粉防己碱对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B, bFGF和相关癌基因表达的影响

用［³H］胸腺嘧啶核苷 (［³H］TdR)参入法, 电镜, 免疫组化, 原位杂交方法, 在自发性高血压大鼠(SHR)观察了粉防己碱(Tet, 0.03 μmol·kg^-1·d^-1×8周 ig)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用及对生长因子PDGF-B, bFGF的抗原表达及其相关癌基因c-sis, c-myc mRNA表达的影响. 结果发现: Tet在降低SHR血压(P<0.01)同时, 能减少VSMC的线粒体,粗面内质网和［³H］TdR参入量(P<0.01), 并能逆转VSMC增殖时PDGF-B, bFGF抗原(P<0.05)及c-sis, c- myc mRNA的表达增强. 提示: Tet抑制SHR的VSMC增殖与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关.     

粉防己碱对高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

探讨了粉防己碱 (Tet)抑制培养的大鼠主动脉平滑肌细胞 (AVSMC)增殖的作用 ,MTT法分析细胞增殖 ,[3 H]TdR参入法分析细胞DNA合成 .结果显示 :①肾血管性高血压〔RH ,二肾一夹 (2K1C)术后18周〕大鼠AVSMC超微结构呈典型的合成细胞特征 ;②RH大鼠AVSMC具有更活跃的增殖倾向 ,血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和去甲肾上腺素 (NE)刺激下指数增长期细胞数和在NE刺激下的AVSMC生长率均明显增高 ;③Tet(50mg·kg- 1·d- 1,po ,2K1C术后 9周始 ,连续 9周 )治疗组的AVSMC对NE和AngⅡ诱导的细胞增殖反应性和生长率较RH组明显降低 ;④对RH组和伪手术组大鼠的AVSMC ,Tet(0 .1～ 10μmol·L- 1)体外给药可浓度依赖性地抑制NE或AngⅡ诱导的增殖和 [3 H]TdR参入 .研究表明 ,RH大鼠AVSMC对NE和AngⅡ促增殖作用敏感性及反应性增高 ;Tet可降低其对NE和AngⅡ的反应性 ,抑制AVSMC增殖和DNA合成 .     

牛磺酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

观察了牛磺酸对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和Ｗｉｓｔａｒ－Ｋｙｏｔｏ大鼠（ＷＫＹ）动脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响．结果显示牛磺酸（１．０ｍｍｏｌＬ－１）虽然抑制ＷＫＹ的ＶＳＭＣ的增殖，对ＳＨＲ的ＶＳＭＣ的生长却无影响，同时发现牛磺酸（１０ｍｍｏｌＬ－１）也不能减低小牛血清所致的ＳＨＲ的ＶＳＭＣ内肌醇磷脂量的异常增加．提示牛磺酸虽然可以通过抑制ＷＫＹ的ＶＳＭＣ增殖进而在防治某些血管性病变中发挥作用，但是对于ＳＨＲ这一遗传性高血压大鼠，牛磺酸既不能抑制ＶＳＭＣ的异常增殖也未能阻止肌醇磷脂量的增加．     

粉防己碱抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化

目的：观察粉防己碱对自发性高血压大鼠心肌胶原和心肌僵硬度的作用。方法：测定羟脯氨酸表示胶原的量，胃酶抽提法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方法测定胶原Ⅰ／Ⅲ型比例，离体灌注大鼠心脏测定左室心肌舒张僵硬度。结果：粉防己碱显著降低心肌胶原浓度和含量，降低胶原Ⅰ／Ⅲ型比例，改善心肌舒张僵硬度。结论：粉防己碱因其有效的抗纤维化作用，能逆转心肌舒张功能障碍。     

卡托普利对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因和抑癌基因的影响

目的：观察卡托普利（CaP）对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。方法：氚-胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）参入，电镜，原位来交及Northernblot杂交。结果：CaP在降低SHR血压同时，能减少VSMC的线粒体，粗面内质网及3H－TdR参入量（P<0.01），并能逆转c－fos，c－myc，c－sis原癌基因mRNA表达增强（P<0.05或0.01），p53抑癌基因mRNA表达减弱（P＜0．01）。结论：Cap能抑制SHR的VSMC增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。     

粉防己碱和依那普利逆转高血压大鼠血管重构粉防己碱和依那普利逆转高血压大鼠血管重构

目的观察粉防己碱(Tet)和依那普利(Ena)对高血压大鼠血管重构的逆转作用。方法用两肾一夹(2K1C)法制备肾血管性高血压(RH)大鼠病理模型,组织切片图像分析法评价大动脉、小动脉和阻力血管结构改变及药物的影响。结果RH大鼠主动脉、尾动脉和股动脉湿重增加;腹主动脉、尾动脉、心脏冠脉小血管、肾小动脉和肠系膜3级小动脉横截面积、中膜厚度和壁/腔比值均明显增大,肾小动脉管壁平滑肌细胞(VSMC)数明显增加。2K1C术后9周给予Tet或Ena连续9周,上述血管变化明显减轻。结论RH大鼠各级动脉均呈肥厚性重构,肾小动脉管壁伴有VSMC增生;Tet和Ena可有效逆转RH大鼠血管重构。     

粉防己碱促进和敏化肾性高血压大鼠血管平滑肌细胞凋亡

目的：从大鼠血管平滑肌细胞凋亡角度探讨粉防己碱逆转肾血管性高血压血管重构的机制。方法：两肾-夹法制备肾性高血压模型,原位末端标记法检测主动脉和尾动脉动脉壁平滑肌细胞凋亡数量;[3H]-TdR掺入和流式细胞术分析粉防己碱对培养细胞凋亡率的影响。结果：粉防己碱能够诱导血管平滑肌细胞凋亡,并使低血清和TNFα、转化生长因子（TGFβ1）诱导的细胞凋亡率增加。结论：粉防己碱逆转肾性高血压大鼠（RHR）血管重构的机制可能与诱导和敏化RHR血管平滑肌细胞凋亡有关。     

色满卡林对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的：观察色满卡林对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法：30只12 wk龄SHR,随机分为高血压组、色满卡林组,另设正常对照组。色满卡林组给予色满卡林0.6 mg·kg~(-1)·d~(-1),分2次灌胃；另2组每日给予等量的生理盐水,共16 wk。监测尾动脉收缩压。用免疫组化法检测Bcl-2,Bax和PCNA蛋白表达。荧光标记TUNEL法检测VSMCs凋亡,计算VSMCs凋亡指数(SMAI)。结果：高血压组与正常对照组比较,收缩压明显增高(P＜0.05)；VSMCs中的Bcl-2,PCNA蛋白表达明显增强(P＜0.05)；SMAI明显减少(P＜0.01)；Bax蛋白表达2组间差异无显著意义(P＞0.05)。与高血压组比较,色满卡林组尾动脉收缩压呈降低趋势,但差别无显著意义(P＞0.05)；VSMCs的Bcl-2和PCNA蛋白的表达减少(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值下降；SMAI增加(P＜0.05)。结论：色满卡林促进了SHR的VSMCs凋亡,可能机制是通过调节VSMCs的Bcl-2/Bax蛋白表达平衡。     

DDPH对血管平滑肌细胞增殖及PDGF-B、bFGFc-sis、c-myc的影响

目的：观察１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对血管平滑肌细胞增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃ表达的影响。方法：内皮素建立培养的ＶＳＭＣ增殖模型，氚—胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）参入法，流式细胞术，１９９７－０３－２３收稿，１９９７－０４－０４修回＊国家教委优秀年轻教师基金资助项目１同济医院心内科，武汉４３００３０作者简介：熊一力，女，４１岁，博士后钱家庆，男，６３岁，博士生导师，药理教研室主任，中国药理学会常务理事免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交方法测定。结果：ＤＤＰＨ能逆转内皮素所致的３Ｈ－ＴｄＲ参入量增多，阻止ＶＳＭＣ由静止期（Ｇ０／Ｇ１期）进入ＤＮＡ合成期（Ｓ期）和有丝分裂期（Ｇ２／Ｍ期），并能逆转内皮素引起的ＰＤＧＦ－Ｂ，ｂＦＧＦ抗原，ｃ－ｓｉｓ，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达增强。结论：ＤＤＰＨ能抑制ＶＳＭＣ增殖，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。     

粉防己碱对犬多种血管平滑肌的作用

观察了粉防己碱（Ｔｅｔ）对犬离体冠状动脉，脑基底动脉和肠系膜动脉平滑肌的作用。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ－１对ＫＣｌ２０及６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１去极化犬冠状动脉呈非内皮依赖性松弛。给格列本脱后，Ｔｅｔ仍可使冠状动脉松弛７４．５％．Ｔｅｔ可使ＫＣｌ所致冠状劝脉收缩的量效曲线右移，最大反应降低，ｐＤ２为４．４其－ｌｇＥＣ５０与其松弛苯福林引起的大肠系膜劝脉收缩的－ｌｇＥＣ５０相近，均为４．１Ｔｅｔ对ＫＣｌ所致犬基底动脉的收缩有明显松弛作风     

粉防己碱对肾血管性高血压大鼠阻力血管反应性的影响

目的　探讨肾血管性高血压 (RH)大鼠阻力血管重构时功能变化特点 ,分析粉防己碱的影响与机制。方法　两肾一夹法制备RH大鼠模型 ,观察肠系膜动脉床和尾动脉对收缩和舒张刺激的反应性。结果　RH大鼠肠系膜动脉和尾动脉对去甲肾上腺素 (NE)诱导的收缩反应性增高 ,最大收缩值增大 ;对乙酰胆碱和硝普钠引起的血管舒张反应性降低 ;对鸟苷酸环化酶 (GC)抑制剂敏感性下降。粉防己碱降低肠系膜动脉的静息阻力和NE诱导的阻力升高幅度 ,改善去内皮后或GC抑制后血管压力及管壁张力。结论　RH大鼠阻力血管对收缩刺激反应性增高 ,对内皮依赖及非内皮依赖性的舒张刺激反应性降低 ;粉防己碱可通过保护内皮和维护细胞GC活性而有效逆转阻力血管功能异常     

粉防己碱对大鼠吗啡戒断反应的影响

目的:研究钙拮抗剂粉防己碱 (Tet)对大鼠吗啡戒断反应的影响。方法··:以剂量递增法形成吗啡依赖模型 ,用纳洛酮催促戒断 ,戒断症状按柳田知司评分法给予评分。结果··:吗啡阳性组戒断症状分值为26.5±s7.1;Tet(30mg·kg-1) +吗啡组和Tet(60mg·kg-1) +吗啡组的戒断症状分值分别为 :11.7±s4.6、6.6±s4.3 ,与吗啡阳性组相比有极显著性差异 (P<0.001)。结论··:Tet能抑制吗啡大鼠依赖的戒断症状。     

卡托普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠TGF-β1表达的影响

目的：探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）卡托普利和血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）拮抗剂氯沙坦对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉和心肌组织转换生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达的影响。方法：12周龄SHR随机分为3组．分别给卡托普利组、氯沙坦组以药物灌胃，不给药物的SHR为对照组，Wistar组给蒸馏水4周，给药前后测尾动脉血压．提取主动脉、心肌组织．RT—PCR半定量法测TGF-β1 mRNA表达。结果：SHR主动脉组织TGF-β1 mRNA表达显著增加．卡托普利和氯沙坦显著降低了SHR主动脉TGF-β1 mRNA的表达（P〈0．05或P〈0．01）。SHR与普通大鼠心肌组织TGF-β1 mRNA表达无差异。结论：早期SHR主动脉TGF-β1 mRNA表达增加，ACEI和AT1拮抗剂可减少主动脉TGF-β1 mRNA的表达．改善血管的重构。     

肾素前体受体依赖性诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖和肥大

目的研究肾素前体通过非血管紧张素Ⅱ途径诱导大鼠血管平滑肌细胞的增殖和肥大。方法利用3 H同位素标记的胸苷和亮氨酸的结合检测血管平滑肌细胞增殖和肥大。肾素受体siRNA进行受体表达抑制。结果肾素前体处理细胞48h后剂量依赖性诱导细胞内3 H同位素标记的胸苷和亮氨酸含量增高(n=6,P<0.05)。而且,20nmol/L肾素前体处理24h后细胞内3 H同位素标记的亮氨酸显著增高(n=6,P<0.05)。预处理血管紧张素Ⅱ受体抑制剂(ARB)坎地沙坦(100nmol/L)和血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂卡托普利(1mmol/L)对20nmol/L肾素前体诱导的细胞增殖和肥大没有作用,然而对于肾素受体siRNA处理后的细胞肾素前体不能引起细胞的增殖和肥大。结论肾素前体诱导血管平滑肌细胞产生的增殖和肥大效应是肾素受体依赖的,而不是通过血管紧张素Ⅱ的产生发挥作用。     

卡托普利对血管平滑肌细胞内pH影响

卡托普利对血管平滑肌细胞内ｐＨ影响１齐建华，章鲁２，王军，顾培坤，金正均，黄明智３（上海第二医科大学药理教研室，２计算机医学应用教研室，３上海市高血压研究所，上海２０００２５，中国）王新明（中国科学院上海细胞生物学研究所，上海２０００３１，中国）关键...     

卡托普利对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因和 …

目的：观察卡托普利（Ｃａｐ）的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。方法：氚－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入，电镜，原位杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。结果：Ｃａｐ在降低ＳＨＲ血压同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网及＾３Ｈ－Ｔｄ参入量（Ｐ〈０．０１），并有逆转ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｓｉｓ原癌基因ｍＲＮＡ表达增强（Ｐ〈０．０     

TGF-α在自发性高血压大鼠心脑肾内的表达

目的：探讨自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）血压升高前后心、脑、肾靶器官内转化生长因子-α（transforming growth factor-α,TGF-α）表达水平的变化及其意义.方法：应用免疫组化SP法及计算机图像分析技术,对幼年和成年SHR大鼠及幼年和成年正常血压对照组京都Wistar大鼠（Wistar-Kyoto,WKY）心、脑、肾TGF-α蛋白的表达水平进行了定量观测.结果：4组大鼠心、脑、肾内均观察到TGF-α阳性细胞,阳性反应产物呈棕色颗粒状.在脑内阳性细胞主要见于大脑皮质和纹状体,在心内分布于心肌细胞中,在肾分布于肾小球足细胞中.对上述3个器官阳性细胞数、积分光密度和灰度值的测量结果显示WKY幼年和成年组及SHR幼年组3组间阳性细胞数及其灰度差别无统计学意义（P＞0.05）,而成年SHR组阳性细胞数及其灰度较其他3组均高（P＜0.05）.结论：成年SHR的TGF-α表达水平上调,可能参与了高血压病时阻力血管的重塑.     

辣椒素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨辣椒素对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖和迁移的影响。方法 体外构建自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞系,分别采用20 μmol·L^-1辣椒素（高剂量组）、10 μmol·L^-1辣椒素（中剂量组）、5 μmol·L^-1辣椒素（低剂量组）和1 μmol·L^-1厄贝沙坦（厄贝沙坦组）直接处理细胞或特异性阻断CD36的表达后,再分别用20 μmol·L^-1辣椒素（高剂量组）、10 μmol·L^-1辣椒素（中剂量组）、5 μmol·L^-1辣椒素（低剂量组）和1 μmol·L^-1厄贝沙坦（厄贝沙坦组）处理细胞,采用MTT法检测VSMCs增殖情况,Boyden趋化小室检测VSMCs迁移情况,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）检测平滑肌22a蛋白（smooth muscle 22a,SM22a）和调宁蛋白（Calponin）mRNA和蛋白的表达水平。结果 辣椒素和厄贝沙坦分别处理VSMCs后,与对照组相比,高、中、低剂量辣椒素组和厄贝沙坦组细胞增殖率和迁移率均有所降低,SM22a和Calponin的表达上调;与厄贝沙坦组相比,高剂量辣椒素组SM22a和Calponin的表达有所上调,中、低剂量辣椒素组SM22a和Calponin的表达均有所下调。特异性阻断CD36的表达后,与对照组相比,高、中、低剂量辣椒素组和厄贝沙坦组细胞增殖率降低,迁移率进一步降低,SM22a和Calponin表达上调;与厄贝沙坦组相比,高、中、低剂量辣椒素组SM22a的表达均有所上调,高、中、低剂量辣椒素组Calponin的表达有所下调。结论 高、中、低剂量辣椒素能够通过上调SM22a和Calponin的表达,抑制CD36的表达,来促进自发性高血压大鼠VSMCs由未分化表型向分化表型转化,从而抑制VSMCs的增殖及迁移和高血压血管重构的发生,促进其动脉管壁恢复正常的生理功能,有助于降低血压。