bFGF单抗协同替吉奥抑制肺癌Lewis细胞的增殖及移植瘤血管新生

目的:探讨碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)单抗与替吉奥(gimeracil and oteracil porassi-um,又称S-1)联合应用体内外抑制小鼠Lewis肺癌细胞增殖、移植瘤生长及转移、肿瘤血管新生的协同作用。方法:CCK-8法检测bFGF单抗及S-1对Lewis细胞增殖的抑制作用。建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌自发转移瘤模型,32只小鼠随机分成生理盐水(NS)组、bFGF单抗组、S-1组和bFGF单抗+S-1组,每组8只;测量瘤体,绘制生长曲线,称瘤质量并计算抑瘤率;计数各组肺表面转移瘤结节;CD31标记血管内皮细胞,计数转移瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:bFGF单抗、S-1剂量依赖性抑制Lewis细胞增殖(P<0.05),联合用药组抑制率明显高于单药组(P<0.05或P<0.01)。bFGF单抗组、S-1组以及bFGF单抗+S-1组对Lewis转移瘤的抑瘤率分别为37.8%、47.7%、65.9%,联合组抑瘤率明显高于单药组(P<0.05或P<0.01)。联合组肺表面转移结节、微血管密度明显低于单药组(2.71±0.76vs6.57±0.98、4.71±0.76;21.6±2.9vs33.4±4.9、41.9±6.3;P<0.05或P<0.01)。结论:bFGF单抗联合S-1对Lewis肺癌移植瘤具有协同抑制作用,其机制与抑制细胞增殖及血管新生有关。     

血管内皮抑素对小鼠体内Lewis肺癌血管生成及转移影响的研究

目的：观察血管内皮抑素（Endostatin）对C57小鼠体内Lewis肺癌生长、血管生成及转移的影响。方法：将荷Lewis肺癌的C57鼠进行不同剂量组的内皮抑素和顺铂干预，观察肿瘤生长、移植瘤及转移瘤体内的血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的表达及转移发生率，并作统计学分析。结果：内皮抑素对鼠Lewis肺癌的生长有明显的抑制作用。内皮抑素处理组（内含400μg、300μg、200μg和200μg＋DDP组）和模型组转移率间的差异有统计学意义（P=0．0303）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内的VEGF。移植瘤中模型组与其余各组之间均存在显著差异（P〈0．01）；400μg组与200μg组、DDP组、联合用药组之间均存在统计学差异（P〈0．05）；300μg组与200组之间存在统计学差异（P〈0．05）；转移瘤中模型组与其余各组之间均存在统计学差异（P〈0．05）。300μg与200μg之间有统计学差异（P〈0．05），200μg与DDP组和200μg＋DDP组之间有统计学差异（P〈0．05）。原位移植瘤与肺转移肿瘤组织中VEGF表达呈正相关（r=0．977，P=0．001）。内皮抑素能显著下调移植瘤及转移瘤内和MVD。在移植瘤中400μg和300μg组肿瘤微血管密度最小，彼此无差异；200μg加DDP组肿瘤微血管密度次之，200μg组肿瘤微血管密度再次，DDP组肿瘤微血管密度在各实验组中最多，模型组肿瘤微血管密度最大。在转移瘤中400μg、300μg和200μg组微血管密度最小，这三组彼此无差异。200μg加DDP组肺转移瘤组织微血管密度次之，DDP组肺转移瘤组织微血管密度在各实验组中最多；模型组肿瘤微血管密度最大。内皮抑素可以减少肿瘤肺转移，作用程度在一定范围内与内皮抑素剂量呈正相关。结论：血管内皮抑素可以通过下调瘤组织中的VEGF和MVD抑制肿瘤生长及转移。     

血管生成在Lewis肺癌生长转移过程中的作用

目的建立能够模拟肿瘤生长、侵袭转移动态全过程的动物模型,利用该模型探讨血管生成与肿瘤生长、转移的关系。方法Lewis肺癌(LLC)在C57BL/6小鼠体内连续传代,观察第2代（早期组）、第8代（中期组）和第15代（晚期组）荷瘤小鼠肿瘤生长和肺转移的情况,采用免疫组织化学法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α）和微血管密度（MVD）的表达。结果(1)早、中、晚期三组小鼠肿瘤随传代次数的增加生长速度加快、侵袭力增强,肺转移率升高。(2) VEGF、 HIF-1α和MVD在早、中、晚期三组小鼠瘤组织中的阳性表达均呈升高趋势,差别有统计学意义（P<0.05）,且HIF-1α与VEGF、VEGF与MVD的表达均呈正相关。结论Lewis肺癌在小鼠体内连续传代过程中生长速度加快,转移潜能增强,而血管生成在这个动态过程中发挥了重要作用,使肿瘤得以持续生长和扩散转移。     

重组人血管内皮抑制素对小鼠Lewis肺癌肿瘤抑制作用

目的：研究重组人血管内皮抑制素（rhuEndostatin）对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长的抑制作用，寻找其量效关系及其作用机制。方法：每只小鼠剃毛背部皮下接种Lewis肺癌细胞，待肿瘤长至100 mm3左右时，随机分为低、中、高3个剂量组，每次分别注射rhuEndostatin 5 mg/（kg·d）， 15 mg/(kg·d)或30 mg/（kg·d），每天1次，连续21 d。同时设置生理盐水对照组和注射用环磷酰胺\[100 mg/（kg·d）\]治疗对照组。于第22天断颈处死小鼠，称皮下肿瘤的重量，并取脑、肺、肝、脾和肾切片做病理学检查。结果： 血管内皮抑制素治疗组的曲线下面积明显小于肿瘤对照组（P<0.01）。病理切片检查显示，治疗组肿瘤有大面积的坏死，瘤周毛细血管消失。结论：rhuEndostatin可明显抑制小鼠Lewis肺癌肿瘤的生长（高剂量组可达588%）、转移和新生毛细血管的形成。     

人血管能抑素抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生

目的:探讨人血管能抑素(canstatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移和血管新生的影响.方法:将pCMV-Script/canstatin及空载体pCMV-Script通过电穿孔的方法转染A549细胞,G418筛选获得阳性克隆.RT-PCR检测转染后细胞中canstatin mRNA的表达,Western blotting检测转染后细胞中canstatin蛋白的表达.建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,观察pCMV-Script/canstatin组A549细胞培养上清对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗作用,免疫组化检测各治疗组荷瘤小鼠移植瘤的微血管密度.结果:pCMV-Script/canstatin转染A549细胞在G418筛选后成功形成克隆,转染的A549细胞能有效表达canstatin mRNA和蛋白.pCMV - Script/canstatin治疗组小鼠肿瘤体积明显小于pCMV-Script组和NS组[(1.47 ±0.21)cm3 vs(2.43 ±0.15) cm3、(2.53 ±0.18) cm3,P ＜0.01);pCMV-Script/canstatin组、pCMV - Script组和NS组的肺转移结节数分别为(3.00±1.00)、(7.80±1.48)、(7.60 ±2.41)个,pCMV-Script/canstatin组肿瘤转移受到显著的抑制(P＜0.01);pCMV-Script/canstatin组小鼠的肿瘤组织微血管数明显少于pCMV-Script组和NS组[(84.40 ±8.83) vs (188.68 ±11.15)、(190.24±12.91)个,P＜0.01].结论:pCMV-Script/canstatin能在A549细胞中表达并分泌至细胞外,canstatin可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长、转移和血管新生.     

维拉帕米抑制Lewis肺癌自发性转移作用的实验研究

目的 :观察不同剂量的维拉帕米对Lewis肺癌自发性肺转移的抑制作用。方法 :将Lewis肺癌细胞种植于C57BL/ 6J小鼠右腹股沟皮下 (2× 10 6/鼠 ) ,将 4 0只小鼠随机分成对照组和 3个治疗组 ,从种植第 5天起腹腔内分别注射生理盐水、2 0mg/kg、30mg/kg和 4 0mg/kg维拉帕米 ,每日 1次 ,共 11天 ,第 2 2天处死并解剖小鼠 ,观察对照组和治疗组的肺转移情况 ,体外进行血小板聚集抑制试验。结果 :治疗组肺转移率明显低于对照组 ,随着药物剂量的增加 ,肺转移率逐渐降低 (P <0 0 1) ;维拉帕米可抑制Lewis肺癌细胞诱致的人血小板聚集 ,抑制率随着药物浓度的增加而增加 (P <0 0 1)。结论 :维拉帕米可剂量依赖性地抑制Lewis肺癌自发性肺转移 ,其抗转移作用可能与抑制肿瘤细胞诱致的血小板聚集有关     

血管生成抑制剂TNP—470抑制Lewis肺癌生长和转移的实验研究

目的采用Ｌｅｗｉｓ肺癌来验证血管生成抑制剂ＴＮＰ－４７０对肿瘤生长和转移的抑制作用。方法将Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞接种于Ｃ５７ＢＬ小鼠皮下（２．４×１０６／鼠）。将２０只小鼠随机分成对照组和治疗组,自第２天起分别给予溶剂（３％酒精）０．２ｍｌ和ＴＮＰ－４７０（４０ｍｇ／ｋｇ）,隔天给药１次,共８次。第２２天时,测定对照组和治疗组的皮下瘤重及肺转移率,分别进行ｔ检验和χ２检验。结果两组皮下瘤重分别为３．７７±１．０５ｇ和１．９８±０．９６ｇ（Ｐ＝０．０００９）;两组肺转移率分别为８０％和３０％（Ｐ＝０．０３）。结论血管生成抑制剂ＴＮＰ－４７０能明显抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌的生长和转移。     

抗CD34单克隆抗体标记血管生成在非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨非小细胞肺癌中抗ＣＤ３４单抗标记的血管生成的表达状况。方法 采用免疫组化法检测８１例手术切除的非小细胞肺癌标本中抗内皮细胞表面抗原ＣＤ３４单抗标记的血管生成。结果 ＣＤ３４以其染色的特异性、敏感性及清晰的背景而易于识别。统计学分析显示微血管密度同肺癌临床分期的进展有密切关系（Ｐ〈０．０５）,但与淋巴结转移及其它临床病理特征无明显关系（Ｐ〉０．０５）。结论 肺癌中微血管密度在肺癌的发生、发     

Experimental chronic jet lag promotes growth and lung metastasis of Lewis lung carcinoma in C57BL/6 mice

Circadian rhythm has been linked to cancer genesis and development, but the detailed mechanism by which circadian disruption accelerates tumor growth remains unclear. The purpose of this study was to investigate the effect of circadian disruption on tumor growth and metastasis in male C57BL/6 mice, using an experimental chronic jet lag model. Lewis lung carcinoma cells were inoculated into both flanks of the mice following 10 days of exposure to experimental chronic jet lag or control conditions. The effects on tumor growth and lung metastasis were assessed, and the effect on gene expression was detected using cDNA microarrays and real-time quantitative RT-PCR. Tumors grew faster in the experimental chronic jet lag mice compared to the control mice (P=0.004). Lung metastases were found in 10 out of 24 mice in the chronic jet lag group, but only in 3 out of 24 mice in the LD group (P=0.023). Microarray data showed that in both liver and tumors circadian disruption altered the expression of genes, including those related to the cell cycle, apoptosis, the immune response and metastasis suppressor genes. The expression of the Ndrg1 gene was suppressed by chronic jet lag. We conclude that circadian disruption can promote tumor progression and metastasis by affecting the expression of both tumor-related genes and metastasis suppressor genes.     

地塞米松对Lewis肺癌细胞小鼠移植瘤的增殖抑制作用

目的:探讨地塞米松对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖的影响。方法:将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,随机分为3组:对照组、顺铂组和地塞米松组,并给予相应治疗,监测皮下移植瘤体积变化,计算抑瘤率。采用免疫组化法检测肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA),细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平;采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化。结果:各用药组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组(P<0.05);肿瘤Cyclin D1及PCNA表达水平亦较对照组显著降低(P<0.05);而地塞米松组与顺铂组比较差异无统计学意义(P>0.05)。FCM检测显示,地塞米松使细胞周期明显阻滞于G1期,作用与顺铂相当(P>0.05)。结论:地塞米松对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖具有明显的抑制作用,使细胞在G1期阻滞。     

白细胞介素-18对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖及微血管生成的抑制作用

背景与目的:白细胞介素18(interleukin18,IL-18)是新近发现的一种多效能细胞因子,在抗肿瘤、免疫调节等方面有着积极的作用及潜在广阔的应用前景。本文旨在研究IL-18对Lewis肺癌小鼠肿瘤增殖及微血管生成的抑制作用。方法:复制Lewis肺癌小鼠模型16只,随机均分为IL-18治疗组(A组)与荷瘤模型组(B组),分别于接种第7天起予IL-18、0.9%氯化钠溶液腹腔注射,每日1次,连续7次。观察Lewis肺癌小鼠健康状况,监测皮下移植瘤变化,并用免疫组化法检测肿瘤增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)与微血管密度(microvessel density,MVD)表达水平。结果:IL-18对小鼠健康状况无明显影响,但可明显抑制移植瘤生长,抑瘤率为75%,并显著降低肿瘤PCNA表达与MVD水平,IL-18治疗组与荷瘤模型组该两项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:IL-18可抗Lewis肺癌生长,其作用与抑制肿瘤增殖活性及微血管生成相关。     

口服VEGFR2 DNA疫苗抗小鼠Lewis肺癌血管生成的实验研究

背景与目的血管内皮生长因子(VEGF)及其主要受体血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)在肿瘤新生血管和肿瘤基质形成过程中起着重要作用。本研究的目的是观察口服VEGFR2 DNA疫苗抗C57BL/6小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长的作用,并探讨其可能的作用机制。方法将重组DNA疫苗对小鼠进行免疫,通过观察小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤大小,记录各组小鼠离体肿瘤湿重,检测移植瘤微血管密度(MVD)及血液CD3 、CD8 T细胞水平,评价重组疫苗的抑瘤作用。结果疫苗组、空质粒组、生理盐水组的MVD分别为1.75±1.07、6.89±2.52、7.57±3.75,肿瘤湿重分别为(2.05±1.32)、(4.83±1.47)、(5.12±1.02)g,疫苗组与其它两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。接种肿瘤后,疫苗组CD3 T细胞仍维持较高水平,其它两组明显下降(P<0.05);疫苗组CD8 T细胞水平较其它两组明显升高(P<0.05)。结论口服VEGFR2DNA疫苗对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的生长具有较强的抑制作用。该疫苗可能是通过杀伤肿瘤内皮细胞、抑制血管生成而起到抗肿瘤生长的作用。     

The growth and metastatic characteristics of Lewis lung carcinoma during reproductive dysfunction in male C57BL/6 mice]

Results of a study of the pattern of spontaneous dissemination of Lewis lung carcinoma in male mice with reproductive system dysfunction showed that removal of the gonads followed by substitution treatment with testosterone failed to influence tumor metastatic potential. The data suggested that the androgen lacked a modulating effect on growth and dissemination of Lewis lung carcinoma.     

IL-18对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用

目的：观察IL-18对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：建立Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型16只，按随机数字法分为IL-18治疗组、荷瘤模型组，每组8只，分别给予IL-18、生理盐水于接种第7日起腹腔注射。观察IL-18对移植瘤体积变化及瘤重的影响。结果：IL-18对小鼠健康状况无明显影响，但对小鼠移植瘤生长有明显抑制作用，肿瘤抑制率为75％。结论：IL-18可抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长，其机制值得深入研究。     

双氢青蒿素对Lewis肺癌小鼠的抑瘤作用及其机制探讨

目的探讨双氢青蒿素对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效应及其作用机制。方法C57BL/6J小鼠皮下接种3LL细胞（2&#215;10^6）50只,随机分为5组,分别为生理盐水组、阳性对照顺铂组、双氢青蒿素高、中、低剂量组,检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率,应用流式细胞术进行TUNEL分析和凋亡相关基因及其表达改变的检测。结果双氢青蒿素中、高剂量组体重较生理盐水组增加明显,其抑瘤率分别为53.5%及59.2%;流式细胞术TUNEL检测结果显示,其作用细胞凋亡和坏死同时存在。FCM法分析其对肺癌组织凋亡相关基因检测表明中、高剂量组Fas、p53等凋亡基因上调,Bcl-2抑制凋亡基因下调。结论双氢青蒿素对Lewis肺癌小鼠肺癌生长具有一定的抑制作用,能促进肿瘤细胞凋亡,其机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关。