CNP-G3法与PNP-G7法测定α-淀粉酶的比较

通过对α-淀粉酶的两种测定方法进行比较,结果表明2-氯-4-硝基苯酚-α-麦芽三糖苷(CNP-G3)法与对硝基苯酚-α-麦芽七糖苷(PNP-G7)法相关性良好,CNP-G3法的优点为不需要辅助酶,直接、一步测定α-淀粉酶的活性,试剂稳定,CNP-G3的用量少,价格低廉,是较为理想的测α-淀粉酶的方法。     

利用CNP-G3法测定淀粉酶的实验室评价

目的：对亚利生物试剂公司提供的以2-氯-4-硝基苯-α-麦芽三糖（GNP-G3）为底物测定淀粉酶的方法进行实验室评价，并与以对硝基苯麦芽七糖（C7-pNP）为底物的亚乙基封闭法（EPS）相比较，选出一种相对较适用于常规淀粉酶测定的CNP-C3法。方法：利用日立7150型全自动生化仪，对CNP-C3法进行稳定性试验、线性试验、重复性试验、干扰试验及方法对比试验，并调查其正常参考价值范围。结果：亚利试剂线性可达2500U/L；血红蛋白、葡萄糖、抗坏血酸、胆红素等干扰物质对该试剂几乎无干扰；批内变异系数为0.66%-1.46%。亚利试剂（Y）与EPS法（X）相比：r=0.9968，Y^=1.0386X-2.9619(n=117)，其试剂至少可稳定6个月。结论：试验表明，亚利试剂重复性好，线性范围宽，抗干扰因素强，与EPS法有良好的相关性。适用于常规淀粉酶测定。     

采用2-氯-4-硝基苯酚-α-麦芽三糖苷为底物的淀粉酶直接速率测定法

血、尿α－淀粉酶测定在临床上主要用于急性胰腺炎等疾病的诊断。到目前为止，测定方法已不下200种[1]。以淀粉及染色淀粉为底物的测定方法因底物本身结构组成的不确定性及酶解产物的不均一性，使酶促反应不能按化学式量进行计算，所以应用不同来源、厂家、批号的淀粉作底物时，测定结果差别较大，方法不易标准化。另外，染色淀粉中色素的加入量不易控制，操作繁杂，不适合自动分析。以结构组成确定的麦芽寡糖为底物的酶偶联测定法[2]克服了以淀粉及染色淀粉为底物的不足，但该法是通过偶联葡萄糖激酶、6—磷酸葡萄糖脱氢酶等测定由底物生成…     

2-氯-4-硝基苯-麦芽三糖苷作为α-淀粉酶底物的实验研究

目的：研究α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-麦芽三糖苷（CNP-G3）酶促反应过程中的激动剂，抑制剂，最适pH、米氏常数等。方法：以测定酶促反应速度的方式分别进行综合。结果：阳离子中仅钙离子和氨离子对α-淀粉酶有轻度的激活作用，阴离子中的氯离子对α-淀粉酶有强大的激活作用，约是迭氮钠的4倍，醋酸离子也有弱激活作用。硫酸，磷酸氢，碳酸离子无激活作用；乙二胺四乙酸是酶的强抑制剂；酶的最适pH为5.9-6.1；酶以CNP-G3为底物时的Km值约为0.22mmol/L;麦芽糖对α-淀粉酶有显著的抑制作用；EGTA为钙离子螯合剂，可调节反应速度，结论：α-淀粉/CNP-G3酶促反应系统研究可用于酶活性和激动剂测定。     

高活性α-淀粉酶的分离与纯化

目的研究高活性α-淀粉酶分离与纯化的新方法。方法运用吸附树脂和离子交换的方法,分离纯化α-淀粉酶。结果吸附树脂分离纯化所得α-淀粉酶的活性约为60000U/g,DEAE-纤维层析所得α-淀粉酶的活性在吸附树脂法的基础上提高了约1倍。结论该方法分离纯化α-淀粉酶简便,成本低,便于工业化生产。     

用2—氯—4—硝基苯—a—半乳糖麦芽糖苷作底物测定总淀粉酶和胰腺淀粉酶

目的　建立一个稳定的单一试剂直接测定总淀粉酶和胰腺α 淀粉酶方法。　方法　用 2 氯 4 硝基苯 α 半乳糖麦芽糖苷 (Gal G2 α CNP)作底物 ,同时用麦芽唾液淀粉酶抑制物直接测定总淀粉酶和胰腺淀粉酶。淀粉酶水解Gal G2 α CNP为半乳糖麦芽糖苷和CNP ,在 4 0 5nm波长测定。　结果　本法不需要其它工具酶 ,延迟相较短 ( <60s) ,线性范围可达 1 0 0 0U/L ,并且试剂的稳定性很好。精密度分析批内CV<2 .2 5% ,总CV <3 .0 5。本法 (Y)与IFCC推荐方法 (X)比较 :r=0 .9997,Y =1 .3 74 5X +0 .0 4。　结论　本法测定体液中总淀粉酶和胰腺淀粉酶活性非常简便和灵敏 ,适用于常规分析。     

3,5-二硝基水杨酸法测定不同高度麦苗中淀粉酶的活性强度

目的检测麦苗在不同生长高度时淀粉酶活性变化情况。方法采用3,5-二硝基水杨酸法测定不同高度麦苗中淀粉酶的活性强度。结果麦苗在不同的生长高度时淀粉酶活性不同,淀粉酶活性强度随麦苗生长高度的增加而减小。结论小麦苗含有丰富的维生素、氨基酸及淀粉酶,但是淀粉酶的活性强度随麦苗的高度增加而降低,因此,可根据嫩麦苗中淀粉酶活性情况,确定嫩麦苗适宜高度。     

肌酐酶-肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐

目前肌酐酶法的测定主要有两种 ,一种是监测肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶变化的酶动力学测定[1] ,另一种为肌酐氨基水解酶偶联肌氨酸氧化酶和过氧化物酶发生Trinder反应的酶动力学测定[2 ] 。其中 ,后者由于试剂价格相对较低 ,不受血氨和其他干扰物的影响 ,目前已有大量的商     

HPLC法测定沙棘油软胶囊中α-维生素E的含量

沙棘油软胶囊是由胡颓子科植物沙棘 H ippol-phae rhamnoides L.种子油经加工所制成的软胶囊制剂。具有消食化滞、和胃降逆、活血化瘀等功能 ,临床用于气滞血瘀、胃气上逆所致的脘腹痛、嗳气返酸、胸闷、纳呆等症 ,取得满意疗效。沙棘油具有较高的医药价值 ,其中含有多种生物活性物质 ,如维生素A,B,C,D,E,F,K,γ-和β-胡萝卜素等 ,还含有亚油酸、亚麻酸、脑磷脂、卵磷脂等成分。α-维生素 E是沙棘油中主要有效成分 ,其含量测定方法有薄层扫描法[1] 、气相色谱法 [2 ] 和高效液相色谱法[3 ] 。本实验采用 HPLC法对沙棘油软胶囊中α-维…     

3,5-二硝基水杨酸法测定多糖含量的研究进展

3,5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)是一种新的多糖含量测定的方法,此法已被用于植物药、中成药、海洋生物药等药物中多糖成分的含量测定。DNS法测多糖含量具有操作简便、快速、灵敏度高、杂质干扰较小等优点。本文就近年来关于DNS法测定多糖含量的研究进行综述。     

人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达

目的利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3-4组件(human laminin Alpha4 LG3-4 Module, hLNα4LG3-4)蛋白并检测其抗原性.方法采用RT-PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3-4的cDNA片段,T/A克隆法将其插入pMD-18T载体进行测序.亚克隆法构建原核表达载体pET-28a-LG3-4,在BL21(DE3)中表达hLNα4LG3-4融合蛋白.融合蛋白经SDS-PAGE鉴定、Ni-NTA亲和层析纯化及Western印迹分析.结果成功获得hLNα4LG3-4 cDNA片段,与GenBank中序列同源性为98%,突变碱基不改变蛋白的氨基酸序列.12%SDS-PAGE电泳检测显示:经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28a-LG3-4细菌裂解液总蛋白中出现一条分子量为44×103的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达95%以上,且Western印迹可特异地检测到目的蛋白所对应转移带.结论成功表达和纯化了hLNα4LG3-4蛋白,从而为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础.     

(农药-纤维素)酯类缓释剂的合成及水解性能的研究

以纤维素和羧甲基纤维素作为载体,将带有羧基的2,4-二氯苯氧乙酸和带有羟基的五氯酚等农药分别与它们相结合。制备了分子链上键合有农药的高聚物。进而通过水解试验其释放农药的性能。结果表明:农药在纤维素链上的替代度可以通过控制反应条件加以调节,所制备的键合有农药的高聚物可以自行水解而缓慢地释放出农药,并随水解时间的延长,释放速度逐渐减慢。     

活性氯酚3-氯-3’,4’-二羟基二苯甲酮固体分散体的制备及体外溶出研究

目的制备活性氯酚3-氯-3’,4’-二羟基二苯甲酮(HP46)的固体分散体(solid dispersion,SD),以提高HP46的体外溶解度和溶出度。方法以聚乙烯吡咯烷酮(PVPK30)为载体,吐温(Tween80)为表面活性剂,采用溶剂法制备HP46的固体分散体,优化固体分散体组成,并进行体外溶出研究。运用粉末X-射线衍射(XRD)和差示热量扫描(DSC)分析固体分散体中药物的分散状态。结果 HP46固体分散体组成的最优质量比为HP46-PVPK30-Tween80 1∶3∶1,XRD和DSC结果表明HP46以无定型或分子状态存在于载体中,体外溶解度和溶出速率显著提高,溶解度为1 319.4μg/ml,在20 min内累积溶出率为77.23%,溶解度和溶出度较原料药分别提高约30倍和8倍。结论以PVPK30为载体,加入表面活性剂Tween80,可有效提高HP46的溶解度和溶出度,固体分散体最优质量比为HP46-PVPK30-Tween80 1∶3∶1。     

17β-羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮衍生物的生物活性研究

通过研究17β-羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮(Ⅱ)的一系列衍生物的孕酮受体亲和力及人蜕膜细胞抑制活性和大鼠抗着床活性,结果表明,4,17β-二羟基-7α-甲基-4-雌烯-3-酮(Ⅲ)的活性均属最佳,其孕酮受体结合率为R 5020的80.64％,抗着床100％有效剂量为0.02mg/kg。其它生物活性实验表明,在6mg/kg剂量下,Ⅲ对大鼠的抗早孕有效率达到100％;在小鼠子宫增重实验中,Ⅲ的雌激素活性约为雌二醇的四分之一。     

4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶的制备工艺研究

目的对4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶制备工艺进行优化。方法选择甲苯作为反应溶剂,氧氯化磷稍过量,反应毕直接用氢氧化钠中和,分层萃取,蒸出溶剂即得产品。结果通过对4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶制备工艺的优化,减少了氧氯化磷的用量,缩短反应时间至2h,降低反应pH值至接近中性。结论本工艺有效地减少了对环境的污染,降低了生产成本,有利于提高经济效益。     

用薄层色谱-光密度法和比色法定量测定3种黄连木属植物中的α-生育酚

作者采用改良的薄层色谱-光密度法和比色法对3种黄连木属植物粘胶乳香树Pistacia lentiscus L．及其变种P．lentiscus var．chia和笃耨香树P．terebinthus中的α-生育酚进行了定量测定，并对这2种方法进行了比较。     

1,4-二氢-2,6-二甲基4-(3-硝基苯基)-5-甲氧羰基-3-吡啶羧酸的合成

目的 改进1,4 二氢 2,6 二甲基 4 (3 硝基苯基) 5 甲氧羰基 3 吡啶羧酸的合成方法.方法 非均相反应中引入相转移催化剂,分析时间、溶剂、催化剂对反应的影响.结果 以四正丁基氯化铵作相转移催化剂,甲醇作溶剂、饱和NaOH水溶液中反应4 h,得到目标产物,产率为81%.结论 改进的反应条件可以较大缩短反应时间,达到选择性水解的目的 .     

光学活性苯乙胺拆分D,L-2-(4-氯苯基)-3-甲基丁酸

以光学活性苯乙胺(PEA)为拆分剂,在甲醇、乙醇和异丙醇溶液中,考察不同原料配比下D,L-2-(4-氯苯基)-3-甲基丁酸(CPA)的手性拆分效果,确定了最佳的拆分条件,用1H-NMR表征了产物的结构特征。结果表明:以φ=0.70的乙醇溶液为溶剂,nCPA∶nPEA=1∶0.7,进行非对映体盐法拆分,产物(S)-( )-2-(4-氯苯基)-3-甲基丁酸[(S)-( )-CPA]的收率达到68.0%,光学纯度达到97.6%。     

竞争性α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑恶唑丙酸受体拮抗剂研究进展

α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑恶唑丙酸（AMPA）受体是游离型谷氨酸受体,广泛分布于中枢神经系统,介导快速兴奋性突触传递。越来越多的证据表明,其在突触可塑性及中枢敏化中发挥重要作用,并且与神经系统疾病关系密切。过度刺激AMPA受体产生兴奋性毒性会导致神经元损伤,引发癫痫、肌萎缩侧索硬化和帕金森病等一系列神经系统疾病的发生。竞争性AMPA受体拮抗剂能够有效下调AMPA受体活性,对预防和治疗神经系统疾病意义重大。本文对竞争性AMPA受体拮抗剂的研究进展进行综述。     

(2S,3S)-N-苄氧羰基-4-苯基-3-氨基-1-氯-2-丁醇的合成与结构表征

以天然产物中提取的L-苯丙氨酸为原料,经氨基保护、重氮化反应、氯化和还原反应后合成了(2S,3S)-N-苄氧羰基-4-苯基-3-氨基-1-氯-2-丁醇。并以高效液相色谱-质谱联用技术、单晶X射线衍射等方法对产品进行了分析和结构表征。