miRNA-145在肺腺癌组织中表达及意义

目的 分析微小核糖核酸-145(microRNA-145,miRNA-145)在肺腺癌组织中的表达情况及其临床意义.方法 收集68例于我院接受手术治疗的肺腺癌患者的肺腺癌组织及癌旁组织标本,提取总RNA,采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)测定肺腺癌患者癌组织及癌旁组织miRNA-145表达,分析其生物学功能.结果 ① 肺腺癌患者癌组织miRNA-145相对表达量低于癌旁正常组织,对比差异具有统计学意义(P<0.05);② 不同性别、不同年龄、有无吸烟史、肿瘤大小不同的肺腺癌患者miRNA-145相对表达量对比差异无统计学意义(P>0.05),临床分期为Ⅲ-Ⅳ期、合并淋巴结转移的肺腺癌患者癌组织miRNA-145相对表达量低于Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05),低分化、中分化肺腺癌患者癌组织miRNA-145相对表达量低于高分化患者(P<0.05),低分化患者癌组织miRNA-145相对表达量又高于中分化患者,对比差异均有统计学意义(P<0.05).结论 肺腺癌患者癌组织miRNA-145相对表达量低于癌旁正常组织,临床分期越高、分化程度越低的伴淋巴结转移的肺腺癌患者癌组织miRNA-145表达水平越低.     

肝细胞癌中c-myc和c-fos表达及其意义

目的探讨c-myc和c-fos在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测分析10例正常肝组织及81例HCC癌旁肝组织和癌组织中c-myc和c-fos蛋白的表达。结果 (1)正常肝组织中c-fos和c-myc均无阳性表达;而在癌组织与癌旁组织则出现阳性表达,其中癌组织的阳性表达率分别为41.9%(34/81)和39.5%(32/81),癌旁组织则为14.8%(12/81)和18.5%(15/81),差异具有统计学意义(P0.05)。(2)c-myc和c-fos在癌组织中的表达与肿瘤分级及分化程度相关(P0.05),但与年龄、性别、肿瘤直径、是否伴有肝硬化及HBsAg阳性无关(P0.05)。结论 c-myc和c-fos的阳性表达与HCC的发生相关。     

结直肠腺癌中Fascin-1 mRNA和蛋白的表达及意义

目的检测Fascin-1 mRNA和蛋白在结直肠腺癌中的表达及预后意义。方法应用RT-PCR、组织芯片及免疫组化EnVision两步法检测结直肠腺癌组织中Fascin-1 mRNA和蛋白的表达,分析其与结直肠腺癌临床病理特征及预后的关系。结果Fascin-1 mRNA在结直肠腺癌组织中的相对表达量(1.309 6±0.947 1)明显高于癌旁正常组织(0.364 1±0.405 3),两组比较差异有统计学意义(t=5.805,P0.05);Fascin-1蛋白在结直肠腺癌组织中的高表达率为29.2%(38/130),显著高于癌旁正常组织(2.3%,3/130,P0.01)。Fascin-1 mRNA的显著上调和Fascin-1蛋白的高表达与结直肠腺癌淋巴结转移、TNM分期相关(P均0.05)。Fascin-1蛋白的高表达与肿瘤位置相关(P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示:Ⅲ+Ⅳ期结直肠腺癌中Fascin-1蛋白高表达组患者较Fascin-1蛋白低表达组患者总生存率低(P0.05)。结论 Fascin-1 mRNA和蛋白的表达与结直肠腺癌的侵袭转移和患者不良预后密切相关,可作为晚期结直肠腺癌不良预后的有效评估指标,并有望成为结直肠腺癌侵袭转移早期识别的新型靶点。     

MKK-4、MMP-9基因的表达与原发性肝癌肿瘤侵袭转移的关系

目的:检测m itogen activated prote in k inase k inase 4(MKK-4)、MMP-9基因在原发性肝癌中的表达,探讨原发性肝癌MKK-4与MMP-9 mRNA表达水平间的相互关系,及两者对原发性肝癌侵袭转移的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测34例原发性肝癌癌组织和相应癌旁组织及12例正常肝组织中MKK-4 mRNA、MMP-9 mRNA的表达。结果:癌旁与正常肝组织的MMP-9 mRNA表达差异无显著统计学意义(P>0.05),癌中的MMP-9 mRNA表达增高,且转移癌与未转移癌组间有差异(P<0.05),转移癌组、未转移癌组分别与正常组及癌旁组织比较有差异(P<0.01);MKK-4 mRNA在正常及癌旁组织中表达无差异(P>0.05),转移癌组、未转移癌组分别与正常组及癌旁组比较有差异(P<0.01),转移癌中较未转移癌中的表达低(P<0.05);MKK-4或MMP-9的mRNA表达均与肿瘤的大小、分化无关(P>0.05);MKK-4 mRNA与MMP-9 mRNA的表达有一定的相关性(r=-0.925,P<0.01)。结论:提示MKK-4 mRNA与MMP-9 mRNA的表达改变与原发性肝癌侵袭转移的发生发展有一定的关系。     

TOP2A在肺腺癌中的表达及其与疾病预后的关系研究

目的 探讨拓扑异构酶Ⅱ(TOP2A)在肺腺癌中的表达情况,并分析其与患者预后的关系.方法 纳入我院2018年1月至2020年1月收治的肺腺癌患者98例,采用免疫组化法检测肺腺癌组织、癌旁组织中TOP2A表达情况,分析肺腺癌组织中TOP2A表达与临床特征的关系.根据TOP2A表达情况分成TOP2A高表达组、TOP2A低表达组,比较两组预后情况(即总生存率),利用Cox多因素回归模型分析患者预后的影响因素.结果 肺腺癌组织中TOP2A高表达率为66.33％,高于癌旁组织的17.35％,且TOP2A高表达组临床分期Ⅲ期、淋巴结转移占比分别为44.62％、46.15％,高于TOP2A低表达组的12.12％、9.09％ (P＜0.05).TOP2A高表达组总生存率为72.31％,低于TOP2A低表达组的90.91％(P＜0.05).Cox多因素分析提示年龄≥60岁、临床分期Ⅲ期、淋巴结转移、TOP2A高表达是增加肺腺癌患者死亡风险的影响因素,术后放疗是降低死亡风险的保护性因素(P＜0.05).结论 肺腺癌患者癌组织中TOP2A呈高表达,且TOP2A高表达会增加患者死亡风险,临床需引起重视.     

miRNA-449a在人肺癌及癌旁组织中的差异表达

目的探讨miRNA-449a在人肺癌及癌旁组织中的表达差异及其临床意义。方法右江民族医学院附属医院2011-01-01—2013-06-30收治的肺癌患者58例,对照组为癌旁正常组织,病例组为鳞癌组织和腺癌组织,并根据miRNA-449a序列结构设计合成miRNA-449a模拟物,设10和20 mg/m L两个不同浓度,以0 mg/m L为阴性对照,用real-time PCR检测肺癌及其对应癌旁组织中miRNA-449a的表达;化学发光技术检测细胞内荧光素酶基因表达;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞活性。结果鳞癌组和腺癌组的miRNA-449a的表达量为1.48±1.63和1.52±1.54,均显著低于癌旁正常对照组的2.74±1.55(P0.01),且与瘤体大小有关(P0.05)。10和20 mg/m L组细胞内的平均荧光强度为2 115±168和1 352±159,均显著低于阴性对照组的4 975±115(P0.01),且抑制作用随浓度增加呈递增趋势。结论 miRNA-449a在肺癌组织中呈低表达,可下调细胞内荧光蛋白表达和诱导细胞凋亡。     

胃腺癌中CBX8的表达与临床病理特征及预后的关系

目的探讨CBX8在胃腺癌组织中的表达及其临床意义。方法收集119例原发性胃腺癌手术切除标本及癌旁正常组织,应用组织芯片、免疫组化PV 6000法检测胃腺癌组织、癌旁正常组织中CBX8的表达,并分析其表达与胃腺癌临床病理特征及生存预后的关系。结果 CBX8在胃腺癌、癌旁正常组织高表达率分别为46. 2%(55/119)、13. 4%(16/119),两者差异有统计学意义(χ2=30. 53,P 0. 01)。胃腺癌组织中CBX8表达与分化程度、临床分期及有无淋巴结转移相关(P 0. 05)。CBX8在低分化胃腺癌组中的高表达率低于中、高分化胃腺癌组,Ⅰ+Ⅱ期胃腺癌中CBX8的高表达率高于Ⅲ+Ⅳ期; CBX8高表达的胃腺癌患者转移率低。Cox回归分析表明,CBX8表达、临床分期、淋巴结转移是影响胃腺癌患者术后总生存期和无瘤生存期的独立预后因素(P 0. 05)。Kaplan-Meier分析显示,CBX8高表达的胃腺癌患者术后总生存期(P=0. 004)和无瘤生存期(P=0. 004)比低表达的患者长。结论 CBX8可能参与胃腺癌的发生、发展过程,是影响患者预后的独立因素之一,检测其表达对评价胃腺癌可能具有重要的临床价值,并有望成为胃腺癌靶向治疗的新靶点。     

胰腺导管腺癌中DR5蛋白及mRNA的表达及临床意义

目的检测死亡受体5(death receptor 5,DR5)蛋白及mRNA在胰腺导管腺癌癌组织及癌旁正常组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测DR5在117例胰腺导管腺癌石蜡包埋组织和癌旁正常组织中的表达,并对DR5蛋白表达与胰腺导管腺癌临床病理特征的关系进行系统性分析。同时利用qRT-PCR及Western blot法各检测20例配对的新鲜冻存的胰腺导管腺癌癌组织和癌旁正常组织中DR5蛋白及mRNA的表达。结果免疫组化结果显示,DR5主要表达于癌旁组织细胞的细胞膜中,DR5在胰腺导管腺癌组织中的阳性率为41. 02%(48/117),癌旁正常组织中的阳性率为74. 36%(87/117),两组表达差异有统计学意义(P 0. 001); DR5表达与分化程度(P 0. 05)、TNM分期(P 0. 05)、神经浸润(P 0. 001)以及淋巴结转移情况(P 0. 05)均有明显相关性。qRT-PCR及Western blot结果显示,癌旁正常组织中DR5蛋白及mRNA的表达量均远高于胰腺导管腺癌组织,两组相比差异有统计学意义(P 0. 001)。结论 DR5蛋白表达与胰腺导管腺癌分化程度、TNM分期、神经浸润及淋巴结转移均相关,对其进行检测可用于评估胰腺导管腺癌患者的病情严重程度及预后。     

胃癌组织中microRNA的差异表达

目的 检测胃癌组织和癌旁组织中microRNA (miRNA)的差异表达.方法 收集经病理确诊为胃癌进行外科手术切除的25例患者的胃癌组织及距离胃癌病灶5 cm以上的癌旁组织,选取其中7例标本提取总RNA,应用Illumina miRNA芯片检测胃癌和癌旁组织中差异表达的miRNA.应用定量实时PCR技术验证25例胃癌和癌旁组织标本中差异表达的miRNA,并分析25例患者的临床病理与胃癌组织中miRNA差异表达的关联.结果 Illumina miRNA芯片检测显示,HS-138,HS-153,HS-157在胃癌组织中表达下调,miR-181a,miR-21,miR-21*,miR-27a,miR-584,miR-93在胃癌组织中表达上调.定量实时PCR显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-181a表达上调(56.848±135.551比3.950±12.101,P＜0.05),而miR-584在胃癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌组织miR-181a表达与患者胃癌淋巴结转移及年龄有关联(rp=0.462、0.414,P=0.009、0.023),与性别和病理分型无关联(P=0.220、0.106).结论 应用miRNA芯片技术和荧光定量PCR技术发现了胃癌组织中差异表达的miRNA.     

窖蛋白-1在肺癌中的表达及意义

目的 探讨窖蛋白-1（caveolin-1）在不同类型肺癌组织中的表达及其与微血管密度（MVD）和临床病理因素之间的关系。方法 对154例原发性肺癌、相应癌旁正常肺组织及36例淋巴结转移癌行caveolin-1免疫组织化学染色;对154例原发性肺癌行CD34免疫组织化学（SP法）染色并进行微血管密度计数;Western印迹法检测其中50例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中caveolin-1的表达情况。结果 caveolin-1为膜／质表达蛋白,在正常支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞中的阳性率为100％。在肺癌组织中的阳性率为59．1％（91／154）,低于癌旁正常肺组织,P＜0．01;Western印迹结果进一步证实caveolin-1在肺鳞癌、肺腺癌组织中的表达均显著低于癌旁正常肺组织,P＜0．01。caveolin-1在小细胞肺癌（SCLC）和非小细胞肺癌（NSCLC）中的阳性率分别为7．1％和64．3％,二者间差异有统计学意义,P＜0．01。NSCLC中,有淋巴结转移组caveolin-1表达高于无淋巴结转移组（P=0．005）;Ⅲ、Ⅳ期组caveolin-1表达显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（P=0．042）,caveolin-1表达与NSCLC的其他临床病理因素及MVD值无关（P＞0．05）。结论caveolin-1其作为一种肿瘤抑制因子的同时,可能还具有促进NSCLC进展和转移的活性。     

ARHGAP10基因在肺腺癌中的表达及其机制

目的:基于生物信息学技术探讨Rho GTPase活化蛋白10（ARHGAP10）在肺腺癌发生发展中的潜在分子机制,为后续深入研究提供生物信息学证据。方法:通过利用TCGA数据库,获取肺腺癌患者RNA高通量序列及相关患者的临床资料,其中包括514例肺腺癌患者的癌组织以及59例相关的癌旁组织;GSE115002肺腺癌基因芯片数据从GEO下载,芯片包含52例肺腺癌患者的癌组织和匹配的癌旁正常组织。通过R语言技术比较ARHGAP10在TCGA和GSE115002中肺腺癌组织和癌旁正常组织之间表达差异,并进一步分析ARHGAP10表达与肺癌患者临床预后的相关性;挖掘两个数据库中ARHGAP10重叠基因,对重叠基因进行GO和KEGG富集分析,采用STRING数据库获取ARHGAP10的相关基因互作蛋白网络,TIMER数据库分析ARHGAP10与免疫浸润的相关性。结果:与癌旁正常组织相比较,肺腺癌组织中ARHGAP10呈现低表达状态（P<0.01）。与ARHGAP10低表达组相比较,ARHGAP10高表达患者拥有更长的总生存期和无进展生存期（P<0.05）。TCGA和GSE115002肺腺癌数据库中ARHGAP10的共同相关基因共133个,与MAPK、PI3K-AKT等信号通路以及细胞外基质受体结合、肌动蛋白细胞骨架、肿瘤信号通路等生物学进程相关。本研究发现PRELP、LIMS2、PPAP2B、MRPL42、SRP9、TSNAX等蛋白在ARHGAP10相互作用网络中发挥重要作用,ARHGAP10与DC细胞、中性粒细胞浸润正相关,与PD-L1表达呈正相关。结论:ARHGAP10在肺腺癌中起抑癌作用,与肺腺癌的生存预后正相关,可作为肺腺癌患者潜在的临床预后标志物。     

血浆胃泌素释放肽前体，细胞角蛋白19和癌胚抗原对各型肺肿瘤的诊断价值

目的探讨胃泌素释放肽前体（ProGRP）,细胞角蛋白19（CYFRA21—1）,癌胚抗原（CEA）对各型肺癌的诊断价值。方法检测85例健康对照人群、49例肺良性疾病患者及143例各型肺癌患者血浆中的ProGRP,CYFRA21-1,CEA三个指标,并对小细胞肺癌（SCLC）患者进行ProGRP的跟踪监测。结果SCLC患者中ProGRP水平[中位数（M）179．1ng／m1）]明显高于肺腺癌（M35．3ng／m1）、鳞癌（肘33．3ng／m1）、健康对照（膨35．6ng／m1）和良性肺病（M33．3ng／m）,差异有统计学意义（P〈0．001）;ProGRP对SCLC的诊断灵敏度和特异性分别为60．6％和95．0％。SCLC治疗有效组,ProGRP降低了45．9％,SCLC疾病进展组,ProGRP升高了103．1％,差异均有统计学意义（P〈0．05）。CEA在肺腺癌转移组中水平（M10．22ng／ml）明显高于无转移组（M3．85ng／m1）和鳞癌组（M2．56ng／m1）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血浆ProGRP是一个很好的SCLC诊断指标和疗效评价指标;CEA明显升高是腺癌肺外转移指标。     

活化白细胞黏附分子、E-钙黏蛋白和β-连环蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的通过对甲状腺乳头状癌(PTC)、结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中活化白细胞黏附分子(ALCAM)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平的检测,分析三者在PTC发生、发展过程中的作用及三者之间的相关性,探讨ALCAM、E-cadherin和β-catenin在PTC中的作用机制。方法采用免疫组织化学法、Western blotting法检测ALCAM、E-cadherin和β-catenin在PTC中的表达并分析三者的变化与临床病理特征的关系。结果 PTC组织中ALCAM的阳性率明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P0.05);PTC组织中E-cadherin的阳性表达率明显低于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P0.05);PTC样本中β-catenin的异位表达率明显高于结节性甲状腺肿和癌旁正常组织(P0.05)。三者的阳性率在结节性甲状腺肿和癌旁正常组织中无明显差异(P0.05)。三者的异常表达与PTC淋巴结转移有关(P0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小无关(P0.05)。结论在PTC组织中ALCAM、β-catenin高表达,E-cadherin呈现低表达,三者的异常表达与淋巴结转移相关。三者在PTC的发生、发展和转移的过程中起重要的作用。     

微小RNA-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8抑制肺腺癌细胞侵袭转移的生物信息学分析及验证

目的 在生物信息学基础上探讨微小RNA（miR)-140-3p靶向细胞分裂周期相关蛋白8（CDCA8）抑制肺腺癌细胞的侵袭和转移。 方法 通过GEO数据库中的GEO2R分析肺腺癌芯片数据中差异表达的miRNA。TargetScanHuman7.2和miRWalk数据库查找miR-140-3p的靶基因。Cytoscape3.7.2软件筛选出Hub基因。GEPIA数据库查询靶基因在肺腺癌组织和正常肺组织中的表达水平,在肺腺癌不同分期中的表达水平以及靶基因的表达水平与肺腺癌患者总体生存率的关系。StarBase数据库查找miR-140-3p在肺腺癌中的生存分析及与CDCA8的表达水平在肺腺癌中的相关性。Real-time PCR检测miR-140-3p在正常肺上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549的表达水平以及感染效率。Real-time PCR和Western blotting实验检测过表达miR-140-3p后CDCA8 mRNA和蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p是否与CDCA8直接结合。Transwell侵袭实验检测过表达miR-140-3p和CDCA8对肺腺癌细胞侵袭力的影响。 结果 通过GEO等数据库的分析结果显示,miR-140-3p在正常肺组织中的表达水平明显高于在肺腺癌中的表达水平,其预测靶基因CDCA8在肺腺癌中的表达水平明显高于在正常肺组织中的表达水平,且CDCA8与miR-140-3p的表达水平在肺腺癌中成负相关。实验结果显示,miR-140-3p在A549细胞中的表达明显低于在BEAS-2B细胞中的表达 (P＜0.05);用过表达慢病毒感染细胞后miR-140-3p的表达水平明显升高 (P＜0.05);过表达miR-140-3p后CDCA8的mRNA和蛋白表达水平明显下调 (P＜0.05);双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-140-3p能与CDCA8直接结合 (P＜0.05);与对照组相比,过表达miR-140-3p可抑制肺腺癌细胞A549的侵袭转移,而CDCA8可逆转miR-140-3p对肺腺癌细胞A549侵袭力的抑制作用 (P＜0.05)。 结论 MiR-140-3p靶向CDCA8抑制肺腺癌细胞的侵袭转移。     

EZH2蛋白在食管癌组织中的表达

目的观察EZH2蛋白在食管鳞癌和腺癌组织中的表达,探讨EZH2蛋白与侵袭、转移程度不同的食管鳞癌及不同病理分级、组织类型食管癌之间的关系。方法采用免疫组织化学染色法、免疫印迹法,分析检测食管癌标本中EZH2蛋白的表达。结果食管癌组织标本均高表达EZH2蛋白,阳性染色定位于细胞核;部分正常组织、癌旁组织也有弱阳性着色。免疫印迹分析表明,食管鳞癌组织EZH2蛋白的表达明显高于癌旁及正常黏膜组织（P〈0．01）。癌旁组织高于正常黏膜组织（P〈0．05）。浸润、转移性食管鳞癌EZH2蛋白表达明显上调,与未发生浸润、转移的相比,差异有显著性（P〈0．05）。高分化鳞癌EZH2蛋白表达低于中、低分化者;但食管腺癌则相反,高分化腺癌的表达高于中、低分化者。结论EZH2蛋白在食管癌高表达,并与其组织类型、侵袭和转移特性密切相关。     

Beclin 1、LC3-Ⅱ及P62蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的 探讨上皮性卵巢癌中Beclin 1、LC3-Ⅱ及P62蛋白的表达及临床意义。方法 选取2011年6月—2013年3月我院手术切除并经病理学检查确诊的上皮性卵巢癌标本50例为实验组,同期手术切除正常卵巢组织20例作为对照,通过免疫组织化学SP法,检测标本中Beclin 1、LC3-Ⅱ及P62蛋白的表达情况,并结合临床病理资料进行分析。结果 在上皮性卵巢癌组织中,Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白的阳性表达率分别为46.00%(23/50)和42.00%(21/50),低于正常卵巢组织的95.00%(19/20)和85.00%(17/20);而P62蛋白的阳性表达率为72.00%(36/50),高于正常卵巢组织的10.00%(2/20),差异均具有统计学意义(P值均＜0.05)。在上皮性卵巢癌组织中,Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白的表达与FIGO分期、病理分级具有相关性(P＜0.05),而P62蛋白的表达与FIGO分期具有相关性(P＜0.05)。Beclin 1蛋白和LC3-Ⅱ蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达呈正相关(P＜0.01),P62蛋白的表达与Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白均呈负相关(P＜0.01)。 结论 在上皮性卵巢癌组织中,Beclin 1、LC3-Ⅱ和P62蛋白的异常表达,可导致自噬体形成减少和自噬功能减弱;可能与卵巢癌的发生、发展和预后不良有关。