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电子显微镜是目前唯一能直接看到DNA或RNA分子的工具,而电泳、同位素标记等技术只能间接地测定这些分子,电镜就是以它这种得天独厚的优点在核酸分子研究中崭露头角。基因的准确定位,核酸复制模型的完善,真核基因DNA倒转重复序列“十字架”结构的观 察及内含子的二发现等等,近四十年来,核酸分子杂交技术取得如此可喜的成绩,电镜所作的贡献是不能低估的。 相似文献
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毛细管电泳与核酸分析 总被引:7,自引:0,他引:7
毛细管电泳技术以其快速,高效,高灵敏度,重复性好,易定量,非同位素操作,可实时监测及全自动化等优点在核酸研究的各个方面和到了广泛应用。本文着重介绍了毛细管电泳技术在4个领域中的应用:(1)未知和已知单核苷酸改变的寻找;(2)短串联重复序列的检测;(3)DNA测序;(4)基因及其表达产物的定量分析。 相似文献
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陈火胜 《微生物学免疫学进展》1991,(4):5-10
<正>一、引言 核酸杂交技术是一种发展很快、应用极广的分子生物学方法。它利用核苷酸碱基互补配对的原理,通过一段已知特异性的核酸分子,标记上特定的示踪物质作为探针,在液相或固相中与待测标本中的特异性核酸反应,探针与标本核酸的互补单链经氢键作用而形成双链。然后,通过一定的程序显示杂交双链的存在、状态、大小或数量进行检测。故核酸杂交亦称分子杂交(moiecular hybridization)。 相似文献
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近年,上海一家儿童医院应用引进的一种“人类凝血因子探针”,对一例血友病B高危孕妇进行产前诊断获得成功,使孕妇中止妊娠,从而防止了一名目前尚无理想治疗方法的血友病B患儿出生。应用基因探针的核酸杂交技术,虽然问世才十年光景,却已被誉为“二十世纪生物学一项重要成就”和“继罗、科赫(R.Koch)之后 相似文献
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核酸转染技术和阳离子脂质体 总被引:4,自引:0,他引:4
阳离子脂质体介导转染是一种具创新性的、高效的转染技术,并且逐渐成为介导核酸进入真核细胞的标准方法。因此,如果在使用其他的转染手段并不理想时,宜试用阳离子脂质体介导的转染技术。 相似文献
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叶勋艳 《中国生物工程杂志》2005,25(B04):299-302
确定了杆菌(Brevibacterium ammoniagenes)JMS1601发酵产核酸的最佳发酵培养基:葡萄糖12%,酵母浸膏1.5%,磷酸二氢钾0.3%。最佳摇瓶培养条件:温度32℃,摇床转速160r/min,接种量(v/v)5%,装液量100ml/500ml。 相似文献
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Gilberto Villescas-Diaz Martin Zacharias 《Journal of biomolecular structure & dynamics》2013,31(3):355-364
Abstract Structure prediction of non-canonical motifs such as mismatches, extra unmatched nucleotides or internal and hairpin loop structures in nucleic acids is of great importance for understanding the function and design of nucleic acid structures. Systematic conformational analysis of such motifs typically involves the generation of many possible combinations of backbone dihedral torsion angles for a given motif and subsequent energy minimization (EM) and evaluation. Such approach is limited due to the number of dihedral angle combinations that grows very rapidly with the size of the motif. Two conformational search approaches have been developed that allow both an effective crossing of barriers during con-formational searches and the computational demand grows much less with system size then search methods that explore all combinations of backbone dihedral torsion angles. In the first search protocol single torsion angles are flipped into favorable states using constraint EM and subsequent relaxation without constraints. The approach is repeated in an iterative manner along the backbone of the structural motif until no further energy improvement is obtained. In case of two test systems, a DNA-trinucleotide loop (sequence: GCA) and a RNA tetraloop (sequence: UUCG), the approach successfully identified low energy states close to experiment for two out of five start structures. In the second method randomly selected combinations of up to six backbone torsion angles are simultaneously flipped into preset ranges by a short constraint EM followed by unconstraint EM and acceptance according to a Metropolis acceptance criterion. This combined stochastic/EM search was even more effective than the single torsion flip approach and selected low energy states for the two test cases in between two and four cases out of five start structures. 相似文献
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凝胶电泳、实时荧光PCR等常规核酸检测方法存在操作繁琐、设备昂贵、反应时间长等局限性。随着核酸检测市场规模的大幅提升,常规检测方法已无法满足临床诊断、检验检疫的需求。核酸试纸条(nucleic acid detection strip,NADS)是一种新兴的核酸检测方法,具有灵敏度高、操作便捷、结果可视化、成本低且耗时短等优势,在基础研究与临床诊断等领域受到广泛关注。综述近年来NADS的检测方法及研究进展,系统总结该技术的原理、应用及临床潜在转化价值,以期为NADS的进一步开发、利用提供借鉴。 相似文献
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采用PXY104(含化学合成的HIV-env26肽基因4重串联体结构)为材料。温和裂解法提取质粒DNA,制备电泳纯化,Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ酶解,低融点琼脂糖凝胶电泳回收HIV-DNA片段作为核酸探针;用[α-~(32)P]dATP通过缺口移位法标记,比放射性为4.05—6.69×10~7cpm/μgDNA通过分子杂交能测出lPg的靶DNA,初步试验结果表明,在本文试验条件下,可用该探针检测与之互补的核酸分子。 相似文献
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艾滋病肆虐全球,已成为世界上危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。疫苗在预防和控制艾滋病中具有重要意义,理想的HIV疫苗必须能够产生广泛的交叉反应性中和抗体、有效的抗病毒细胞毒性T细胞(CTL)反应。近年来,核酸疫苗的研究已经取得了可喜的进展,科学家正不断努力研制更有效、更强大、更广谱的新型疫苗。综述了艾滋病核酸疫苗的载体改造、抗原选择、免疫策略等方面的研究进展,并对其今后的研究发展方向进行了阐述。 相似文献
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