安神补脑液去除维生素B1前后对小鼠镇静、催眠作用及脑内RNA,DNA,蛋白质合成影响的比较

目的:探讨维生素B1(VB1)对安神补脑液功效的影响。方法:实验小鼠按体重随机分为7组,分别为正常组(蒸馏水),安神补脑液高、低剂量组(0.1,0.05 g·kg-1),不含VB1的安神补脑液高、低剂量组(0.1,0.05 g·kg-1),VB1口服液高、低剂量组(0.1,0.05 g·kg-1),每组10只。每日按体重ig给药1次,连续ig 10 d。通过小鼠自主活动实验观察各样品的镇静作用;戊巴比妥钠所致小鼠睡眠实验观察各样品的催眠作用;地衣酚(Orcinol)法测定脑组织中RNA含量、二苯胺显色法测定脑组织中DNA含量、福林酚(Lowry)法测定脑组织中蛋白质的含量。结果:与正常组比较,安神补脑液高、低剂量组、不含VB1的安神补脑液高、低剂量组自主活动次数明显减少,且具有显著性差异(P0.05),而VB1口服液高、低剂量组自主活动次数与正常组相比无显著性差异;安神补脑液高剂量组可明显增加小鼠戊巴比妥钠阈上剂量睡眠时间(P0.05),不含VB1的安神补脑液组对小鼠戊巴比妥钠阈上剂量睡眠时间有增加趋势,其他各组无明显差异;除安神补脑液低剂量组外,各组脑内DNA含量均明显增加(P0.01);不含VB1的安神补脑液高剂量组、VB1口服液高、低剂量组蛋白质含量明显增加(P0.01),其余各组无显著性差异;同时,各组对脑内RNA含量无明显影响。结论:不含VB1的安神补脑液和安神补脑液的镇静、催眠作用效果相当;同时,实验证明了不同工艺制备样品对小鼠脑组织中DNA,蛋白质合成有促进作用,对RNA的含量无影响。     

泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠氨基酸类神经递质影响的研究

目的探讨泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠脑干、海马、下丘脑脑区氨基酸类神经递质含量的干预效应。方法将60只SD大鼠随机分为4组,分别为正常对照组、失眠模型组、中药组、西药组,每组各15只,除正常对照组外的其余三组大鼠一律采用水平台法反复剥夺睡眠7次,每次持续24小时。造模结束后,中药组大鼠灌胃给药泻肝安神汤,西药组灌胃给药地西泮溶解液,失眠模型组灌胃给予纯净水,干预7天后取材,采用高效液相色谱法检测各组大鼠脑干、海马、下丘脑脑区6种氨基酸类神经递质的含量。结果经方差分析发现大鼠剥夺睡眠后脑干氨基酸类神经递质门冬氨酸下降,γ-氨基丁酸升高,下丘脑γ-氨基丁酸下降(P0.05),而在海马和下丘脑区域各氨基酸类神经递质含量变化不显著(P0.05)。采取泻肝安神法治疗后大鼠脑干门冬氨酸含量显著升高,下丘脑γ-氨基丁酸含量升高(P0.05);而采用地西泮片治疗后大鼠脑干区门冬氨酸升高,下丘脑门冬氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸、牛磺酸升高(P0.05)。结论泻肝安神法可调节睡眠剥夺大鼠的氨基酸类神经递质,在下丘脑的作用机制类似于地西泮片,但对于氨基酸类神经递质的影响影响靶点要少于西药。     

疏肝调神针法针刺对睡眠剥夺模型大鼠神经递质的影响

目的:探讨疏肝调神针法针刺对睡眠剥夺大鼠神经递质的影响。方法:采用改良小平台水环境间断剥夺睡眠法复制失眠大鼠模型。将Wistar大鼠分为正常组、模型组、针刺组、西药组,针刺组分别针刺相应穴位,每次20 min,每日1次,共治疗7 d。西药组腹腔注射地西泮。观察各组大鼠一般状况,检测各组大鼠脑组织5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、氨基丁酸(GABA)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠的皮质、丘脑内的5-HT 5-HIAA、GABA含量显著降低,DA、NE含量上升,与正常组相比差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,针刺组和西药组大鼠的脑组织5-HT、5-HIAA及GABA含量上升,NE含量降低,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:疏肝调神针法针刺可能是通过增加了脑内的5-HT合成及代谢水平,增加GABA的含量,降低NE含量,从而改善睡眠剥夺大鼠失眠症状。     

人参-石菖蒲药对安神益智作用的动物行为学研究及其机制的初步探索

目的证实人参-石菖蒲药对安神益智的配伍功效并探索其机制。方法分别用人参、石菖蒲、人参-石菖蒲水煎液分别给小鼠灌胃一段时间后,用阈上剂量的戊巴比妥钠催眠,观察不同组别动物的睡眠潜伏期和维持时间;用阈下剂量的戊巴比妥钠催眠,观察协同催眠效果。将实验大鼠分为正常对照组、睡眠剥夺组和中药干预组,通过多平台水环境法制作失眠动物模型,运用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力。免疫荧光检测大鼠皮质区域GABRA1的表达情况;ELISA检测大鼠海马组织中乙酰胆碱(ACh)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的含量。结果中药干预后小鼠睡眠维持时间显著延长,催眠效率显著增强,人参-石菖蒲药对作用效率最高,维持的时间最长;中药干预后小鼠睡眠潜伏期显著缩短,人参-石菖蒲药对组最为显著;Morris水迷宫检测中,人参、石菖蒲、人参-石菖蒲干预后,大鼠在目标象限搜索的时间以及穿越平台的次数显著增加,人参-石菖蒲药对组改善最显著(P0.001)。人参、石菖蒲、人参-石菖蒲中药干预组的GABRA1的表达情况与睡眠剥夺组有差异极显著(P0.001),石菖蒲组与正常组有显著性差异;人参、石菖蒲、人参-石菖蒲组与睡眠剥夺组大鼠脑组织Ach含量、ChAT的活性存在显著性差异(P0.001)。结论人参、石菖蒲配伍后安神益智的功效远胜于单用人参或石菖蒲;人参-石菖蒲安神益智的功效与改善睡眠剥夺动物的脑内神经递质ACh、GABA有关。     

电针对糖尿病大鼠脑组织游离氨基酸含量的影响

目的观察电针对糖尿病大鼠脑组织游离氨基酸含量的影响。方法采用四氧嘧啶腹腔注射法制备糖尿病大鼠模型,采用高效液相色谱法检测糖尿病大鼠脑组织游离氨基酸含量并观察电针的影响。结果电针组血糖治疗前后差异非常显著(P<0.01),但仍然高于正常组(P<0.001);糖尿病模型组脑内游离氨基酸谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸均较正常组明显增高,(P<0.01)。电针组4种游离氨基酸均较模型组明显降低(P<0.01),其中Gly明显低于正常组(P<0.05)。结论电针能够降低糖尿病大鼠血糖,可以抑制糖尿病大鼠脑组织游离氨基酸含量的升高。     

人参石菖蒲药对对睡眠剥夺大鼠海马IL-6R、NMDAR影响的实验研究

目的探索人参-石菖蒲水煎液增强睡眠剥夺大鼠记忆功能的机制。方法将动物分为正常对照组、睡眠剥夺组和中药干预组,通过多平台水环境法制作失眠动物模型,运用ELISA法检测大鼠海马组织中IL-6和IL-6R的表达,免疫印迹法检测大鼠海马组织中NMDAR2B的表达,对相应脑组织采用免疫荧光标记观测。结果 (1)睡眠剥夺组较正常对照组GFAP和NEUN表达显著下调(P 0. 001),药物干预组则比睡眠剥夺组表达上升(P 0. 001);(2)与正常对照组相比,睡眠剥夺组大鼠血液中IL-6和IL-6R均上升,且差异极显著(P 0. 001),同时药物干预组低于睡眠剥夺组,且差异极显著(P 0. 001);(3)NMDAR2B蛋白表达结果进行灰度分析,药物干预组与实验组以及正常组与实验组之间的差异均为极显著(P 0. 001)。结论人参-石菖蒲水煎液能够抑制睡眠剥夺带来的脑部炎性反应,防止睡眠剥夺引起的脑神经细胞损伤,可能通过提高睡眠剥夺动物海马NMDAR2B的表达来增强记忆力。     

摩腹手法对睡眠剥夺大鼠脑内神经递质及Orexin-A的影响

[目的]观察和探讨摩腹手法对睡眠剥夺大鼠脑内神经递质及Orexin-A水平的影响。[方法]将Wistar大鼠30只随机分为正常对照组、模型对照组和摩腹手法组各10只,采用改良多平台水环境法对后两组大鼠进行睡眠剥夺造模,造模后正常对照组和模型对照组大鼠不作干预,摩腹手法组大鼠给予每日1次的摩腹治疗,持续14 d后,检测比较各组大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、γ-氨基丁酸(GABA)和食欲素A(Orexin-A)的水平。[结果]与正常对照组相比,模型对照组大鼠脑内5-HT、DA、NE、GABA和Orexin-A的水平均发生显著变化(P0.05)。与模型对照组相比,摩腹手法组大鼠脑内5-HT水平显著回升,DA、NE和Orexin-A水平均明显回落(P0.05),而GABA水平无统计学差异(P0.05)。[结论]摩腹手法可通过调节大鼠脑内5-HT、DA、NE和Orexin-A的水平,起到调节动物睡眠和觉醒状态的作用。     

三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠脑组织SOD、MDA含量的影响

目的:观察三化汤对脑缺血-再灌注老龄大鼠脑组织SOD、MDA的影响.方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型组、三化汤组、大黄配羌活组、大黄配枳实厚朴组、西药对照组(尼莫地平)、中成药对照组(血栓心脉宁).采用双侧颈总动脉结扎方法制备老龄大鼠脑缺血模型,脑缺血1h后,再灌注0.5 h.取各组右侧大脑半球前2/3的50～200 mg制成脑匀浆,分别测定其脑组织SOD、MDA的含量.结果:与空白组比,模型组SOD显著降低(P<0.05),MDA显著升高(P<0.05);与模型组比,三化汤组、大黄配羌活组及尼莫地平组SOD均显著升高(P<0.05),MDA均显著降低(P<0.05);而血栓心脉宁组、大黄配枳实厚朴组则效果不明显.结论:三化汤能明显升高脑缺血-再灌注老龄大鼠脑组织SOD含量,明显降低其MDA含量,对脑缺血一再灌注老龄大鼠脑损伤具有保护作用.     

针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波频率的影响

目的:通过睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波的频率,分析针刺百会穴对失眠的治疗效果。方法:采用水平台法建立睡眠剥夺大鼠模型,分为实验组、假穴位组和模型组,以正常喂养的大鼠作为空白对照组。实验组行百会穴针刺治疗,假穴位组行百会穴左侧旁0.2cm的假穴位针刺治疗,模型组、空白组不予以治疗。在72h睡眠剥夺结束后记录各组大鼠脑电波数据,观察针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型脑电图α波、β波频率的影响。结果:针刺前,实验组、假穴位组、模型组大鼠α波、β波频率无统计学差异(P0.05),且α波均低于空白组,β波均高于空白组,说明睡眠剥夺可影响正常脑电波频率,提升大鼠大脑皮层兴奋性;针刺假穴位组大鼠脑电图变化与模型组比较无统计学差异(P0.05),且治疗后大鼠的狂躁表现无显著改善,没有立刻进入睡眠;针刺治疗中,实验组大鼠α波频率上升、β波频率下降,趋向于正常,且治疗后立刻进入睡眠状态,说明针刺百会穴可降低睡眠剥夺模型的大脑皮层兴奋度。结论:针刺百会穴对睡眠剥夺大鼠模型具有安神作用。     

抓痧调神法推拿对失眠大鼠脑内单胺类神经递质的影响观察

目的探讨抓痧调神法推拿对失眠大鼠脑内单胺类神经递质的影响。方法将实验动物分为大平台对照组(对照组)、睡眠剥夺模型组(模型组)、抓痧调神法推拿治疗组、药物治疗组,后两组分别行以抓痧调神法和口服中药解郁安神颗粒治疗。取大鼠脑内单胺类神经递质5-HT、5-HIAA、NE及DA进行含量变化的观测。结果抓痧调神法推拿可以有效调节失眠大鼠脑内单胺类神经递质含量的变化,与其他各组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论抓痧调神法推拿可能是通过调节失眠大鼠脑内单胺类神经递质失衡状态而起到治疗失眠症的作用。     

泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠单胺类神经递质影响的研究

[目的]探讨泻肝安神法对睡眠剥夺大鼠脑干及海马脑区单胺类神经递质含量的干预效应。[方法]采用水平台睡眠剥夺法造模后,给予泻肝安神法干预7 d后取材,高效液相色谱法检测脑干及海马脑区7种单胺类神经递质的含量。[结果]大鼠剥夺睡眠后脑干单胺类神经递质5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、5-羟色胺(5-HT)明显下降,多马胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、3-甲氧基4-羟基苯乙酸(HVA)明显升高,二羟苯乙酸(DOPAC)无明显变化。而在海马区域各单胺类神经递质含量变化不显著。采取泻肝安神法治疗后大鼠脑干5-HT、5-HIAA含量显著升高,DA含量明显下降;而在双侧海马5-HT、5-HIAA、DA、HVA升高,NE下降。采用地西泮片治疗后大鼠在海马区的单胺类神经递质变化与中药组结果一致,但在脑干仅有5-HIAA升高,而5-HT、DA则没有明显变化。[结论]泻肝安神法可调节睡眠剥夺大鼠的单胺类神经递质,且影响靶点要多于地西泮片,机制可能与综合的调节单胺类神经递质水平,纠正其紊乱相关。     

NIR光谱结合LLE-PLS建模用于安神补脑液提取过程分析的研究

目的:探讨安神补脑液提取过程近红外(NIR)光谱分析的可行性及其方法。方法:提出NIR光谱建模的局部线性嵌入(LLE)-偏最小二乘(PLS)方法,该方法首先用LLE对NIR光谱数据降维,再用PLS建立校正模型。结果:参数优化后的LLE-PLS,二苯乙烯苷留-法交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.0457mg/mL、决定系数(R2)为0.9673,淫羊藿苷RMSECV为0.0333mg/mL、R2为0.9809,均优于常规的PLS建模方法。结论:基于NIR光谱和LLE-PLS方法可实现安神补脑液提取过程的在线分析。     

pH对安神补脑液稳定性影响的研究

目的探讨pH对安神补脑液稳定性的影响。方法结合安神补脑液的现行药典标准及HPLC图谱,对加速反应后的不同pH值的安神补脑液进行检测,分析成分的变化规律。结果pH对安神补脑液中维生素B1、二苯乙烯苷、淫羊藿的黄酮类成分均有影响,pH=5.0～5.5的环境较有利于安神补脑液的稳定。结论pH对安神补脑液的稳定性有较大的影响,应确定合适的制剂pH范围。     

安神脐贴对PCPA 致失眠大鼠自主活动及GABA、5-HT 含量的影响

目的：本实验主要观察安神脐贴对对氯苯丙氨酸（P-chlorophenylalanine,PCPA）致失眠大鼠自主活动的影响及血清神经递质γ-氨基丁酸（GABA）、单胺类神经递质5-羟色胺（5-HT）含量的变化。方法：采用腹腔注射PCPA的方法制备失眠大鼠模型,将健康SD大鼠按随机数字表法随机分为空白对照组、模型对照组、安神脐贴低剂量组、安神脐贴高剂量组、同仁安神丸组。采用EthoVision大小鼠行为学系统记录大鼠自主活动情况,采用ELISA法测定各组大鼠血清五羟色胺（5-HT）、γ-氨基丁酸（GABA）的含量变化。结果：安神脐贴和同仁安神丸均能减少大鼠的自主活动次数,提示安神脐贴有明显的镇静作用。腹腔注射PCPA可导致大鼠血清神经递质GABA、5-HT表达量发生显著变化,采用安神脐贴低剂量、高剂量及同仁安神丸干预后,与模型组相比,GABA、5-HT的表达量升高。结论：安神脐贴有明显的镇静作用,安神脐贴调节睡眠的机制与调节具有促眠作用的因子GABA、5-HT有关。     

补脑安神胶囊镇静催眠作用的实验研究

目的：探讨中药补脑安神胶囊（BNAS）的镇静催眠作用,为该药临床应用提供参考。方法：采用观察小鼠自发活动及小鼠戊巴比妥钠（阈下剂量）协同催眠时间的研究方法,进行镇静催眠实验。结果：与给药前比较补脑安神胶囊低剂量组（BNAS1）、中剂量组（BNAS2）、高剂量组（BNAS3）均可显著减少小鼠自主活动时间和延长戊巴比妥钠（阈下剂量）协同睡眠时间。与空白对照组比较具有显著差异（P〈0.05,P〈0.01）该作用呈剂量依赖性。BNAS1与阳性对照组ASBN0作用相当,无显著差异（P〉0.05）。结论：补脑安神胶囊具有镇静催眠作用。     

睡眠剥夺对大鼠大脑功能的影响

目的探讨睡眠剥夺(SD)对大鼠大脑功能的影响。方法采用小平台水环境法建立SD模型,以正常对照组和大平台对照组为对照,以学习记忆能力和脑电活动为指标,观察SD对大鼠脑功能的影响。结果①大平台对照组学习记忆能力提高(P<0.05);SD组学习记忆能力降低(P<0.05和0.01),且随SD时间的延长,学习记忆能力下降越明显。②大平台对照组与正常对照组的脑电活动无差别(P>0.05);SD组与大平台组有差异(P<0.05和0.01)。结论SD的确对大脑功能有明显的抑制作用,而且SD时间越长抑制越明显。     

养阴安神口服液药理作用研究

动物实验结果表明:养阴安神口服液能显著减少正常小鼠的自发活动次数,极显著缩短正常小鼠戊巴比妥钠出现睡眠的时间和延长睡眠持续时间,其镇静、催眠作用与市售枣仁安神液相当。该药还能显著降低甲亢阴虚大鼠血清T_3、T_4浓度,防止肝糖元含量减少、降低心率、对抗体重减轻,从而显示其养阴、安神作用。     

电针百会、足三里穴对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响

目的观察电针百会、足三里穴对睡眠剥夺(SD)后大鼠学习记忆能力的影响以及脑干中多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)含量的变化。方法将32只雄性SD大鼠随机分为正常组、睡眠剥夺组、假针组和电针组。采用Morris水迷宫实验和避暗实验分别在连续5 d的睡眠剥夺前后测试大鼠的学习记忆能力,并应用高效液相色谱(HPLC)和电化学检测器检测大鼠脑干中DA和5-HT含量。结果在Morris水迷宫实验中,睡眠剥夺组和假针组的潜伏期均高于正常组和电针组(P0.05);睡眠剥夺组和假针组的平台象限滞留时间均低于正常组和电针组(P0.05),电针组低于正常组(P0.05)。在避暗实验中,连续5 d的睡眠剥夺后睡眠剥夺组、假针组和电针组的步入潜伏期均低于正常组(P0.05),而电针组高于睡眠剥夺组和假针组(P0.05)。连续5 d的睡眠剥夺后,睡眠剥夺组和假针组大鼠脑干DA含量均低于正常组和电针组(P0.05),电针组低于正常组(P0.05);睡眠剥夺组和假针组大鼠脑干5-HT含量均高于正常组和电针组(P0.05),电针组高于正常组(P0.05)。结论电针可明显改善睡眠剥夺后大鼠的学习记忆能力,其机制可能与脑干中DA和5-HT含量的变化有关。     

NIR在线检测监控安神补脑液水提过程的研究

目的 建立近红外光谱快速测定安神补脑液提取过程中有效成分的方法.方法 按照厂家工艺实验室模拟安神补脑液水提过程,近红外在线检测并对提取物进行HPLC法测定,获取提取液的近红外(NIR)光谱信息与提取物中的代表活性成分二苯乙烯苷、淫羊藿苷的信息,采用偏最小二乘法建立NIR与HPLC信息间的关系.结果 校正模型相关系数分别为0.953 8、0.975 6,预测样本集的误差均方根(RMSEP)分为0.048 7、0.043 2.结论 本法操作简便、快速,可用于安神补脑液水提过程质量监控.