化,初步确定了灵芝多糖摇瓶培养的优化条件     

灵芝液体深层发酵培养条件初探

以菌丝体生物量为主要指标,研究了灵芝在液体深层发酵过程中培养基及培养条件对其菌丝体生长状况的影响.实验结果表明,适宜灵芝液体深层发酵的培养基配方为：豆饼粉1.25%,蔗糖4%,KH2PO40.0107%,MgSO40.0336%（C/N为：10/1）;最佳发酵条件为：初始pH 4.0,接种量10%,在温度28℃,转速170 r/min的条件下,培养4 d,每100 mL培养液菌体收获量可达1.8370 g（湿重）,含水率83%,折合干重0.3213 g.     

灵芝胞外多糖液体发酵培养基的优化

灵芝液体发酵过程中培养各主要成分之类间的比例对灵芝胞外多糖产量有明显影响。正交试验结果表明,当发酵培养基的配方为葡萄糖3.5%、（NH4）2SO40.1%、MgSO40.05%、KH2PO40.2%、酵母膏0.2%,培养基初始pH6.0,此时得到的胞外多糖（EPS）的量可以达到最大,实验中还进行了在不同培养基中灵芝菌丝体的生物量测定,结果表明生物量最高的培养基中灵芝胞外多糖的产量并非最高。     

纤维素酶提取灵芝多糖的单因素研究

利用纤维素酶从灵芝子实体中提取灵芝多糖,通过单因素实验研究酶量、酶解时间、料液比、酶解温度对灵芝多糖提取率的影响。实验结果表明:纤维素酶能够显著提高灵芝多糖的提取率,提取的最佳工艺条件为酶量2.0%,酶解时间90min,料液比1:30,温度50℃。     

深层发酵生产灵芝菌丝体多糖研究

采用生物工程发酵技术进行灵芝菌730菌丝体多糖扩大生产,在500 L全自动不锈钢发酵罐中通过控制深层发酵工艺条件获得灵芝菌丝体、灵芝多糖。结果表明:发酵70 h,镜检菌丝壁上无明显的芽头和锁状联合,菌丝体有少许自溶,无杂菌。灵芝菌丝体的浓度达到30%左右,胞外灵芝多糖和胞内灵芝多糖分别达3.5g/L和4.8%。     

灵芝纤维素酶的纯化和性质研究

从七种食用和药用真菌中筛选出纤维素分解能力较强的灵芝菌株（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ５００５９），比较了几种不同碳源的固体发酵培养基对灵芝５００５９产内切β－葡聚糖酶（又称羧甲基纤维素酶，ＣＭＣ酶）能力的影响，确定了最佳培养时间为５～６ｄ。通过硫酸铵沉淀、凝胶过滤和离子交换层析初步提纯了灵芝的ＣＭＣ酶，得到三个组分。其中一个组分在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳中为一条带，为单亚基分子，分子量为４．５×１０４，等电点为３．２，以ＣＭＣ－Ｎａ为底物的米氏常数（Ｋｍ）为７．２ｇ／Ｌ。该酶活力的最适温度为５０℃，半致死温度约６７℃。该ＣＭＣ酶组分在ｐＨ３．０～６．０范围内稳定，最适ｐＨ约为２．０和４．０。     

超声波酶法提取灵芝多糖的机理研究

叙述了用超声波协同酶法提取灵芝多聚糖的作用机理,与普通方法相比,该法具有水解效率高,产品质量好等优点,同时还能缩短提取周期,并使反应条件更加温和。     

灵芝菌发酵产物中多糖组分的分离与性质研究

从灵芝的发酵产物中提取到水溶性多糖，经乙醇分级，重结晶纯化得到多糖组分ＧＰ，由凝胶过滤，琼脂糖电泳证明为化学均一性多糖，分子量约为２．９×１０＾４，将多糖组分ＧＰ水解后，用纸导析分析鉴定出由三种单糖组成：葡萄糖，木糖和甘露糖，此外，对纯多糖组分还进行了比旋度，熔点，紫外与红外光谱的性质测定。     

灵芝良种选育Ⅰ：影响灵芝原生质体形成的因素

对灵芝的原生质体形成条件进行了研究。结果表明,合适的在生质体形成条件为酶组成蜗牛酶４ｇ／Ｌ,溶壁酶５ｇ／Ｌ;ｐＨ７．１７的磷酸缓冲液;酶解温度３０℃;酶解时间４ｈ;菌龄７２ｈ;稳定剂０．６ｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ。原生质体最高产量为５．２×１０＾６个（ｇ·Ｌ＾－１）。灵芝菌丝释放原生质有顶端的边上二种方式。     

大豆粉用于灵芝发酵液制取灵芝醋的研究

将大豆粉作为氮源用于灵芝发酵液的培养,可明显改善发酵液口感利于灵芝醋的生产。试验表明,灵芝发酵液培养基配比为在20%的马铃薯汁中加入葡萄糖2.0%、大豆粉1.5%、KH2PO40.2%、MgSO40.05%,经发酵制取的灵芝发酵液多糖含量可达到0.94 g/L,同时制成的灵芝醋各项指标较好。     

Optimization of enzyme assisted extraction of polysaccharides from Ganoderma lucidum

In the present work, an enzyme assisted extraction method is used to isolate crude polysaccharides from Ganoderma lucidum. The isolating effect was optimized with orthographic graph statistic method with three levels and four independent variables. Complex enzyme, extraction temperature, extraction time and extraction pH were combined to obtain the best possible combination to get maximum amount of extract and crude polysaccharides yield. The optimum extraction conditions were： complex enzyme amount of 3 % （w/v）, extraction temperature at 45 ℃, extraction time of 3 h and extraction pH at 7. Under these conditions, the experimental amount of extract is 8.9 % and the yield of crude polysaccharides is 1.1%, which are in close agreement with the value predicted by the model.     

不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定

建立不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定方法.灵芝样品用乙醇提取,依次经氯仿、5%碳酸氢钠萃取,酸化后再用氯仿萃取、浓缩至干,称重,即得灵芝总三萜酸量.结果:灵芝子实体总三萜酸为(8.58±0.25)mg/g,孢子粉为(3.48±0.03)mg/g,菌丝体仅为(1.75±0.09)mg/g;菌盖总三萜酸含量为(12.62±0.22)mg/g,菌柄为(7.66±0.08)mg/g.10批次灵芝子实体的总三萜酸含量范围为4.3416.39 mg/g.灵芝子实体提取物中的总三萜酸含量以醇-水提取物的最高为(208.70±5.54)mg/g;碱水提取物的最低,仅为(123.07±4.99)mg/g.HPLC初步分析子实体和孢子及子实体提取物间三萜酸成分大部分相同.本法适用于灵芝子实体及其提取物、灵芝孢子和菌丝体总三萜酸的含量测定,结果可靠,可为灵芝产品质量指标提供依据.     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一。主要就近年来灵芝多糖的提取、分离纯化、含量测定、结构分析、硒化修饰和抗氧化、免疫调节、降血糖、抗肿瘤活性等方面的研究进行了综述。     

高压热水提取灵芝多糖及对其抗氧化活性的影响

以灵芝子实体超微粉为原料,研究了提取温度、提取时间和料液比在高压热水条件下对灵芝多糖提取以及多糖提取液对DPPH自由基清除率的影响,并采用正交试验优化了灵芝多糖高压热水提取工艺。确定较优工艺条件为料液比1∶50g/mL、提取温度125℃下提取30min,一次高压热水提取灵芝多糖提取率达到4.54%。抗氧化实验结果表明,灵芝多糖对 DPPH 自由基有一定的清除能力,且与多糖质量浓度存在一定的量效关系。     

Comparison of the antitumor activity of polysaccharides extracted by boiling water and enzyme assistance from Ganoderma lucidum

Polysaccharides are the most important pharmacologically active constituents of Ganoderma lucidum. In this work, polysaccharides were extracted from Ganoderma lucidum with boiling water method and enzyme assisted method. The human liver hepatocellular carcinoma cell line HepG2 was used to compare the an- titumor effect of the two kinds of extraction with 3-（4, 5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide （MTT） test. Both of these two kinds of Ganoderma lucidum polysaccharides reduced cell viability of cancer cell HepG2 in a dose and time-dependent manner. At low concentrations, there was no significant difference in the effectiveness of L 1 and L2; while at concentrations over 0.8 ug/mL, the difference in the effectiveness of L2 in comparison to L1 became significant. At the concentrations of 3.2 ug/mL, the cancer cells were almost killed in 2 d.