口服脊髓灰质炎减毒活疫苗猴体神经毒力试验病理结果分析

目的分析口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)猴体神经毒力试验病理学改变特征,对OPV猴体神经毒力试验两种注射方法进行评价。方法对1988～2004年间OPV猴体神经毒力试验病理结果进行分析。结果脑内注射法总合格率为99.38%,脊髓内注射法总合格率为98.14%,两种注射方法之间差异无显著意义。脊髓内注射法检定不合格的3批疫苗,经脑内注射法检定也不合格。脊髓内注射法90%以上的Ⅲ型疫苗(中Ⅲ2株)平均病变得分小于SabinⅢ型参考品,提示中Ⅲ2疫苗株的减毒程度明显高于SabinⅢ型;单批疫苗检定与多批疫苗合并检定,其病变得分之间差异无显著意义;脑内注射法原倍疫苗剂量组与10-1稀释度剂量组病变率及病变程度构成比差异均无显著意义;SabinⅠ型病变率(4.88%)高于SabinⅡ型(0.65%)及中Ⅲ2(0.67%),而SabinⅡ型及中Ⅲ2之间病变率差异则无显著意义;复试组病变发生率6%(6/100)高于初试组0.66%(12/1812),差异有显著意义。结论脑内注射法与脊髓内注射法均是OPV猴体神经毒力试验的敏感方法,病理结果准确可靠。     

口服脊髓灰质炎活疫苗（OPV）猴体神经毒力试验国内外病理？…

根据荷兰国立公共卫生与环境保护研究所（ＮＩＰＨＥＰ）和昆明医学生物学研究所的要求,英国国家生物制品标准和检定所Ｍａｒｓｄｅｎ教授,在１９９４－１９９６年,按ＷＨＯ推荐的方法,对昆明医学生物学研究所ＯＰＶ猴体神经毒试验的病理切片进行复检。经复检４批毒种,９批疫苗和８批参考品的结果完全符合ＷＨＯ要求,但两处病主炉分不完全一致,而接种部位和中脑部位的选择,麻痹的和阳性的猴数的计算,针迹部位病变的判定和复     

猴体神经毒力试验在减毒活疫苗安全性评价中的应用

出于对减毒活疫苗的安全性考虑,当从具有中枢神经系统靶向性的野毒株中分离得到减毒疫苗株时,大多数国家的药品注册法规均要求开展猴体神经毒力研究,以评价减毒疫苗株的安全性。但猴体神经毒力试验存在不同法规间的差异、对个别减毒活疫苗不适用等问题。在开展猴体神经毒力试验前,应综合考虑野毒株的临床学特性、已上市疫苗的临床应用经验、疫苗的体外评价及体内试验结果,最终确定是否有必要开展猴体神经毒力研究。本文对猴体神经毒力试验存在的问题、替代方法及其在不同减毒活疫苗安全性评价中的应用作一综述。     

口服脊髓灰质炎活疫苗(OPV)猴体神经毒力试验国内外病理学检定结果分析

根据荷兰国立公共卫生与环境保护研究所（NIPHEP）和昆明医学生物学研究所的要求,英国国家生物制品标准和检定所Marsden教授,在1994～1996年,按WHO推荐的方法,对昆明医学生物学研究所OPV猴体神经毒试验的病理切片进行复检。经复检4批毒种,9批疫苗和8批参考品的结果完全符合WHO要求,但两处病变记分不完全一致,而接种部位和中脑部位的选择,麻痹的和阳性的猴数的计算,针迹部位病变的判定和复试标准等,尚需进一步改进。     

应用转基因小鼠作为脊髓灰质炎活疫苗神经毒力实验动物模型的研究

选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒 ,3批活疫苗样品 (WHO/Ⅲ ,参考疫苗 ;93/ 36 3和 3J 2批猴体神经毒力实验不合格的疫苗 )和 1株标准强毒株 (Leon) ,脊髓内注入携带有人细胞脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠 (PVRTg2 1)。临床观察和组织病理学检查表明 ,Leon病毒的毒力极强 ,2 .0LogTCID50 可使 10 0 %小鼠麻痹和死亡。WHO/Ⅲ参考疫苗毒力最弱 ,5 .5LogTCID50 才能使 81.7%小鼠麻痹和 5 1.7%小鼠死亡。另 2种疫苗样品的毒力都高于参考制品。各项观察指标随毒力的不同而有明显差别 ,与猴体神经毒力实验结果一致。证明PVRTg2 1小鼠可以用作评价脊髓灰质炎活疫苗毒力试验的动物模型 ,也可用于病毒学和流行病学研究     

应用转基因小鼠作为脊髓灰质炎活疫苗神经毒力实验动物模 …

选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒,３批活疫苗样品（ＷＨＯ／Ⅲ,参考疫苗,９３／３６３和３Ｊ２批猴体神经毒力实验不合格的疫苗）和１株标准强毒株,脊髓内注入携带有人细胞脊髓同炎病毒受体转基因小鼠。临床观察和组织病理学检查表明,Ｌｅｏｎ病毒的毒力和极强,２．０ＬｏｇＴＣＩＤ５０可使１００％小鼠麻痹和死亡。ＷＨＯ／Ⅲ参考疫苗毒力最弱,５．５１ＬｏｇＴＣＩＤ５０才能使８１．７％小鼠力５１．７％小鼠死亡。另２种疫苗样品     

口服脊髓灰质炎减毒活疫苗的热稳定性试验

本试验是受WHO委托的OPV热稳定性协作研究项目。目的是验证和完善WHO推荐的OPV热稳定性实验,(即:OPV在37℃放48小时后,病毒滴度不能低于10~(5.65)TC ID_(50)/剂,下降不得超过0.5log TCID_(50)/剂。)试验结果表明WHO推荐的OPV热稳定性实验是必要的也是可行的。我国生产的OPV糖丸的热稳定性急待改进,液体疫苗是值得推荐的剂型。     

2016—2020年口服脊髓灰质炎减毒活疫苗批签发汇总及质量分析

<正>脊髓灰质炎（简称脊灰）是由脊灰病毒感染引起的急性传染病,严重者可瘫痪甚至死亡,全球免疫接种疫苗是消灭脊灰的唯一解决方案[1]。几十年来,口服脊灰减毒活疫苗（oral polio vaccine,OPV）一直是免疫接种的支柱,是根除野生型脊灰病毒工作的重要组成部分。OPV能够在胃肠道中复制,诱导肠道黏膜免疫,并在个体随后接触活病毒时减少病毒脱落,有效建立免疫屏障,且具有产能高、价格便宜、     

细胞工厂在制备口服脊髓灰质炎减毒活疫苗中的应用

目的采用细胞工厂替代转瓶培养Sabin株脊髓灰质炎病毒,制备脊髓灰质炎减毒活疫苗。方法用细胞工厂和15 L转瓶分别培养人二倍体细胞(2BS),扩增至36代后,分别接种0.20 MOI的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎工作代毒种,待细胞病变达100%时收获病毒液,加入保护剂(4.5 mol/L氯化镁溶液),制备单价疫苗,分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个型别的单价疫苗按照病毒数10∶1∶6的比例混匀,制备成三价疫苗半成品,分装入1 ml西林瓶中(每瓶为10人份剂量),即为疫苗成品。采用微量滴定法测定疫苗原液及成品的病毒滴度,同时进行其他各项检定,并考察疫苗成品的稳定性。结果采用相同的感染复数接种病毒,细胞工厂制备的3个型别疫苗原液的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗原液,Ⅰ型平均滴度高0.17 log10CCID50/ml,Ⅱ型平均滴度高0.33 log10CCID50/ml,Ⅲ型平均滴度高0.27 log10CCID50/ml;细胞工厂制备的疫苗成品3个型别的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗,三价疫苗的平均滴度均高于6.24 log10CCID50/ml,符合国内外标准;疫苗原液及疫苗成品的其他各项检定均合格;细胞工厂制备的3批疫苗成品于37℃放置2 d,疫苗的总病毒含量不低于6.24 log10CCID50/0.1 ml,且病毒滴度下降未超过0.5 log10CCID50/0.1 ml,于2~8℃放置9个月,疫苗的总病毒含量仍不低于6.24 log10CCID50/0.1 ml,均符合WHO的标准要求。结论利用细胞工厂替代转瓶培养2BS细胞制备脊髓灰质炎减毒活疫苗,可获得高于转瓶培养3个型别疫苗的滴度,且工艺稳定,质量可控,可用于规模化脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产。     

乙型脑炎减毒活疫苗毒力稳定性分析

目的分析乙型脑炎减毒活疫苗毒力稳定性。方法按照《中国药典》三部(2010版)及武汉生物制品研究所有限责任公司《乙型脑炎减毒活疫苗乳鼠返祖传代试验及小鼠脑内致病力试验SOP》,对随机抽取的28批乙型脑炎减毒活疫苗进行乳鼠返祖传代试验的脑内致病力检测,同时测定发病乳鼠脑组织悬液的病毒滴度,并应用SPSS 13.0软件对28批疫苗病毒滴度、发病乳鼠脑组织上清病毒滴度及发病乳鼠脑内病毒对小鼠的脑内致病力检测结果进行Kendall相关性分析。结果 28批乙脑减毒活疫苗病毒滴度为6.0~7.1 Lg PFU/ml,发病乳鼠脑内病毒对小鼠的脑内致病力(LD50)均低于3.0 Lg LD50/0.03 ml,发病乳鼠脑组织上清病毒滴度为5.8~7.0 Lg PFU/ml。发病乳鼠脑内病毒对小鼠的脑内致病力与疫苗滴度及发病乳鼠脑组织上清病毒滴度间不存在相关性,而疫苗滴度与发病乳鼠脑组织上清病毒滴度间低度相关。结论乙型脑炎减毒活疫苗毒力稳定,乳鼠传代返祖试验及其判定标准科学严谨,用于疫苗的质量控制是可行的,进一步表明SA14-14-2株遗传稳定性良好。     

麻疹乙脑二联活疫苗猴体神经毒力试验

目的 观察麻疹乙脑二联活疫苗对猴体的安全性。方法 应用麻疹乙脑二联活疫苗注射恒河猴 脑内和脊髓,以麻疹和乙脑单价苗作对照,进行临床体征和组织病理学观察以及抗体测定。结果 全部试验猴临 床体征无异常反应,组织病理学检查联苗组大脑皮质和中脑黑质、颈髓仅见轻微炎症反应,病变均＜５％,未见神经 细胞坏死现象。麻疹抗体应答较好,乙脑抗体有轻微的升高。结论 麻疹乙脑二联活疫苗的神经毒力与两种单价 苗比较未见增强。     

甲型肝炎灭活疫苗免疫原性的猴体实验

甲型肝炎病毒TZ84毒株经 2BS二倍体细胞培养制备成甲型肝炎灭活疫苗。采用普通狨猴和恒河猴进行疫苗的保护性研究。结果均有较好的抗体反应 ,而且对甲型肝炎病毒鲁兴株 (强毒株 )的攻击亦均有保护作用。表明该疫苗有较好的免疫效果。     

口服脊髓灰质炎疫苗效力标准品国际协作研究

目的评价第2代脊髓灰质炎疫苗效力国际标准品的适用性,并确定其标示滴度。方法由WHO参考实验室英国国家检定所(NIBSC)组织协作研究,并提供测定样本及单克隆抗体,共有13个实验室参加,各实验室分别采用单抗及内部参考品进行测定,结果递交NIBSC进行总结。结果本实验室对各样本测定的结果与各实验室测定结果均值总体上是一致的,变异系数基本在5%以下。结论本实验室目前采用的病毒滴度测定方法及试剂的敏感性、标准化程度均与国际一致。     

犬用口服狂犬病疫苗的研究

用我国分离并传代适应的狂犬病病毒固定毒22号毒株作为家犬口服疫苗毒株。22号毒株活毒疫苗用于家犬一次口服(拌入煮熟待凉的粥内,在口腔停留约30秒至2分钟服完)即可获得免疫。免疫力可持续15个月,至少与国外Flury LEP疫苗相同。流行病学观察19,425只家犬证明疫苗安全、有效。犬用口服疫苗在我国属首创,国外仅有用于狐狸的口服疫苗,用于家犬的同类制品未见报道。     

应用金黄地鼠进行流行性出血热灭活疫苗效力试验的研究

以流行性出血热灭活疫苗原苗或稀释苗免疫地鼠，首针免疫后4周用野鼠型病毒A537株或家鼠型病毒L99株攻击，攻击后第7天取肺和脾以IFA检查EHF病毒抗原。所检测的3批疫苗均具有较好的保护效果，并有一定的规律性。表明该动物敏感，可作为流行性出血热疫苗效力试验的动物模型。     

口服轮状病毒活疫苗LLR-85株的选育及鉴定

一株羊轮状病毒经初生小牛肾原代细胞传代，定名为LLR－85株。按Jennerian种痘法的原理，取第37代和第19代毒种，作为人用口服轮状病毒活疫苗的候选疫苗株。疫苗株电镜检查形态典型，抗原鉴定为A群、亚群Ⅰ、血清型G10和P12。电泳型为长型，11条带。病毒滴度可达105.0～7.0TCIDEA50。经无菌试验、支原体检查、外源因子检查及动物安全试验等项目检定，均符合我国规程要求。疫苗株遗传性状稳定，有望用于婴幼儿轮状病毒急性腹泻的预防。     

新型口服霍乱疫苗人体反应及效果

用工程菌产生的霍乱毒素 B 亚单位(BS)和灭活霍乱弧菌(WC)构建成新型 BSWC 口服霍乱疫苗,经志愿者口服免疫证实安全而且免疫原性良好,能刺激人体产生强的抗菌及抗毒免疫,其所引起的肠道免疫和血清抗体与用天然霍乱毒素纯化的 BS 构建成的同型疫苗效果相似,因此,可作为预防霍乱的候选苗。