羟苯磺酸钙对动脉粥样硬化斑块形成的影响及其机制

目的：探讨羟苯磺酸钙对兔动脉粥样硬化（AS）斑块形成的影响及其作用机制。方法：24只健 康雄性新西兰兔,以液氮冻伤术在兔右颈总动脉处建立AS斑块模型,随机分为模型组和治疗组,每组12只。 模型组给予高脂饲料喂养8周,治疗组给予高脂饲料加羟苯磺酸钙0.15mg·g-1·d -1喂养8周。分别于实验前 及实验8周后取血,ELISA测定血清内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO）和血管内皮生长因子（VEGF）含量。8周 后处死动物,取右颈总动脉,光镜和电镜观察病理形态学变化,免疫组织化学检测兔右颈总动脉基质金属 蛋白酶9（MMP-9）和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的表达。结果：8周后,模型组兔血管内膜具有典型 的AS斑块表现,治疗组兔血管内膜AS斑块病变轻微;2组兔颈动脉局部可见PAI-1和MMP-9蛋白表达,但治疗 组的表达量较模型组明显减少,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;2组ET-1显著降低,NO、VEGF显著升高,差 异有统计学意义（ P ＜0.05）,且治疗组ET-1降低幅度大于模型组,NO、VEGF升高幅度大于模型组,差异有统 计学意义（ P ＜0.05）。结论：羟苯磺酸钙通过减少血管壁局部组织中PAI-1和MMP-9蛋白的表达,降低血循 环中ET-1含量,升高NO、VEGF水平等改善内皮功能障碍,进而发挥抗AS斑块形成作用。     

颈动脉粥样硬化斑块中亲环素A/CD147表达及阿托伐他汀干预的影响

目的：探讨兔颈动脉粥样硬化不稳定斑块中亲环素A(cyclophilin A, CyPA)、基质金属蛋白酶诱导因子CD147表达机制及阿托伐他汀干预对其表达的影响。方法：24只新西兰大白兔分为3组,正常组(A组)8只,余16只给予球囊损伤颈总动脉和高胆固醇喂养12周,随机分成模型对照组(B组,n=8,不接受药物处理)和阿托伐他汀干预组[C组,n=8,阿托伐他汀2.5 mg/(kg.d)],干预4周后给予鲁塞尔氏蛙蛇毒和组胺药物触发斑块破裂。测定不同时间点血清TC,TG,HDL-C和LDL-C水平,对粥样斑块组织进行病理分析,免疫组织化学法检测斑块内巨噬细胞及CyPA和CD147蛋白表达,反转录聚合酶链反应检测斑块内CyPA和CD147 mRNA表达。结果：与A组比较,12周末B组和C组血清TC,HDL-C和LDL-C浓度显著增高(均P<0.01);与B组比较,干预4周后C组血清TC和LDL-C浓度显著降低(均P<0.01)。药物触发后B组存活的6只兔中有4只发生斑块破裂及血栓形成,C组存活的7只兔中有1只发生斑块破裂及血栓形成。与B组比较,C组颈动脉斑块中CyPA,CD147及巨噬细胞含量均显著减少(均P<0.01)。结论：CyPA/CD147可能参与了兔颈动脉不稳定粥样斑块的形成,阿托伐他汀可能可以抑制CyPA/CD147的表达而发挥稳定斑块的作用。     

CD40-CD40L系统与斑块稳定性的相关性研究

目的:研究CD40-CD40L系统在兔腹主动脉粥样硬化斑块进展过程中的表达以及与斑块稳定性的相关性.方法:50只健康新西兰大白兔,随机均分为10组:正常对照1～5组(C1～5组)、动脉粥样硬化模型1～5组(AS1～5组).C1～5组分别予兔标准饲料喂养至8周、10周、12周、14周、16周取腹主动脉标本;AS1～5组均在高脂饲养1周后予腹主动脉球囊导管损伤术造模,并分别持续高脂饮食至8周、10周、12周、14周、16周取标本.各组均于实验前及取标本前检测血清C反应蛋白(CRP),各组腹主动脉标本通过免疫及特殊染色定位、光镜下摄片并计算机图像分析软件测定斑块内CD40、CD40L、MMP-1阳性染色的面积占血管内膜面积百分比值及胶原/脂质含量比值,分析CD40-CD40L系统的表达与斑块稳定性的相关性.结果:AS1～5组均形成腹主动脉粥样硬化斑块.与C1～5组对应比较,AS1～5各组血清CRP均显著增高(P＜0.01),斑块内CD40、CD40L、MMP-1的表达显著增加(P＜0.01).在动脉粥样硬化进程中,CD40、CD40L表达与CRP、MMP-1表达呈正相关,与胶原/脂质含量比值负相关.结论:斑块中CD40-CD40L系统表达随着动脉粥样硬化进展而逐渐增高,其高表达与斑块的不稳定性增加密切相关.     

烟酸对兔动脉粥样硬化斑块及MK2和骨桥蛋白表达的影响

目的探讨烟酸对兔动脉粥样硬化斑块形成（AS）和丝裂原活化蛋白激酶激活蛋白激酶2（MK2）及骨桥蛋白（OPN）的影响。方法24只新西兰兔按随机数字表法分为对照组、高脂组和烟酸组,每组8只,对照组和高脂组分别给予普通饮食和高脂饮食14周,烟酸组给予高脂饮食8周后加用烟酸200mg·kg-1·d-1共6周。实验前后抽血检测血脂水平,14周末进行主动脉病理学检查,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组兔主动脉壁MK2mRNA、OPNmRNA表达,采用免疫组化法检测兔主动脉壁OPN表达。结果与对照组相比,高脂组TG、TC和LDL-C显著升高（P＜0．05）,主动脉斑块面积明显增大（P＜0．05）,MK2、OPN表达显著增加（P＜0．01）。与高脂组相比,烟酸组 TC、TG和LDL-C显著降低（P＜0．05）,主动脉斑块面积显著缩小（P＜0．05）,MK2、OPN表达显著减少（P＜0．01）。结论烟酸具有抗 AS作用,其机制可能与下调 OPN和MK2的表达有关。     

血管紧张素Ⅱ对动脉粥样硬化斑块炎症的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AⅡ)对动脉粥样硬化(AS)斑块炎症及稳定性的影响.方法新西兰兔12只,随机分为单纯高脂组(注射生理盐水)和AⅡ组(注射AⅡ)各6例,喂养3个月.采用计算机图象分析系统测定内膜、中膜的厚度和面积,免疫组化法检测血管壁巨噬细胞表达.结果AⅡ组内膜、中膜的厚度和面积明显高于单纯高脂组水平(P＜0.05);AⅡ组AS斑块内含有大量巨噬细胞和巨噬细胞源性泡沫细胞,而单纯高脂饮食组AS斑块内只有稀疏分布的巨噬细胞和巨噬细胞源性泡沫细胞.结论注射AⅡ能明显促进高脂饮食兔AS斑块的炎症程度,加重其病理过程.     

血管紧张素Ⅱ对动脉粥样硬化斑块炎症的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AⅡ)对动脉粥样硬化(AS)斑块炎症及稳定性的影响。方法新西兰兔12只,随机分为单纯高脂组(注射生理盐水)和AⅡ组(注射AⅡ)各6例,喂养3个月。采用计算机图象分析系统测定内膜、中膜的厚度和面积,免疫组化法检测血管壁巨噬细胞表达。结果AⅡ组内膜、中膜的厚度和面积明显高于单纯高脂组水平(P<0.05);AⅡ组AS斑块内含有大量巨噬细胞和巨噬细胞源性泡沫细胞,而单纯高脂饮食组AS斑块内只有稀疏分布的巨噬细胞和巨噬细胞源性泡沫细胞。结论注射AⅡ能明显促进高脂饮食兔AS斑块的炎症程度,加重其病理过程。     

CD147基因沉默对亲环素A趋化作用及MMP-9表达的影响

目的探讨CD147在亲环素A（cyelophilinA,CyPA）诱导单核／巨噬细胞趋化过程及MMP-9表达中的作用。方法根据兔源CD147mRNA的序列构建能高效抑制兔外周血单核／巨噬细胞CD147表达的shRNA慢病毒载体,将分离出的兔外周单核／巨噬细胞分为空白对照组、NC对照组、CD147慢病毒组。对NC对照组及CD147慢病毒组分别给予空白慢病毒、CD147．shRNA慢病毒转染,以荧光显微镜观察转染效果。采用流式细胞仪检测膜CD147水平,并检测CD147mRNA及蛋白水平,采用微孔小室趋化实验检测CyPA对单核／巨噬细胞的趋化作用。对三组单核／巨噬细胞分别加人CyPA,孵育12h后ELISA检测上清液中MMP-9含量。结果CD147慢病毒组单核／巨噬细胞CD147表达水平较其他两组明显降低（P〈0．01）,基因沉默CD147降低了CyPA对单核／巨噬细胞的趋化作用（P〈0．05）及CyPA诱导的MMP-9（P〈0．05）产生。结论CyPA对单核／巨噬细胞趋化作用依赖或部分依赖于膜CD147水平,阻断CyPA-CD147相互作用可显著降低单核／巨噬细胞MMP-9表达水平。     

多聚肌苷酸在兔动物模型中抗动脉粥样硬化的作用及对血管组织LOX-1表达的影响

目的探讨多聚肌苷酸在兔动物模型中抗动脉粥样硬化(AS)的作用以及对血凝素样氧化低密度脂蛋白-1(LOX-1)表达的抑制作用。方法 30只雄性新西兰大白兔随机分为普通饲料喂养组(对照组n=6)、球囊拉伤后高脂饲料喂养组(高脂组n=6)、球囊拉伤后高脂饲料+氟伐他汀喂养组(他汀组n=6)、球囊拉伤后高脂饲料喂养+多聚肌苷酸(polyⅠ)肌注组(polyⅠ组n=6)和球囊拉伤后高脂饲料+氟伐他汀喂养+polyⅠ肌注组(联合组n=6)。除对照组外,其余各组兔均在3%质量浓度的戊巴比妥钠全麻下经股动脉行腹主动脉球囊拉伤术损伤动脉内膜,术后开始给予高脂饲料喂养制备AS模型。各组动物均喂养12周,喂养同时每天分别给予polyⅠ[1%的质量浓度1 mL/(kg.d)]肌肉注射和氟伐他汀[10 mg/(kg.d)]喂养干预。12周后处死动物取其腹主动脉观察病理变化,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定LOX-1 mRNA的表达;免疫组化测定LOX-1蛋白的表达。结果各组兔腹主动脉组织病理学变化:①对照组动脉血管内膜内皮细胞完整,无明显脂质沉淀;②高脂组动脉血管内膜内皮细胞脱落,可见粥样斑块形成,纤维帽下含大量无定形的坏死崩解产物,其内含大量胆固醇结晶、泡沫细胞和少量淋巴细胞;③他汀组AS程度较高脂组明显减轻,内皮细胞部分脱落,内膜下散在不规则隆起的斑块,可见数量不等的泡沫细胞;④PolyⅠ组较高脂组AS程度亦减轻,血管内膜内皮细胞部分脱落,血管可见纤维斑块和粥样斑块并存,斑块表面有纤维组织覆盖,内膜纤维帽下含大量泡沫细胞,并伴炎细胞浸润;⑤联合组病变较高脂组减轻最明显,内膜稍增厚,可见少量泡沫细胞,内弹力板完整,中膜平滑肌排列整齐。对照组兔腹主动脉血管组织中有少量的LOX-1蛋白及mRNA的表达;高脂组较其他组表达最为明显,他汀组以及联合组LOX-1蛋白和mRNA的表达较高脂组均明显减少(P均<0.01),PolyⅠ组LOX-1蛋白和mRNA的表达与高脂组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PolyⅠ可能具有一定的抗AS发生发展的作用,但PolyⅠ抑制LOX-1蛋白和mRNA表达的作用不显著。氟伐他汀抗AS的同时可明显地抑制血管AS斑块中LOX-1蛋白及mRNA的表达。     

光甘草定通过p38/MAPK通路调控动脉粥样硬化模型兔动脉MLCK表达

目的 研究光甘草定能否通过p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路影响动脉粥样硬化(AS)兔模型主动脉内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达.方法 建立AS兔模型,将新西兰大耳白兔随机分为3组:正常对照组、高脂模型组、光甘草定组.正常对照组用正常饲料喂养;高脂模型组、光甘草定组用高脂饲料喂养,12周后分析血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)成分的变化,通过苏木精-伊红(HE) 染色分析兔动脉壁形态结构变化;免疫组织化学方法观察兔模型主动脉内膜MLCK的分布和表达;Western blot 分析兔动脉内膜MLCK水平及p38蛋白磷酸化变化.结果 成功建立AS兔模型,在给予高脂饮食12周以后,与正常对照组相比,血清中TC增高(P<0.05),TG有所增加,但差异无统计学意义;大体标本观察到大量兔动脉粥样斑块形成,HE染色显示高脂模型组兔主动脉血管内皮细胞间隙明显增大并伴有大量泡沫细胞,内膜增厚明显;免疫组化显示主动脉内膜MLCK表达量增多;Western blot显示动脉p38磷酸化水平增强(P<0.05).而加喂光甘草定后,血管内膜病变程度有所下降,MLCK表达有所下降,动脉p38磷酸化水平有所下降(P<0.05). 结论 光甘草定可能通过p38/MAPK通路影响AS兔模型主动脉内皮细胞MLCK的表达.     

氯沙坦对兔动脉粥样硬化影响的实验研究

目的：了解氯沙坦的抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS)作用及其机制。方法：通过高脂饮食及内皮损伤术建立兔AS模型，一组用氯沙坦（25mg.kg^-1.d^-1)，另一组不用，并设正常对照组，喂养4个月，观察血管内膜，血管壁血管紧张素Ⅱ（AⅡ）含量及内膜巨噬细胞的变化。结果：氯沙坦治疗组兔主动脉内膜面积及内膜厚度等参数均小于未治疗组，其AⅡ的含量亦明显低于未治疗组，内膜巨噬细胞细胞阳性面积的表达率亦明显减少，结论：氯沙坦具有抗AS作用，可能与减少AⅡ的产生及阻滞AII的功能等有关。     

亲环素A和CD147在皮肤衰老过程中表达的研究

目的:检测不同年龄组正常人避光部位及曝光部位表皮组织中亲环素A(CyPA)和CD147的表达,初步探讨CyPA和CD147在皮肤衰老过程中的意义.方法:收集少年组(＜15岁)、中年组(30-40岁)和老年组(＞65岁)避光部位和曝光部位正常皮肤各20例,运用免疫组织化学及原位杂交2种方法检测表皮中CyPA和CD147蛋...     

DNA双链损伤修复机制在糖尿病致动脉粥样硬化中的作用研究

【摘要】 目的 探讨DNA双链损伤修复机制在糖尿病致动脉粥样硬化中的作用。方法 将Wistar雄性大鼠随机分为3组,即正常对照组（A组）,主动脉内膜球囊损伤组（B组）,糖尿病模型+主动脉内膜球囊损伤组（C组）。C组采用链脲霉素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型,注射STZ 72 h后,B组与C组大鼠均被施行主动脉球囊损伤术,术后分别予以高脂饲料饲养;A组予以基础饲养,每周监测血糖水平及体质量变化。分别于术后2周、4周、6周、8周,取大鼠主动脉进行老化β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色、HE染色,并计算主动脉内膜面积、中膜面积、内中膜面积比,免疫组织化学染色检测磷酸化共济失调毛细血管扩张突变基因（ATM）、磷酸化细胞周期检测点激酶2（CHK2）、磷酸化P53、磷酸化组蛋白2A变异体（γ-H2AX）的表达。结果 术后2周,A组大鼠主动脉内膜老化SA-β-gal染色呈阴性,B组和C组大鼠老化SA-β-gal染色阳性区域较少且散在分布;HE染色示B组和C组大鼠主动脉内膜开始出现少量增生。术后4周,B组和C组大鼠主动脉内膜老化SA-β-gal染色呈阳性;HE染色示C组大鼠主动脉内膜增厚明显,主动脉内膜面积较A组和B组增加（P <0.05）。术后6周,C组大鼠主动脉内膜老化SA-β-gal染色呈阳性且面积较B组增加;HE染色示C组大鼠主动脉壁形成典型动脉粥样硬化斑块,斑块内平滑肌细胞排列紊乱,泡沫细胞聚集,管腔狭窄,与A组、B组相比,主动脉内中膜面积比增加（P <0.05）。术后8周,C组大鼠主动脉内膜老化染色阳性面积较B组增加;HE染色示C组大鼠主动脉腔明显狭窄,增生部分突入管腔,内膜面积、内中膜面积比较A组和B组增加（P <0.05）;免疫组化染色示C组大鼠主动脉内膜中γ-H2AX、磷酸化ATM、磷酸化CHK2、磷酸化P53表达均呈阳性,上述蛋白在B组大鼠主动脉内膜中表达均呈弱阳性。结论 糖尿病状态下,血管内皮细胞衰老激活,DNA双链损伤加剧,双链损伤修复机制参与了糖尿病致动脉粥样硬化的发生发展。     

G-CSF对动脉粥样硬化兔颈总动脉球囊损伤后内皮修复的影响

目的研究重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的骨髓动员作用能否促进动脉粥样硬化性血管内膜损伤后的再内皮化过程,来预防损伤血管再狭窄.方法将35只新西兰雌性大白兔,随机分为正常饲养组（对照组）5只;高脂饲料喂养组30只在喂养10周后随机抽取20只行右颈总动脉囊扩张损伤,术后随机将其分为：G-CSF干预＋损伤组（n=10）,予静脉注射G-CSF50μg/d,连续7d,NS＋损伤组（n=10）,术后静脉注射生理盐水2mL/d,连续7d;第12周处死所有试验动物,取右颈总动脉、胸主动脉行HE染色观察血管粥样硬化病变评价模型制作情况,弹力纤维染色计算内膜（）I、中膜面积（M）比值I/M以评价内膜增生程度;伊文氏蓝染色并计算内皮再生面积（An）、内皮总面积（A）t比值An/At以评价再内皮化率;CD31免疫组化染色检测损伤局部CD31细胞表达的阳性率以评价G-CSF对EPCs动员效果以及EPCs对受损内皮的修复情况.结果 （1）高脂饲料喂养12周后可形成典型的动脉粥样硬化斑块.（2）G-CSF＋损伤组与NS＋损伤组相比I/M值降低,差异有统计学意义（P〈0.01）.（3）An/At明显升高,有统计学意义（P〈0.01）.（4）免疫组织化学染色显示颈动脉内皮CD31细胞表达阳性率G-CSF＋损伤组高于NS＋损伤组,有统计学意义（P〈0.01）.结论 G-CSF可以动员骨髓EPCs到外周血并迁移到血管内膜受损部位,促进再内皮化,抑制内膜增生,有效预防血管损伤后再狭窄的发生。     

糖尿病和非糖尿病动脉粥样硬化兔模型的建立

目的建立兔动脉粥样硬化和糖尿病动脉粥样硬化模型并比较其动脉粥样硬化病变的特点。方法四氧嘧啶静脉推注诱发糖尿病后,行腹主动脉球囊损伤术拉伤内皮并饲高脂饲料建立糖尿病动脉粥样硬化兔模型,非糖尿病动脉粥样硬化兔模型静脉推注生理盐水,余处理相同。喂养10周做腹主动脉造影和腹主动脉内超声后处死,取腹主动脉横切片做HE染色和免疫组化,比较两组兔主动脉内膜/中膜比值及巨噬细胞、平滑肌细胞含量,以评价动脉粥样硬化病变的程度和性质。结果所有兔胸主动脉粥样硬化病变明显轻于腹主动脉;糖尿病动脉粥样硬化兔腹主动脉壁特别是近血管腔处巨噬细胞浸润明显多于动脉粥样硬化兔,而平滑肌细胞含量显著减少。结论糖尿病动脉粥样硬化兔的腹主动脉粥样硬化病变内有更加活跃的炎症细胞浸润,提示病变性质更加不稳定。     

亲环素A及其受体CD147对动脉粥样硬化的影响

亲环素A（CyPA）通过其受体CD147分子作用于动脉粥样硬化发生、发展的全过程。其机制包括引起内皮细胞损伤、凋亡和活化所致的血管内皮功能障碍;趋化各种白细胞如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞等聚集至炎症反应局部,并产生各类炎症因子,加重炎症反应;诱导巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶,增强粥样斑块的不稳定性;介导巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞,加速脂质条纹形成;促进巨噬细胞、血管平滑肌细胞的增殖,引起血管壁增厚和重构等。对CyPA与其受体CD147分子作用的研究可能为干预动脉粥样硬化提供新的方向。     

全反式维甲酸对实验性动脉粥样硬化兔动脉血管内皮依赖性舒张功能的影响

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对实验性动脉粥样硬化兔动脉血管内皮依赖性舒张功能的影响.方法 普通级新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1℅胆固醇+5℅猪油);ATRA组:饲喂高脂饲料,同时ATRA灌胃5 mg/(kg·d).分别于2、4、8、12周后处死取血,检测血清中血脂指标;油红染色观察大体斑块形成情况;HE染色观察动脉的内皮结构变化;8周后,每组随机取3只实验兔进行离体动脉环实验检测兔动脉内皮依赖性舒张功能(EDD)及非内皮依赖性舒张功能(NEDD).结果 与正常组相比,2周后,模型组血清中总胆固醇(TCH)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)浓度显著升高(P<0.05);4周后,三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)浓度明显升高(P<0.05);油红染色表明2周时脂质斑块不明显,4周以后脂质斑块明显;HE染色显示内膜增厚,泡沫细胞增多,平滑肌细胞极性紊乱,向内膜迁移;内皮依赖性舒张功能高脂组EDD显著低于正常组(P<0.05).与模型组相比,ATRA治疗组血清中TG浓度无差异,TCH浓度明显下降(P<0.05),HDL-C浓度4周及12周时明显升高(P<0.05),LDL-C浓度2周及12周时降低(P<0.05);油红染色表明4周后可见脂质斑块;HE染色显示内膜稍微增厚,泡沫细胞减少,平滑肌细胞排列较整齐;内皮依赖性舒张功能检测表明当乙酰胆碱浓度为10-7 mol/L时,ATRA组EDD显著高于高脂组(P<0.05).结论 血脂升高可引起动脉粥样硬化的发生,动脉内皮损伤使内皮依赖性舒张功能下降,ATRA可能通过降低血脂改善内皮依赖性舒张功能.     

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后心脏功能及损伤血管再狭窄的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSC)移植改善心肌梗死后心功能的变化,及其治疗的安全性.方法 建立兔右侧颈动脉粥样硬化狭窄和心肌梗死早期再灌注模型并行右侧颈动脉球囊损伤,建模后分为MSC移植组和对照组,经耳缘静脉注射MSC或等体积的磷酸盐缓冲液.移植后1周观察MSC的归巢;2周时免疫组织化学染色检测血管和心肌组织中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的表达;移植后4周颈动脉造影检测血管狭窄程度,HE染色测定新生内膜面积及血管狭窄率,并同步测定心脏功能和心肌梗死面积、计数梗死心肌周围毛细血管密度.以及移植后对球囊损伤血管再狭窄产生的影响.结果 细胞移植后1周在梗死的心肌组织和损伤血管内膜均有4′,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)标记的MSC归巢.移植后2周MSC移植组的损伤血管内膜见CD31连续性表达,而对照组无表达.与对照组比较(50.5±3.6)%,MSC移植组血管组织增殖细胞核抗原的表达明显降低[(23.4±2.8)%,P＜0.05].4周时损伤血管的新生内膜面积(0.092±0.009比0.189±0.007,P＜0.05)及血管再狭窄率在MSC移植组[(41.7±3.7)%]明显小于对照组[(61.3±1.6)%,P＜0.05].与对照组比较,4周时MSC移植组的心功能有所改善,心肌梗死面积缩小[(21.7±2.2)%比(34.3±1.8)%,P＜0.05],梗死心肌周围新生毛细血管密度明显增加[(33.6±2.0)%比(20.8±2.6)%,P＜0.05].结论 MSC移植在改善梗死心脏功能的同时,对促进损伤血管的再内皮化和减轻新生内膜的增殖可能产生有益作用,从而有助于减轻损伤血管的再狭窄.

Abstract：

Objective Although earlier studies have shown that the transplantation of mesenchymal stem cells (MSCs) might improve cardiac functions after myocardial infraction, its role on vascular restenosis after percutaneous coronary intervention (PCI) remains controversial.The aim of this study was to investigate the effects of MSCs on the restenosis of injured artery following balloon angioplasty in a rabbit model with both myocardial infarction reperfusion and atherosclerotic stenosis cardotid artery by balloon injury.Methods After the animal model was established for myocardial infraction reperfusion and atherosclerotic stenosis cardotid artery by balloon injury, the rabbits received an intravenous transplantation of MSCs.And an equal volume of phosphate buffered solution was administered for the control group.The animal vascular tissue and myocardium tissue were excised at different time points post-transplantation and used to detect the homing of MSCs and the expressions of playlet-endothelial cell adhesion molecule-1 (CD31) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) by immunohistochemical staining.Four weeks later, vascular restenosis was analyzed by angiography of bilateral carotid arteries and the vascular tissues were used for histological studies.Results At one week post-transplantation, the 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)-labeled MSCs could be detected in myocardial infarction and injured intima.And the intimal expression of CD31 was observed at 2 weeks in the MSCs transplantation group.Yet the expression of PCNA was significantly lower in the MSCs transplantation group than that in the control group (50.5% ± 3.6% vs 23.4% ±2.8%, P ＜0.05).At 4 week post-transplantation, the neointimal area of injured vessels and the vascular restenosis were significantly lower in the MSCs transplantation group than those in the control group (0.092±0.009 vs0.189 ±0.007, P＜0.05;41.7 ±3.7 vs 61.3 ±1.6, P＜0.05).Furthermore the MSCs transplantation group demonstrated improved cardiac functions, reduced myocardial infarct size (21.7% ±2.2% vs 34.3% ± 1.8%, P ＜ 0.05) and significantly increased capillary density around infarction foci (33.6% ±2.1% vs 20.8% ±2.6%, P ＜0.05 ) versus the control group.Conclusion The transplantation of MSCs plays significant roles in cardiac repairing in terms of improved cardiac functions, accelerated repair of injured vessels, suppression of neointimal hyperplasia and reduced restenosis of injured vessels.     

四逆汤对兔髂动脉球囊损伤后血管狭窄和氧化应激的影响

目的通过球囊损伤兔髂动脉造成动脉损伤的动物模型,观察四逆汤对损伤后动脉内膜的保护和修复作用,以及对氧化应激的影响。方法雄性新西兰大白兔24只,随机分为对照组、模型组、四逆汤治疗组(四逆汤组),每组8只。对照组兔给予普通饲料,模型组、四逆汤组兔给予高脂饮食。饲养2周后模型组、四逆汤组兔行髂动脉内膜剥脱术。4周后,通过电镜观察髂动脉内膜的病变情况,光镜观察血管的病理变化,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和血脂的水平。结果扫描电镜发现,对照组兔髂动脉内膜内皮细胞形态正常,排列整齐;模型组可见内皮细胞脱落,内皮细胞增生形态各异,内皮下胶原纤维暴露;四逆汤组内皮细胞排列基本正常。光镜发现,对照组兔髂动脉管腔和管壁厚度正常,管壁光滑;模型组管壁明显增厚,管腔明显狭窄,内膜增厚;治疗组血管病变程度明显减轻。四逆汤可明显改善血脂的紊乱。对照组兔血清SOD活性明显高于四逆汤组和模型组,四逆汤组SOD活性又明显高于模型组。对照组兔血清MDA水平明显低于四逆汤组和模型组,四逆汤组MDA水平又明显低于模型组。结论四逆汤可减轻兔髂动脉剥脱术后的内膜增生和血管狭窄,其机制可能与抑制髂动脉剥脱术后兔的脂质过氧化反应、增强SOD活性有关。