胃蛋白酶原光激化学发光免疫测定方法的建立

目的建立一种检测人血清胃蛋白酶原浓度的光激化学发光免疫测定方法。方法采用双抗体夹心法建立检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ浓度的方法,评估其分析灵敏度、回收率和批内精密度,并与雅培(化学发光法)进行比较。结果胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ的分析灵敏度分别为0.8ng/mL和0.6ng/mL,回收率分别为100.3%、106.5%,批内变异系数(CV)为0.93%~4.1%、1.2%~4.3%,与化学发光法的相关性较好(r=0.99)。结论该方法测定胃蛋白酶原具有较高灵敏度、精密度和准确性,适用于临床。方法建立后可进一步进行长期稳定性试验。     

电化学发光免疫分析仪残余试剂的再利用

目的探讨电化学发光免疫分析仪残余试剂再利用的可行性。方法采用混合残余试剂检测血清中降钙素原（PCT）、糖类抗原72-4（CA72-4）的含量,并进行精密度、准确性、稳定性及回收率分析;与新试剂分别检测血清标本中2个项目的含量,并做均值比较及相关性分析。结果混合试剂检测PCT、CA72-4两项目批内、批间变异系数（CV）均符合相关标准;质控血清准确性在允许范围内,回收率为90%～110%;用混合试剂与新试剂分别检测血清中2个项目含量,两组均值比较差异无统计学意义（P〉0.05）;3周内混合试剂检验结果未出现失控。结论罗氏E170免疫分析仪的残余试剂可以再利用,方法简便可行,测定结果可靠。     

血清脂蛋白(a)免疫比浊法的建立

目的建立血清脂蛋白(a)[Lp(a)]单克隆抗体免疫比浊测定法.方法应用20株载脂蛋白(a)[Lp(a)]单克隆抗体,于自动分析仪免疫终点法检测Lp(a).结果检测试剂与其它Apo和纤维蛋白原及人血清白蛋白均无交叉反应.胆红素(15μmol/L)和血红蛋白(2.5g/L)对测定无干扰,检测范围0～1200mg/L.该法与ELISA对照,差异无显著性,r=0.98.批内CV分别为3.2%[Lp(a)87mg/L],2.9%[Lp(a)256mg/L],2.7%[Lp(a)658mg/L];批间CV分别为4.1%、3.7%和3.5%.结论建立的免疫比浊测定血清Lp(a)方法,具有特异、灵敏、简便、快速和适用于自动分析等优点.     

血清降钙素原定量检测与血培养结果的比较研究

目的探讨血清降钙素原定量检测与血培养结果。方法选择2016年12月至2017年12月来我院进行血液检测的716例患者作为研究对象,于清晨对所有患者空腹抽取外周循环血样10 mL进行血培养,5 mL血样进行血清降钙素原水平检测,并执行血培养,比较两种检测结果。结果 716例患者中经血清降钙素原定量检测结果呈阳性209例(29.19%),呈阴性507例(70.81%);716例患者经血培养确诊呈阳性48例(4.89%),呈阴性1402例(95.11%)。血清降钙素原定量检测的敏感度、特异度和阳性、阴性预测值分别为79.31%、74.32%、11.33%、98.86%,准确率达到74.52%。经血培养为阳性的35例样本血清降钙素原检出率达到80.00%,其余681例阴性样本的血清降钙素原阳性检出率达到26.58%。结论运用血清降钙素原定量检测方法,测定细菌感染的血液样本,可以取得不错检测结果,值得推广运用。     

血清降钙素原在菌阴肺结核活动性的判定价值

目的探讨血清降钙素原在菌阴肺结核活动性的判定价值。方法采用荧光酶免疫分析法对①初治菌阴活动性肺结核患者,②非活动性肺结核患者,③健康体检者的血清降钙素原进行检测,并对结果进行比较分析。结果第1组血清降钙素原水平（0.45±0.05）ng/mL均高于第2组（0.11±0.05）ng/mL和第3组（0.09±0.05）ng/mL。第2组和第3组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论血清降钙素原水平在菌阴肺结核患者中轻微升高,可考虑作为临床判定菌阴肺结核活动性的辅助指标。     

CC反应蛋白荧光免疫层析定量检测试剂的研制及性能评价

目的旨在建立一种人CRP荧光免疫层析快速定量检测试剂。方法采用双抗体夹心法,以羧基荧光微球标记的抗人CRP单克隆抗体及羊抗兔IgG为标记抗体,另外一株抗人CRP单克隆抗体作为检测线,制备荧光免疫层析试纸条。结果研制的检测试剂盒检测限为0.12 mg/L,CV≤15%,线性范围(0.5~200)mg/L;对223份临床样本进行测试,经配对t检验分析,t=-0.155,P=0.877,与对照试剂性能无显著性差异。结论本研究研制出了一种操作简便、快速的CRP POCT定量检测试剂。     

化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清的效果

目的:探讨化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清的效果。方法:对2018年6月～2018年12月某院413例乙肝病毒筛查病人进行研究分析,采集血液标本,平均分为两份,分别采用化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清,比较检测结果。结果:化学发光法检出乙肝病毒血清阳性189例(45.76%),酶联免疫法检出阳性125例(30.27%),差异具有统计学意义(P0.05);酶联免疫法的中浓度HBsAg含量的批内重复率、批间重复率分别为9.48%、14.92%,显著高于化学发光法1.16%、5.47%;低浓度HBsAg含量的批内重复率、批间重复率分别为12.85%、19.47%,显著高于化学发光法2.42%、7.29%,差异具有统计学意义(P0.05)。两种检测方法高浓度HBsAg含量的批内重复率与批间重复率比较,不具有统计学意义(P0.05)。结论:临床检测乙肝病毒血清,应用化学发光法的准确率比酶联免疫法更高,值得推广。     

血清降钙素原定量检测与血培养结果的比较分析

目的分析血清降钙素原定量检测与血培养结果的比较。方法选择2015年1月~2016年12月在我院血液检测的患者1460例,均在清晨空腹状态下抽取外周循环血液样本,分别行血清降钙素原定量检测及血培养,以血培养为金标准,分析两种检测结果差异。结果 1460例中经血清降钙素原定量检测结果显示阳性406例(27.81%),阴性1054例(72.19%);1460例经血培养确诊阳性者58例(3.97%),阴性1402例(96.02%);血清降钙素原定量检测敏感度为79.31%、特异度为74.32%、阳性预测值为11.33%、阴性预测值为98.86%、准确率为74.52%;58例血培养确认阳性者中血清降钙素原检出率为79.31%,而1402例经血培养阴性者中血清降钙素原阳性检出率为25.68%,组间数据差异有统计学意义(P0.01)。结论在细菌感染检测血液样本方面采用血清降钙素原定量检测能够获得良好的检测结果,值得进一步在临床应用及推广。     

定量检测降钙素原在患者感染诊断及其预后判断中的临床价值探究

目的探讨分析定量检测血清降钙素原(PCT)对感染性疾病的诊断以及疾病的预后判断的临床价值。方法选取来我院就诊的患有各类感染性疾病的患者108例。所有患者均在入院的当天,使用药物治疗之前行血常规、血清降钙素原以及细菌血培养的检查。并对细菌性感染的患者以及病毒性感染的患者的数据进行比较分析。结果如果以PCT≥1.0 ng/mL为阳性阈值,则有13例细菌感染性疾病的患者的血清降钙素原的检查结果是阴性的,占20.63%,在病毒感染性疾病的患者中,有31例患者的血清降钙素原的检查结果是阴性的,占88.57%。两组数据比较,差异有统计学意义,P<0.05。血清降钙素原检测方法在检测细菌感染方面的敏感度为79.37%,特异性是88.57%。结论血清降钙素原能够比较有效地反应患者感染性疾病的严重程度及其进展的情况,对患者感染的诊断以及疾病的预后判断都有很好的临床应用价值,对临床上的诊断、治疗以及疾病的预后等方面,均有良好的指导作用,值得在临床上进一步推广应用。     

化学发光法和胶体金法检测血清HBsAg的结果分析

目的:比较化学发光法和胶体金法检测血清HBsAg结果及发光法检测浓度和胶体金法检测血清HBsAg时间关系。方法:化学发光法是使用双抗夹心法定量检测人血清或血浆中的HBsAg含量;胶体金法是采用抗原抗体反应原理及胶体金标记免疫层析分析技术。用胶体金法检测经化学发光法从4323人中筛选的342例临床标本模式如下:①HBsAg浓度大于21ng/ml的261例;②6.4～21ng/ml的27例;③4.8～6.4ng/ml的22例;④0.51～4.8ng/ml19例;⑤0.16～0.5ng/ml9例;⑥小于0.15ng/ml但HBeAg和HBcAb阳性的4例。结果:化学发光法灵敏度0.05,阳性检出率98.4%;胶体金法10分钟内的灵敏度21.00阳性检出率76.3%;15分钟内的灵敏度6.4阳性检出率84.2%;20分钟的灵敏度为4.8阳性检出率90.6%;30分钟的灵敏度为0.50,阳性检出率96.2%.结论:胶体金法灵敏度不如化学发光法,受判读时间和人观察因素影响大,易漏检;而化学发光法灵敏度高,漏检率低。     

联合检测血清PCT、CRP在细菌感染引起AECOPD患者的诊断价值

目的探讨检测血清降钙素原（procalcitonin,PCT）、C-反应蛋白（C—reactiveprotein,CRP）水平对指导细菌感染引起慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acuteexacerbationofchronicobstructivepulmonarydisease,AECOPD）患者临床诊治中的意义。方法对AECOPD患者58例（A组）及COPD稳定期患者31例（B组）,采用免疫发光法测定其血清PCT及CRP水平,并进行诱导痰细菌定量培养;以痰中下呼吸道潜在病原菌（PPM）浓度107CFU／mL作为诊断AECOPD细菌感染的标准,将AECOPD患者分为有细菌感染组（Al组35例）、无细菌感染组（A2组23例）。结果AECOPD有细菌感染组血清PCT（0．22±0．03）ng／mL,CRP（59．79±10．23）mg／mL水平高于无细菌感染组PCT（0．11±0．02）ng／mL,CRP（18．34±3．15）mg／mL及稳定期组PCT（0．08±0．01）ng／mL,CRP（10．06±1．63）mg／mL,差异有统计学意义（P〈0．05）。COPD急性加重期无细菌感染组PCT（0．11土0．02）ng／mL水平高于稳定期组PCT（0．08±0．01）ng／mL,差异无统计学意义（P〉0．05）,急性加重期无细菌感染组CRP（18．34±3．15）mg／mL水平高于CRP（10．06±1．63）mg／mL,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论COPD患者PCT水平升高可能与细菌感染有关、而CRP水平升高可能提示急性加重,联合检测血清PCT及CRP可以帮助了解AECOPD的细菌感染及指导抗生素应用。     

肺部细菌感染患者血清降钙素原水平变化及临床意义

目的探讨肺部细菌感染患者血清降钙素原(PCT)水平的变化及其临床意义。方法应用双抗夹心免疫发光法测定血浆PCT含量;对30例肺部细菌感染组治疗前后以及30例健康志愿者(正常对照组)分别进行血浆PCT水平的测定。结果细菌感染组治疗前PCT值为(34.96±6.83)ng/mL,正常对照组PCT值为(0.41±0.18)ng/mL,差异有显著性(P<0.05);细菌感染组治疗后PCT值为(7.64±1.97)ng/mL,与治疗前相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清PCT检测在肺部细菌感染的早期诊断中有一定价值,动态检测PCT水平有助于评估治疗效果,协助临床判断病情转归。     

乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光免疫法与酶联免疫法检测试剂的临床比对

目的 将国产乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光检测试剂与ELISA试剂进行临床比对评价.方法 收集临床乙肝患者的血清标本452份,分别用乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光检测试剂与ELISA试剂进行检测.与ELISA试剂比对,计算化学发光检测试剂的特异度、灵敏度以及总符合率.并计算Kappa值,比较二者结果一致性.结果 与ELISA试剂比对,化学发光检测试剂的特异度为99.4％,灵敏度为100％,总符合率为99.8％,Kappa值为0.995,一致性强度为最强.结论 快速、特异、敏感的前S1抗原化学发光免疫检测试剂适合在临床上推广应用.     

血清降钙素原水平与脓毒血症预后的相关性研究

目的：探讨血清降钙素原（PCT）水平检测在脓毒血症预后判断中的临床价值。方法选取113例感染患者为研究对象,根据是否伴有脓毒血症分为观察组（脓毒血症）和对照组（非脓毒血症）。于患者入院时抗生素治疗前抽取患者静脉血2 mL应用免疫发光法检测PCT水平。比较两组入院时及入院后PCT水平,分析其与患者病情变化及预后的关系。结果观察组PCT（11．03±6．21）ng／mL,显著高于对照组的[（0．81±1．61）ng／mL]（t＝8．507,P＜0．01）;脓毒血症死亡患者血清PCT水平随着时间推移明显上升（F＝5．061,P＜0．05）;无效患者血清PCT水平随病情加重而显著升高（F＝4．793,P＜0．05）;好转患者血清PCT水平随病情好转而降低（F＝6．009,P＜0．05）。且PCT＜10 ng／mL者病死率（14．89％）明显低于PCT≥10 ng／mL患者（72．22％）。结论 PCT对预测脓毒血症的预后具有重要的临床价值,值得临床推广和应用。     

用液相色谱-串联质谱法测定人血清中加巴喷丁的含量

目的:建立测定人血清中加巴喷丁含量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法:以磺胺二甲异嘧啶为内标,血清用乙腈直接沉淀蛋白质后进样分析。色谱条件:XBridge Phenyl(150 mm×2.1 mm,5μm)为色谱柱,流动相:0.02%甲酸的乙腈溶液-0.02%甲酸的水溶液(15∶85)。电喷雾离子源,正离子MRM扫描分析。结果:加巴喷丁和内标磺胺二甲异嘧啶离子对分别为m/z172→154.1和m/z279→124。加巴喷丁在50~5 000 ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6),检测限为50 ng/ml。批内、批间RSD均<10%,平均提取回收率为97.7%~108.5%。结论:本方法灵敏度高、专一性好,可用于人血清中加巴喷丁的检测。     

降钙素原在细菌感染患儿中的临床价值

目的探讨血清降钙素原（PCT）在儿童细菌感染中的临床价值。方法回顾性分析2010年9月～2012年1月本院儿童重症监护室收治的150例脓毒症危重患儿的临床资料．其中,细菌感染组60例、病毒感染组36例、病因不明感染组54例。全部患儿于入院治疗前（R）及使用抗感染药物24h（TM）、96h（氏）分别检测血清PCT的水平。结果在抗感染治疗前,血清PCT在病因不明感染组中为（1．83±0．25）ng／ml,在病毒感染组中为（0．45±0．12）ng/ml,在细菌感染组中为（4．38±0．39）ng/ml;细菌感染组中血清PCT水平明显高于病毒感染组和病因不明感染组,差异有统计学意义（P〈0．05）;动态监测全部患者的PCT水平发现,细菌感染组在抗感染治疗后血清PCT快速下降,而病毒感染组和病因不明感染组PCT水平仍维持在原有水平,其回落变化速度明显慢于细菌感染组（P〈0．05）。结论血清PCT与细菌感染具有良好的相关性,具有对病情的早期评估、预后评价及疗效观察的价值。     

高效液相色谱法定量尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度

目的:建立高效液相色谱法测定尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度.方法:用Agilent ZORBAX SB-Aq column色谱柱,ZORBAX-Extend C18预柱,以甲醇和47 mmol/LKH2PO4水溶液作为流动相,流速:1.0 mL/min,检测波长为260 nm.结果:血清中尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤的线性范围分别是(1.667～166.667)×103 ng/mL (r=0.9995)、(0.033～3.338)×103 ng/mL(r=0.9994)和(0.033～3.338)×103 ng/mL(r=0.9996),日间与日内精密度均＜15％.结论:该法灵敏度高,精密度和准确度佳,能满足非布司他体内药效学研究.     

血清抑制素-A水平与异位妊娠的相关性研究

目的探讨异位妊娠患者血清中抑制素-A(INH-A)的水平变化及临床意义。方法采用全自动化学发光免疫分析(CLIA)法对异位妊娠50例(观察组),正常孕妇50例(对照组)血清中INH-A、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)及孕酮水平进行检测。结果与对照组相比,观察组血清中INH-A(3.6±1.4)、β-HCG(308.5±57.9)、孕酮(29.8±9.4)的水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血清INH-A对异位妊娠的早期诊断和治疗起到积极的辅助作用。     

研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒研究

目的 研究研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒.方法 选取有辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与抗TSHβ亚单位的另一个mAb相配对,使用鲁米诺做底物,采取两步法建立起双位点夹心法来进行研制人血清中TSH的化学发光免疫检测试剂盒.结果 这种检测方法具有较好的灵敏度,其中批内的CV平均是4.7％,批间的平均CV是8.4％.本次检测实验与LH、FSH及HCG都没有交叉反应.经过测试部分实验样品,得出该试剂与国外同类试剂测定结果有明显的相关性(r=0.984).结论 实验研究中的检测方法具有较好的灵敏度及准确性,与同类产品相比也相对简便、快捷,花费成本低,在临床检测与科研上值得使用与推广.     

液相色谱-串联质谱法同时测定7种抗抑郁类和5种抗精神病类药物的血药浓度

目的：建立同时测定血清中7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物浓度的液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法。方法：血清样品中加入还阳酚（内标,西地那非中间产物）,采用乙腈直接沉淀法处理样品。分析柱为XbridgeTMPhenyl柱（150mm×2.1mm,5μm）;流动相为含0.02%甲酸水溶液-含0.02%甲酸乙腈溶液（35：65）,等度洗脱,流速为0.3mL·min-1,进样量为20μL。采用电喷雾离子源,多离子反应监测（MRM）,正离子扫描进行测定。结果：7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物线性范围在2~1000μg·L-1,线性相关系数均大于0.9931,各浓度的批内和批间RSD〈10%,提取回收率为102%~112%,方法准确度为89.3%~107.9%。结论：本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可同时进行7种抗抑郁类药物和5种抗精神病类药物的血药浓度监测。