氦氖激光对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和脑组织内微管相关蛋白2表达的影响

目的:观察氦氖激光治疗改善血管性痴呆大鼠学习记忆障碍的作用,并以脑神经元特有的细胞骨架蛋白微管相关蛋白2表达的变化评估脑组织损伤程度。方法:实验于2004-04/07在郑州大学基础医学院人体解剖教研室完成。45只成年健康Wistar大鼠随机分为3组,每组15只。①氦氖激光治疗组和血管性痴呆模型组制备血管性痴呆大鼠模型。氦氖激光治疗组采用氦氖激光照射百会、大椎两穴,1次/d,30min/次,7d为1个疗程,共2个疗程,疗程间隔3d。模型组未做治疗。②假手术组不造成脑缺血,未做治疗。用Y-型迷宫检测3组大鼠的空间记忆和学习记忆能力,以连续10次测试中有9次正确反应时所需的电击次数为评估标准。取3组大鼠组织切片,进行微管相关蛋白2免疫组织化学染色检测,用灰度值大小说明其在脑组织内表达的高低。结果:41只大鼠进入结果分析。①大鼠的学习和记忆能力:氦氖激光治疗组第1次和第2次连续10次测试中有9次正确反应时所需的电击次数少于模型组(7.71±1.59,4.71±1.94,18.50±1.68,15.58±2.64,P<0.01),接近假手术组(6.60±1.55,4.20±1.74)。②大鼠脑组织海马CA1区微管相关蛋白2阳性反应灰度值:氦氖激光组明显高于模型组(0.69±0.03,0.45±0.07,P<0.01),与假手术组比较无显著差别。结论:氦氖激光照射疗法可以改善血管性痴呆大鼠的空间定向能力和学习记忆能力,并使微管蛋白2活性提高,从而保持神经元细胞骨架的完整,减轻脑组织的损伤。     

电针对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响

背景：血管性痴呆(vascular dementia，VD)目前尚缺乏特异性的治疗方法。但有效地消除危险因素，积极预防脑血管疾病，或对已发脑血管疾病的患者预防其复发、进展和并发症，对防止VD的发生将起到重要的作用。而探明针灸治疗VD的获效机制是VD治疗研究的热点之一。目的：观察电针对实验性，VD大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响。设计：随机对照实验研究。单位：广州中医药大学针灸推拿学院与基础医学院。材料：成年健康SD大鼠60只，雌雄各半，体质量200～250g，由广州中医药大学实验动物研究中心提供。方法：在本校动物实验中心选用健康SD大鼠建立4-血管阻断VD模型。用Morris水迷宫测定大鼠定位航行试验和空间探索试验，并用Tunel法检测鼠脑皮质和海马细胞凋亡表达。结果：在定位航行实验中，模型大鼠潜伏期为(58．08&;#177;38．77)s，假手术组为(26．50&;#177;29．4)s，模型大鼠潜伏期显著延长；在空间探索试验中，模型大鼠在原平台象限跨越平台次数与其余三个象限差异无显著意义；其顶叶皮层凋亡细胞数为41．60&;#177;3．71，海马凋亡细胞数为35．83&;#177;7．11。电针组定位航行试验的潜伏期为(29．89&;#177;32．62)S；在空间探索试验中，在原平台象限跨越平台次数显著多于其余三个象限，与假手术组比较差异无显著意义；顶叶皮层的凋亡细胞数为12．84&;#177;5．44．海马为11．30&;#177;4．16，其细胞凋亡数目明显少于模型组。结论：电针能改善VD大鼠学习记忆能力，有拮抗脑组织细胞凋亡的作用。     

静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞对血管性痴呆大鼠海马区脑组织形态及微管相关蛋A2表达的影响

目的：骨髓间充质干细胞移植进入脑组织后，能否影响脑组织的形态及微管相关蛋白2的表达从而改善痴呆状态下的认知功能？观察静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞后，血管性痴呆模型大鼠脑海马CAl区脑组织形态及微管相关蛋白2的变化。方法：实验于2004-08／2005-05在解放军第二军医大学完成。①实验动物：健康雄性SD大鼠60只，随机数字表法分为细胞移植组、模型对照组、假手术组，20只，组。②实验方法：另取20只大鼠用于体外分离、培养扩增骨髓间充质干细胞，传至第2代时加入BrdU进行标记，制备单细胞悬液，调整细胞浓度为3x109L～。细胞移植组、模型对照组采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆动物模型，假手术组仅暴露双侧颈总动脉但不结扎。造模后4周，细胞移植组尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1mL，模型对照组注射等量磷酸盐缓冲液，假手术组不进行尾静脉注射。③实验评估：细胞移植后4周，苏木精一伊红染色检测各组大鼠脑海马CAl区脑组织形态变化，免疫荧光染色观察经BrdU标记的骨髓间充质干细胞示踪情况，免疫组织化学染色检测脑海马CAl区微管相关蛋白2的表达。结果：细胞移植组5只大鼠死亡，模型对照组3只大鼠死亡，假手术组均进入结果分析。①脑海马CAl区锥体细胞形态变化：细胞移植组和模型对照组CAl区锥体细胞较假手术组排列稀疏、紊乱，细胞肿胀、脱失，核固缩，但细胞移植组细胞排列较模型对照组规则，且细胞肿胀、脱失及核固缩较模型对照组减轻。②脑海马内骨髓间充质干细胞的示踪：细胞移植后4周，大鼠脑海马内可见被绿色荧光标记的骨髓间充质干细胞。③脑海马CAl区微管相关蛋白2的表达：与假手术组比较，细胞移植组及模型对照组脑海马CAl区锥体细胞层微管相关蛋白2阳性产物的吸光度值均明显降低（P〈0．05）；细胞移植组明显高于模型对照组（P〈0．05）。结论：静脉注射骨髓间充质干细胞能够使血管性痴呆大鼠脑海马CAl区神经元损伤及脱失减轻，并使微管相关蛋白2表达增加。     

丰富环境干预对慢性低灌注血管性痴呆大鼠学习记忆及突触素蛋白和微管相关蛋白的影响

目的:观察丰富环境干预对慢性低灌注血管性痴呆大鼠学习记忆能力、海马突触素(SYN)蛋白及微管相关蛋白-2(MAP-2)表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、丰富环境组。双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性低灌注大鼠模型。丰富环境干预50d后,利用Morris水迷宫检测学习记忆功能;免疫组织化学法检测SYN、MAP-2的表达。结果:慢性低灌注大鼠空间参考记忆能力下降,搜索隐藏平台的逃避潜伏期和游泳路径明显延长;定位记忆障碍,在空间探索实验中准确穿越平台位置的次数减少;工作记忆明显损害,寻找移动平台的逃避潜伏期及游泳路径比正常大鼠明显延长(P0.01或P0.05)。海马CA1、CA3区SYN、MAP-2的免疫反应明显减弱(P0.01)。丰富环境干预后,大鼠搜索隐匿平台的逃避潜伏期和游泳路径均有不同程度的缩短,准确穿越平台所在位置的次数比模型组增加;移动平台位置后,动物找到平台的时间和游泳路径明显比模型组缩短(P0.01或P0.05);海马区SYN、MAP-2的积分光密度值均有不同程度增加(P0.01或P0.05)。结论:丰富环境干预可改善慢性低灌注大鼠学习记忆能力,其作用与上调海马SYN、MAP-2蛋白表达,提高突触可塑性有关。     

纳洛酮对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和海马神经细胞内钙离子浓度的影响

背景：脑缺血时阿片受体发生变化并可导致痴呆，阿片受体拮抗剂纳洛酮对脑缺血时阿片受体变化起调控作用，故纳洛酮对血管性痴呆可能起预防作用。目的：研究阿片受体拮抗剂纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退的防治作用，探讨防治作用的神经机制。主要涉及海马神经细胞内钙离子浓度。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：在汕头大学医学院清洁级实验动物饲养中心，30只雄性Sprague Dawley大鼠。采用持久性结扎双侧颈总动脉方法制备血管性痴呆模型，随机分为假手术对照组、模型组和防治组。干预：防治组于术后即连续7d腹腔注射纳洛酮，其他两组腹腔注射等体积生理盐水。8周后用Morris水迷宫训练方法。主要观察指标：假手术对照组、模型组与防治组大鼠的隐匿平台逃避潜伏期，空间探索实验穿越平台次数，可见平台实验逃避潜伏期。三组钙离子荧光像素值。结果：假手术组和防治组与模型组的实验大鼠相比，其Morris水迷宫隐匿平台逃避潜伏期明显缩短[假手术组为(7．80&;#177;4．70)s，防治组为(8．10&;#177;2．93)s，模型组为(21．26&;#177;17．41)s，F=15．028，P&;lt;0．01]，前两者差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；空间探索实验穿越平台次数明显增加[假手术组为(8．45&;#177;1．19)次／min，防治组为(8．00&;#177;1．17)次／min，模型组为(4．44&;#177;1．74)次／min，F=23．257，P&;lt;0．01]．前两者差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。可见平台实验逃避潜伏期三组间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。荧光像素值平均值，假手术组、防治组为135．05&;#177;29．14，139．39&;#177;30．74；模型组为484．05&;#177;298．72，较另两组明显升高(P&;lt;0．01)。结论：纳洛酮对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退有明显防治作用。其机制可能是防止神经细胞内钙离子增高有关。     

静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞对血管性痴呆大鼠海马区脑组织形态及微管相关蛋白2表达的影响

目的:骨髓间充质干细胞移植进入脑组织后,能否影响脑组织的形态及微管相关蛋白2的表达从而改善痴呆状态下的认知功能?观察静脉注射同种异体骨髓间充质干细胞后,血管性痴呆模型大鼠脑海马CA1区脑组织形态及微管相关蛋白2的变化。方法:实验于2004-08/2005-05在解放军第二军医大学完成。①实验动物:健康雄性SD大鼠60只,随机数字表法分为细胞移植组、模型对照组、假手术组,20只/组。②实验方法:另取20只大鼠用于体外分离、培养扩增骨髓间充质干细胞,传至第2代时加入BrdU进行标记,制备单细胞悬液,调整细胞浓度为3×109L-1。细胞移植组、模型对照组采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆动物模型,假手术组仅暴露双侧颈总动脉但不结扎。造模后4周,细胞移植组尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1mL,模型对照组注射等量磷酸盐缓冲液,假手术组不进行尾静脉注射。③实验评估:细胞移植后4周,苏木精-伊红染色检测各组大鼠脑海马CA1区脑组织形态变化,免疫荧光染色观察经BrdU标记的骨髓间充质干细胞示踪情况,免疫组织化学染色检测脑海马CA1区微管相关蛋白2的表达。结果:细胞移植组5只大鼠死亡,模型对照组3只大鼠死亡,假手术组均进入结果分析。①脑海马CA1区锥体细胞形态变化:细胞移植组和模型对照组CA1区锥体细胞较假手术组排列稀疏、紊乱,细胞肿胀、脱失,核固缩,但细胞移植组细胞排列较模型对照组规则,且细胞肿胀、脱失及核固缩较模型对照组减轻。②脑海马内骨髓间充质干细胞的示踪:细胞移植后4周,大鼠脑海马内可见被绿色荧光标记的骨髓间充质干细胞。③脑海马CA1区微管相关蛋白2的表达:与假手术组比较,细胞移植组及模型对照组脑海马CA1区锥体细胞层微管相关蛋白2阳性产物的吸光度值均明显降低(P<0.05);细胞移植组明显高于模型对照组(P<0.05)。结论:静脉注射骨髓间充质干细胞能够使血管性痴呆大鼠脑海马CA1区神经元损伤及脱失减轻,并使微管相关蛋白2表达增加。     

电针对实验性血管性痴呆大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响

目的：观察电针对实验性血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响。方法：实验中用4－血管阻断模型，用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力，并用Tunel法检测鼠脑皮质和海马细胞凋亡情况。结果：模型大鼠表现明显的学习记忆障碍，在定位航行实验中，与假手术组相比，潜伏期显著延长；在空间探索试验中，在原平台象限跨越平台次数与其余三个象限无显著差异，其顶叶皮层及海马有大量的凋亡细胞出现。而电针能显著缩短定位航行试验的潜伏期，在空间探索试验中，在原平台象限跨越平台次数显著多于其余三个象限，与假手术组无显著差异；其顶叶皮层及海马CA1区的凋亡细胞数显著减少，受损程度明显轻于模型组。结论：电针能改善VD大鼠学习记忆能力，有拮抗脑组织细胞凋亡的作用。     

运动训练对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及大脑皮质区生长相关蛋白-43表达的影响

目的:研究运动训练对血管性痴呆大鼠学习记忆功能恢复及组织生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响。方法:采用双侧颈总动脉反复缺血再灌注加降血压法制作血管性痴呆大鼠模型。选择SD雌性大鼠44只,随机分为运动组20只,制动组20只和假手术组4只。运动组大鼠进行滚筒、转棒训练,1h/d;制动组大鼠限制其自由活动;假手术组置于普通笼中自由活动。3组分别于术后第27、28天进行跳台实验测定学习、记忆能力。取脑组织采用免疫组织化学染色方法观察不同时间点大脑皮质区GAP-43的表达。结果:跳台实验对学习记忆能力进行评估,运动组优于制动组(P0.01),运动组GAP-43在皮质区的表达第1天逐渐增高,第7天达高峰,较制动组和假手术组均有明显增加(P0.01)。结论:运动训练可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与运动训练能促进皮质区上GAP-43表达有关。     

运动训练对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马GAP-43表达的影响

目的研究运动训练对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆功能恢复及组织生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。 方法选择SD雌性大鼠44只,随机分为运动组20只、制动组20只和假手术组4只,采用双侧颈总动脉反复缺血再灌注加降血压法制作血管性痴呆大鼠模型。运动组大鼠每天进行滚筒、转棒训练,时间为1 h;制动组大鼠被限制自由活动;假手术组置于普通笼中自由活动。3组分别于术后第27,28天进行跳台试验测定学习、记忆能力。取脑组织采用免疫组织化学染色方法观察不同时间点海马CA1区GAP-43的表达。 结果以跳台试验对学习记忆能力进行的评估示运动组优于制动组(P<0.01),运动组GAP-43在海马CA1区的表达第1天后逐渐增高,第7天时达高峰,较制动组和假手术组均有明显增加(P<0.01)。 结论   运动训练可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与运动训练能促进海马CA1区上GAP-43表达有关。     

电针相关井穴对血管性痴呆大鼠学习记忆及清除自由基能力的影响

目的：观察电针相关井穴对血管性痴呆(vascular dementia，VD)大鼠学习记忆和清除自由基能力的影响。方法：参照Pulsinelli4血管闭塞法(4-VO)造模，结合行为学试验筛选VD模型。用跳台法评价大鼠不同时期的学习记忆能力，测定治疗后血清及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛含量。结果：电针治疗后VD大鼠行为学测试成绩明显提高(F=101．951，P&;lt;0．01)；脑组织及血清中SOD活性升高(F=14．405和21．248，P&;lt;0．01)，脑组织中丙二醛水平下降，假手术组、模型组、井穴组、西药组分别为(1．47&;#177;0．23)，(2．12&;#177;0．41)，(1．49&;#177;0．24)和(1．53&;#177;0．16)μmol／g)(F=35．653，P&;lt;0．01)，血清丙二醛水平无明显变化。结论：电针相关井穴能显著改善VD大鼠的学习记忆能力；电针后机体清除自由基能力增强，可能是其作用机制之一。     

重度牙周炎对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及脑组织炎症因子表达的影响

目的 探讨重度牙周炎对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及脑组织炎症因子表达的影响.方法 将48只健康SD大鼠按照随机数字表法分为空白对照组、牙周炎组、阿尔茨海默病模型组和阿尔茨海默病+牙周炎组,每组12只.空白对照组不进行处理,牙周炎组建立重度牙周炎模型,阿尔茨海默病模型组建立阿尔茨海默病模型,阿尔茨海默病+牙周炎组建...     

氦氖激光对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠学习记忆能力的影响

目的:研究氦氖激光穴位照射疗法对缺氧缺血性脑损伤(hypoxiais-chemiabraindamage,HIBD)新生大鼠学习记忆和脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)的影响。方法:实验于2003-12/2004-05在郑州大学基础医学院人体解剖学教研室完成。7日龄Wistar大鼠56只随机分为假手术组、HIBD组、HIBD激光穴位照射组、HIBD激光非穴位照射组。用Y型迷宫检测新生大鼠HIBD后学习记忆能力以及取左脑进行BDNF免疫组织化学染色。结果:HIBD激光穴位照射组大鼠与HIBD组和HIBD激光非穴位照射组相比学习和记忆能力明显提高,BDNF免疫阳性细胞明显增加(35.67±4.32)个/视野,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:激光穴位照射提高HIBD新生大鼠学习记忆能力。     

电针对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响

背景血管性痴呆(vascular dementia,VD)目前尚缺乏特异性的治疗方法,但有效地消除危险因素,积极预防脑血管疾病,或对已发脑血管疾病的患者预防其复发、进展和并发症,对防止VD的发生将起到重要的作用.而探明针灸治疗VD的获效机制是VD治疗研究的热点之一.目的观察电针对实验性,VD大鼠学习记忆能力和脑组织细胞凋亡的影响.设计随机对照实验研究.单位广州中医药大学针灸推拿学院与基础医学院.材料成年健康SD大鼠60只,雌雄各半,体质量200～250 g,由广州中医药大学实验动物研究中心提供.方法在本校动物实验中心选用健康SD大鼠建立4-血管阻断VD模型.用Morris水迷宫测定大鼠定位航行试验和空间探索试验,并用Tunel法检测鼠脑皮质和海马细胞凋亡表达.结果在定位航行实验中,模型大鼠潜伏期为(58.08±38.77)s,假手术组为(26.50±29.4)s,模型大鼠潜伏期显著延长;在空间探索试验中,模型大鼠在原平台象限跨越平台次数与其余三个象限差异无显著意义;其顶叶皮层凋亡细胞数为41.60±3.71,海马凋亡细胞数为35.83±7.11.电针组定位航行试验的潜伏期为(29.89±32.62)s;在空间探索试验中,在原平台象限跨越平台次数显著多于其余三个象限,与假手术组比较差异无显著意义;顶叶皮层的凋亡细胞数为12.84±5.44,海马为11.30 ±4.16,其细胞凋亡数目明显少于模型组.结论电针能改善VD大鼠学习记忆能力,有拮抗脑组织细胞凋亡的作用.     

电针对血管性痴呆大鼠海马脑源性神经营养因子mRNA表达及学习记忆的影响

目的:通过观察电针后血管性痴呆(VD)大鼠不同时相海马脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA表达的变化规律,探讨电针改善VD大鼠学习记忆的可能机制.方法:通过结扎大鼠双侧颈总动脉,制成VD模型,分为l周组,2周组,4周组和6周组,其中每一组又分为电针组和模型组,用RT-PCR法检测各组BDNF mRNA表达的变化规律,观察电针的影响,并通过Morris水迷宫来观察各组神经行为学的改变.结果:经统计分析发现同时相电针组与模型组相比,电针组海马BDNF mRNA随着时间的延长表达升高(P＜0.05),而且与模型组相比,电针组大鼠的学习记忆能力比模型组好(P＜ 0.01,P＜ 0.05).结论:电针能够促进海马BDNF mRNA的表达,可能是针灸治疗治疗VD,改善VD大鼠症状的可能机制之一.     

高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力行为学的影响

目的:研究高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力行为学的影响。方法:成年Sprague-Dawly雄性大鼠40只,体重250—300g,采用线栓法再灌注大脑中动脉梗死建立血管性痴呆大鼠模型,随机分为假手术组、梗死模型组、高压氧组、药物组、高压氧+药物组,每组8只,用高压氧或(和)复方海蛇胶囊干预各模型组4周后,行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力。结果:①水迷宫平均逃避潜伏期比较,高压氧组(41.15±6.75s)、药物组(44.11±6.05s)和高压氧+药物组(29.32±3.72s)均明显短于梗死模型组(67.05±9.00s)(P<0.05);高压氧+药物组均明显短于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。②平均游泳路程比较,高压氧组(7631.89±1277.73mm)、药物组(8114.48±1091.82mm)和高压氧+药物组(5699.27±1339.82mm)均明显短于梗死模型组(12492.46±2161.74mm)(P<0.05);高压氧+药物组均明显短于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。③跨越原平台位置的次数比较,高压氧组(2.74±0.65次)、药物组(2.25±0.87次)、高压氧+药物组(3.82±0.96次)跨越平台次数较梗死模型组(1.06±0.55次)明显增加(P<0.05);高压氧+药物组明显多于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。④平台滞留时间的比较,高压氧组(30.05±3.58s)、药物组(30.24±5.13s)、高压氧+药物组(35.29±3.51s)平台滞留时间较梗死模型组(24.52±4.05s)明显增加(P<0.05);高压氧+药物组明显长于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义。结论:高压氧或复方海蛇胶囊治疗均可改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,如果二者联合使用治疗,大鼠学习记忆能力改善更为显著。     

慢性血管性痴呆模型大鼠脑胶质细胞反应及基质金属蛋白酶9的表达

背景：胶质细胞及炎性细胞因子参与了血管性痴呆慢性脑缺血的炎性反应过程。目的：观察慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠的脑组织中胶质细胞反应及基质金属蛋白酶9的表达。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组和模型组3组。模型组通过永久性结扎大鼠的双侧颈总动脉导致慢性脑缺血建立动物模型,假手术组除不结扎双侧颈总动脉外,其余处理与模型组相同。各组大鼠行Morris水迷宫试验检测大鼠的学习记忆能力。采用病理染色、免疫组化的方法,观察大鼠在缺血后不同时间点脑组织中胶质细胞及基质金属蛋白酶9的病理改变。结果与结论：缺血早期的病理变化主要发生在皮质、基底前脑、海马、胼胝体、颞叶皮质及视束,部分出现小的梗死灶。缺血1个月后,白质髓鞘脱失、间质疏松呈空泡样改变逐渐明显,神经轴索连续性完好。小胶质细胞、星形胶质细胞及基质金属蛋白酶9的表达在缺血早期以皮质及海马为主,缺血后期以室周白质及白质疏松处更为明显,海马区表达则减少。