三七总皂苷对老年性痴呆动物模型快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响.方法:采用免疫组织化学方法,随机选取快速老化小鼠大脑顶叶皮层、海马周围白质连续五个视野在高倍显微镜下观察,并计数五个视野下Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性细胞的平均个数.结果:PNS能明显减少快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性神经元的数量.结论:PNS对SAMP8小鼠大脑Aβ1-40及Aβ1-42的表达有明显的抑制作用.     

绞股蓝正丁醇提取物对快速老化小鼠Aβ蛋白的影响

目的探讨壮药绞股蓝Gynostemma pentaphyllum正丁醇提取物对快速老化SAMP8小鼠淀粉样蛋白(Aβ蛋白)的影响。方法 50只快速老化SAMP8小鼠随机分为模型组、石杉碱甲组[0.15 mg/(kg·d)]和绞股蓝正丁醇提取物高、中、低剂量组[500、250、125 mg/(kg·d)],10只正常老化SAMR1小鼠为正常对照组。灌胃给药8周后,取小鼠血清和脑匀浆,以ELISA法检测其Aβ蛋白的水平,RT-PCR和免疫组织化学法检测App基因和APP蛋白的表达。结果与模型组比较,绞股蓝正丁醇提取物给药组小鼠脑组织中的APP基因表达和蛋白表达明显下调,血清和脑组织中的Aβ蛋白水平显著降低。结论绞股蓝正丁醇提取物可通过抑制APP蛋白的生成,使Aβ蛋白的表达减少,从而起到防治阿尔茨海默症(AD)的作用。     

三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。     

三七总皂苷对快速老化SAMP8小鼠大脑α分泌酶含量及活性的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化SAMP8小鼠大脑α分泌酶含量和活性的影响。方法:采用快速老化痴呆模型小鼠SAMP8,将其随机分为模型组、PNS高剂量组(200 mg/kg)、PNS低剂量组(100 mg/kg)和石杉碱甲组(0.3 mg/kg),8只/组,对照组给予给药组相同容积的双蒸水灌胃。每天灌胃1次,连续给药2个月。分别采用western blot和直接免疫荧光法检测三七总皂苷对快速老化SAMP8小鼠大脑α分泌酶(ADAM 9、AD-AM10、ADAM17)的影响。结果:western blot结果显示PNS高、低剂量组ADAM10和ADAM17蛋白表达均低于模型组(P0.05),而ADAM9蛋白表达量均高于模型组(P0.05);石杉碱甲组ADAM17、ADAM9蛋白表达量均高于模型组(P0.05),而ADAM10蛋白表达则低于模型组(P0.05)。直接免疫荧光法结果显示PNS高、低剂量组和石杉碱甲的RFU值均高于模型组(P0.01)。结论:三七总皂苷可以通过提高α分泌酶中的ADAM9的含量,石杉碱甲则可能通过提高ADAM9和ADAM17的含量,从而提高SAMP8小鼠大脑α-Secretase的活性。     

二苯乙烯苷对SAMP8小鼠APPmRNA和PS1mRNA表达的影响

目的:探讨灌胃给二苯乙烯苷(TSG)后SAMP8小鼠β淀粉样蛋白前体(APP)mRNA和早老蛋白-1(PS1)mRNA表达的变化。方法:6月龄快速老化模型小鼠SAMP8 50只,随机均分为SAMP8空白组,阳性药石杉碱甲对照组,高、中、低剂量TSG组(0.3,0.1,0.033 g·kg-1·d-1)共6组;6月龄正常老化小鼠SAMR1鼠10只为正常对照组。各组分别灌胃相应药物60 d后,应用实时定量PCR法检测海马组织APP和早老蛋白-1(PS1)mRNA的表达。结果:与SAMP8空白组比较,TSG组APP mRNA 2-△△CT值明显降低,PS1 mRNA 2-△△CT值也明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明TSG组APP mRNA和PS1 mRNA表达下调。结论:二苯乙烯苷对痴呆小鼠SAMP8有显著地抗痴呆作用,其作用机制可能与调控APP,PS1表达有关。     

基于“肾脑相济”理论的电针疗法对痴呆小鼠脑内β-淀粉样蛋白及中性内肽酶表达的影响

目的:探讨基于"肾脑相济"理论的电针疗法对快速老化SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层β-淀粉样蛋白(Aβ)含量及中性内肽酶(NEP)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制。方法:将8月龄雄性快速老化SAMP 8小鼠随机分为模型组、电针组、美金刚组,每组6只。使用同月龄正常老化SAMR 1小鼠6只作为对照组。电针组电针小鼠"百会""肾俞""太溪"穴,每次15min,每日1次,治疗8周,美金刚组予美金刚灌胃(20mg·kg-1·d-1),连续8周。采用ELISA法、免疫组织化学法、Western blot法观察小鼠大脑颞叶皮层内Aβ含量和NEP的表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显增高,NEP表达水平明显下降(P0.05);与模型组比较,电针组和美金刚组小鼠大脑颞叶皮层内Aβ1-40和Aβ1-42含量明显下降,NEP表达水平明显上升(P0.05);电针组与美金刚组各指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:"肾脑相济"电针疗法对SAMP 8小鼠大脑颞叶皮层中NEP表达有较好的调控作用,能抑制脑内Aβ的生成,从而防治AD。     

三七总皂苷对快速老化SAMP8小鼠大脑α-分泌酶 mRNA 表达的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化SAMP8小鼠大脑α-分泌酶mRNA表达的影响。方法:采用快速老化痴呆模型小鼠SAMP8,将其随机分为对照组、PNS高、低剂量组(200,100 mg.kg-1)和石杉碱甲组(0.3 mg.kg-1),每组8只,对照组给予相同容积的双蒸水灌胃。每天灌胃1次,连续给药2个月。通过实时荧光定量PCR法检测各组SAMP8小鼠大脑α-分泌酶(ADAM9,ADAM10,ADAM17)mRNA的含量。结果:对照组ADAM9 mRNA含量均低于PNS高剂量组和石杉碱甲组(P<0.05);低剂量组ADAM10 mRNA的含量低于对照组(P<0.05);PNS高、低剂量组和石杉碱甲组ADAM17 mRNA与对照组比较无显著差异。结论:PNS可以上调SAMP8小鼠脑内ADAM9 mRNA和下调ADAM10 mRNA的表达。     

黄连解毒汤对快速老化模型小鼠海马蛋白表达的影响

目的：研究黄连解毒汤(HLJDT)对快速老化模型小鼠(senescence accelerated mouse,SAM)的快速老化亚系SAM-prone/8(SAMP8)海马蛋白表达的影响,以期从分子水平较深入地阐明HLJDT治疗阿尔茨海默病（AD）的机制。方法：将12月龄SAM的快速老化亚系SAMP8和抗快速老化亚系SAM-resistance/1(SAMR1)分为SAMR1对照组、SAMP8模型组和HLJDT给药组,应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,观察HLJDT对SAM海马组织蛋白表达的影响。结果：与SAMR1相比,SAMP8海马中有29个蛋白点的表达发生显著变化；给予HLJDT后有38个蛋白点的表达发生显著变化。选取部分HLJDT的作用蛋白点进行质谱分析结合数据库检索,共鉴定出12个蛋白,这些蛋白涉及到能量代谢、转录调控、细胞骨架、氨基酸代谢等功能。其中有4个蛋白是SAMP8与SAMR1海马蛋白比较存在显著差异的蛋白,给予HLJDT后其蛋白表达得到了明显改善。结论：HLJDT通过调节SAMP8脑中与能量代谢、信号转导、细胞骨架及氨基酸代谢等相关蛋白的表达,从多途径对SAMP8的老化起到了改善作用。     

电针足三里对AD小鼠大脑皮层APP和Aβ表达的影响

目的:探究电针足三里对老年痴呆小鼠大脑皮层β-淀粉样肽前体蛋白(APP)及β-淀粉样肽蛋白(Aβ)表达的影响。方法:将快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、电针组和非穴组,并设同源SAMR1小鼠作为对照组。电针组给予足三里电针干预,非穴组针刺双侧固定非穴位点。应用免疫组织化学SABC法观察各组小鼠大脑皮层APP及Aβ的表达情况。结果:SAMP8大脑皮层内APP和Aβ蛋白呈较高表达的状态,电针治疗后明显下调,与模型组、非穴组相比,差异有统计学意义(P0.01);而非穴组与模型组相比,各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针足三里能有效改善AD,其机制可能与其下调AD小鼠大脑皮层APP及Aβ蛋白水平的表达有关。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白影响的研究

目的观察地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8海马神经元凋亡相关蛋白的影响,探讨地黄饮子治疗AD的作用机制。方法以快速老化小鼠SAMP8为研究对象,依据"补肾益髓,化痰行瘀,开窍醒神"的原则,给予地黄饮子灌胃,1次/d,连续灌胃28 d。采用免疫组化法观察地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8小鼠海马组织凋亡相关蛋白bax、bcl-2及cyt-c的影响。结果与模型组比较,地黄饮子可降低快速老化小鼠bax、cyt-c的表达,提高bcl-2的表达。结论地黄饮子可改善SAMP8小鼠海马神经元的细胞凋亡情况。     

针刺对痴呆小鼠大脑神经元超微结构的影响

[目的]研究三焦针法对痴呆小鼠皮质和海马CA1区神经元线粒体结构的影响。[方法]选取雄性SAMP8小鼠30只(随机分成模型组、非穴组、穴位组)和10只SAMR1小鼠(正常对照组)。持续治疗30日后,采用电子显微镜对小鼠大脑皮质顶叶和海马CA1区进行观察。[结果]R1组皮质顶叶和海马CA1区超微结构正常;SAMP8模型组小鼠神经元部分线粒体肿大、部分变性、部分脂肪化和坏死;SAMP8三焦针刺组线粒体肿大减少,少数线粒体变性,脂肪化和坏死;非经穴针刺组线粒体少数介于两者之间。[结论]三焦针法能有效改善SAMP8小鼠大脑皮质和海马CA1区神经原线粒体病理性损伤。     

SAMP10鼠脑衰老相关基因HSP86、HSP84的表达及针刺影响的研究

目的：探讨针刺延缓衰老的作用机制。方法：采用快速老化小鼠SAMP10、SAMR1为模型，运用RT-PCR和地高辛标记的非放射性Northern blot技术，观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马HSP84、HSP86基因表达的变化。结果：SAMP10对照组小鼠热休克蛋白HSP84、HSP86在全脑、皮层、海马中的表达下调，针刺后表达上调并趋向于正常组。结论：SAMP10小鼠脑衰老与热休克蛋白HSP84、HSP86基因表达异常有关，针刺可以通过调节HSP84、HSP86基因表达增强细胞保护、抑制细胞凋亡、抵抗氧化应激，从而起到延缓衰老的作用。     

不同中药复方对拟老年痴呆症小鼠的治疗比较

目的:比较两种不同功效中药复方对SAM小鼠的治疗差异,为中药复方评价体系提供依据。方法:选用8月龄SAMP8小鼠,分为模型(P)组、六味地黄颗粒(PL组)和通络救脑滴丸(PT组)治疗组。同月龄SAMR1小鼠为对照(N)组。通过水迷宫、避暗实验检测小鼠行为学改变,IH染色观察组织病理学变化,WB检测脑组织APP表达差异。结果:与N组比较,P组及PT组行为学、IH、WB检测指标均出现统计学差异。与P组相比,PL组水迷宫潜伏期缩短,避暗潜伏期延长,海马APP表达减少。结论:六味地黄颗粒可以减少SAMP8小鼠海马APP表达,改善其学习记忆障碍,起到治疗痴呆症的作用,但通络救脑滴丸的疗效不佳。此外,不同中药复方的作用特点有差异,应选择适合的动物模型进行药效评价研究。     

针刺对快速老化小鼠SAMP10转录调节因子NF-E2、YB-1、LRG47的影响

目的:探讨针刺延缓衰老的机制。方法:采用快速老化小鼠(SAMP10)、正常老化小鼠(SAMR1)为模型,运用地高辛标记的非放射性Northernblot技术,观察8月龄SAMR1对照组、SAMP10对照组、SAMP10针刺组及SAMP10非穴位刺激组全脑、皮层和海马NF-E2、YB-1、LRG47基因表达的变化。结果:SAMP10对照组小鼠NF-E2、YB-1、LRG47在全脑、皮层、海马中的表达下调,针刺后表达上调并趋向于正常组。结论:SAMP10小鼠脑衰老与NF-E2、YB-1、LRG47基因表达异常有关,针刺可以通过调节NF-E2、YB-1、LRG47基因表达增强红细胞系统功能和细胞增殖,提高细胞抗菌免疫,从而起到延缓衰老的作用。     

电针足三里干预快速老化痴呆鼠大脑APP及Aβ蛋白表达的实验研究

目的：研究电针足三里穴对快速老化痴呆鼠（SAMP8）海马中β-淀粉样肽前体蛋白（APP）及β-淀粉样肽蛋白（Aβ）表达水平的影响,探讨电针足三里防治老年性痴呆（Alzheimer’s disease,AD）的作用机制。方法：将18只SAMP8随机分为三组：模型组、电针组及非穴组,每组各6只,并设正常对照组（SAMR1）。电针足三里干预结束后,应用免疫组化的方法检测各组小鼠海马中APP及Aβ蛋白的表达情况。结果：电针组APP及Aβ蛋白的表达水平下调,明显低于模型组及非穴组（P〈0.05）;而模型组与非穴组间APP及Aβ蛋白的表达水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：电针足三里可降低SAMP8脑部APP及Aβ蛋白的表达水平,从而抑制老年斑及神经原纤维缠结形成,改善痴呆鼠的智能状态,这可能是针刺足三里治疗改善AD的重要机制。     

不同电针刺激对SAMP8小鼠学习记忆能力及大脑皮层APP、ApoE mRNA表达的影响

目的：探讨脉冲电针和音乐电针治疗阿尔茨海默病（AD）的可能作用机制,并比较两种电针的疗效差异。方法：将SAMP8小鼠随机分为模型组、脉冲电针组和音乐电针组,SAMR1小鼠作为正常组。两电针组均给予电针百会穴、印堂穴20min后,点刺水沟穴。治疗结束后,以Morris水迷宫测定小鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR法测定小鼠大脑皮层中APP、ApoE mRNA表达量。结果：与模型组比较,音乐电针组、脉冲电针组逃避潜伏期分别在第4天、第5天明显下降（P〈0．05）,目标象限游泳时间均增加（P〈0．05）;脉冲电针组、音乐电针组大脑皮层APP mRNA表达量均显著下降（P〈0．05）。结论：脉冲电针和音乐电针均可改善SAPM8小鼠学习记忆能力;脉冲电针和音乐电针可能通过下调APP mRNA表达发挥抗痴呆作用。     

针刺调控NLRC5抑制NF-κB通路减轻SAMP8小鼠脑内神经炎症反应的研究

[目的]观察针刺调控NLRC5抑制核转录因子-κB(NF-κB)通路减轻SAMP8脑内神经炎症反应的作用.[方法]将7月龄雄性快速老化鼠SAMP8及其同源正常对照小鼠SAMR1分为SAMR1组、SAMP8组和SAMP8针刺组.针刺组予以针刺治疗,采用"调神益智"针法进行治疗,取穴为水沟、内关和三阴交;针刺每日1次,持续...     

调心方有效部位和达纳康对类AD大鼠脑组织IL-1β IL-6和APPmRNA表达的影响

目的:研究调心方有效部位(TX0201)和达纳康(EGb761)对Aβ25-35所致类AD模型大鼠神经免疫调节作用机制的异同。方法:采用双侧杏仁核注射Aβ25-35造成类AD大鼠模型,观察大鼠Morris水迷宫空间记忆能力,并分别通过免疫组化和RT-PCR方法研究类AD大鼠神经元胶质细胞(GFAP)APPmRNA表达;炎性细胞因子IL-1β,IL-6的变化以及TX0201和EGb761的影响。结果:类AD模型大鼠Morris水迷宫测试出现空间记忆能力下降,皮层、海马APPmRNA的表达上调;海马、皮层GFAPP阳性胶质细胞和IL-6mRNA以及海马IL-1βmRNA表达增高。TX0201和EGb761能有效控制以上病理变化。结论:TX0201和EGb761均能显著改善Aβ诱导的痴呆模型大鼠学习记忆障碍,降低海马APPmRNA表达,减轻神经细胞的炎症和免疫联级反应。提示有效控制AD患者脑内Aβ免疫联级反应是TX0201和EGb761的重要作用机制之一。