松口蘑糖蛋白联合5-Fu体外对人肝癌细胞Bel-7402的影响及作用机理初探

采用MTT法研究了松口蘑抗肿瘤糖蛋白MTS03与化疗药物5-Fu单独及联合使用对人肝癌细胞Bel-7402的影响及对人正常肝细胞L-02的毒性作用，观察不同浓度配比及不同作用时间对细胞是否具有增效减毒的作用；采用扫描电镜观察MTS03作用后的Bel-7402细胞形态．结果表明，MTS03与5-Fu在较低浓度单独使用对肿瘤细胞无显著差异，但两者联合使用增强了对肿瘤细胞的杀伤作用，而对正常细胞的作用较小，联合使用的q值均大于0．85，说明不存在拮抗作用．扫描电镜观察到凋亡小体的形成，随着剂量升高，凋亡小体增多．这一结果说明两者合用后MTS03增加了5-Fu对肝癌细胞的敏感性，同时降低了两者单一高剂量使用时引起的毒副作用，同时MTS03能诱导Bel-7402细胞膜皱缩和凋亡小体的形成．     

玛咖生物碱对人肝癌细胞Bel-7402和H22荷瘤小鼠的抑制作用

探究玛咖生物碱对Bel-7402细胞体外抗肝癌活性及体内抗H22肝癌活性的影响。通过0.5%的盐酸95%乙醇溶液提取获得玛咖生物碱粗提物,并通过进一步的酸溶碱沉方法纯化获得玛咖生物碱,通过MTT法测定不同剂量玛咖生物碱对Bel-7402细胞抑制率的影响,并进一步通过体内抗肝癌H22荷瘤小鼠试验,考察不同剂量玛咖生物碱体内抗肝癌活性影响。细胞实验表明,不同剂量组玛咖生物碱对Bel-7402细胞有一定的抗肝癌活性,其抗癌活性高低顺序为:玛咖生物碱高剂量组玛咖生物碱中剂量组玛咖生物碱低剂量组。体内抗肝癌试验表明,玛咖生物碱高、中剂量组具有显著的抗肝癌活性。可见,玛咖生物碱具有一定的抗肝癌活性,这为玛咖生物碱活性的研究提供新的方向。     

洋葱汁对结肠癌细胞SW620株增殖和凋亡的影响

目的:初步探讨洋葱汁对结肠癌细胞株SW620增殖的影响及可能的机制。方法:通过MTT法及对比绘制处理组与对照组生长曲线验证不同浓度洋葱汁对肿瘤细胞增殖的影响;对比观察处理前后的细胞形态及荧光定量PCR检测Caspase-3基因检测洋葱汁对SW620细胞凋亡的影响。结果:通过MTT法检结果表明,不同浓度洋葱汁对结肠癌细胞株SW620均有明显的抑制作用,且其抑制作用随着浓度的升高而明显增强;通过绘制对照组和IC50浓度刺激下的SW620细胞的生长曲线,两者对比表明,IC50浓度刺激下的SW620的生长情况明显受到抑制;通过对比处理前后细胞的形态学观察,细胞基因组DNA变化,初步表明,处理组出现了凋亡现象;通过荧光定量PCR法检测对照组及IC50浓度刺激下结肠癌细胞株SW620中凋亡相关的基因——Caspase-3,结果表明,该基因参比未刺激结肠癌细胞株中Caspase-3的表达量增加10倍以上。结论:通过本研究初步说明了不同浓度洋葱汁对结肠癌细胞株SW620的生长有抑制作用,且随浓度的增加抑制能力增强,其抑制机制可能与细胞凋亡有关。     

苦荞麦蛋白质对乳腺癌细胞的增殖抑制作用

采用MTT 法、HE 染色法、扫描电镜法研究苦荞麦蛋白质(TBWSP31)对人乳腺癌Bcap37 细胞的增殖抑制作用。结果表明：TBWSP31 对人乳腺癌细胞株Bcap37 的生长有明显的抑制作用,并且存在时间效应和剂量效应。48h 和72h 的IC50 值分别为43.37、19.75μg/mL。HE 染色发现细胞经样品作用后,细胞变形,变小,细胞核固缩、裂解,细胞膜皱褶、卷曲和出泡,并且有细胞膜包裹的凋亡小体生成。扫描电镜下观察细胞表面超微结构,发现细胞出现典型的凋亡形态学特征,细胞表面微绒毛大量减少,有的甚至消失,细胞体积变小,细胞膜皱缩,表面凸起,形成了大量的小泡,有的成为凋亡小体。     

油樟叶提取物对人肝癌BEL-7402细胞增殖的抑制作用

采用水蒸汽蒸馏和系统溶剂提取获得油樟叶的不同提取物,运用MTT法考查油樟叶各提取物对人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用的影响。结果表明,油樟叶各提取物对BEL-7402细胞的增殖具有不同程度的抑制作用,呈现明显的量效关系;各提取物抑制作用的大小顺序为:乙酸乙酯萃取物石油醚萃取物乙醇提取物1,8-桉叶油素油樟叶精油正丁醇萃取物;低浓度时1,8-桉叶油素与油樟叶精油的差异有统计学意义(P0.05);高浓度时油樟叶精油、乙醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物之间的差异无统计学意义(P0.05)。油樟叶提取物有一定抑制肝癌细胞增殖的作用,油樟叶精油的主要活性成分可能是1,8-桉叶油素,去精油后残渣的活性组分存在于石油醚部分和乙酸乙酯部分。     

白花蛇舌草对HepG2人肝癌细胞Bcl-2和Caspase-3表达的影响

目的：研究白花蛇舌草对HepG2人肝癌细胞Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法：MTT检测白花蛇舌草提取液（EHD）对HeDG2细胞增殖的抑制作用和免疫组化SP法检测Bcl-2和Caspase-3蛋白表达。结果：EHD在一定浓度和时间内能抑制HepG2细胞的生长,并具有剂量和时间依赖性;EHD（160mg／m;_）作用HepG2细胞48h后,Bcl-2的表达水平下降,而CaspaseJ的表达水平升高。结论：EHD（160mg／mL）对HepG2细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,婪机制可能与相关基因BcL2、 Casnase-3的袁主太调控有美．     

蜂胶醇提物对人肝癌细胞Hep G2增殖及凋亡的影响

为探讨蜂胶醇提物对人肝癌细胞Hep G2 增殖和凋亡的影响,采用MTT 法检测蜂胶醇提物对Hep G2 细胞增殖的抑制作用,用荧光倒置显微镜和流式细胞仪分析蜂胶醇提物对Hep G2 细胞凋亡的影响。结果表明：12.5～200μg/mL 质量浓度的蜂胶醇提物作用24、48h 后,均能不同程度地抑制Hep G2 细胞的增殖,呈明显的时间、剂量依赖关系,半数抑制质量浓度(IC50)分别是115、78μg/mL。作用8h 后,Hep G2 细胞出现不同程度的凋亡,凋亡率由6.36% 上升到21.9%,呈现出剂量依赖关系。故蜂胶醇提物可显著抑制人肝癌细胞Hep G2 的生长,诱导其凋亡。     

赤芝富硒蛋白对肝癌HepG2细胞的抑制作用

探究赤芝富硒蛋白对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、周期分布、侵袭、迁移能力的影响。选取人肝癌HepG2细胞,分为空白组、药物对照组、无硒赤芝蛋白组、低、中、高浓度组,检测六组细胞生物学行为及Bcl-2、Bax、caspase3表达。结果显示,高浓度组细胞增殖率低于其他各组,凋亡率高于其他各组,G1期细胞比例为58.66%,高于其他各组。高浓度组细胞侵袭、迁移数分别为28.21、29.66,低于其他各组(p0.05)。高浓度组细胞Bcl-2、caspase3表达分别为0.98、1.01,均低于其他各组;Bax表达为1.03,高于其他各组(p0.05)。使用赤芝富硒蛋白进行干预,能够影响肝癌细胞增殖、凋亡,阻滞细胞周期,抑制侵袭、迁移能力,调控Bcl-2、Bax、caspase3表达,说明赤芝富硒蛋白能够调控肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力,抑制肝癌HepG2细胞的发展和扩散,为肝癌的临床治疗提供一定的理论依据。     

绿茶富硒蛋白对肝癌HepG2细胞的抑制作用

本研究探讨了绿茶富硒蛋白对肝癌HepG2细胞的抑制作用.采用DEEM培养基培养对数生长期的肝癌HepG2细胞,并将其作为对照组,将浓度分别为0.11 g/L、0.18 g/L、0.25 g/L、0.50 g/L的绿茶富硒蛋白为实验组;将添加二甲基亚砜(DMSO)的DMEM培养基作为参考组.通过光密度值计算抑制率,采用流...     

姜黄素对大肠癌细胞Caspase-3和PARP表达的影响

为了探讨姜黄素对LoVo细胞凋亡与凋亡相关蛋白Caspase-3和多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达的影响,明确其治疗大肠癌的生物学基础。用不同浓度姜黄素处理体外培养的人大肠癌LoVo细胞,采用MTT法检测姜黄素对LoVo细胞的增殖抑制作用,倒置显微镜观察姜黄素对LoVo细胞集落形成的影响;Hoechst33258染色法观察细胞凋亡;采用分光光度法检测Caspase-3酶活性;Western blotting检测姜黄素作用前后Caspase-3和PARP蛋白表达的差异。结果显示姜黄素可抑制人大肠癌LoVo细胞的生长増殖,并能抑制细胞集落的形成,降低细胞增殖生存率,激活Caspase-3的表达,呈量效和时间依赖性,20μmol/L以上浓度姜黄素能显著诱导LoVo细胞凋亡,上调Caspase-3和PARP蛋白表达。这表明姜黄素能显著抑制LoVo细胞的增殖并诱导其发生凋亡,其分子机制与调节Caspase-3和PARP的表达相关。     

二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

本研究旨在探讨二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。采用MTT法检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜、Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞术检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞形态、凋亡和周期的影响;并进一步采用Western Blot法分析细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。研究结果表明二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,细胞形态发生了明显变化,呈显著的剂量依赖型,其半数抑制浓度（IC50）值为24.41±1.25 μM。细胞周期实验结果表明,经二氢杨梅素处理后,G0/G1期细胞数百分比从60.20%下降到21.50%,而G2/M细胞数百分比从11.60%增加到45.30%,细胞周期蛋白Cyclin B1表达下降引起细胞周期阻滞;此外,抗凋亡蛋白Bcl-2表达和促凋亡蛋白Bax表达的比例显著下降,从而诱导细胞发生凋亡。结果表明二氢杨梅素具有显著的抗骨肉瘤增殖活性,可开发一种潜在的治疗骨肉瘤的功能食品或药物。     

山楂原花青素对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法：体外培养SMMC-7721细胞,噻唑蓝法检测不同质量浓度山楂原花青素对细胞增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染色法观察细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达;检测每组细胞中过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、Na＋K＋-ATP酶活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果：山楂原花青素提取物、表儿茶素和原花青素B2呈时间和质量浓度依赖性地显著抑制SMMC-7721细胞的增殖（P＜0.05）,促进细胞凋亡;与对照组相比,SMMC-7721细胞中SOD、CAT、GSH-Px、Na＋K＋-ATP酶活力降低,MDA含量升高;细胞凋亡相关蛋白半胱天冬酶-8、半胱天冬酶-3、Bcl-2相关X蛋白表达量和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶片段化增加,Bcl-2表达量降低。结论：山楂原花青素可通过影响抗氧化酶活力和细胞凋亡相关蛋白来抑制SMMC-7721细胞增殖,促进细胞凋亡。     

NF-κB和Caspase-3在金雀异黄素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用研究

采用MTT法、形态学观察和琼脂糖凝胶电泳法检测了金雀异黄素(genistein,Gen)对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞的生长和凋亡诱导作用,并采用免疫组化法和WesternBlot法检测Gen对人胃癌细胞NF-κB、Caspase-3蛋白的表达情况。结果显示:Gen可抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡,抑制NF-κB蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达。结果提示:Gen抑制NF-κB蛋白表达、增加Caspase-3蛋白表达,可能是其诱导胃癌细胞凋亡的机制之一。     

番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用及其机理研究。方法:番茄红素及不同浓度番茄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测番茄汁、番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)法观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。结果:番茄汁、番茄红素能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。以上各指标中,番茄汁随着浓度增大其作用加强;低剂量组的作用虽比番茄红素组差,中剂量组的作用与番茄红素组相比无差别,高剂量组的作用比番茄红素组强。结论:番茄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除番茄红素外,可能还存在其他抗癌成分的交互作用。番茄汁、番茄红素对PC-3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞细胞凋亡有关。     

藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖抑制人结肠癌细胞增殖的研究

分离纯化藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖(EPS),研究EPS纯品对HCT-8人结肠癌细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用。利用Sepharose CL-6B凝胶柱探讨干酪乳杆菌KL1菌株EPS粗品的纯化条件,应用紫外全波长扫描及苯酚-硫酸法鉴定EPS纯度;采用CCK-8法和Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒研究EPS对HCT-8人结肠癌细胞的增殖抑制和凋亡作用。结果表明:在0.02～0.12mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱、流速3mL/min、样品上样质量浓度15.0mg/mL、样品上样量2.0mL的纯化条件下获得EPSa和EPSb两个单一组分的胞外多糖,其纯度分别为91.67%和82.86%。EPSa处理HCT-8人结肠癌细胞体外实验发现,EPSa对HCT-8细胞的增殖有抑制作用,以及诱导细胞凋亡的发生,且细胞生长抑制率呈时间-剂量依赖性。提示藏灵菇源干酪乳杆菌KL1菌株的EPSa有抑制结肠癌细胞增殖的生物活性。     

薯蓣皂苷对HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用

研究薯蓣皂苷对HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用。不同浓度薯蓣皂苷干预HepG2肝癌细胞24h后,采用MTT法、Hoechst33258染色法、JC-1染色法和Western blot法检测细胞的增殖能力、线粒体膜电位水平、活性氧水平和Bax、Bcl-2表达。结果显示,2.00μmol/L薯蓣皂苷组对HepG2细胞的抑制率为41.69%,高于1.00μmol/L薯蓣皂苷组;薯蓣皂苷干预HepG2细胞后,细胞分布密度降低,出现变圆脱落死亡;升高ROS水平、降低MMP、抑制Bcl-2和上调Bax的表达,与对照组相比均有显著性差异。2.00μmol/L薯蓣皂苷组Bcl-2、Bax相对表达量分别为0.08、0.10。以上实验结果表明,薯蓣皂苷可明显抑制HepG2肝癌细胞的增殖能力,诱导其发生凋亡,其机制可能与其通过线粒体途径降低MMP,抑制Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达有关。     

地皮菜中一种新型水应激蛋白基因的克隆表达及其抗人结肠癌细胞SW480的作用

利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增出地皮菜（Nostoc commune Vauch.）一种新型水应激蛋白（water stress protein,WSP）的基因（GenBank 序列号：KF003026）,连接到原核表达载体pET28a上,测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21,获得一种新型水应激蛋白表达工程菌;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达及镍离子亲和层析柱（Ni-NTA）纯化后,得到了带6×His标签、分子质量大小为40 kD的可溶性目的蛋白,称其为重组水应激蛋白1（recombinant water stress protein 1,Re-WSP1）。细胞增殖抑制实验结果表明,Re-WSP1蛋白可以抑制结肠癌细胞SW480的增殖,而对正常结肠上皮FHC细胞无明显作用;DAPI细胞核染色结果表明,该蛋白能够诱导SW480细胞凋亡小体的形成;Western blotting结果显示,Re-WSP1蛋白能够促进Procaspase-3和Procaspase-8的活化剪切。以上结果表明：Re-WSP1蛋白能够明显的抑制结肠癌SW480细胞的增殖,并可能通过Caspase依赖途径诱导SW480细胞凋亡。