发色底物法定量测定重组u-PA产品的总活性和单链比例

目的建立一种发色底物酶水解方法定量分析重组尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)中的总活性及其单链酶原比例.方法用嗜热菌蛋白酶激活u-PA转化成具有催化活性的双链尿激酶,再用尿激酶的发色底物S-2444测定u-PA的总活性.在非激活条件下,u-PA产品中的单链酶原不会催化水解S-2444底物,因而可以测定其单链酶原比例.结果优化了嗜热菌蛋白酶激活u-PA的反应条件和尿激酶催化水解S-2444的反应条件.用这种方法测定了用CHO细胞表达的基因重组u-PA产品,单链比例大于98%,比活性约为11×104 U/mg.结论用发色底物法测定重组人u-PA产品中的总活性和单链比例具有很好的重复性和准确性.     

小鼠脾细胞培养上清中的粒系造血活性及其照射后的改变

观察了小鼠脾脏，胸腺和骨髓细胞培养上清中的粒系造血刺激活性和抑制活性及其在照射后的改变。结果表明，正常小鼠脾细胞培养上清中有一定的造血刺激活性，抑制活性不明显，经３、５、７、８、９Ｇｙ不同剂量照射后早期造血刺激活性随之降低，大剂量照射可降至零。１２￣１４ｄ刺激活性有所恢复。大剂量照后早期小鼠脾细胞培养上清中有一定的抑制活性，照后小鼠的胸腺、骨髓细胞培养上清中未见明显的粒系造血刺激活性，大剂量照射仅     

免疫荧光技术在生物材料体外细胞培养实验中的应用

作者根据荧光显微镜的成像原理，采用免疫荧光染色技术将钛片表面成骨细胞骨架－肌动蛋白特异性荧光标记，吧呈现细胞的形态大小以及细胞核。结果表明：束状排列的荧光着色向一丝位于胞 浆内，并勾画出细胞外形和细胞核的轮廓。     

荧光染色法快速检出细胞培养物中的支原体

我们参照Chen的报道,根据发荧光的双苯咪唑化合物(Hoechst-33258,简称H-33258)能结合DNA的特点,建立了从细胞培养物中快速检测支原体污染的方法. 在此基础上检查了21株细胞培养物标本,并与常规的半固体培养法、电子显微镜检查法进行了比较.结果表明该方法具有快速、简便和敏感性高的特点,更适合于一般实验室快速检测细胞培养物中支原体污染的需要.     

脐带血清与细胞因子在造血细胞培养中的效应比较

目的：比较人脐带血清（CBS）与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法：在体外人骨骨CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM、CAFC、LTC－IC培养体系中,加入CBS或／和细胞因子,观察所形成的集落。结果：与细胞因子比,CBS中含有较高的GM－CSF、EPO、SCF、IL－3、IL－6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论：CBS内的造血刺激活性能刺激CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM的生长,使CAFC、LTC－IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。     

稳定性核素氘在生物医学研究中的应用

氘标记物在生物医学研究中的应用，为人们提供了一个安全、有效、方便的示踪工具。本文综述了氘标记物在生物代谢转变研究方面的示踪技术，以及在医学诊断和临床治疗方面的应用进展。     

用单克隆抗体BA法快速检出细胞培养物中的支原体

口腔支原体是实验室细胞培养物的主要污染源之一.为解决支原体的快速诊断问题,1987年我们建立了7株分泌抗口腔支原体单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.进而我们应用McAb-BA(biotin-avidin)法检查了7株细胞培养物,其中4份阳性,3份阴性,获得了满意结果.     

感咳清颗粒的鉴别及稳定性研究

目的 介绍感咳清颗粒的制备、薄层鉴别方法并预测其保质期。方法 以薄荷、黄芩、防风等为原料制备感咳清颗粒剂;参照《中国药典》的方法对该制剂的主药进行薄层定性鉴别;用加速实验法以黄芩苷含量为指标预测了该制剂的稳定性。结果 感咳清颗粒定性鉴别的专属性强;高温加速实验法测得常温下复方制剂以黄芩苷含量为指标的保质期为2年半。结论 该制剂质量稳定可控。     

尿激酶原cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的高效表达(Ⅰ)

借鉴基因表达调控理论的研究结果和作者多年来对高效表达的研究经验,自行设计和构建了一个适合在哺乳动物细胞中高效表达外源基因的新型载体。将插入尿激酶原(pro—UK)cDNA的这一表达载体用磷酸钙共沉淀法转染CHO—dhfr~-细胞,经一系列筛选、MTX加压扩增、亚克隆和锌离子诱导,获得了高效表达尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)的细胞株,表达水平达800～1500IU/(10~6细胞·d)。     

稳定性核素氘在生物医学研究中的应用

氘标记物在生物医学研究中的应用，为人们提供了一个安全、有效、方便的示踪工具。本文综述了氘标记物在生物代谢转变研究方面的示踪技术，以及在医学诊断和临床治疗方面的应用进展。     

适用于基因转染的细胞培养板的研制

目的:研制用于基因转染的细胞培养板.方法:用0.2%的明胶稀释LPEI, BPEI, Superfect,Lipofectamine 2000等转染试剂并将它们固定在96孔细胞培养板上.以绿色荧光蛋白(GFP)基因和荧光素酶基因(Luciferase)为报告基因检测培养板的转染效率,用MTT法检测转染24 h后的细胞毒性,将LPEI包被的培养板放置在37℃环境下进行稳定性研究.结果:所有试剂包被的培养板均有一定的基因转染效率,聚合物类试剂的效率高于脂质体类的Lipofectamine 2000.其中,LPEI包被的培养板的转染效率最高、细胞毒性最低.当LPEI的包被量为3.2 μg/孔时,293细胞在转染24 h后的荧光素酶活性达3.0×108 RLU/mg,细胞存活率为85%左右.LPEI包被的培养板在37℃保温14 d后基因转染效率无明显变化.结论:LPEI包被的转染平板具有转染效率高、细胞毒性低、稳定性好的优点.该平板具有操作简便、节省时间的优点,可用于进行大规模的基因转染研究.     

微小种植体在正畸治疗中的稳定性研究现状

为加深对微小种植体支抗在正畸治疗中的稳定性意义,从微小种植体的植入方式、加载时机、植入角度及深度、植入部位及临床操作等角度研究影响微小种植体支抗的稳定性因素。影响微小种植体支抗稳定性的因素并没有唯一绝对的标准,但是其能达到强支抗的效果已得到临床正畸医师的普遍认可。本文就影响微小种植体支抗的稳定性因素进行了综述。     

高效液相色谱法考察胰岛素在能量合剂中的稳定性

目的：考察室温下8h以内胰岛素在输液用能量合剂中的稳定性情况。方法：采用高效液相色谱法，结合外观与pH值的观察，以高效液相色谱法来定量表达胰岛素的含量变化情况。结果：能量合剂在室温8h以内无色澄明，pH值较稳定。胰岛素的含量变化〈5．O％。结论：室温8h以内，胰岛素在能量合剂配伍中稳定。     

肿瘤患者血清及外周血单个核细胞培养上清TNF-α含量变化

肿瘤坏死因子(TNF)是近年来研究及应用较广泛的细胞因子之一,它不仅是一种有效的肿瘤杀伤因子,而且是机体炎症与免疫应答反应的重要调节因子.有关TNF-α在感染性疾病及自身免疫性疾病中的变化已有不少报道,但肿瘤患者体内TNF-α的变化报道较少.本文应用放射免疫测定方法对40例健康对照者、30例非肿瘤患者及28例肿瘤患者(其中6例术后复查)进行了血清及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清TNF-α含量测定,现将结果报告如下.     

HI-6水溶液稳定性的研究 Ⅰ.HI-6稀水溶液在高温下的稳定性

本文报道HI-6稀水溶液在高温(100℃)下的稳定性。在pH1至10的缓冲水溶液中,比较了H1-6和2-PAM-C1,TMB-4,LüH_6的稳定性,找出了HI-6比较稳定的pH值,观察了盐酸羟胺对HI-6稳定性的影响,确定了HI-6分解反应的级数。     

Ku蛋白在肿瘤发生中的作用及其靶向抑制策略

Ku蛋白参与辐射诱导的DNA损伤修复,严重影响着肿瘤细胞的辐射敏感性。细胞内Ku蛋白异常表达与肿瘤发生和发展存在密切关系。目前,研究者试图抑制Ku蛋白表达来增强肿瘤细胞的辐射敏感性,为进一步靶向治疗奠定基础。     

MRI动态增强扫描在评估颈动脉斑块稳定性中的应用

目的:采用MRI动态增强扫描(DCE-MRI)测算厚壁斑块、薄壁斑块与破裂斑块容积传输常数(Ktrans),评估新生血管,为易损斑块的早期诊断提供依据。方法:怀疑有动脉粥样硬化斑块的41例患者均行MRI平扫及动态增强扫描。根据MRI平扫图像对斑块进行分类,其中厚壁斑块15个,薄壁斑块9个,破裂斑块11个。根据DCE-MRI图像后处理获得各型斑块容积传输常数(Ktrans)。结果:厚壁斑块与薄壁、破裂斑块Ktrans值比较,差异均有统计学意义(均P0.05),薄壁斑块与破裂斑块Ktrans值之间,差异无统计学意义(P0.05)。结论:Ktrans值反映了不同类型斑块新生血管及炎性浸润的不同,可作为早期评估斑块稳定性的一个指标。     

不同剂量尿激酶在急性脑梗死溶栓治疗中的效果比较

目的 比较不同剂量尿激酶在急性脑梗死溶栓治疗中的治疗效果.方法 将60例发病 2 4 h内的急性脑梗死患者随机分为观察组和对照组,观察组用尿激酶 (U K) 50000U/d,对照组用1 500 000 U/d,静脉滴注,连用3d.比较两组的治疗效果.结果 观察组的总有效率为83.3%,对照组的总有效率为60.0%,两组比较有显著性差异(P＜0.01).观察组并发脑出血发生1例,对照组为4例,两组比较有显著性差异(P＜0.01).结论 应用UK 50000U/d× 3d进行急性脑梗死溶栓效果优于1 500 000 U/d× 3d.     

限制性内切酶诱发DNA双链断裂在细胞中的修复忠实性

用限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＥｃｏＲＶ分别处理双标记基因质粒（ｐＳＶｎｅｏ－ｇｐｔ）ＤＮＡ，在ｇｐｔ基因序列上产生双链断裂，然后将其导入ＣＨＯ细胞中，研究受损基因在细胞中的修复忠实性。结果显示由ＥｃｏＲＶ产生的平齐末端ＤＮＡ双链断裂在细胞中的修复忠实性高于由ＫｐｎＩ酶产生的粘性末端ＤＮＡ双链断裂。还用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交检测了部分转化克隆中酶切ｇｐｔ序列的重接．