细胞周期素D1及相关基因在胆管癌中的进展

细胞周期素D1(cyclin D1)在肿瘤中的作用日益受到人们的重视,本文研究cyclin D1及其相关基因其在胆管癌中的作用.     

胃癌组织中细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白质依赖激酶6的表达与预后的关系

目的检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白质依赖激酶6(CDK6)在胃癌组织中的表达情况,分析其表达与胃癌的临床病理因素和预后之间的关系。方法用Western blot 法测定48例胃癌组织及其邻近的正常胃黏膜中cyclinD1和CDK6的表达量。结果 Cyclin D1在 58％的胃癌组织中呈异常高表达,且其表达与胃癌的浸润深度、淋巴转移和TNM分期相关。CDK6 的表达水平在69％的胃癌组织中异常升高,并与组织学分类、淋巴转移和TNM分期相关。未发现 cyclin D1和CDK6在胃癌组织中的表达存在线性相关关系。包括cyclin D1和CDK6过表达在内的多个因素与胃癌患者的5年生存率相关,但只有TNM分期和CDK6是患者预后的独立影响因素。结论 Cyclin D1和CDK6的异常高表达有可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

细胞周期蛋白D1和P21WAF1在胃癌中的表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的检测细胞周期蛋白（cyclin）D1、P21WAF1在胃癌组织中的表达,并探讨其与化疗药物敏感性的关系。方法采用MTT比色法观察80例胃癌原代培养细胞在体外对化疗药物羟基喜树碱（HCPT）、顺铂（DDP）、阿霉素（ADM）、氟尿嘧啶（5-Fu）及丝裂霉素（MMC）的敏感性;免疫组织化学染色检测cyclin D1和P21WAF1蛋白在胃癌组织中的表达情况。结果胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同：5-FU、MMC和DDP对胃癌细胞的抑制率显著高于ADM和HCPT（P〈0．05）。胃癌组织中cvclin D1和P21WAF1蛋白的阳性率分别为70．0％和47．5％。cyclin D1阳性表达者对5-Fu和HCPT的敏感性显著高于阴性表达者（P〈0．05）,而P21WAF1阴性表达者对MMC、5-FU和DDP的敏感性显著高于阳性表达者（P〈0．05）。结论cyclin D1和P21WAF1蛋白与胃癌对化疗药物敏感性有关．检测其表达对于化疗药物的选择具有一定的参考价值。     

二甲基苯蒽诱导大鼠乳腺癌发生过程中周期蛋白D1、p53表达

目的 探讨周期蛋白D1（cyclin D1）、p53蛋白在大鼠乳腺癌生过程中的表达及其意义。方法 雌性Wistar大鼠120只，利用二甲基苯蒽200mg/kg体重灌胃，复制大鼠乳腺癌动物模型，应用链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶C免疫组织化学技术检测周期蛋白D1、p53蛋白在正常乳腺、不典型增生乳腺及乳腺癌中的表达。结果 在正常乳腺组织中无cyclin D1、p53蛋白表达，不典型增生乳腺组织中无p53蛋白表达，在不典型增生Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺组织中分别为15％、30％、55％有cyclin D1表达，7／9的乳腺癌Ⅰ级有cyclin D1的表达，1／4的乳腺癌Ⅱ级中cyclin D1有表达，乳腺癌Ⅲ级无表达。p53蛋白在乳癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中分别有1／9、1／4、6／7有过度表达。结论 在大鼠乳腺癌发生过程中，cyclin D1过度表达参与肿瘤的发生，是肿瘤发生中的早期事件，而p53表达与肿瘤进展有关，是肿瘤发生的晚期事件，cyclin D1表达与p53蛋白表达呈负相关。     

CD105和细胞周期蛋白D1协同表达与食管鳞癌淋巴结转移及预后的关系

目的 探讨食管鳞癌中CD105和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的协同表达与淋巴结转移和预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测南通市第一人民医院收治的80例食管鳞癌患者食管鳞癌组织中CD105和cyclin D1的表达,分析两者协同表达与食管鳞癌淋巴结转移及预后的关系.选取80例正常食管组织作对照.采用方差分析或t检验、x2检验、Pearson相关分析,生存分析采用Kaplan-Meier法,CD105的表达用微血管密度(MVD)值以-x±s表示.结果 食管鳞癌组织和正常食管组织CD105表达分别为36±8和11±3;Cyclin D1阳性表达率分别为61%(49/80)和23%(18/80),两者比较,差异有统计学意义(t=25.129,x2=4.972,P<0.05).按照食管鳞癌中CD105标记的MVD均值36为界,分为LCD105(MVD≤36)和HCD105(MVD＞36),其中LCD 44例,HCD 36例.LCD105淋巴结转移9例,HCD淋巴结转移26例.Cyclin D1阳性表达者有淋巴结转移28例,阴性表达者淋巴结转移7例.经Pearson列联相关分析显示CD105高表达、cyclin D1阳性表达与淋巴结转移有关(x2=21.562,9.217,P<0.05).HCD105+cyclin D1阳性28例,生存时间为(31±6)个月;LCD105+cyclin D1阳性21例,生存时间为(47±7)个月;HCD105+cyclin D1阴性8例,生存时间为(51±9)个月;LCD105+cyclin D1阴性23例,生存时间为(61±5)个月,4者比较,差异有统计学意义(F=11.76,P<0.05).结论 CD105和cyclin D1两者协同表达可作为判断食管鳞癌预后的指标.     

阿司匹林对大鼠肝癌组织PCNA及cyclin D1表达的影响

目的 观察阿司匹林对二乙基亚硝胺诱导肝癌形成大鼠肝脏细胞增殖核抗原(proliferating nuclear antigen, PCNA)及细胞周期蛋白(cyclin D1)表达的影响,探讨阿司匹林在肝癌发生发展过程中的作用.方法 应用二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌模型,预防组饲料中添加阿司匹林,两组分别于第8、12、16周时处死大鼠6只,用免疫组化检测肝脏PCNA及cyclin D1,观察不同时期肝脏PCNA及cyclin D1表达的变化及肝癌发生率.结果 预防组大鼠肝硬化发生时间较晚,程度较轻,肝癌发生少,16周时对照组4/6只大鼠发生肝癌(P<0.05).PCNA及cyclin D1的表达明显低于对照组,阿司匹林对大鼠PCNA的抑制作用在12～16周时比较明显(F=5.696,F=11.057,均P<0.05),对cyclin D1的抑制作用在16周时比较明显(F=11.944,P<0.05).结论 阿司匹林能降低诱癌大鼠肝脏PCNA及cyclin D1表达,对实验性大鼠肝癌的形成有抑制作用.     

细胞周期蛋白D1的表达与乳腺浸润性导管癌的临床病理相关性

细胞周期蛋白(cyclin)是细胞有丝分裂过程中的一组重要蛋白，是细胞周期调节因子之一，通过相应的周期素依赖性激酶(cyclin—dependent kinase，CDK)及其抑制因子(cyclin-dependent kinases inhibitor．CKI)对细胞周期中G1／S期起重要调控作用。正常细胞中cyclin的合成和降解受到高度有序的调节，但乳腺癌细胞中却往往有异位表达。本研究应     

环氧化酶2抑制剂对结肠癌细胞中BCL-3及细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨环氧化酶2（COX-2）抑制剂对BCL-3基因及其靶向基因细胞周期蛋白1（cyclin D1）的转录和表达的影响.方法 实验组分别以25、50、100及200 μmol/L的NS398（COX-2抑制剂）处理结肠癌SW480细胞48 h或72 h;对照组以不含NS398的溶媒处理SW480细胞.采用RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学染色方法分别从mRNA和蛋白水平检测各组细胞中BCL-3和cyclin D1的表达情况.结果 各组细胞处理48 h后,与对照组相比,实验组BCL-3和cyclin D1 mRNA水平下降,呈剂量依赖性;而蛋白水平则无明显差异（P〉0.05）.处理72 h后,与对照组相比,实验组BCL-3和cyclin D1蛋白水平下降,亦呈现剂量依赖性.当NS398浓度达到100 μmol/L时,其BCL-3 mRNA及蛋白表达水平与对照组比较差异即有统计学意义（P〈0.01）：当NS398浓度达到50 μmol/L时,其cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平与对照组比较差异即有统计学意义（P〈0.05）.结论 结肠癌细胞株SW480中有BCL-3的表达.COX-2抑制剂NS398可从基因及蛋白水平对BCL-3及cyclinD1进行抑制,并呈剂量依赖性.NS398可能通过BCL-3而抑制cyclinD1.     

围手术期营养支持对结直肠癌患者细胞周期蛋白D1表达及复发转移的影响

目的 探讨围手术期营养支持对结直肠癌患者肿瘤细胞cyclin D1表达及复发转移的影响.方法 将120例结直肠癌患者按其是否行营养支持分为营养支持组（60例）和对照组（60例）.围手术期营养支持方案：葡萄糖、脂肪乳剂、氨基酸及微量元素等组成的营养液,行全胃肠外营养,术前7 d,术后3 d.采用原位杂交检测cyclin D1的表达;采用TUNEL法检测细胞凋亡;采用细胞核抗原免疫组织化学染色检测细胞增殖.结果营养支持治疗后,营养支持组和对照组患者肿瘤组织cyclin D1阳性表达率分别为（35.23±5.12）%和（37.53±5.31）%;增殖指数分别为（7.21±2.56）%和（8.75±3.84）%;凋亡指数分别为（53.45±7.74）%和（56.74±8.02）%;差异均无统计学意义（P＞0.05）.两组患者术后3年复发率分别为16.7%和15.0%,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 围手术期营养支持不会影响cyclin D1的表达,也不会促进肿瘤复发和转移.     

围手术期营养支持对结直肠癌患者细胞周期蛋白D1表达及复发转移的影响

Objective To evaluate the effects of perioperative total parenteral nutrition on cyclin D1, recurrence and metastasis of colorectal cancer cells. Methods A total of 120 patients with colorectal carcinoma were randomly divided into two groups, namely group A (total parenteral nutrition,TPN,60 cases) and group B (non total parenteral nutrition, NTPN, 60 cases). In group A, the patients were given with TPN (including glucose, intralipid, amino acid, and vitamins, etc.) for 10 days perioperation (7 days preoperatively and 3 days postoperatively). In group B, the patients did not receive any nutrition support perioperative nutrition support. The samples were obtained by colonoscopy preoperatively or during operation. Apoptosis was detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling (TUNEL) technique,expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) by immunohistochemical staining, and the expression of cyclin D1 by in situ hybridization. The apoptotic index (AI), the proliferating index (PI), and the expression of cyclin D1 were calculated perioperatively and postoperatively. Results After perioperative nutrition support, the expression rates of cyclin D1, PI and AI in group A and group B were (35.23±5.12)% and (37.53±5.31)%, (7.21±2.56)% and (8.75±3.84)%, (53.45±7.74)% and (56.74±8.02)% respectively. There were no significant difference of PI, AI and the expression of cyclin D1 (all P＞0.05) between two groups. The 3-year recurrent rates in two groups were 16.7% and 15.0%(P＞0.05). Conclusion Perioperative TPN can not promote proliferation and apoptosis of carcinoma cells, and has no significant impact on the expression of cyclin D1, recurrence or metastasis of colorectal cancer.     

围手术期营养支持对结直肠癌患者细胞周期蛋白D1表达及复发转移的影响

Objective To evaluate the effects of perioperative total parenteral nutrition on cyclin D1, recurrence and metastasis of colorectal cancer cells. Methods A total of 120 patients with colorectal carcinoma were randomly divided into two groups, namely group A (total parenteral nutrition,TPN,60 cases) and group B (non total parenteral nutrition, NTPN, 60 cases). In group A, the patients were given with TPN (including glucose, intralipid, amino acid, and vitamins, etc.) for 10 days perioperation (7 days preoperatively and 3 days postoperatively). In group B, the patients did not receive any nutrition support perioperative nutrition support. The samples were obtained by colonoscopy preoperatively or during operation. Apoptosis was detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling (TUNEL) technique,expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) by immunohistochemical staining, and the expression of cyclin D1 by in situ hybridization. The apoptotic index (AI), the proliferating index (PI), and the expression of cyclin D1 were calculated perioperatively and postoperatively. Results After perioperative nutrition support, the expression rates of cyclin D1, PI and AI in group A and group B were (35.23±5.12)% and (37.53±5.31)%, (7.21±2.56)% and (8.75±3.84)%, (53.45±7.74)% and (56.74±8.02)% respectively. There were no significant difference of PI, AI and the expression of cyclin D1 (all P＞0.05) between two groups. The 3-year recurrent rates in two groups were 16.7% and 15.0%(P＞0.05). Conclusion Perioperative TPN can not promote proliferation and apoptosis of carcinoma cells, and has no significant impact on the expression of cyclin D1, recurrence or metastasis of colorectal cancer.     

乳腺癌中细胞周期素D1基因改变和转录异常对其蛋白表达的影响

目的:研究乳腺癌中细胞周期素D1(cyclin D1)在DNA、mRNA和蛋白水平的改变,探讨cyclinD1基因改变和转录异常对其蛋白表达的影响.方法:免疫组织化学检测cyclin D1蛋白表达,RT-PCR检测cyclin D1 mRNA的转录异常, southern杂交检测cyclin Dl的基因改变.结果:(1)yclin D1蛋白在乳腺癌中表达阳性率为54%.(2)cyclin D1在早期乳腺癌、浸润性导管癌原发灶、腋窝淋巴结转移灶中表达阳性率的差异无统计学意义.(3)浸润性导管癌中15%出现cydinDl基因扩增,35%出现cyc-lin D1 mRNA表达升高.结论:(1)cyclin D1蛋白表达是乳腺癌发生中的早期事件,且在乳腺癌进程中有稳定保持的趋势.(2)cyclin D1的蛋白表达除受基因扩增和mRNA表达升高的影响外,还受到其他因素的影响.     

结直肠癌患者术前区域动脉灌注化疗对癌细胞增殖的影响

目的 探讨术前区域动脉灌注化疗对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法 选择术前临床病理证实的结直肠癌患者 20例,于术前选择肿瘤供应动脉行区域灌注化疗, 10 d后行根治手术。免疫组织化学法测定并比较癌组织增殖细胞核抗原（ PCNA）及细胞周期蛋白 D1（ cyclin D1）的表达水平。同时选择同期未行动脉灌注化疗的结直肠癌患者直接接受根治手术,作为对照组。结果 化疗组及对照组 PCNA标记指数 (LI)分别为 16. 4％± 15. 2％及 38. 1％± 17. 8％（ P=0.02） ; cyclin D1 LI分别为 8. 7％± 8. 0％ 及 27. 4％± 16. 5％（ P=0. 0002)。细胞增殖指标 PCNA及 cyclin D1的表达在化疗组显著低于对照组。结论 术前选择性区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞增殖可能有较明显的抑制作用,从而发挥抑制肿瘤生长的治疗作用。     

Cyclin D3、Cyclin D1、p27KIP1在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及其关系

目的 探讨膀胱尿路上皮细胞癌(UCCB)组织中Cyclin D3、Cyelin D1和p27KIP1的表达及关系.方法 采用免疫组织化学方法测定50例UCCB组织、癌旁组织及15例正常膀胱黏膜组织的Cyelin D3、Cyelin DI和p27KIP1表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CyclinD3 mRNA的表达情况.结果 Cyclin D3蛋白在UCCB、癌旁黏膜及正常膀胱黏膜中的表达率分别为32.00%(16/50)、12.00%(6/50)和6.67%(1/15),在UCCB组织中的表达高于癌旁黏膜和正常膀胱黏膜中的表达,差异有统计学意义(P<0.05),和病理分级、肿瘤大小及1年内肿瘤复发明显相关(P<0.05);Cyelin D3 mRNA在膀胱癌组织与癌旁组织和正常组织间,差异均有统计学意义(P<0.01).CycLin D1阳性率为80.00%(40/50),和病理分级及1年内肿瘤复发明显相关(P<0.05);p27KIP1阳性率为46.00%(23/50),和病理分级及1年内肿瘤复发明显相关(P<0.05).p27KIP1蛋白与Cyclin D3蛋白、Cyefin D1蛋白在UCCB中的表达呈负相关(r=-0.5472,P<0.01:r=-0.5417,P<0.01).Cyelin D3和Cyclin D1蛋白表达呈正相关(r=0.3430,P(0.05).结论 UCCB组织中Cyclin D3、Cyclin D1和p27KIP1表达明显相关,三者联合检测对UCCB的诊断治疗和估计预后有一定意义.     

胆囊癌组织中cyclin D1，cdk4，p16，Rb表达及意义

目的 研究胆囊癌组织中cyclin D1,cdk4,p16和Rb的表达相互关系。方法 石蜡包埋切片ABC免疫组织化学法。结果 40例胆囊癌cyclin D1,cdk4,p16和Rb阳性病例率分别为42.5%,47.5%,32.5%和37.5%;高分化、组织学分级Ⅰ级和未转移病例cyclin D1,cdk4,RB阳性率明显低于低分化、组织学分级Ⅲ级和转移病例;cyclin D1表达与cdk4表达呈正相关系和与P16呈负相关系,P16表达与Rb表达和cdk4表达呈负相关系,结论 cyclin D1,cdk4,p16和Rb表达特征与胆囊癌发生发展、生物学行为及其预后有密切关系。胆囊癌的分子发病机制可能涉及cdk4/cyclin D1,Rb和p16负反馈调节通路的异常。     

长链非编码RNA MLK7-AS1在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞增殖的影响

背景与目的:长链非编码RNA(lncRNA)MLK7-AS1是一种新发现的与多种肿瘤发生发展密切相关的lncRNA,但其在结肠癌中的表达及其作用尚未见报道。因此,本研究旨在探讨lncRNA MLK7-AS1在结肠癌中的表达以及其对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法:用qRT-PCR检测lncRNA MLK7-AS1在21对结肠癌组织与相对应的癌旁组织手术标本以及在不同结肠癌细胞系(SW480、HCT116、SW620、DLD1、HT29、LOVO)与正常结肠上皮细胞(NCM460)中的表达。将结肠癌细胞转染lncRNA MLK7-AS1过表达质粒后,分别用MTS、平板克隆试验、流式细胞术、Western blot及qRT-PCR分别检测细胞活力、克隆形成能力、细胞周期以及细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:lncRNA MLK7-AS1在结肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织;在各结肠癌细胞株中表达水平明显高于正常结肠上皮细胞(均P<0.05)。将lncRNA MLK7-AS1表达量相对较低的SW480与HCT116转染lncRNA MLK7-AS1过表达质粒后,两种细胞的细胞活力和克隆形成能力均显著增强(均P<0.05);G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(均P<0.05);细胞周期相关蛋白cyclin D1和CDK6的表达水平均明显上升(均P<0.05)。结论:lncRNA MLK7-AS1在结肠癌中高表达,其高表达可以促进结肠癌细胞增殖,其机制可能与上调细胞周期相关蛋白cyclin D1及CDK6表达有关。     

Pin1和周期素D1在胰腺癌中的表达及其意义

目的:检测胰腺癌及癌旁组织中Pin1和周期素D1基因的表达,探讨Pin1在胰腺癌发病中所起的作用。方法:收集27例胰腺肿瘤组织及其相应的肿瘤旁组织标本,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（RQ RT-PCR）检测胰腺良恶性肿瘤及肿瘤旁组织中Pin1和周期素D1 mRNA 的表达,运用Fisher精确概率分析两者之间的相关性及其与肿瘤临床分期和病理特征的关系。结果:7例胰腺囊腺瘤中周期素D1和Pin1的表达与肿瘤旁组织之间无显著性差异;而20例胰腺癌中周期素D1和Pin1的表达明显高于肿瘤旁组织［（2.78±1.02）vs.（4.36±1.27）和(5.48±1.69) vs. (9.97±1.86),P<0.05）］。Pin1和周期素D1与肿瘤的临床分期和病理分化程度无明显的相关（组间差异均为P>0.05）,但Pin1与周期素D1的表达有关（P<0.01）。 结论:胰腺癌中Pin1的过表达可促进周期素D1表达,由此诱导了肿瘤的发生;Pin1可能在胰腺癌中起着重要作用。     

细胞周期蛋白D1在三氧化二砷抑制人胆囊癌细胞生长中的作用

目的 探讨细胞周期蛋白(Cyclin)D1在三氧化二砷(As2O3)抑制人胆囊癌细胞体外生长中的作用.方法 不同浓度的As2O3作用于胆囊癌细胞GBC-SD,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期分布.Western印迹和RT-PCR检测Cyclin D1、D2、D3和CDK4、K6的蛋白和mRNA表达.构建Cyclin D1的表达质粒并转染GBC细胞,观察Cyclin D1过表达时细胞周期的变化.结果 As2O3能抑制胆囊癌细胞生长,作用呈时间、剂量一效应关系;流式细胞仪检测发现As2O3可将增殖过程中的胆囊癌细胞阻滞于G1期;Western印迹及RT-PCR检测显示Cyclin D1表达下降;过表达Cyelin D1逆转了As2O3对细胞周期的改变.结论 Cyclin D1在As2O3抑制人胆囊癌细胞的生长中起重要作用.     

Cyclin D1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin D1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例HCC组织、20例正常肝组织中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果Cyclin D1蛋白在肝癌组织中的阳性率为44．0％,极显著高于正常肝组织（均为阴性表达）（P〈0．01）;阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P〈0．05,P〈0．05）。Cyclin D1的过表达均与病人术后〈3年生存期有关（P〈0．05）。结论Cyclin D1在HCC的发生、发展过程中起着不同程度的作用,检测Cyclin D1对判定HCC预后可提供一定的依据。     

细胞周期素D1（cyclin D1）和Ki67蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨细胞周期素D1（cyclinD1）、Ki67蛋白在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化方法检测28例ESCC组织和33例食管炎组织中cyclin D1蛋白、Ki67蛋白的表达。结果在ESCC与食管炎组织中cyclin D1阳性表达率分别为60.7%（17/28）和33.3%（11/33）（χ2=4.573,P=0.032）,Ki67标记指数（Ki67LI）分别为（49.21±25.15）%和（11.62±9.87）%（t=7.908,P=0.000）。ESCC组TNM分期中Ⅰ期cyclin D1阳性表达率为14.3%（1/7）,Ⅱ期为55.6%（5/9）,Ⅲ期为85.7%（6/7）,Ⅳ期为100%（5/5）,Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅳ期与Ⅰ期相比,差异有显著性（P值分别为0.029,0.015）。有淋巴结转移者cyclin D1阳性表达率为90.9%（10/11）,无淋巴结转移者为41.2%（7/17）（P=0.016）。28例ESCC随访6～34个月,（25.0±4.2）月,死亡4例（3例为原发病进展,1例脑血管意外）,生存19例,失访5例。结论cyclin D1的表达与进展期肿瘤、淋巴结转移有关。Ki67在肿瘤中高表达,表达强弱与肿瘤分化程度及肿瘤分期无关。