高效液相色谱法检测食品中嘌呤含量的方法研究

目的建立测定食品中嘌呤含量的高效液相色谱法。方法采用不同浓度高氯酸溶液在100℃下水解样品60 min,水解液过滤膜,以10 mmol/L甲酸铵溶液(pH3.6)-甲醇(99∶1)为流动相进行色谱分离,色谱柱为Waters Atlantis T3(4.6 mm×250 mm×5μm),流速1.0 ml/min;柱温30℃;Waters 2487型紫外检测器检测,检测波长254 nm;进样量10μl。结果在0.05～20.00μg/ml浓度范围内,各嘌呤的响应峰面积与其相应浓度呈良好相关性,r>0.999 9。方法回收率93.1%～101.3%,相对标准偏差<12.5%。结论本方法准确度高,精密度好,能够快速检测食品中4种主要的嘌呤成分。     

优化高效液相色谱法测定鸡肉及鸡汤中嘌呤含量

从色谱条件的选择和优化混合酸法提取鸡肉和鸡汤中嘌呤两方面,建立了同时检测鸡肉和鸡汤中腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤的高效液相色谱检测方法。结果表明,使用Waters Atlantis dC18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为7×10-3 mol/L的KH2PO4-H3PO4(pH为3.8),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,紫外检测器检测波长为254nm,进样量为10μL时,4种嘌呤可以完全分开,峰形较好。经方法学验证,4种嘌呤的质量浓度和峰面积在0.5～300mg/L线性范围内,线性关系良好,相关系数R在0.9998～0.9999之间,检出限在0.024～0.129mg/L范围内,检测方法精密度RSD为0.4673%～0.8132%。正交实验优化混合酸提取鸡肉和鸡汤中嘌呤实验结果表明,三氟乙酸浓度为95%,在90℃下水解20min时,鸡肉中总嘌呤的提取效果最好;三氟乙酸浓度为80%,在90℃下水解25min时,鸡汤中总嘌呤的提取效果最好,样品处理重复性RSD在2.202%～7.293%之间,鸡肉样品平均加标回收率在91.6343%～95.9119%之间,鸡...     

高效液相色谱法快速测定青海牛羊肉和内脏组分中尿酸和嘌呤

建立青海牛羊肉和内脏组分中尿酸和4种嘌呤(鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤和腺嘌呤)的2种分析方法,一种是采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法同时测定上述5种组分,并折算出尿酸总含量;另一种是采用生物酶解法将嘌呤全部转化后,采用HPLC法快速测定其降解产物尿酸。2种方法均采用Agilent Zor Bax Eclipse XDB-C18色谱柱分离,浓度为7×10~(-3) mol/L的KH_2PO_4-H_3PO_4(pH=3.83)溶液作为流动相,紫外检测波长为254 nm。结果表明:同时测定法中,被测物质在上述条件下分离良好,在较宽的浓度范围内线性良好,相关系数(r)均在0.998 4以上,平均回收率为92.2%~119.8%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.78%~10.43%;转化后尿酸快速测定法中,被测物质在1~70 mg/L质量浓度范围内与峰面积间的线性关系良好,r=0.999 4。将2种分析方法得出的总尿酸含量进行比较,经配对t检验,结果无显著性差异(P=0.7730.05)。2种方法均可用于牛羊肉和内脏组分中嘌呤类物质的检测。     

高效液相色谱测定脱脂豆粕中嘌呤含量

为检测脱脂豆粕中嘌呤含量,利用高氯酸水解豆粕样品中的核酸,采用高效液相色谱法测定豆粕粉中嘌呤含量。测定结果表明:色谱柱为Ultimate AQ-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温25℃,进样量10μL,流速1.0mL/mim,紫外检测器波长254 nm;流动相为水、冰乙酸、四丁基氢氧化铵以997∶1.5∶1.5的比例混合,再与无水甲醇以99∶1混合。以此方法测定的腺嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤的精密度RSD分别为0.31%,0.27%,0.50%,0.41%;回收率分别为89.00%,86.90%,88.10%,81.30%。通过此方法测定脱脂豆粕粉中的嘌呤含量为253.0 mg/100g。     

反相高效液相色谱法检测带鱼糜中的嘌呤含量

目的:建立一种检测水产品中游离嘌呤和水解后总嘌呤含量的反相高效液相色谱法,并将此方法应用到带鱼糜中游离态嘌呤和总嘌呤的含量测定中。方法:以Waters Atlantis dC18色谱柱为固定相,0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液(pH3.62)为流动相进行色谱分离;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;DAD检测波长:254nm。采用水处理样品并在90℃下水解12～14min后取上清液过膜,测定4种游离嘌呤的含量;采用三氟乙酸/甲酸/水(3者体积比5:5:1)处理样品并在90℃下水解12min,水解液浓缩,过膜后测定4种嘌呤总量。结果:在20min内4种嘌呤能得到很好分离,且在质量浓度1～40mg/L范围,4种嘌呤的响应峰面积与其相应浓度相关性良好,r2>0.9998,精密度RSD<2%。结论:该方法简便、快速、准确,可用于检测水产品中游离嘌呤和总嘌呤的含量。     

高效液相色谱法测定麦汁、发酵液和啤酒中的嘌呤含量

通过高效液相色谱法测定了不同浓度的麦汁、发酵液及成品啤酒中的嘌呤含量,分析了嘌呤在发酵过程中的变化情况。此外,还分析了不同辅料比的麦汁中嘌呤含量的差异,发酵液中含有酵母与不含有酵母时检测的差异性,以及活性碳吸附对啤酒中嘌呤含量的影响。该研究为开发低嘌呤啤酒提供了可靠的检测方法和研究思路。     

高效液相色谱法测定大蒜中蒜素含量

建立了大蒜中蒜素含量测定的高效液相色谱法。大蒜中的蒜素用水提取后,以乙腈和水溶液为流动相,采用梯度洗脱的方式在C18柱上进行液相色谱分离,在245nm波长下以保留时间定性,外标法定量。结果表明:蒜素在6.25~500mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9999,四家实验室对该方法的重复性和再现性验证实验结果为:平均回收率89.0%~107%,相对标准偏差为1.39%~6.62%(n=3),重复性标准偏差小于重复性限,再现性标准偏差小于再现性限。该方法前处理简单、准确,适用于大蒜中蒜素含量的测定。     

高效液相色谱法测定保健食品中叶黄素含量

目的建立高效液相色谱法测定保健食品中叶黄素含量的分析方法。方法使用60℃水溶解后用0.1%丁基羟基甲苯(butylatedhydroxytoluene,BHT)乙醇溶液作为提取液,甲醇+水(95:5,V:V)作为流动相,用C18柱在445 nm检测波长下等度分离。采用高效液相色谱法测定保健食品中叶黄素的含量。结果叶黄素在0.2597～2.597μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9990),精密度相对标准偏差低于5%,重复性相对标准偏差为2.9%,回收率为96.57%～98.67%。结论本检测方法操作简便、灵敏度好、准确性高,适用于保健食品中叶黄素的测定。     

高效液相色谱法测定食品中甲醛次硫酸氢钠含量

目的建立高效液相色谱法检测食品中的甲醛次硫酸氢钠含量。方法样品经磷酸溶液提取,残留在其中的甲醛次硫酸氢钠分解释放出甲醛,甲醛与衍生试剂2,4-二硝基苯肼发生反应,生成黄色的衍生物苯腙,经Eclipse XDB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-水(60:40,V:V),柱温为35℃,流速为1.0 m L/min;检测波长为355 nm,经高效液相色谱仪检测。结果本方法优化的实验条件是:磷酸溶液浓度2.0%,衍生剂2,4-二硝基苯肼溶液的浓度为2.0%,60℃水浴中反应30 min;甲醛标准溶液在0~3μg/m L浓度范围内具有良好的线性关系(r=1.00);在5、10和30μg 3个加标水平上的回收率为95.36%~98.20%,相对标准偏差为0.403%~1.05%;检出限为0.17 mg/kg。结论本方法快速准确,适合于测定食品中甲醛次硫酸氢钠的残留量。     

高效液相色谱法测定牛奶中硫氰酸钠含量

目的采用高效液相色谱法检测牛奶中硫氰酸钠含量。方法样品用5 m L乙腈沉淀蛋白质,上清液过C_(18)柱净化。以磷酸缓冲溶液(pH=7.0):乙腈(95:5,V:V)作为流动相,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分析,柱温30℃±2℃,流速1.0 m L/min,以紫外检测器分析样品。结果该方法对牛奶中硫氰酸钠有较高的提取率,质量浓度范围在5~100 mg/L内线性较好(r~2=0.9995),检测限1.0 mg/kg,回收率90%。结论该方法具有预处理简单、灵敏度高的优点,满足对牛奶中硫氰酸钠含量的检测要求。     

六类鱼制品中生物胺的HPLC法测定

针对不同类型的鱼制品建立同时检测腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、酪胺、苯乙胺、组胺和色胺8种生物胺含量的高效液相色谱(HPLC)法。应用该方法,测定了干燥制品、油炸制品、烘烤制品、发酵制品、混揉制品以及萃取制品6类鱼干制品中的生物胺含量。结果显示,萃取制品-鱼油中未检测出生物胺,其余5类产品中生物胺含量最高的为发酵制品(73.42~70.59 mg/kg)和混揉制品(55.48~49.88 mg/kg),其次为油炸制品(17.72~14.32 mg/kg),而鱼干制品(5.28~5.17 mg/kg)和烘烤制品(4.75~4.69 mg/kg)中的生物胺含量相对较少;另外,尸胺、组胺、精胺和亚精胺四种生物胺为除萃取制品之外的5类鱼制品中普遍存在的4种生物胺成分;其中尸胺是鱼制品中变化最大、影响最为明显的单体生物胺,检测产品中尸胺含量有利于监控、评判鱼干制品的质量。     

水产品及其苗种中硝基呋喃代谢物的高效液相色谱- 串联质谱法测定

对115 个水产品及鱼苗样品进行呋喃妥因(AHD)、呋喃它酮(AMOZ)、呋喃唑酮(AOZ)和呋喃西林(SEM)4 种硝基呋喃代谢物残留量分析。样品水解、衍生和净化后,采用液相色谱- 电喷雾三重四级杆串联质谱仪检测,多反应监测扫描模式和同位素内标法定量。各类硝基呋喃代谢物线性范围为0.5～20ng/mL、检出限0.25μg/kg,在0.25～5μg/kg 范围内样品添加回收率为89.0%～117.2%,相对标准偏差小于10%。结果表明,水产鱼苗中的硝基呋喃代谢物残留量远远高于成鱼,其中大黄鱼苗中AOZ 的检出率为62%,最大残留量3890μg/kg,而大黄鱼成鱼AOZ 的检出率17%,最大残留量2.81μg/kg,同时淡水鱼的硝基呋喃类药物残留小于海产鱼。     

酿造黄酒用粮食原料中嘌呤的检测研究

建立了酿造黄酒用粮食原料中嘌呤含量的多组分高效液相色谱分析方法。采用三氟乙酸∶甲酸(1∶1)在沸水浴下水解样品30 min,氮吹除去大部分酸,然后调pH值至5～7,用滤膜过滤后进液相色谱分析。色谱条件:流动相0.02 mol/L KH2PO4-H3PO4缓冲溶液(pH4.07);色谱柱Waters Atlantis T3;流速1 mL/min;检测器为紫外检测器,检测波长为254 nm;柱温为30℃;进样量10μL。在0.1～20 mg/L浓度范围内,各嘌呤(鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、腺嘌呤)的峰面积与浓度呈良好线性关系,相关系数大于0.9999。各组分平均加标回收率在84.8%～102.1%之间,RSD在2.4%～9.8%之间。将该方法应用于粮食原料中嘌呤的检测,结果显示,几种粮谷中小麦的嘌呤含量最高,黍米的含量最低。     

高效液相色谱-串联质谱法检测鱼肉中5种头孢类药物

建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼肉中5 种头孢类抗生素（头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、头孢 喹肟和头孢唑啉）残留的检测方法。鱼肉基质经乙腈提取,Prime HLB（6 mL,200 mg）固相萃取小柱净化。采用 AB-4500 Qtrap液相色谱-串联质谱仪,Accucore C18 RP-MS色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.7 μm）,以乙腈和体积分 数0.1%的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温30 ℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描,多反 应监测模式,外标法定量。结果表明：5 种头孢类药物在0～75 μg/kg范围内线性良好,且在8 min内完全分离;5 种 头孢类药物的检出限均为0.5 μg/kg,定量限为2.0 μg/kg;在10、25、40 μg/kg加标水平下,5 种头孢类药物的批内平 均加标回收率为81.0%～111.0%,相对标准偏差为0.41%～10.50%,批间平均加标回收率为84.7%～106.0%,相对标 准偏差为0.88%～8.71%。     

分散固相萃取净化-高效液相色谱-串联质谱法测定鱼体中地克珠利残留量

建立分散固相萃取净化-高效液相色谱-串联质谱法测定鱼体中地克珠利残留量的分析方法。样品经无水硫酸钠脱水,乙腈超声提取并减压浓缩,正己烷去脂,基质分散固相萃取净化,以电喷雾离子源负离子扫描模式进行质谱分析,内标法定量。结果表明,地克珠利在1～100 μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2大于0.999。地克珠利添加水平为1.00～50.0 μg/kg时,平均回收率在95.4%～108%之间,批内和批间变异系数均小于15%。地克珠利的检出限为0.50 μg/kg。本方法灵敏、高效、简单、重复性好,能满足鱼体中地克珠利残留量的检测要求。     

高效液相色谱法测定肉松中的淀粉含量

建立超声辅助双酶水解法联合高效液相色谱测定肉松制品中淀粉含量的检测方法。采用超声辅助双酶水解法水解肉松中的淀粉后,利用高效液相色谱法对水解液中的葡萄糖含量进行测定,并换算为淀粉含量,采用C18色谱柱（4.6?mm×250?mm,5?μm）,以乙腈-20?mmol/L乙酸铵溶液（22∶78,V/V）为流动相,以245?nm为分析波长,葡萄糖在5～50?mg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数r大于0.999。本实验采用耐高温α-淀粉酶与淀粉葡萄糖苷酶酶解淀粉,该方法仪器检出限为0.4?μg/mL,方法检出限为0.16%。通过肉松水解液加标验证,平均回收率为88.0%～96.6%,相对标准偏差小于5%（n=6）。与国家标准方法相比,该方法重复性好、回收率高,适用于各种肉松中淀粉含量的测定。?     

棉仁生育酚组成及其含量的高效液相色谱测定方法研究

优化并建立了棉仁生育酚含量的快速提取技术及高效液相色谱检测方法。样品用抗坏血酸和乙醇溶液处理后,正己烷超声萃取,以正己烷/异丙醇(100/1)流动相,采用C18色谱柱(ZORBAXRX-SIL)等度洗脱,流速0.88 m L/min,紫外检测器检测并定量(激发波长300 nm,发射波长330 nm)。测得4种生育酚的回归方程R2在0.990~0.999之间,线性关系良好;4种生育酚精密度试验结果的相对标准偏差(RSDs,n=5)均小于1%,加标回收试验的平均回收率范围在90%~105%之间,RSDs(n=3)低于7%;方法检出限范围为0.1~0.2μg/m L,定量限为0.2~0.5μg/m L。该方法作为棉仁生育酚的快速测定方法,准确、快捷、选择性好,具有较强的实用价值。     

高效液相色谱法分析三氯蔗糖的含量

目的:建立三氯蔗糖高效液相色谱测定方法。方法:采用DIKMAC18色谱柱(200mm×4.6mmi.d.5μm),流动相为甲醇-水(体积比为65:35),流速1.0ml/min,示差折光检测器,柱温40℃。结果:三氯蔗糖质量浓度在1.5～2000mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.65%,相对标准偏差(RSD)为0.15%。结论:方法简便快速,操作稳定,经济环保,适用于三氯蔗糖的分析。     

高效液相色谱-串联质谱法快速分析鱼肉中的类固醇激素残留

建立了一种快速高效的液相色谱-串联质谱法分析鱼肉中类固醇激素。实验优化了色谱分离条件和三重四级杆质谱检测参数。采用Hypersil GOLD C18色谱柱（150 mm×2.1 mm,i.d. 5 μm）,甲醇-水（含0.1%甲酸,V/V,%）为流动相进行梯度洗脱,在20 min内基本实现了大部分物质基线分离;在电喷雾正离子和选择离子对模式下,结合目标物保留时间和特征离子对信息,对16种激素进行定性和定量分析。结果表明,所有化合物具有良好的线性范围（0.10~3000.00 ng/mL）,相关系数R大于0.9987,检测限介于0.05~5.00 ng/mL范围内。鱼肉样品在液氮中研磨成鱼粉,经过固相萃取法净化处理后,测得氢化可的松药物残留为48.00 ng/g。16种激素的回收率介于82.84%~115.10%之间,RSDs值小于9.30%。该法分离能力强、灵敏度高,适用于水产品中类固醇药物的多残留同时测定。