p53基因与5-FU联合作用诱导鼻咽癌细胞凋亡的研究

目的:研究通过转染野生型p53基因,并联合5-FU诱导人鼻咽癌CNE2细胞的凋亡作用.方法:将克隆有野生型p53基因的pUHD10-3-p53质粒.用脂质体(Lipofectamine)介导的方法转染人鼻咽癌CNE2细胞,同时在培养液中加入5-FU;以RT-PCR检测p53基因的表达,通过AO/EB染色和流式细胞术等方法进行细胞凋亡分析.结果:经转染wt-p53基因后,基因在细胞中的表达增加.在荧光显微镜下可观察到凋亡细胞增多.流式细胞仪检测结果示,经转染质粒pUHDl0-3-p53后,细胞的凋亡率为35.2%,单纯用5-FU组的细胞凋亡率为33.8%,而联合作用组的细胞凋亡率可达53.9%.结论:野生型p53基因与5-FU均可诱导人鼻咽癌细胞CNE2发生凋亡,野生型p53基因与5-FU联合作用,促进鼻咽癌细胞凋亡.     

p53基因与鼻咽癌关系的研究进展

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）是常见的恶性肿瘤之一,好发于我国南方及东南亚国家。病因学研究表明,鼻咽癌的发生与EB病毒感染、遗传易感性、饮食习惯及某些环境理化因素有关。鼻咽癌的发生是一个多基因参与、多步骤的复杂过程。其中抑癌基因失活和癌基因活化是肿瘤发生的重要原因。p53基因是极为重要的抑癌基因,是迄今发现的与人类肿瘤相关性最高的基因,它能与特异性DNA序列结合并激活靶基因转录,具有阻滞细胞周期、启动细胞凋亡、维持基因组稳定性的作用。p53基因失活是多种肿瘤发生发展过程中的重要事件,至少50％以上的人类肿瘤存在p53基因高频率突变失活。与其他肿瘤相比,     

转染野生型p53基因对肝癌细胞生长的影响

目的：通过转染野生型p53基因致肝癌细胞株BEL-7404，研究其对肝癌细胞的生长及凋亡作用。方法：野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株BEL-7404。用四甲基偶氮唑（MTT）法测定细胞生长曲线，用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果：肝癌细胞BEK-7404转染野生型p53基因后，其生长作用明显受到抑制．细胞生长抑制率在第4天可达50．8％。流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为1．7％，转染pUHD10-3组为3．2％．转染pUHD10-3-p53组为40．7％。结论：野生型p53基因可诱导肝癌细胞BEL-7404的生长抑制及发生凋亡。     

鼻咽癌p53基因的表达及功能状态研究

目的:研究鼻咽癌(NPC)中p53表达及功能。方法:对38例N:PC和16例对照样本中的p53、p21 mRNA进行RT—PCR定量分析。结果:(1)NPC组p53mRNA的水平较高,差异有统计学意义(t=2.14,P<0.05);p21 mRNA的水平两组相同。(2)在相关分析中,对照组p21mRNA水平随p53 mRNA的水平升高而升高,相关具有高度显著性,[(γ p53一p21)=0.654,P相似文献   

转染野生型p53基因对人肝癌细胞生长的抑制作用

目的 研究转染野生型p53基因对人肝癌细胞的生长影响作用。方法 将克隆有野生型p53基因的pUHD10-3质粒,通过Lipofectin转染肝癌细胞株BEL-7402、BEL-7404、HLE、HUH-7及SMMC-7721,用四甲基偶氮唑(MTT)法观察细胞的生长情况。结果 转染野生型p53基因,可使肝癌细胞BEL-7404、HLE、HuH-7的生长明显受到抑制,第4天生长抑制率分别是50．0％、69．0％及65．1％。结论 转染野生型p53基因能有效抑制肝癌细胞株BEL-7404、HLE、HuH-7的生长。     

脂质体介导p53基因对肝癌细胞生长的抑制作用

观察外源野生型p5 3基因在肝癌基因治疗方面的可行性。方法 :将载有人野生型 p5 3-cDNA的真核表达质粒pcDNA3 - p5 3,用阳离子脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG3B细胞 ,用流式细胞仪检测pcDNA3-p5 3对HepG3B细胞生长的影响。结果 :通过观察细胞生长曲线与流式细胞仪检测细胞周期和细胞的凋亡指数发现 ,HepG3B细胞生长受到明显的抑制。结论 :脂质体介导的p5 3基因可在HepG3B细胞中表达 ,且明显抑制该细胞的生长。     

肝癌细胞转染野生型p53基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡

肝癌细胞转染野生型ｐ５３基因稳定表达后肝癌细胞出现自发凋亡＊张晓东１王文亮１穆峰２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２第四军医大学唐都医院胸外科）关键词肝肿瘤细胞凋亡ｐ５３基因转染中图号Ｒ７３－３１目的进一步探讨ｐ５３基因与细胞凋亡（ａｐｏ...     

高强度聚焦超声联合脂质体介导p53基因转染胰腺癌细胞的实验研究

目的探讨HIFU联合脂质体介导p53基因转染胰腺癌细胞的可行性以及转染后对细胞生物学行为的影响。方法实验分为5组:I组为单纯细胞组,II组为HIFU+质粒组,III组为HIFU+脂质体+质粒组,IV组为脂质体+质粒组,V组为单纯质粒组。每组予以相应处理后,采用RT-PCR法检测各组细胞p53 mRNA表达情况,MTT法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡的情况。结果荧光显微镜下见Ⅲ组有较多绿色荧光蛋白表达的细胞(转染率为10.6%),II组及IV组有少量的荧光细胞(转染率分别为1.2%,4.8%);V组仅有极少的荧光细胞(0.3%);I组无荧光表达;III组和IV组经RTPCR法均检测到p53mRNA表达,且两组灰度值差异有显著性意义(P<0.05);MTT结果显示II,III,IV组细胞均有明显的生长抑制作用,而其中III组的增殖抑制作用最为明显,与其它各组比较差异具有显著性意义(P<0.05);Ⅲ组细胞凋亡率为(14.2±1.55)%,与其它4组比较,凋亡率明显增高(P<0.05)。结论 HIFU联合脂质体可提高p53质粒转染率;p53质粒转染后促凋亡作用增强,肿瘤细胞生长进一步受到抑制。     

脂质体介导p53基因对腩癌细胞生长的抑制作用

目的观察外源野生型p53基因在肝癌基因治疗方面的可行性。方法：将载有人野生型p53-cDNA的真核表达质粒pcDNA3-p53，用阳离子脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG3B细胞，用流式细胞仪检测pcDNA3-p53对HepG3B细胞生长的影响。结果：通过观察细胞生长曲线与流式细胞仪检测细胞周期和细胞的凋亡指数发现，HepG3B细胞生长受到明显的抑制。结论：脂质体介导的p53基因可在HepG3B细胞中表达，且明显抑制该细胞的生长。     

野生型p53基因转染前列腺癌细胞系PC-3m对细胞凋亡的不同影响

目的：观察野生型p53基因转染对前列腺癌细胞PC-3m增殖和凋亡的影响。方法：用脂质体Lipofectamine将真核表达载体pCMV—p53和pCMV—p53mt135分别转染PC-3m细胞，MTT法检测转染前后细胞生长情况，转染48h后采用流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率。结果：pCMV—p53转染后的PC-3m细胞生长明显受到抑制，FCM显示，转染48h后，细胞凋亡率为15％。结论：野生型p53基因瞬间转染PC-3m细胞可抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

p53蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性关系的研究

目的探讨p53表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系。方法应用免疫组化检测159例鼻咽癌组织中p53蛋白情况。结果159例放疗鼻咽癌组织中p53阳性表达率为90.6%;p53表达强度与鼻咽癌的临床分期无关（P〉0.05）;根治放疗70 Gy后,鼻咽部肿瘤和颈部淋巴结CR、PR,与p53表达强度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论p53与鼻咽癌的放射敏感性无关。     

鼻咽癌放疗效果与p53基因多态关系的临床研究

目的 探讨p53基因的单核苷酸多态与鼻咽癌(NPC)放疗为主的治疗效果的关系.方法 应用PCRRFLP(聚合酶链反应-限制性片断长度多态性)分析方法,对74例以放疗为主治疗的NPC患者,进行p53第72密码子Arg-Pro多态检测,治疗结束后进行效果评价.以非条件Logistic回归模型比较不同基因型与治疗效果的关系.结果 携带Arg/72Pro基因型患者的疗效是携带72Arg/Arg与Pro/Pro基因型患者的2.49倍(95%CI=0.913～6.810,P=0.075);Ⅰ Ⅱ期患者的疗效是Ⅲ Ⅳ期的3.32倍(95%CI=1.028～10.720,P=0.045);男性患者的疗效是女性的2.39倍(95%CI=0.862～6.670,P=0.094);年龄不是影响敏感性的因素(P=0.194);治疗方式的不同,对疗效未见显著影响.结论 与其他两种基因型的携带者相比,携带p53第72密码子Arg/Pro基因型鼻咽癌患者的疗效有可能提高.     

p53基因与5-氟尿嘧啶联合作用对鼻咽癌CNE2细胞生长的影响

目的通过转染野生型p53基因,并与5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合作用,观察其对鼻咽癌细胞生长的影响。方法将克隆有野生型p53基因的pUHD10-3-p53质粒,用脂质体（1ipofectamine）介导转染人鼻咽癌CNE2细胞,在培养液中加入5-Fu,用四甲基偶氮唑（Mar）法分析细胞生长情况。结果人鼻咽癌CNE2细胞加入含5-Fu的培养液后,第4天生长抑制率为54．85％;CNE2细胞转染wt-p53基因后,第4天生长抑制率为45．90％。人鼻咽癌CNE2细胞转染wt-p53基因后应用5-Fu处理,细胞的生长抑制率第4天可达到85．82％,其生长明显受到抑制。结论野生型p53基因能抑制CNE2细胞生长,wt-p53与5-Fu联合作用,对人鼻咽癌CNE2细胞生长有明显的抑制效果。     

P53和P21蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的：探讨P53和P21蛋白在鼻咽癌（NPC）、癌旁组织和鼻咽慢性炎症中表达的差异，及其与肿瘤生物学行为的关系。材料与方法：首程放疗前的NPC病人100例，癌旁组织和鼻咽慢性炎症对照组各20例，用SP法进行P53和P21蛋白免疫组化染色，P53阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞核有棕色沉着的细胞；P21阳性细胞的标准为：癌巢内肿瘤细胞浆有棕色沉着的细胞。结果：在鼻咽癌、癌旁组织和鼻咽慢性炎症组织中，P53蛋白的阳性率分别为：78．0％、35．0％和0．0％，P＝0．001；P21蛋白的阳性率分别为：83．0％、75．0％和65．0％，P＝0．170。在鼻咽癌原发灶早期（T1＋2）和晚期（T3＋4），颈结阴性和阳性及临床早期（Ⅰ Ⅱ）和临床晚期（Ⅲ Ⅳ）各组中，P53蛋白和P21蛋白的阳性率均无差异（P＞0．05）。结论：P53基因的突变与鼻咽癌的发生有一定的关系。P53蛋白可能是鼻咽癌癌病变的指标；P21的突变可能与鼻咽癌的发生无明显的关系，P53蛋白和P21蛋白的阳性率与鼻咽癌原发灶的早晚，颈结转移，和临床分期无关。     

野生型p53基因转染对人胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用

目的 研究野生型p53基因对人未分化胃癌细胞系HGC27生长的抑制作用。方法 用表达人野生型p53基因全长cDNA的真核载体pcDNA3—p53，转染人未分化胃癌细胞系HGC27，对转染后细胞进行生长曲线、细胞生长抑制率及流式细胞术分析，观察其生物学特性变化。结果 外源野生型p53基因在HGC27细胞内稳定表达，经pcDNA3—p53转染的HGC27细胞生长速度受到明显抑制，流式细胞分析显示G1期增加，S期下降，细胞出现凋亡。结论 野生型p53基因能在HGC27细胞内表达，且能抑制其生长并促进细胞凋亡。     

p53 p63及 p73在鼻咽癌患者组织中的表达及临床意义

目的：研究 P53、P63和 P73在鼻咽癌患者组织中的表达情况及临床意义。方法：选择2012年8月至2014年8月在我院确诊的鼻咽癌患者89例为观察组。并选择同期在我院接受治疗的鼻咽黏膜慢性炎症患者50例为对照组。对比两组组织中 P53、P63和 P73表达情况,并分析其不同临床病例特征的意义。结果：观察组 P53、P63和 P73阳性率为67．4％（60／89）、87．6％（78／89）以及53．0％（48／89）,均高于对照组的28．0％（14／50）、36．0％（18／50）、20．0％（10／50）,差异均具有统计学意义（P＜0．05）。不同性别、年龄中 p53、p63和 p73表达阳性率差异均无统计学意义。在具有颈淋巴转移的鼻咽癌患者中 p53、p63表达阳性率更高、在 TNM 分期为Ⅲ～Ⅳ期的鼻咽癌患者中 p63、p73表达阳性率更高以及病理类型为非角化癌鼻咽癌患者中 p63表达阳性率更高。差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：鼻咽癌患者组织中 P53、P63和 P73基因高表达,并且对临床分期、淋巴转移以及病理分型有显著的相关性。通过对 P53、P63和 P73在两种基因的监测,对鼻咽癌临床治疗和预后都有较好的指导作用。     

p53基因突变和p16基因缺失与肝癌的相关性

目的:检测肝癌患者血浆中p53基因突变和细胞核中p16基因缺失的机率,研究与疾病发生、发展的相关性并探讨其意义.方法:实验采用聚合酶联链式反应(PCR)扩增p53基因外显子5～8和免疫组织化学方法SP-p16,对其突变和缺失进行分析.结合临床患者有无肝组织以外转移来对比差异性.结果:33例肝癌患者中,有17例结果显示血浆循环核酸p53基因突变;有转移病灶组18例的突变率高于无转移病灶组15例.结论:血浆p53基因突变和p16基因缺失与肝癌的发生、与疾病的轻重及病灶转移有相关性,突变机率在临床鉴别诊断和治疗预后中有参考价值.     

Survivin、p53基因在甲状腺乳头状癌组织中表达的研究

目的探讨新的凋亡抑制基因survivin和抑癌基因p53在甲状腺乳头状癌组织中的表达与甲状腺乳头状癌发生发展、临床病理特征之间的关系.方法应用免疫组织化学(SP法),检测survivin、p53基因在102例甲状腺乳头状癌组织及10例结节性甲状腺肿组织中的表达.结果102例甲状腺乳头状癌组织中survivin、突变型p53基因的阳性表达率分别为66.7%和81.4%.与良性病变组织中survivin、p53的阳性表达率30%、0%相比较二者差异有显著的统计学意义(P＜0.05).甲状腺乳头状癌组织中突变型p53及survivin阳性表达率在不同性别、不同年龄、肿瘤大小,WHO大体分类、组织学分类及组织学分级间差异无显著性(P＞0.05).伴有淋巴结转移的甲状腺乳头癌组织中survivin的阳性表达率为79.5%,不伴有淋巴结转移者,survivin的阳性率为57.1%,二者差别有显著性(P＜0.05).突变型p53在甲状腺乳头状癌组织中表达的阳性率与淋巴结转移无关(P＞0.05).结论 Survivin与mtp53基因在甲状腺乳头状癌组织中表达显著正相关.     

p53基因联合栓塞化疗治疗原发性肝癌22例

目的 探讨经肝动脉灌注p53基因联合栓塞化疗术在治疗原发性肝癌中的应用价值.方法 将78例原发性肝癌患者分成实验组及对照组,分别进行肝动脉灌注重组人p53腺病毒注射液联合栓塞化疗术及常规TACE治疗,对术后反应及疗效进行对比分析.结果 术后实验组在治疗效果及肝功能都优于对照组,不良反应两组大致相同.结论 p53基因联合栓塞化疗术治疗中晚期肝癌是一种安全可行的治疗方法.