四氢生物喋呤对内皮细胞产生一氧化氮和超氧阴离子的影响

目的 探讨四氢生物喋呤(BH_4)对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮(NO)和超氧阴离子(O_2~(?))的影响。方法 在培养液中分别加入不同浓度的D—葡萄糖、胰岛素和BH_4，24h后取细胞培养液分别测定一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、NO和O_2~(?)浓度。结果 BH_4(10、100、500μmol／L)使内皮细胞NOS活性增高，500μmol／L BH_4使内皮细胞NO产生增加，10或100μmol／L BH_4对内皮细胞产生NO有增加的趋势，但与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)；25mmol／L葡萄糖 BH_4(10、100、500μmol／L)对内皮细胞产生NO与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)；高浓度胰岛素(10、100、1000mU／L) BH_4(10、100、500μmol／L)使内皮细胞NOS活性增强，NO产生增加。BH_4(10、100、500μmol／L)对内皮细胞SOD活性无明显影响，但可以改善25mmol／L葡萄糖对内皮细胞SOD活性的影响；胰岛素 BH_4对内皮细胞SOD活性无明显影响(P＞0.05)。BH_4(10、100、500μmol／L)使内皮细胞产生O_2~(?)减少，并可以改善25mmol／L葡萄糖对内皮细胞产生O_2~(?)影响；胰岛素 BH_4组O_2~(?)浓度明显低于对照组和不同浓度胰岛素组(P＜0.01)。结论 BH_4可以增加培养的人脐静脉内皮细胞NOS活性，使NO产生增加而使O_2~(?)水平下降。     

四氢生物喋呤对内皮细胞产生一氧化氮和超氧阴离子的影响

目的探讨四氢生物喋呤(BH4)对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮(NO)和超氧阴离子(O-2)的影响.方法在培养液中分别加入不同浓度的D-葡萄糖、胰岛素和BH4,24 h后取细胞培养液分别测定一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、NO和O-2浓度.结果BH4(10、100、500μmol/L)使内皮细胞NOS活性增高,500 μmol/L BH4使内皮细胞NO产生增加,10或100 μmol/LBH4对内皮细胞产生NO有增加的趋势,但与对照组比较无显著性差异(P＞0.05);25 mmol/L葡萄糖+BH4(10、100、500 μmol/L)对内皮细胞产生NO与对照组比较无显著性差异(P＞0.05);高浓度胰岛素(10、100、1 000 mU/L)+BH 4(10、100、500 μmol/L)使内皮细胞NOS活性增强,NO产生增加.BH4(10、100、500μmol/L)对内皮细胞SOD活性无明显影响,但可以改善25 mmol/L葡萄糖对内皮细胞SOD活性的影响;胰岛素+BH4对内皮细胞SOD活性无明显影响(P＞0.05).BH4(10、100、500 μmol/L)使内皮细胞产生O-2减少,并可以改善25 mmol/L葡萄糖对内皮细胞产生O-2影响;胰岛素+BH4组O-2浓度明显低于对照组和不同浓度胰岛素组(P＜0.01).结论BH4可以增加培养的人脐静脉内皮细胞NOS活性,使NO产生增加而使O-2水平下降.     

血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮和超氧阴离子的影响

目的 研究不同途径生成的血管紧张素(Ang)Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮(NO)和超氧阴离子(O2^-)的影响。方法 应用卡托普利(商品名：开博通)、chymostafin(一种胃促胰酶抑制剂)、抑肽酶(广泛的蛋白酶抑制剂)、氯沙坦[AngⅡ1型受体(AT1受体)拮抗剂]分别阻断体外培养的人脐静脉内皮细胞AngⅡ的生成或阻断其与受体结合，观察细胞培养液中NO和O2^-的变化。结果 高浓度AngⅡ使内皮细胞NOS活性下降，NO产生减少，SOD活性下降，O2^-产生增加；100、1000μmol／L卡托普利使。AngⅡ的生成分别降低了11．15％和17．06％；100、1000μmol／L chymostatin使AngⅡ的生成分别降低了60．23％和68．48％；1μmol／L抑肽酶使AngⅡ的生成降低了13．96％；卡托普利 chymostatin使人脐静脉内皮细胞产生AngⅡ减少85．81％；卡托普利 抑肽酶抑制29．57％。AngⅡ的生成；卡托普利 chymostatin 抑肽酶几乎完全抑制人脐静脉内皮细胞将AngⅠ转变成AngⅡ，与AngⅠ组相比降低97．71％；氯沙坦不能阻断内皮细胞使AngⅠ转变成AngⅡ。阻断AngⅡ的生成或阻断其与受体结合均可以使内皮细胞NOS活性升高，NO产生增加，SOD活性升高，O2^-产生减少。结论 内皮细胞AngⅡ的生成主要是胃促胰酶途径，阻断胃促胰酶途径AngⅡ的生成可以使NO产生增加，O2^-生成减少。AngⅡ引起内皮细胞NO和O2^-的改变是AT1受体介导的。     

对内皮细胞产生超氧阴离子作用的研究

目的:研究四氢生物喋呤(BH4)、L-精氨酸、局部血管紧张素Ⅱ生成对内皮细胞产生超氧阴离子(O2-)的作用以探讨它们对内皮功能的影响.方法:将BH4、L-精氨酸、血管紧张素Ⅰ和厄贝沙坦加人体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),根据不同干预浓度及干预因素组合,实验共分14组,干预8小时后取出上清液分别测定O2-(Fenton反应原理)、一氧化氮(NO,硝酸还原酶法)和血管紧张素Ⅱ(放射免疫分析法)的浓度.结果:与对照组相比,不同浓度的BH4和L-精氨酸组的血管紧张素Ⅱ水平均显著减低,NO水平显著升高(除外L-精氨酸10 μM组);BH420 μM组O2-水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).与对照组相比,血管紧张素I加不同浓度的BH4和厄贝沙坦各组NO水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).与对照组相比,血管紧张素Ⅰ组O2-的产生增加,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01);与血管紧张素Ⅰ组相比,血管紧张素Ⅰ加不同浓度的BH4和厄贝沙坦各组的O2-水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).结论:BH4在防止一氧化氮合成酶解耦联中可能起主要作用,BH4和L-精氨酸均能促进NO的产生并且抑制血管紧张素Ⅱ的生成.BH4及BH4和厄贝沙坦合用可以抑制局部血管紧张素Ⅱ生成引起的O2-产生增加,并促进NO的产生.     

四氢生物喋呤修复高胆固醇血症兔血管内皮功能

目的:研究四氢生物喋呤(BH4)对高胆固醇喂养兔的血管内皮功能的影响.方法:24只新西兰兔随机分4组每组6只.正常饮食组、高胆固醇饮食组、叶酸加高胆固醇饮食组、BH4加高胆固醇饮食组.喂养5周后,测定血中总胆固醇及一氧化氮(NO)水平,并取胸主动脉,进行离体血管环实验,测定血管条对乙酰胆碱的累积浓度舒张反应.结果:①血脂及NO水平变化:与正常饮食组比较各胆固醇喂养组血清总胆固醇明显增高,有极显著性差异(P＜0.01).同时测定NO显示,高胆固醇饮食组较正常饮食组NO水平明显减低,有极显著性差异(P＜0.01);叶酸加高胆固醇饮食组、BH4加高胆固醇饮食组与高胆固醇饮食组比较NO水平也明显减低,有显著性差异.②动脉对乙酰胆碱的最大舒张功能:不同组别的动脉对不同浓度的乙酰胆碱最大舒张功能是不同的,高胆固醇饮食组的舒张功能较其他3组明显下降,叶酸加高胆固醇饮食组和BH4加高胆固醇饮食组的舒张功能均有不同程度的恢复.结论:高胆固醇血症导致内皮功能紊乱,BH4和其类似物叶酸对高胆固醇血症兔的血管内皮功能紊乱有保护作用.     

四氢喋呤对高胆固醇血症兔内皮舒张功能的影响

目的　研究四氢喋呤 (tetrahydrobiopterin ,BH4)对于胆固醇喂养兔的血管内皮舒张功能的影响。方法　 2 4只新西兰兔随机分为三组 :A组进食普通饲料 ,B、C组进食高脂饲料。C组在指标观测前 2h耳缘静脉注射BH410mg/kg ,5周后三组动物取胸主动脉进行离体血管条实验 ,分别测定血管条对乙酰胆碱 (Ach)、三磷酸腺苷 (ATP)、硝普钠 (SNG)的累积浓度舒张反应。结果　B组血管条对Ach、ATP的最大舒张反应能力较A组明显降低 (分别为Bmax =4 65± 1 63比Amax =13 87±2 62 ,Bmax =4 2 7± 1 41比Amax =12 0 3± 2 55,P <0 0 1) ;C组对Ach、ATP的最大舒张反应能力较B组明显改善 (分别为Cmax =9 0 6± 2 14比Bmax =4 65± 1 63 ,Cmax =10 87± 1 89比Bmax= 4 2 7± 1 41,P <0 0 1) ;而三组血管条对硝普钠的最大舒张功能无明显改变 (Amax =7 2 0± 2 3 0 ,Bmax =6 77± 1 86,Cmax =6 2 3± 2 13 ,P >0 0 5)。结论　高胆固醇血症时内皮依赖性舒张功能受损 ,四氢喋呤能改善高胆固醇血症时内皮依赖性舒张功能 ,而对非内皮依赖性舒张功能无影响     

四氢喋呤对兔缺血再灌注损伤内皮功能的保护作用

目的　研究四氢喋呤 (BH4 )对兔实验性缺血再灌注 (MI R)损伤中一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)水平及心肌梗死面积的影响。方法　 2 4只新西兰兔随机分为假手术组、模型组和药物干预组 3组。制备MI R模型 ,观察BH4 预处理后MI R损伤中NO、MDA、SOD水平的变化及对心肌梗死面积的影响。结果　模型组较假手术组NO显著减低 [(2 8± 10 ) μmol L比(116± 17) μmol L ,P <0 0 1],MDA水平明显升高 [(5 8 3± 10 4 )nmol L比 (7 0± 1 8)nmol L ,P <0 0 1],SOD活性明显减低 [(2 6 8± 17)nu ml比 (340± 2 4 )nu ml,P <0 0 5 ];而BH4 预处理组较模型组NO明显升高 [(6 2± 17) μmol L比 (2 8± 10 ) μmol L ,P <0 0 1],MDA明显减低 [(30 9± 6 1)nmol L比(5 8 3± 10 4 )nmol L ,P <0 0 1],SOD活性无明显改变 [(2 88± 2 0 )nu ml比 (2 6 8± 17)nu ml,P >0 0 5 ];BH4 预处理组和模型组心肌梗死面积差异有显著性 [(18± 4 ) %比 (16± 4 ) % ,P <0 0 5 )。结论　MI R导致内皮功能紊乱。BH4 对内皮功能有保护作用 ,从而减轻再灌注损伤。     

四氢生物蝶呤与内皮细胞功能障碍

许多心血管疾病中存在血管内皮细胞功能异常,其机制可能为内皮细胞生成的一氧化氮(NO)活性降低,四氢生物蝶呤(BH4)是一氧化氮合酶(NOS)的辅因子,该辅因子有调节NOS功能和NO活性的作用,本文就BH4在心血管疾病中的研究作一综述。     

氧化低密度脂蛋白和抗氧化剂对人脐静脉内皮细胞一氧化氮产生的影响

目的研究氧化ＬＤＬ和抗氧化剂对人脐静脉内皮细胞一氧化氮的影响。方法用一氧化氮试剂盒测试培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量。结果氧化ＬＤＬ对培养的内皮细胞一氧化氮产生有明显抑制作用（Ｐ＜０．０１），并且具有浓度和时间依赖效应。抗氧化剂ＶｉｔＥ可明显减弱氧化的ＬＤＬ对内皮细胞的损伤，与ＯＸ－ＬＤＬ组相比一氧化氮含量增加２１％～６０％（Ｐ＜０．０１）。结论氧化ＬＤＬ可以明显抑制人脐静脉内皮细胞一氧化氮的合成，抗氧化剂ＶｉｔＥ有明显的保护作用。     

比索洛尔对缺氧/复氧内皮细胞一氧化氮生成的影响

目的 :观察比索洛尔对培养的人脐静脉内皮细胞 （HU VECs）在缺氧 /复氧 （A/ R）过程中一氧化氮 （NO）生成的影响。方法 :将 HUVECs暴露于缺氧环境中 30 m in后复氧 ,并加入比索洛尔 （1,5 0和 5 0 0 μmol/ L）或空白对照 ,测量复氧前、复氧后 1和 4h培养液上清 NO含量。结果 :对照组 NO产量在复氧后 1h,4h与复氧前相比有显著下降 （均 P<0 .0 1）。比索洛尔 5 0 μm ol/ L 组和 5 0 0 μmol/ L 组 NO产量在复氧后 1h,4h与复氧前相比无显著差异 （均P>0 .0 5 ） ,而与对照组和 1μmol/ L 组同一时间相比均有显著增加 （均 P<0 .0 1）。结论 :比索洛尔可以阻止 A/ R期间内皮细胞 NO产量的下降 ,因此 NO可能参与了 β阻滞剂减少缺血再灌注损伤的过程。     

超氧阴离子自由基对心肌细胞的损伤作用

目的 :探讨超氧阴离子自由基 (O2 ·- )对培养心肌细胞的影响。方法 :利用黄嘌呤氧化酶 /黄嘌呤(XO/X)产生O2 ·- 系统作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞 ,观察其对心肌细胞的损伤 ,并分析其对核DNA、Na/K ATP酶 (ATPase)活性和脂质过氧化的影响。结果 :O2 ·- 使心肌细胞受损 ,扫描电镜见细胞伪足变短甚或消失并趋于固缩 ,乳酸脱氢酶漏出增多〔(2 0 2 .0 0± 19.5 0 )U/L〕 ,核DNA单链断裂增加 (DNA EB的相对荧光强度 :31.93± 3.4 7) ,ATPase活性下降 [4 .75± 0 .4 3(μmol/min) a],丙二醛含量增加〔(1.16± 0 .14 )nmol/L〕 ,过氧化氢酶 (CAT)能明显抑制这些损伤效应。结论 :O2 ·- 可对心肌细胞及其核酸、蛋白质和脂质造成损伤。     

醌型二氢生物喋呤还原酶基因表达变化对高糖环境下NRK-52E细胞葡萄糖调节蛋白75表达的影响

目的探讨醌型二氢生物喋呤还原酶(QDPR)基因对高糖环境下肾小管上皮细胞系NRK-52E葡萄糖调节蛋白75(GRP75)的影响及其在DN中的可能作用机制。方法构建过表达及敲低QDPR基因的NRK-52E模型,分别予5.4 mmol/L和30 mmol/L葡萄糖培养基培养,Western blot检测GRP75在OLETF大鼠肾皮质及细胞模型各组的表达水平,流式细胞术检测细胞周期。结果与LETO鼠比较,OLETF大鼠肾皮质GRP75含量降低[(1.53±0.27)vs(0.79±0.26),P0.01];与NRK-52E组比较,NRK-52E高糖组的GRP75含量降低[(0.62±0.03)vs(0.46±0.06)]、G0/G1期细胞增多[(39.80±1.31)%vs(50.35±0.33)%]、S期细胞减少[(48.55±1.85)%vs(37.17±0.10)%](P0.05);过表达QDPR使高糖环境下GRP75含量降低[(0.85±0.10)vs(0.45±0.16),P0.05]、G0/G1期细胞增多[(43.73±0.48)%vs(61.87±0.17)%,P0.01],S期细胞减少[(42.42±0.66)%vs(25.29±0.12)%,P0.01];敲低QDPR不影响GRP75表达量与细胞周期。结论 GRP75在DN模型中含量减少,QDPR基因可能通过GRP75及细胞周期影响DN发生发展。     

探讨血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生超氧阴离子和1型纤溶酶原激活物抑制剂的作用机制

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生超氧阴离子(O-2)和1型纤溶酶原激活物抑制剂( PAI-1)的作用机制及0-2与PAI-1产生之间的关系.方法:第一部分实验:观察血管紧张素Ⅱ不同浓度及不同作用时间对HUVEcs产生0-2和PAI-1的作用.分为对照组,AngⅡ10-8～10-5 moL/L不同浓度组,AngⅡ10-6mol/L作用不同时间(0、6、12、24和48h).第二部分实验:观察不同浓度的缬沙坦对AngⅡ诱导HUVECs产生O-2和PAI-1的作用.分为对照组,缬沙坦(10-6 mol/L)组,AngⅡ(10-6mo/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+不同浓度缬沙坦(10-8～ 10-5mol/L)组.第三部分实验:观察缬沙坦、二甲苯基碘、超氧化物歧化酶对AngⅡ使HUVECs产生O-2和PAI-1的作用.分为对照组,AngⅡ(10-6 mol/L)组,AngⅡ(10-6 mol/L)+缬沙坦(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+二甲苯基碘(10μmol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+超氧化物歧化酶(2μl)组.用酶消化法收集并培养HUVECs,采用氯化硝基四氮唑蓝还原法测定上清液O-2浓度,用酶联免疫吸附法测定上清液PAI-1浓度.结果:①AngⅡ在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地使HUVECs产生O-2和PAI-1增加.②缬沙坦在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地降低AngⅡ促HUVECs产生O-2和P1AI-1的作用.③二甲苯基碘和超氧化物歧化酶可显著抑制AngⅡ刺激HUVECs产生0-2及PAI-1.结论:①AngⅡ通过作用于AngⅡ受体1(AT1)激活还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶途径呈浓度和时间依赖性地使HUVECs产生O-2和PAI-1增加.②AngⅡ通过增加O-2产生而致PAI-1产生增加,提示抗氧化治疗有助于预防血栓性疾病的发生.     

低密度脂蛋白和高密度脂蛋白对动脉内皮细胞一氧化氮生成的影响

为研究高密度脂蛋白和低密度脂蛋白对动脉内皮细胞一氧化氮合成的影响,以豚鼠动脉内皮细胞为实验对象,用低密度脂蛋白、高密度脂蛋白及两者以不同剂量混合加入培养基中,每组设置三种剂量,分别于２ｈ、６ｈ、１２ｈ和２４ｈ测定一氧化氮含量。结果发现,高密度脂蛋白促进内皮细胞一氧化氮的合成（Ｐ〉０．０５）,与剂量大小无关;低密度脂蛋白显著抑制一氧化氮的合成（Ｐ〈０．００１）,与剂量相关;混合组同样明显抑制其合成,     

肾动脉性高血压大鼠血清一氧化氮、血管紧张素Ⅱ和超氧阴离子水平的变化

目的　探讨一氧化氮、血管紧张素Ⅱ和超氧阴离子 (O2 -)在高血压发病机制中的作用。方法　将体重2 5 6～ 2 85g雄性Wistar大鼠随机分成 5组 ,每组 10只 ,实验前测量血压、心率。对照组进行假手术及常规饮食喂养 ,单纯结扎组 :不完全结扎一侧肾动脉及常规饮食喂养 ,结扎 +Losartan组 :不完全结扎一侧肾动脉并在水中加入Losartan2 0mg·kg-1·d-1,结扎 +精氨酸 (L Arg)组 :不完全结扎一侧肾动脉并在水中加入L Arg 2g·kg-1·d-1,结扎 +L Arg +Losartan组 :不完全结扎一侧肾动脉并在水中加入L Arg 2g·kg-1·d-1和Losartan 2 0mg·kg-1·d-1,结扎后 1周测量血压、心率并取血测血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) ,环岛苷磷酸 (cGMP) ,一氧化氮 (NO) ,一氧化氮合成酶 (NOS) ,O2 -,超氧化物歧化酶 (SOD)浓度。结果　单纯结扎组收缩压较结扎前明显升高 (P <0 0 5 ) ,而结扎 +Losartan组收缩压较单纯结扎组明显减低 (P <0 0 5 ) ,结扎 +L Arg组血压较对照组增加 ,但较单纯结扎组降低 ,较结扎 +Losartan组高 (P <0 0 5 ) ,结扎 +L Arg +Losartan组血压较对照组增加 ,但低于单纯结扎组和结扎 +L Arg组 (P <0 0 5 )。实验前、后各组心率无变化(P >0 0 5 )。单纯结扎组AngⅡ较对照组明显升高 (P <0 0 5 ) ,而结扎 +Losart     

活性氧对肺动脉内皮细胞分泌内皮素一氧化氮和前列环素的影响

活性氧对肺动脉内皮细胞分泌内皮素一氧化氮和前列环素的影响姜智亓久生张伟张荣银刘爱华我们用黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应产生超氧阴离子，观察了活性氧对猪肺动脉内皮细胞分泌内皮素（ＥＴ）、ＮＯ和前列环素（ＰＧＩ２）的影响。无菌取成年杂种猪肺动脉段，用胶原酶（Ⅱ...     

血清和尿液新喋呤水平与类风湿关节炎关系的研究

类风湿关节炎 (ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ,ＲＡ)是一种以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾病 ,为了探讨ＲＡ患者体内免疫激活标志物—新喋呤与ＲＡ疾病活动性、临床疗效和其它实验室指标间的关系 ,我们采用ＥＬＩＳＡ测定了 35例ＲＡ患者血清和尿液中新喋呤水平 ,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　研究对象　 2 0 0 0 - 0 5～ 2 0 0 1- 0 5 35例ＲＡ患者选自我院风湿免疫科住院患者 ,符合美国风湿病学院 1987年诊断标准 ,男性 8例 ,女性 2 7例 ,平均年龄 (48 8± 16 7)岁(2 6～ 5 4岁 ) ,平均病程 (5 2…     

氧化型低密度脂蛋白和维生素E对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮及合酶的影响

为研究氧化型低密度脂蛋白和维生素Ｅ对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮及合酶的影响,应用一氧化氮及一氧化氮合酶试剂盒测定培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性。结果发现,氧化型低密度脂蛋白能显著抑制培养的内皮细胞一氧化氮的产生,从对照组的１２６±２４ｍｍｏｌ／ｇ下降为４１±８ｍｍｏｌ／ｇ;并能明显降低一氧化氮合酶的活性,具有浓度和时间效应。抗氧化剂维生素Ｅ显著增加氧化型低密度脂蛋白刺激内皮细胞产生一氧化氮含量以及一氧化氮合酶活性。提示氧化型低密度脂蛋白可以通过抑制内皮细胞一氧化氮合酶的活性而抑制其产生一氧化氮。维生素Ｅ通过增加一氧化氮合酶活性而增加内皮细胞产生一氧化氮。     

低氧及丹参对肺动脉内皮细胞内皮素和一氧化氮释放的影响

低氧及丹参对肺动脉内皮细胞内皮素和一氧化氮释放的影响姜智刘焕星亓久生张荣银刘爱华缺氧是引起急性缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ）和慢性缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）的起始环节，其发生机制目前尚未完全阐明。血管内皮细胞分泌的内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＯ）异常...