转基因产品中常见外源基因的克隆与转化

设计带不同酶切位点的引物,分别用PCR扩增植物内源rbcL基因和2种转基因产品中常见的外源基因-CP4-EPSPS基因和BAR基因,并分别与pGEM-TEasyVector连接,克隆到大肠杆菌DH5α中。提取克隆菌落的质粒,并进行酶切鉴定和序列测定。对3个基因的克隆质粒进行相应的双酶切,回收酶切产物,先后转化到受体载体pCAMBW中。最后获得的重组质粒的酶切和PCR鉴定结果表明3个基因已被成功转化到受体载体中。     

转基因大豆食品中外源基因种类及食用安全性分析

自从转基因技术进入中国市场,各种转基因大豆及豆制品逐渐进入人们的餐桌,其安全性成为人们关注的焦点.本文综述了大豆中转入的外源基因种类,并进一步探讨了转基因大豆食品的安全性.     

转基因大豆水酶法制油过程中内、外源基因的分布研究

以挤压膨化过的转基因大豆为原料,大豆油的提取率为指标,在单因素试验的基础上,使用微滴式数字PCR仪对水酶法提取转基因大豆油的工艺过程中内、外源基因的分布进行研究,探索转基因大豆内、外源基因的降解规律。通过单因素试验确定水酶法提取转基因大豆油的最佳工艺条件为:料液比1∶6(g/mL),碱性蛋白酶加酶量1.8%,酶解温度35℃,酶解时间4.0 h,酶解pH 9.0,在此条件下,通过水酶法得到的水相中转基因大豆的内源基因占65.0652%,外源基因占81.742 1%;固相中内源基因占16.892 5%,外源基因占11.284 2%;油相中内源基因占0.000 2%,外源基因占0.000 4%。     

转基因作物中外源基因在体内代谢途径的研究进展

为研究转基因食品中外源基因发生水平转移和其它危害的可能性，从而揭示转基因食品的安全性，综述了外源基因在体内代谢的途径及影响因素，外源基因在消化系统中的代谢降解，外源基因的水平转移以及外源基因在体内代谢途径的研究方法。     

走近转基因产品

转基因食品一直备受关注,其安全性一直存在着巨大的争议,目前国际上还没有达成共识。前不久,我国公布了我国转基因食品名单,一直备受关注的转基因食品问题又回归到人们的视野。什么是转基因我们所说的转基因是指利用现代基因工程手段,人为地使一种生物的一个或几个基因转移到另一种生物体内安家落户,并使其获得新功能的过程。转基因育种与常规育种有何区别常规育种是在同种或近缘种生     

走近转基因产品

转基因食品一直备受关注．其安全性一直存在着巨大的争议．目前国际上还没有达成共识。前不久,我国公布了我国转基因食品名单,一直备受关注的转基因食品问题又回归到人们的视野。     

转基因食品安全性评价

转基因食品与普通食品的重要差异在于前者含有采用DNA重组技术导入的外源基因。近年来随着大量的转基因食品被批准商业化使用 ,转基因食品的安全性问题也越来越受到关注。本文对影响转基因食品安全性的重要因素———外源基因及其编码蛋白的食品安全性进行了简要的分析讨论     

米曲霉pyrG 基因克隆及其同源转化系统的建立

建立以乳清酸核苷-5＇- 磷酸脱羧酶基因(pyrG)为选择标志,以米曲霉为宿主菌的同源转化系统。以米曲霉基因组为模板,通过PCR 扩增获得pyrG 基因,将该片段与表达载体pMD18-T 相连,转化大肠杆菌DH 5α,经蓝白斑筛选、PCR 快速筛选、酶切和测序验证,获得重组质粒pMD-pyrG,完成pyrG 基因的克隆。序列分析表明该基因与米曲霉KBN616 的pyrG 基因编码序列的同源性为99.9%,两者经推导的氨基酸的同源性为99.6%。以米曲霉 pyrG 营养缺陷株为受体菌,通过PEG/CaCl2 诱导的原生质体转化方法,将重组质粒导入该受体菌,使米曲霉pyrG 缺陷株发生基因转化,成为pyrG+,由此成功建立了以pyrG 为筛选标记基因、同型米曲霉pyrG 基因缺陷株为受体菌的基因转化系统。     

多重实时荧光定量PCR分析转基因烟草外源基因拷贝数

[目的]采用多重实时荧光定量PCR方法在一个反应内同时检测转基因烟草中插入外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的拷贝数。[方法]将转基因阳性参照烟草基因组DNA经梯度稀释,通过多重荧光定量PCR反应同时获得烟草内源参照基因NR、外源基因35S、NOS、NPT Ⅱ的相关性标准曲线方程,将待测株系外源基因的Ct值代入标准曲线方程后估算其拷贝数。[结果]获得了上述4个基因的标准曲线,其R2均接近于1,相关性较高。在检测的六个转基因株系中初筛到3株3个外源基因均为单拷贝的株系。[结论]可使用该方法对转基因烟草外源基因插入拷贝数进行估算,为获得稳定遗传材料提供初筛依据。      

转基因产品带来的思考

如今我们在各大超市里随处可见转基因产品,从转基因黄豆到转基因的西红柿,从转基因玉米到转基因草莓。这些转基因产品在很多年前还只是试验阶段,但现在他们已经正式进入到我们的生活里来了。虽然其他转基因的产品已经开始造福人类,但是转基因的食品是否安全呢?     

An overview of genetically modified crop governance,issues and challenges in Malaysia

The application of agricultural biotechnology attracts the interest of many stakeholders. Genetically modified (GM) crops, for example, have been rapidly increasing in production for the last 20 years. Despite their known benefits, GM crops also pose many concerns not only to human and animal health but also to the environment. Malaysia, in general, allows the use of GM technology applications but it has to come with precautionary and safety measures consistent with the international obligations and domestic legal frameworks. This paper provides an overview of GM crop technology from international and national context and explores the governance and issues surrounding this technology application in Malaysia. Basically, GM research activities in Malaysia are still at an early stage of research and development and most of the GM crops approved for release are limited for food, feed and processing purposes. Even though Malaysia has not planted any GM crops commercially, actions toward such a direction seem promising. Several issues concerning GM crops as discussed in this paper will become more complex as the number of GM crops and varieties commercialised globally increase and Malaysia starts to plant GM crops. © 2017 Society of Chemical Industry     

作物转基因成分检测能力验证结果与分析

目的 为提高农业转基因成分检测能力和水平, 保证检测质量, 更好地发挥检测机构在转基因生物安全管理中的技术支撑作用。方法 根据农业农村部公告的转基因检测方法的要求, 分别对编号为YZ180011、YZ180012、YZ180013和YZ180014样品进行检测。结果 检测到所有样品外源基因CaMV35S启动子均为阳性; YZ180012和YZ180014样品中, 外源基因bar均为阳性; YZ180011、YZ180012和YZ180013号样品中, 外源基因NOS终止子为阳性; 而YZ180012号样品, 外源基因pat为阳性; YZ180012和YZ180013号样品中, 外源基因FMV35S启动子和NPTⅡ均为阳性; YZ180011和YZ180012号样品中, 外源基因HPT为阳性。结论 本次能力验证获得结果为满意。     

公共引物介导的多重定量PCR技术在转基因大豆检测中的应用研究

目的 建立公共引物介导的多重定量PCR法检测我国农业农村部允许进口的6种转基因大豆(包括:MON87701、DP356043、CV-127、MON87769、MON87705、MON87708)的方法.方法 设计并筛选出针对本研究涉及的6种转基因大豆对特异性引物,在每对特异性引物的5'端均加上一段公共引物,形成特异性嵌...     

农产品中转基因检测抽样研究-第1部分: 转基因农产品抽样标准国际现状及理论研究

针对目前没有国际范围内可接受的转基因产品(genetically modified organism,GMO)抽样标准的现状,分析世界各国家和国际组织的GMO相关抽样标准,并对国际标准关于GMO抽样的适用性进行分析;同时对适用于农产品中GMO抽样的理论进行了总结,依次对GMO检测中涉及的4个过程,包括分析试料、从分析样品中采取试料的过程、从实验室样品到分析样品以及从批到实验室样品的过程,对各步骤所产生的方差进行分析,并对总方差进行合成计算,以期指导本系列文章的其余部分抽样研究实践,并期望能推动相应国际标准的制定。     

植物源性转基因食品PCR衍生技术研究进展

转基因食品尤以植物源性转基因食品的安全性已成为公众关注的焦点。针对植物源性转基因食品甄别与安全性评估,已有多种检测手段得到广泛应用。PCR衍生技术因为具有高特异性、高敏感性等技术优势,为植物源性转基因食品的快速、准确检测提供了有效方法。PCR衍生技术包括多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、多重实时荧光定量PCR技术、多重巢式PCR技术以及多重PCR-DHPLC技术。本文就植物源性转基因食品检测的PCR衍生技术的研究进展作简要综述。      

The effect of glyphosate on digestion and horizontal gene transfer during in vitro ruminal fermentation of genetically modified canola

BACKGROUND: The impact of glyphosate on ruminal fermentation, selective pressure on ruminal bacteria and horizontal transfer of the gene encoding 5‐enolpyruvylshikimate‐3‐phosphate synthase (epsps) to ruminal bacteria was studied using batch culture with glyphosate‐tolerant (Roundup Ready^®) canola meal as substrate. RESULTS: A glyphosate concentration × time interaction (P < 0.05) occurred when glyphosate (0–100 mmol L^?1) was included in in vitro ruminal incubations with a diet containing 150 g kg^?1 Roundup Ready^® canola meal (Experiment 1). Glyphosate at 50 and 100 mmol L^?1 inhibited fermentation. In Experiment 2, epsps fragments were detected in plant debris for up to 16 h of incubation using primer sets that amplified three fragments (62, 108 and 300 bp) of DNA spanning the transgenic construct. Persistence was affected by fragment size but not by glyphosate concentration (0, 10 or 60 mmol L^?1). Extensive polymerase chain reaction assays provided no evidence of acquisition of epsps by feed‐ or fluid‐associated bacteria during fermentation. A glyphosate concentration × time interaction (P < 0.05) was observed for all fermentation parameters measured, and glyphosate caused a general inhibition of fermentation. CONCLUSION: The presence of glyphosate did not increase selective pressure for gene transfer of DNA encoding glyphosate resistance from Roundup Ready^® canola meal to ruminal bacteria. Copyright © 2007 Society of Chemical Industry     

大豆转基因成分测定能力验证结果与分析

目的进一步提高实验室对转基因成分的检测水平,提升检验人员的专业素养。方法根据能力验证计划作业指导书中推荐使用的GB/T 19495.5-2004《转基因产品检测核酸定量PCR检测方法》中提供的3种方法分别对样品进行检测。结果样品013和083为GTS-40-3-2品系转基因大豆,142为非转基因大豆。能力验证获得满意结果。结论转基因成分检测应重点关注DNA提取效率和实验过程质控等因素。     

中国转基因食品研究文献统计与分析

基于统计学和计量经济理论,选取CNKI收录的1997~2016年发表的中国转基因食品研究文献341篇,通过统计和计量分析,指出载文期刊具有一定的集中度,核心作者研究较为深入,研究方向具有一定的规律性、外延性。研究表明:国内学者对转基因食品领域的研究呈动态上升趋势,自然科学研究文献偏少,应致力于转基因工程技术的研究;社会科学研究文献中,学者们对转基因食品安全方面的关注度越来越高,解决食品安全问题的重要手段是风险交流。转基因食品的风险交流研究将成为创新研究的主流。     

大豆及其加工食品转基因成分检测技术研究进展

随着基因工程技术在食用农产品领域的应用发展,形形色色的转基因食品应运而生。目前包括我国在内的许多国家为保护消费者的知情权和选择权,都建立了转基因食品标识管理制度。科学有效的转基因食品检测技术是实现我国转基因产品标识管理的前提。我国食品成分多样且基质复杂,针对初级农产品的转基因成分检测技术并不完全适用于工业加工食品尤其是深加工食品。这对食品监管及技术检测部门提出了新的要求。本文根据技术原理的不同分类介绍了目前几种主要的食品中转基因成分检测技术,除介绍现在已经成熟应用的技术方法外,本文还重点介绍了国内学者新近研发出的几种新技术,为研究人员进一步研发新技术提供重要参考。