ISSR分子标记及其在植物分子生物学中的应用

ISSR分子标记是在PCR基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术。其基本原理就是在SSR的3’或5’端锚定1~4个核苷酸,然后对反向排列SSR间的一段DNA进行PCR扩增,而不是扩增SSR本身。ISSR分子标记通常为显性标记,呈孟德尔式遗传,具有简便、快速、稳定、DNA多态性高等优点。目前,在植物遗传多样性、系统发育、品种鉴定、基因定位、遗传作图等研究中已得到广泛的应用。     

RNA干扰及其在植物研究中的应用

RNA干扰（RNA interference, RNAi）是双链RNA诱导的转录后基因沉默。RANi在生物体内普遍存在,且高度保守,被生物学家誉为生物体在基因组水平上的免疫系统。随着RNAi机制研究的不断深入,RNA干扰作为一种高效的、序列特异的基因沉默,可在植物基因功能分析、农作物基因组改良和植物抗病毒研究等方面发挥重要作用。     

绿色荧光蛋白及其在植物分子生物学中的应用

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是源于海洋生物多管水母属(Aequoria Victoria)的一种发光蛋白,能够自身催化形成生色团并在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光,能在活细胞内稳定表达。GFP的荧光反应不需要任何底物及辅助因子,使表达检测非常简单。同时,GFP在细胞中呈自主表达,没有细胞种类、位置和种属的特异性。GFP对受体细胞无毒性,对目的基因没有影响。因而可以很方便的对活体进行观察,来研究GFP基因的表达。由于GFP对光漂白、氧化剂、还原剂、酸、碱以及其它许多化学试剂具有极强的稳定性,因此,GFP作为报告基因可用来监测转基因的表达、信号转导、蛋白运输与定位等。本文对GFP基础理论研究及在植物分子生物学中的应用作了综述。     

RNAi技术及其在植物中的应用

RNA干扰(RNA interference, RNAi)是由双链RNA (double-stranded RNA, dsRNA)诱导产生的基因沉默现象,是真核生物中一种十分保守的基因调节机制,它可以在转录水平和转录后水平的基因沉默中发挥作用。RNAi依赖于siRNA (small interference RNA)与靶m RNA之间的严格碱基配对,具有高度的特异性。自RNAi现象发现以来,基于RNAi技术的植物遗传改良及作物育种已取得了相当大的成就。本综述就近年来RNAi的分子机制和特点以及在植物基因功能分析、抗病虫和非生物胁迫、作物品质改良等方面的应用进行了总结,并对存在的问题和未来发展方向做了探讨和展望。     

保存在重铬酸钾中的微小隐孢子虫卵囊活性及传染性研究

目的 探索保存在4℃ 2.5 %重铬酸钾(K2Cr2O7)中1－30个月的微小隐孢子虫卵囊（CPO）的活性和对免疫抑制BALB/C小鼠的感染性。方法 通过体外脱囊技术测定卵囊的脱囊率评价卵囊的活性;以BALB/C小鼠为感染模型,通过检测CPO感染小鼠的潜伏期、排卵囊数量和回肠末端绒毛中的隐孢子虫数量来评价卵囊的传染性。结果 保存在2.5 % K2Cr2O7中1—16个月的卵囊出现脱囊;免疫抑制BALB/C小鼠在感染保存1—16个月的卵囊后3－8 d开始排出大量的卵囊,且发现在末端回肠绒毛中寄生有大量的隐孢子虫;卵囊的保存时间与潜伏期之间存在强烈的相关性(r2＝0.92)。结论CPO在4℃ 2.5 % K2Cr2O7中能保持活性和传染性至少16个月,K2Cr2O7是保存CPO的良好介质。     

《植物分子生物学》（Plant Molecular Biology）

《植物分子生物学》（Plant Molecular Biology）是一个国际性期刊，ISSN：0167-4412（印刷版），ISSN：1573-5028（电子版），2005年影响因子为3．328。该刊主要对植物生物学各个领域的原始性论文进行快速报道，内容涉及比较基因组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、计算生物学、生物化学与调节生理网络、生物工程学等方面。由于期刊的版面有限，该刊优先刊登对生物学问题有重要揭示意义及对结构、功能、机制或者调节有最新见解的论文。作者必须确保论文结果是高质量的，论文主要读者群是广大的植物科学工作者。     

SSR技术及其在植物遗传育种中的应用

利用１７４对ＳＳＲ引物对４个玉米自交系进行鉴定,详细介绍了一种新的分子标记ＳＳＲ的操作技术。鉴定结果表明,ＳＳＲ在玉米染色体上呈随机分布,可以有效地揭示玉米自交系间的遗传差异,追踪亲本遗传物质在后代中的遗传动态。     

植物中多胺的合成代谢及其分子生物学水平研究进展

多胺广泛存在于动植物体内,具有促进植物生长发育和延缓果实后熟进程等作用,但对其研究大多停留在生理水平,还需从分子生物学水平深入了解其调控机理以及代谢中各通路之间的相互作用关系。本文介绍了多胺生物合成与分解代谢过程,阐述了多胺及其代谢产物的生理功能,同时以国内外研究文献为基础,探讨植物中多胺代谢相关基因的分子生物学作用,指出了目前存在的问题,并为其研究方向提供了建议。     

RNAi及其在功能基因组研究中的应用

RNAi是双链RNA介导的、序列特异性的转录后基因沉默,自1998年发现至今已有很大进展。随着后基因组时代的到来,将是今后功能基因组研究中的有力工具,并可能用于基因特异治疗     

RNA干扰及其植物抗病毒应用

【研究目的】RNA干扰(RNA interference,RNAi)是分子生物学研究领域的一项新兴技术,在动植物的遗传改良、功能基因组、基因治疗等研究中广泛应用;【方法】它是指一些小的双链RNA分子介导的、序列特异的转录后基因沉默现象;【结果】本文就RNA干扰的作用机制、RNA干扰与植物病毒间的互作以及RNA干扰表达载体构建的一些研究进展进行了综述;【结论】随着RNAi研究的进一步深入,RNAi必将成为遗传育种工作者培育抗病毒植物的有力手段,促进植物抗病育种的发展。     

世界棉花分子生物学研究进展

扼要综述了棉花分子生物学在以下几个方面的进展：１、Ｌｅａ基因家族结构与功能研究;２、棉花纤维发育基因的研究;３、四倍体栽培棉种的Ａ／Ｄ染色体组来源;４、四倍体棉花基因组物理图谱的构建;５、基因的克隆与序列分析。     

上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究

据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体pSMAK321的35S启动子和NOS终止子之间,构建成Uenishiwase-ETR5基因的RNA干扰植物表达载体。载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA101中。以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200μmol/L的AS及Spc梯度筛选能有效提高转化率。转化植株经PCR检测得到7株阳性植株。     

堆肥微生物的分子生物学研究进展

堆肥微生物是实现固体废物资源化、无害化、减量化的执行者和实施者,成为当前的研究热点。现代分子生物学技术为堆肥微生物的研究提供了新的途径。本文综述了分子生物学技术在堆肥微生物研究中的应用进展情况,并对其发展前景进行了展望。     

中国亚麻分子生物学研究进展与建议

为了促进中国亚麻分子生物学研究的发展,总结了中国亚麻DNA提取、基因克隆与转化、分子标记、分子身份证、遗传多样性分析、遗传图谱构建等方面的研究进展。提出了上述各方面存在的分子标记开发较少,目的基因及可用的性状标记缺乏,分子遗传图谱覆盖基因组范围较小,有关栽培的分子生物学方面的研究比较少,满足不了育种、栽培以及种质资源分类等相关研究要求等一系列问题。针对存在的问题提出了5点建设性建议,以期为中国亚麻分子生物学研究与发展提供参考。     

草莓细胞工程技术与分子生物学研究进展

综述了草莓细胞工程技术操作中外植体的类型、外源激素种类及其剂量、培养基的选择以及碳源浓度对培养效果的影响、草莓培养条件的简化和改进及细胞工程技术在草莓资源研究上的应用;分子生物学技术在草莓抗逆性、耐贮运、品质和风味、以及草莓种质亲缘关系等方面的研究进展,并对今后草莓细胞工程技术和分子生物学的研究利用提出了几点建议.     

草莓细胞工程技术与分子生物学研究进展

从成熟的薄皮甜瓜（齐甜1号）果肉组织中提取总DNA，经PCR扩增得到约0.5kb的ACC合成酶基因的片段，将其克隆到质粒载体pMD18-T中，测序表明，该基因为583bp，编码194个氨基酸；从番茄（东农706）叶片组织中提取总DNA，经PCR扩增得到约2.2kb的E8基因片段，将其克隆到质粒载体pGEM-T Easy中，测序表明，该基因为2192bp； 以pCAM2301为起始植物表达载体，pCAM-GT为中间载体，成功构建了果实特异启动子（E8）调控薄皮甜瓜ACC合成酶反义基因植物表达载体，采用冻融法将其转入根癌农杆菌LBA4404,得到了完整的Ti质粒表达载体系统。