贝壳煅烧物的防腐作用研究

研究了牡蛎壳、泥蚶壳、贻贝壳、河蚬壳、花甲壳等五种贝壳煅烧物对猪瘦肉和豆腐干的防腐效果,测试了上述五种贝壳煅烧物对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的杀菌动力学曲线,以及最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果表明:各种贝壳煅烧物都能有效抑制细菌生长,其中牡蛎壳煅烧物的效果最好。     

花椒籽提取物对副溶血弧菌抑菌作用的研究

目的研究花椒籽提取物对副溶血弧菌的抑制效果。方法采用无水乙醇提取花椒籽,采用牛津杯法,比较不同提取条件下花椒籽提取物对副溶血弧菌的抑制作用。结果 100%的花椒籽提取物抑制副溶血弧菌效果最好;最小抑菌浓度和最小杀菌浓度均为12.50 mg/m L。温度升高不利于花椒籽提取物抑菌效果的发挥,适宜温度范围为20~40℃;酸性及中性环境中抑菌效果明显,p H为7.0时,花椒籽提取物抑菌作用最强;紫外照射可使花椒籽提取物菌能力减弱。结论花椒籽提取物对副溶血弧菌有明显抑制效果,抑菌效果随提取条件的改变而改变。     

异硫氰酸酯类香料对两种革兰氏阴性致病菌的抑制作用

选取9种异硫氰酸酯类香料,研究其对常见的两种革兰氏阴性致病菌——副溶血性弧菌和沙门氏菌的抑菌活性。通过倍比肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,根据OD600nm值绘制生长曲线。使用荧光定量PCR方法研究异硫氰酸酯类香料对副溶血性弧菌主要的毒力基因——tdh基因表达的影响。结果表明,调整香料浓度为0.04mol/L时,异硫氰酸苄酯、异硫氰酸3-甲硫基丙酯、异硫氰酸苯乙酯、异硫氰酸丁酯和异硫氰酸4-戊烯酯对两种供试菌均有明显的抑制作用(P0.05)。其中异硫氰酸苄酯的抑菌效果最佳,对副溶血性弧菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为9.54μmol/L和2.44 mmol/L。异硫氰酸苄酯对tdh的基因表达具有抑制作用,并且有浓度依赖性。综上,异硫氰酸苄酯对两种革兰氏阴性致病菌有很好的作用效果,苄基对异硫氰酸酯类香料抑制革兰氏阴性致病菌有一定的影响,说明异硫氰酸苄酯香料可作为抑制致病菌的添加剂应用。     

大黄抑制食源性致病菌的活性成分研究

研究了大黄对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果,初筛的结果显示大黄醇提物对这3种菌均有较强的抑菌作用,并发现其中抑菌作用最强的物质分布在大黄氯仿段萃取物中。利用UPLC-MS-MS分析大黄氯仿段萃取物,发现大黄氯仿段萃取物的主要成分分别是大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素甲醚和大黄酚。在这五种化合物中,大黄酸对大肠杆菌和沙门氏菌具有最强的抑菌效果,对大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为125μg/m L和250μg/m L,最小杀菌浓度分别为250μg/m L和500μg/m L,大黄素对于金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌效果,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为62.5μg/m L和125μg/m L。     

三种百合科葱属植物对五种食源性致病菌抑菌效果的比较

本文采用滤纸片法测定并比较了三种百合科葱属植物(沙葱、韭菜和大蒜)的水提取物对五种食源性致病菌,即大肠杆菌O157∶H7、肠炎沙门氏菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌的抑菌作用。结果表明:三种葱属植物对五种食源性致病菌均有抑制作用且具有浓度依赖性。当提取物添加量为50μg(干重)时,沙葱水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好(41.7±1.52)mm,韭菜水提物对沙门氏菌的抑菌效果最好(17.7±0.57)mm,大蒜水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好(29.3±2.08)mm。沙葱水提物对大肠杆菌O157∶H7,金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、以及副溶血性弧菌的抑菌活性总体上高于大蒜和韭菜水提物,而对单增李斯特菌的抑菌活性却不及大蒜水提取物。三种葱属植物水提物对五种食源性致病菌的最低抑菌浓度(MIC)的结果表明:大蒜水提物对五种菌的敏感性强于沙葱水提物强于韭菜水提物。     

含氧硫醚类香料对常见致病菌的体外抑菌活性研究

对11种含氧硫醚类香料的抑菌活性进行研究,并探讨其构效关系。以副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和单增李斯特菌为供试致病菌,通过测量抑菌圈直径考察硫醚类香料的抑菌活性,并通过统计分析探讨结构的影响。结果显示在浓度为5 mol/L的条件下,3-(甲硫基)丙醛(MTPD)、2-甲基-3-甲硫基呋喃(MMTF)、糠基异丙基硫醚(FIPS)和甲基糠基二硫醚(MFDS)对四种致病菌均有抑制作用,且抑菌能力为MTPDMFDS或≈FIPS或≈MMTF。对比11种含氧硫醚类香料的抑菌活性,双(2-甲基-3-呋喃基)二硫醚(BMFDS)对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,MTPD次之,而BMFDS对其他三种致病菌无抑制作用。MTPD对副溶血性弧菌、大肠杆菌和单增李斯特菌的抑制作用均最强,且对副溶血性弧菌的作用效果最佳,其最低抑菌浓度为2.44 mmol/L。以上结果说明,醛基的存在对含氧硫醚类香料抑制副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和单增李斯特菌具有重要作用。     

海产品中副溶血弧菌的分离和PCR检测

为了建立一种快速、特异的PCR方法检测副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp),根据Genebank库中收录的Vp的tlh基因序列进行引物设计,应用PCR技术扩增tlh基因。利用TCBS和TSI2种选择性培养基从海产品总分离出68株疑似副溶血弧菌,经生化鉴定68株均为副溶血弧菌。用Chelex100法提取基因组DNA,进行tlh基因的PCR检测,tlh基因在不同副溶血弧菌中都广泛存在,而大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等其他食源性致病菌均为阴性。tlh基因具有种属特异性,因此可以用来检测副溶血弧菌。     

基于分子对接的副溶血弧菌外膜蛋白OmpW天然抑制剂的筛选

为了筛选更加高效、无毒、绿色的副溶血弧菌抑制剂,以副溶血弧菌外膜蛋白OmpW作为受体,利用分子对接方法筛选具有潜在抑菌作用的天然小分子,选用对接结果较理想的柠檬酸和咖啡酸进行试验验证。在测定最小抑菌浓度的基础上,研究去外膜和去壁的副溶血弧菌对小分子敏感性及杀菌曲线的变化,分析外膜蛋白OmpW是否为柠檬酸和咖啡酸的作用位点,验证基于分子对接筛选细菌抑制剂方法的正确性。研究结果显示,柠檬酸与咖啡酸对副溶血弧菌ATCC17802的最小抑制浓度均为2 mg/mL。去外膜和去壁的菌体与对照相比,最小抑制浓度减小16～64倍,这表明柠檬酸和咖啡酸很有可能作用于副溶血弧菌的外膜蛋白OmpW,分子对接结果也显示二者通过非共价结合发挥抑制作用。验证性试验表明:这两种小分子对于副溶血弧菌其它菌株类型也有同样的抑制效果。结论:柠檬酸和咖啡酸是有效的副溶血弧菌抑制剂(最小抑制浓度5 mg/mL),其作用位点很可能是外膜蛋白OmpW。利用分子对接方法寻找高效、绿色的细菌抑制剂具有广阔的发展前景。     

阿魏酸化学修饰溶菌酶及扩展抑菌谱的研究

为了使溶菌酶扩展抑菌谱,同时作用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,本文采用了阿魏酸修饰溶茼酶.采用EDAC作为缩合剂,使溶菌酶赖氡酸残基上的ε-氨基共价结合阿魏酸的羧基,形成一定程度的阿魏酸修饰酶结果显示:与天然溶菌酶相比,修饰酶的酶活力略有下降,但是修饰酶扩展了抑菌谱,对革兰氏阴性菌的抑菌作用增强.修饰酶对大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度均为0.5mg/mL,而对金黄色葡萄球菌的抑菌作用略有下降.     

壳聚糖盐酸盐对几种水产致病菌的抑菌性研究

目前,对虾疾病仍然是困扰对虾养殖业的一大难题,由弧菌属（Vibrio）细菌引起的弧菌病（Vibriosis）是其中危害最大的细菌性疾病,给水产养殖业造成了严重的经济损失。本实验以副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌为供试菌种,采用滤纸片扩散法对壳聚糖盐酸盐进行抑菌实验研究。在此基础上进一步采用96孔板法测定了壳聚糖盐酸盐对副溶血弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌的最小抑菌浓度（MIC）,结果表明：壳聚糖盐酸盐对3种供试菌株均具有抑菌作用,最小抑菌质量浓度因供试菌的不同而不同,副溶血弧菌为2.5 mg/mL,哈维氏弧菌和鳗弧菌为3.25 mg/mL。     

湛江两近海域文蛤和翡翠贻贝副溶血性弧菌污染情况分析

目的:对湛江东海岛和南三岛两近海域文蛤和翡翠贻贝副溶血性弧菌的污染进行检测和评价。方法:在5～11月,采用SN0173-92出口食品副溶血性弧菌检验方法,分别对文蛤和翡翠贻贝样品进行副溶血性弧菌生化反应初筛和MPN值测定。结果:每克文蛤样品中副溶血性弧菌的MPN值为<3～93,其中在6～7月副溶血性弧菌MPN值最高,为93。每克翡翠贻贝样品中副溶血性弧菌的MPN值<3～23,其中在6～7月副溶血性弧菌MPN值最高,为23。结论:湛江东海岛和南三岛附近海域每克文蛤和翡翠贻贝样品中副溶血性弧菌MPN最高值≤100,未超过相关国际标准。     

湛江东海岛文蛤模拟加工的细菌学分析

用行业标准分别对文蛤原料、清洗并热烫后和冷冻0.5 h后等加工工序中文蛤细菌总数、大肠菌群数、粪大肠菌群数、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌进行了检验.结果发现,湛江东海岛近海文蛤原料的细菌总数为(4.0±0.1)×105 cfu/g,清洗并热烫和再冷冻0.5 h后对细菌总数的影响不明显.文蛤原料大肠菌群数为(790.7±21.3)MPN/g,清洗并热烫后大肠菌群数明显降低至(19.4±1.3)MPN/g,再冷冻0.5 h后大肠菌群数为(18.3±1.1)MPN/g.文蛤原料粪大肠菌群数为(817.5±19.8)MPN/g,清洗并热烫后粪大肠菌群数明显降低至(194.2±10.2)MPN/g,再冷冻0.5 h后粪大肠菌群数为(180.6±11.3)MPN/g.文蛤原料、清洗并热烫后和再冷冻0.5 h后副溶血性弧菌的检验结果均为＜3 MPN/g;均未检出凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌.可见湛江东海岛近海文蛤的细菌污染主要是大肠菌群和粪大肠菌群,经清洗并热烫和再冷冻0.5h处理,能明显降低大肠菌群和粪大肠菌群数量.     

不同海洋生物源肝素的理化性质及抗凝血活性

为研究和开发海洋生物源肝素,本实验采用酶解醇沉法从9?种海洋生物中提取出粗肝素,采用紫外光谱法、傅里叶变换红外光谱法和高效液相色谱法对其理化性质和结构特性进行分析,并通过体外凝血实验分析其抗凝血活性。结果表明：9?种肝素粗品的肝素含量从高到低依次为凡纳滨对虾（Penaeus vannaei）虾头339.92?μg/mg、海蚌（Mactra antiquata）239.15?μg/mg、泥蚶（Tegillarca granosa）234.85?μg/mg、蛏子（Sinonovacula constricta）218.29?μg/mg、文蛤（Meretrix meretrix L.）214.78?μg/mg、钝缀锦蛤（Tapes dorsatus）212.194?μg/mg、海湾扇贝（Argopecten irradias）68.52?μg/mg、象拔蚌（Panopea abrupta）61.48?μg/mg、菲律宾蛤蜊（Ruditapes philippinarum）24.29?μg/mg,其均为吡喃糖,且都含有肝素的主要单糖：氨基葡萄糖、艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸。体外凝血实验结果表明,9?种粗肝素效价从高到低依次为海蚌67.1?U/mg、凡纳滨对虾虾头59.3?U/mg、文蛤44.0?U/mg、钝缀锦蛤39.2?U/mg、蛏子35.0?U/mg、泥蚶29.6?U/mg、象拔蚌27.2?U/mg、海湾扇贝27.1?U/mg、菲律宾蛤蜊24.1?U/mg,它们具有不同强度的抗凝血活性,且发挥抗凝血作用的途径不同。实验结果可为海洋源肝素的开发提供参考。     

用螠蛏贝壳制备乳酸菌富集钙的工艺

为了充分利用螠蛏贝壳资源开发新型生态补钙制剂,用两种乳酸菌发酵螠蛏贝壳粉,以发酵结束后乳酸菌的活菌数和游离钙转化率为指标,优选出最佳发酵工艺。研究结果表明,最佳发酵条件为300目粒度的螠蛏贝壳粉15%,蔗糖8%,1∶1混合的保加利亚杆菌和嗜热链球菌接种量7%,发酵30 h。     

革兰氏阳性菌和阴性菌对山梨酸钾的耐受差异性

对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌对山梨酸钾防腐剂的耐受性差异进行了探讨。以食品中常见的革兰氏阳性菌(蜡样芽孢杆菌,金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌)与革兰氏阴性菌(沙门氏菌、副溶血弧菌、荧光假单胞菌)为研究对象,针对纯培养状态和模拟食品体系进行了研究。结果显示,加入1g/L山梨酸钾后革兰氏阴性菌的菌数可减少近102～103.5 CFU/mL,而革兰氏阳性菌的菌数只能减少近10CFU/mL,说明山梨酸钾对革兰氏阴性菌的抑菌效果比革兰氏阳性菌要高2倍以上。最小抑菌浓度实验和即食海带的接种模拟实验结果与生长曲线结果相吻合,显示革兰氏阳性菌对山梨酸钾的耐受性强于革兰氏阴性菌,此结果对于今后应用山梨酸钾进行革兰氏阳性菌类的防控具有重要意义。     

酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌杀菌效果的比较研究

目的研究不同浓度酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌单增李斯特菌的杀菌作用,比较酸性电解水对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的杀菌效果。方法采用传统的平板计数法进行细菌计数,扫描电镜观察细菌细胞的形态变化,琼脂糖胶电泳检测细菌DNA变化和BSA法进行细菌蛋白质泄露测定。结果酸性电解水对副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌均具有很强的杀灭效果,其杀菌效果随着电解水浓度的增加而增强。较高浓度的电解水处理后,副溶血性弧菌几乎全部杀灭,单核细胞增生李斯特氏菌菌落总数降低了1.45 log CFU/mL。扫描电镜实验表明,经酸性电解水处理的副溶血性弧菌坍塌明显,且随着酸性电解水浓度的升高,细胞形态崩解严重,细菌形状模糊。结论相较于单核细胞增生李斯特氏菌,酸性电解水对革兰氏阴性菌副溶血性弧菌有明显的杀菌效果     

鲜活缢蛏肉质细菌菌群组成分析

对浙江省宁海县的鲜活缢蛏肉质进行了细菌菌群分析,从肉质中共分离到53株需氧性细菌,革兰氏阴性菌52株,占98.1%,优势菌为弧菌属(Vibrio)27株,占50.9%,其次是无色菌属(Achromobacter)5株、黄杆菌属(Flavobocterium)4株、气单胞菌属(Aeromonas)3株,此外还有假单胞菌属(Pseudo monas)1株、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)1株、噬胞菌属(Cytophaga)1株、不动杆菌属(Acinetobacter)1株和葡萄球菌属(Staphylococuus)1株,另有9株细菌在传代中失去了生长能力。     

2017~2019年广东省动物性水产品7种致病微生物污染状况分析

目的 了解2017-2019年广东省水产品中7种致病菌的污染状况。方法 2017~2019年在广东省的17地市总共采集875份动物性水产品样品, 进行创伤弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌、河弧菌以及沙门氏菌共7种致病菌的检测。结果 2017~2019年致病菌的总检出率为43.20%(378/875), 淡水产品致病菌检出率略高于海产品; 根据水产品类型分类, 致病菌在虾类和蟹类在均有较高的检出率。7种致病菌中, 副溶血性弧菌、溶藻弧菌和沙门氏菌检出率较高, 分别为41.16%, 17.26%, 12.50%。各地市均有不同程度致病菌检出, 其中茂名、清远的副溶血性弧菌检出较高; 广州和潮州的溶藻弧菌检出较高; 清远的沙门氏菌检出较高。结论 副溶血性弧菌是广东省水产品主要污染致病菌; 小餐饮和实体店中的致病菌检出率相对较高, 存在一定风险。应加强多种食品的致病菌监测, 针对性的提升对小型餐饮业的卫生管理, 以降低食源性致病菌感染的风险。     

Effects of heat-degraded sugars on survival and growth of Vibrio parahaemolyticus and other bacteria

We studied the effects of autoclaved (121 degrees C, 15 min) sugar solutions on the survival and growth of Vibrio parahaemolyticus and other bacteria. The growth and survival of V. parahaemolyticus in Luria-Bertani media and phosphate buffer, respectively, were inhibited by the addition of D-glucose autoclaved in pH 8.0 phosphate buffer. The bactericidal effect of autoclaved D-glucose was very small when autoclaved in pH 7.0 phosphate buffer, but larger effects were observed when autoclaved in the buffer at an alkaline pH. The autoclaving of D-glucose in CH3COONa, NaHCO3, and Na2HPO4 solutions at pH 7.6 to 8.5 also generated bactericidal effects, but it was not the case when D-glucose was autoclaved in Na2SO4, (NH4)2SO4, or NH4Cl solution at pH 8.0. The same effects as autoclaved D-glucose were observed in autoclaved lactose, D-fructose, and D-ribose. The bactericidal effects of autoclaved D-glucose were also noted in Salmonella Enteritidis, Listeria monocytogenes, and E. coli strains, but the effects were smaller than those seen in V. parahaemolyticus and V. vulnificus. The growth of V. parahaemolyticus in clam extracts was also inhibited by the addition of autoclaved D-glucose, indicating that heat-treated reduced sugars can exert bactericidal effects in foods.