SD大鼠脊髓损伤前后外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的:探讨SD大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)前后外周血T淋巴细胞亚群的动态变化。方法:取22只健康SD大鼠(雌雄各半),采用NYU脊髓损伤仪制作重物坠落SCI模型。于SCI前、SCI后1、3、5、7和14 d采外周血,用流式细胞术检测外周血淋巴细胞中CD3+T、CD3+CD4+T和CD3+CD8+T细胞比例的变化。结果:SCI前与SCI后1、7和14 d CD3+CD8+T细胞比例均无明显变化(P0.05),而SCI后第3、5 d均高于SCI前14 d(P0.01)。SCI后1、3、5 d及7 d的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞比例,以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值均明显低于SCI前(P0.01)。在SCI后14 d,上述各T细胞亚群的比例均恢复到术前水平,两时间点之间比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:SCI后,SD大鼠总T细胞和CD4+T细胞明显降低,CD3+CD4+/CD3+CD8+下降。提示SCI后的早期阶段,可能存在T细胞功能的异常。     

CD8+CD28-抑制性T细胞研究进展

CD8+CD28-抑制性T细胞是一种重要的CD8+Treg,并且是典型的FoxP3-Treg。它不仅在自然老化过程中累积增加,而且在多种疾病的发生发展过程中显著增多,并通过多种机制对机体的免疫应答产生负向调节。本文就CD8+CD28-T细胞作为调节性T细胞的分子特征及其在不同疾病中的变化规律等研究进展作一综述。     

流式细胞仪检测急性脊髓损伤患者外周血T淋巴细胞亚群

应用免疫荧光标记流式细胞仪检测 15例急性 SCI患者外周血淋巴细胞 CD3、CD4、CD8表达的变化 ,与正常人群进行比较。结果发现急性 SCI患者 T细胞 CD3、CD4和 CD4 / CD8比值显著低于正常组 (P<0 .0 1)。这表明急性脊髓损伤后机体T细胞免疫功能受到严重损伤 ,可能与脊髓损伤后机体易受感染状态有一定联系。     

幼年和成年大鼠外周血T细胞亚群变化

本实验应用了MAbs和流式细胞仪做为检测方法,比较观察了不同鼠龄的大鼠外周血T细胞亚群分布变化。结果显示,幼鼠(40d)和成鼠(5～6个月)的外周血T细胞亚群变化有明显差异:成鼠的OX-19~+(全T细胞)和W3/25~+(Th/i)细胞细胞较幼鼠有明显减少(P<0.001),而OX-8~+(Ts/C细胞)亚群却较幼鼠明显升高。但W3/25~+和OX- 8+亚群细胞表面的荧光密度变化却与阳性细胞百分率相反。推测造成这种T细胞亚群变化的原因可能与T细胞的发育成熟及T细胞本身的调节有关。实验资料为研究大鼠T细胞亚群的发育成熟过程提供了重要数据。     

乳腺癌患者手术前后外周血CD8+/CD28- 表达及意义

［摘要］目的　探讨乳腺癌患者手术前后外周血淋巴细胞表型CD8、CD28变化及临床意义．方法　应用CD8、CD28单克隆抗体,采用流式细胞术,对40例乳腺癌和25例对照组手术前后CD8,CD8+CD28+和CD8+CD28-进行测定．结果　乳腺癌CD8的表达（32.8±4.5）%高于对照组（30.4±3.3）%,P＜0.05,而CD8+CD28+细胞表达（10.4±1.7）%则低于对照组（14.3±2.6）% ,CD8+CD28-细胞表达（25.1±2.8）%高于对照组（19.6±2.3）%,P＜0.01.切除肿瘤后,外周血CD8、CD8+CD28-细胞、CD8+CD28+测定值（31.9±4.3）%（15.4±2.7）%（20.4±2.8）%与正常对照组相比无明显变化,P＞0.05．手术前后CD8、CD8+CD28-细胞、CD8+CD28+细胞测定值均有差异P＜0.05．结论　乳腺癌手术切除后,细胞毒性T淋巴细胞免疫防御和免疫监视增强,免疫抑制减弱,减少肿瘤免疫逃逸,对乳腺癌免疫治疗和预后判断具有一定的指导意义     

CD8+调节性T细胞亚群在系统性红斑狼疮患者外周血中分布的初步研究

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD8 CD28-调节性T细胞和CD8 CD28 效应性T细胞的比例,以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间的比值及其临床意义。方法:对37例SLE患者及15例健康对照新鲜外周全血以双抗体标记流式细胞术测定CD8 CD28-、CD8 CD28 T细胞亚群比例,计算CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值,并分析以上数据与SLE活动度、SLE活动性评分(SLEDAI)、免疫球蛋白增高或补体下降或肾损害的关系,观察激素治疗对以上数据变化的影响。结果:(1)稳定期SLE患者外周血CD8 CD28-T细胞群比例较正常对照及活动性SLE显著升高,而高活动性SLE患者CD8 CD28 T细胞群比例显著降低,同时CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(2)SLEDAI与CD8 CD28 T细胞亚群比例存在负相关(P<0.05),与CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值存在正相关(P<0.05);(3)SLE患者中补体水平降低者较补体水平正常者、有肾损害者较未发生肾损害者CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值显著升高;(4)对10例活动性SLE患者进行追踪,经激素治疗达到稳定期后,其CD8 T细胞、CD8 CD28-T细胞比例及CD8 CD28 T细胞比例均显著增高。结论:SLE患者体内免疫系统紊乱可表现在CD8 T细胞亚群比例改变上,其中CD8 CD28 T细胞群比例以及CD8 CD28-/CD8 CD28 细胞间比值改变可能反映了细胞免疫功能的紊乱,而CD8 CD28-调节性T细胞比例增高与病情活动的控制有关;CD8 CD28-/CD8 CD28 比值与病情活动性和补体异常及肾损害相关,可以作为病情监测的指标。     

流式细胞术检测脊髓损伤大鼠局部浸润的巨噬细胞亚群

目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法。方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组。SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞。分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化。结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0.07±0.02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9.90±3.28)%和(4.95±0.17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0.21±0.09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18.71±0.49)%和(27.07±3.74)%,差异均有统计学意义(P0.05～P0.01)。结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群。     

胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群变化的临床意义

目的 探讨胃癌患者细胞免疫功能改变的临床意义。方法 采用流式细胞术检测胃癌患者外周血T淋巴细胞亚群。结果 50例胃癌患者与正常对照组比较,CD4降低,CD8升高（P＜0．05）,CD4／CD8比值下降（P＜0．05）。胃癌患者中,20例有转移单纯化疗组与21例无转移手术联合手术化疗组和对照组相比,CD4下降,CD8升高,CD4／CD8有下降趋势;但CD4、CD8／CD4／CD8均无显著性差异（P＞0．05）。结论 胃癌的发生发展与机体免疫系统功能状态密切相关。     

CD4+CD25+调节性T细胞对直肠癌过继免疫治疗效应细胞的影响和作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）在直肠癌过继免疫治疗中对免疫杀伤细胞的负性调节作用。方法 利用流式细胞仪分别检测15例直肠癌患者和健康志愿者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量;分离提取直肠癌患者外周血CD4+T细胞,免疫磁珠法去除 CD4+CD25+调节性T细胞,同灭活的LOVO直肠癌细胞珠共培养并扩增为肿瘤抗原特异性CTL,以LOVO细胞为靶细胞行肿瘤杀伤实验,观察各实验组CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果 直肠癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞总数的（11.12±0.57）%,显著高于健康对照组（8.77±0.66）%（t=2.687,P＝0.012）;去除Treg细胞后诱导产生的抗原特异性CTL对靶细胞的杀伤效率为（33.74±4.42）%,显著高于未去除Treg细胞的对照组CTL的杀伤效率[(17.39±2.54)%; t=3.206, P=0.0034]。结论　直肠癌患者外周血中调节性T细胞含量明显增高,并且对肿瘤抗原诱导的CTL的免疫杀伤功能具有明显抑制作用。     

冠心病患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+T细胞亚群变化

目的 探讨冠心病患者外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)亚组的变化及意义.方法 入选病例为我院从2005年6月到2005年12月共28例行冠状动脉支架术治疗的冠心病患者(不稳定性心绞痛16例、稳定性心绞痛12例),以同时冠脉造影正常11例胸痛综合症患者为对照.借助三色荧光标记技术对外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 Treg占CD4 T细胞比例进行流式细胞术测定.结果 不稳定性心绞痛患者外周血Treg/CD4 T细胞比例[(6.55±2.45)%]显著低于稳定性心绞痛组[(14.01±4.92)%]和胸痛综合征组[(13.55±3.87)%](P＜0.05),而CD4 CD28-/CD4 T细胞比例[(10.55±4.76)%]则明显高于稳定性心绞痛组[(2.64±1.33)%]和胸痛综合征组[(2.75±1.55)%](P＜0.05).结论 不稳定性心绞痛患者外周血Treg比例减少而CD4 CD28-T细胞比例升高,Treg比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了动脉粥样硬化的发生发展.     

强啡肽A及其受体拮抗剂对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量的影响

目的；探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法，采用Ａｌｉｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内主Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ及其受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＳＣＢＦ的影响。结果；ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４－８ｈ又进一步下降，两次下降相差显著；ＳＣＩ后脊髓蛛网膜下腔     

大黄对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的保护作用

目的 观察不同浓度大黄对大鼠脊髓损伤(SCI)后血-脊髓屏障(BSCB)的影响,筛选大黄煎药灌服的最佳浓度,拟为临床治疗SCI提供一定的依据.方法 成年健康SD大鼠125只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组及大黄低、中、高剂量组.大黄各剂量组用大黄水溶液灌胃,其余两组用等量生理盐水.记录大鼠SCI后双后肢运动功能(BBB)评分、脊髓含水量以及荧光显微镜观察注入伊文思蓝(EB)后的BSCB情况.结果 (1)BBB评分:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(2)脊髓含水量的测定:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(3)荧光显微镜下观察到Sham组没有EB染出,模型组EB大量染出,以3 d时染出最多,大黄各剂量组EB染出较模型组有不同程度减少,以大黄中剂量组EB染出最少.结论 中剂量组大黄有效地降低了大鼠SCI后BSCB的通透性,对其保护作用最为明显.     

2-氯腺苷对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量和神经功能的影响

目的：观察腺苷受体激动剂2－氯腺苷对大鼠脊髓损伤后神经功能和脊髓血流量的影响,探讨腺苷在继发性脊髓损伤中的作用。方法：脊髓腹侧压迫法造成T13脊髓损伤,用激光多普勒血流仪检测损伤前后的脊髓血流量、治疗组于伤前15例min蛛网膜下腔注射不同剂量的非特异性腺苷受体激动剂2－氯腺苷（2－CADO）,对照组注射同量的生理盐水。伤后24h观察神经功能评分、倾斜平面临界角和组织学变化。结果：脊髓损伤后脊髓血流量立即下降,而治疗组较对照组显改善（P＜0．05,P＜0．01）。大剂量（500μmol/L)的2－CADO能显改善损伤后的神经功能,小剂量（50μmol/L)则对脊髓损伤无明显神经保护作用,大小剂量的作用有显差异（P＜0．01）。结论：腺苷通过改善脊髓血流量,从而对脊髓损伤起保护作用。     

Rapid loss of both CD4+ and CD8+ T lymphocyte subsets during the acute phase of severe acute respiratory syndrome

Objective To study the alteration of peripheral lymphocyte subsets in severe acute respiratory syndrome (SARS) patients and to help improve the early diagnosis of the disease. Methods Anti-coagulating blood samples from 98 SARS patients in the acute phase, 56 normal healthy blood donors, and from patients infected by HIV, CMV and EBV were collected. The T lymphocyte subsets were counted by flow cytometry using fluorescence-labeled specific monoclonal antibodies. Results A significant decrease was observed in all SARS patients in their peripheral CD4+ and CD8+ T lymphocyte absolute counts ［256(104)×10(6)/L and 256 （117）×10(6)/L, respectively］, which were also lower than those of the patients infected with HIV, CMV and EBV. All patients infected with HIV, CMV and EBV had significantly higher CD8+ T lymphocyte counts in comparison with normal controls. Conclusions Decrease of both CD4+ and CD8+ T lymphocytes of patients is related to onset of SARS. T lymphocyte subset analysis would help improve the early diagnosis of the disease.     

重型颅脑损伤T淋巴细胞亚群的变化

目的:探讨重型颅脑损伤后T淋巴细胞亚群变化规律,为进行免疫干预预防感染提供参考依据。方法:选择单纯重型颅脑损伤格拉斯哥昏迷评分≤8分的患者30例为观察组,同期单纯轻型颅脑损伤格拉斯哥昏迷评分=14~15分患者30例为对照组。采用免疫荧光三色标记流式细胞仪对2组患者伤后第1、3、7和14天外周血T淋巴细胞亚群进行检测。结果:与对照组比较,观察组伤后第1天CD3、 CD4、CD4/CD8开始下降,CD8升高,第3天CD3、 CD4、CD4/CD8明显下降,CD8明显升高,第7天开始恢复,第14天基本同正常水平,2组伤后第1、3和7天差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。而伤后第14天 2组4项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组伤后第4天肺部感染73.3%,对照组无肺部感染,2组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:重型颅脑损伤后T淋巴细胞亚群变化规律为伤后第1天开始下降,第3天下降明显,第7天开始恢复,第14天基本恢复到正常水平,可考虑重型颅脑损伤后进行免疫干预预防感染。     

脐血淋巴细胞亚群水平及其临床意义

目的检测新生儿脐血淋巴细胞亚群水平,探讨新生儿脐血的免疫功能。方法24例正常足月自然分娩新生儿脐血作为研究对象,26例健康成年献血员（男女不分）的血液作为对照,采用流式细胞术（FCM）检测脐血和成人血液中CD3（＋）、CD4（＋）、CD8（＋）、CD19（＋）、CD16＋56（＋）、CD4（＋）/CD8（＋）的水平,对结果进行统计学分析。结果脐血中CD3（＋）、CD4（＋）、CD8（＋）的量明显低于对照组（P〈0.01或〈0.05）;CD4（＋）/CD8（＋）的水平明显高于对照组（P〈0.01）;CD19（＋）、CD16＋56（＋）的水平与对照组相比差异无显著性（P〉0.05）。结论脐血的淋巴细胞免疫功能低于健康成人。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化

目的研究慢性肝炎外周血淋巴细胞亚群的变化。方法健康医护人员10例，乙肝病毒携带11例，慢性乙型肝炎21例通过流式细胞术进行外周血CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋检测。结果CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值、CD3^＋CD8^＋百分率在三组间有显著性差异（P〈0．01，P〈0．05）。CD3^＋CD4^＋百分率，CD3^＋百分率在慢性乙型肝炎组，乙肝病毒携带组与对照组无统计学意义。结论慢性乙型肝炎患者体内存在细胞免疫功能障碍，外周血CD3^＋CD8^＋百分率升高，CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值降低，无CD3^＋CD4^＋百分率变化，可能与其功能变化有关。     

脊髓损伤对大鼠骨细胞凋亡的影响

目的：探讨脊髓损伤（SCI）对骨细胞凋亡的影响及其在SCI后骨质疏松发病中的可能机制,方法：20只3mo龄SD大鼠均分为SCI组与对照组,SCI组于T10 处完全横断脊髓,对照组仅行椎板切除术,3wk后对骨骨进行取材料,应用原位凋亡法计数股骨髁部松质骨骨细胞的凋亡指数,对股骨髁部行透射电镜观察,采用双能线骨密度仪对各组大鼠的股骨髁部骨密度（BMD）进行测定,结果：SCI组BMD较对照组明显降低（P＜0．05）,小梁骨中骨细胞凋亡比率显上升（P＜0．001）,透射电镜观察到SCI组骨细胞异梁色质凝聚,边集等典型的细胞凋亡征象,结论：骨细胞凋亡在SCI后骨质疏松发病中起着重要作用。