肉及肉制品中空肠弯曲菌的污染情况调查

<正>空肠弯曲菌为市场所贩卖的生肉及生肉制品中的常见致病菌,如果加工,销售不当,及监督不严,会对群众健康构成潜在威胁。研究表明,空肠弯曲菌主要存在于未冻鸡鸭等家禽与牛羊类家畜的肉制品中,说明空肠弯曲菌的存活条件要求较高。为降低由空肠弯曲菌感染而引发的腹泻及食物中毒的发生率,本文选取国内某市作为观察对象,     

辽宁省鸡源空肠弯曲菌耐药性监测与分析

目的了解辽宁省内鸡源空肠弯曲杆菌耐药性情况。方法采用特异性选择培养基分离出空肠弯曲菌,并使用生化反应和分子生物学方法双重方法进行鉴定,并进行耐药性分析。结果采集的辽宁省某屠宰场的鸡盲肠共198份样品,分离鉴定得到60株空肠弯曲菌,分离率为30.3%。同时对60株空肠弯曲菌进行了药物敏感性检测。结论 60株空肠弯曲菌几乎均对红霉素、庆大霉素、克林霉素和萘啶酸耐药,其MIC90值均高于所测试的最高药物浓度。空肠弯曲杆菌氟苯尼考和泰利霉素的敏感性最强。     

广东省2016–2019年市售畜禽肉产品中空肠弯曲菌污染状况分析

目的 为了解广东省市售畜禽肉产品中空肠弯曲菌的污染状况,于2016-2019年在广东省21地市采集畜禽生肉样品872份样品。方法 采用国家标准方法对空肠弯曲菌进行检测并对污染状况进行分析。结果 872 份畜禽肉产品中,空肠弯曲菌检出率为6.67%(59/872)。按照肉的种类分析,禽肉检出率11.2%(46/410)高于畜肉检出率2.81%(13/462),两者差异有统计学意义（χ2=24.3301,P<0.05）。按年份分析,2018年检出率最高11.48%(31/270), 其次是2016年10.71%（15/140）,2017年3.19%(9/282),2019年检出率最低2.22%(4/180)。四者差异有统计学意义（χ2=24.5797,P<0.05）。按包装形态分析,散装检出率6.94%（59/850）高于预包装检出率0。按季度,空肠弯曲菌检出率高低依次为第二季度（8.21%,18/219）。按采样环节,空肠弯曲菌检出率网店（16.67%,1/6）最高。按地区,深圳市空肠弯曲菌检出率最高37.21%（16/43）。结论 广东省市售畜禽肉产品中空肠弯曲菌存在较高比例,禽肉中比例更高,散装禽畜肉存在较大风险,建议相关部门针对性加强对畜禽产品市场的监管及风险监测工作。 关键词:畜禽肉产品;空肠弯曲菌;污染状况;分析     

空肠弯曲菌在牛奶中的存活和对热敏感性的实验

空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是引起人类急性腹泻和食物中毒的一种重要病原菌,已知牛奶可被其作为媒介而引起疾病的爆发。因此该菌在牛奶中的存活情况,以及巴氏消毒法是否能杀死该菌以保证这种奶的安全是重要的。为此,笔者进行了这方面的实验研究,现报告如下。     

石家庄市肉鸡屠宰和市售环节弯曲菌污染状况及耐药分析

目的了解石家庄市肉鸡屠宰和市售环节中弯曲菌的污染状况及对12种抗生素的耐药谱和耐药特征。方法采集屠宰前肉鸡肛拭子、鸡酮体涂抹拭子标本和市售鸡肉、鸡肝脏样品,参照GB 4789.9—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》和多重聚合酶链式反应(PCR)方法进行弯曲菌的分离和鉴定,用K-B纸片法对分离弯曲菌进行6类12种抗生素药敏测定。结果在439份标本/样品中共有17份检出弯曲菌,总检出率为3.9%(17/439)。空肠弯曲菌对萘啶酸、左氧氟沙星、环丙沙星和四环素的耐药率均为85.7%(6/7),对庆大霉素、链霉素、丁胺卡那、阿奇霉素、氟苯尼考全部敏感。结肠弯曲菌除对阿奇霉素、多西环素、氟苯尼考的耐药率小于50.0%外,对环丙沙星、左氧氟沙星、萘啶酸、庆大霉素、丁胺卡那、四环素、链霉素、克林霉素的耐药率均高于80.0%。17株弯曲菌多重耐药率为70.6%(12/17),呈11种耐药谱型,市售环节分离株耐药谱型多于屠宰环节分离株,并具有各自不同的优势耐药谱型。结论石家庄市肉鸡屠宰和市售环节均有一定程度的弯曲菌污染,分离株多重耐药情况严重,呈多种耐药谱型。     

肉鸡屠宰加工过程中空肠弯曲菌污染的监测与分析

目的 调查分析浙江金华地区肉鸡屠宰加工过程中空肠弯曲菌的污染现状及规律.方法 选择金华地区6家肉鸡屠宰加工企业,通过直接计数法对空肠弯曲菌定性定量检测,分析其流行病学规律.结果 采集的2139份样品中,泄殖腔、脱毛、取内脏、消毒预冷、包装和速冻等环节样品的空肠弯曲菌阳性率分别为92.48％、83.39％、98.12％、...     

空肠弯曲菌保存方法的研究

自从1972年在比利时第一次确定空肠弯曲菌是腹泻疾患的常见致病菌以来,对它的的研究越来越广泛、深入,由于空肠弯曲菌营养条件要求高,不易存活,给检验工作带来很大的不便。为了找出比较简便、经济、保存时间比较长的方法,我们选用三种培养基在三种不同温度下进行保存。     

空肠弯曲杆菌在牛奶中对热的敏感性

现已确知牛奶可被作为人类空肠弯曲杆菌肠炎爆发的媒介物,因此巴氏消毒法是否能杀死空肠弯曲杆菌(Campylobact-er)以保证这种奶的安全是重要的。为此,作者将5株来自腹泻病人粪便和1株来自爆发肠炎的可疑食物(牛奶)的空肠弯曲杆菌接种在血琼脂上,经培养后得到的生长物,分别用林格氏溶液做成浓菌液(每毫升含活菌10~9),然后各以1毫升之量加     

猪肉屠宰加工过程中弯曲菌流行病学调查与分析

目的 调查分析猪肉屠宰加工过程中主要环节弯曲菌的污染现状。方法 选择两家猪肉屠宰加工企业,分别采集宰前、脱毛、取内脏、胴体修饰和预冷前后等环节样品,应用选择性CCDA平板直接计数法对弯曲菌进行定量检测。结果 150份猪肉样品检测出22份弯曲菌阳性样品,阳性率14.67%;环境样品30份,检出12份阳性样品,阳性率40.00%。所检出的弯曲菌均为结肠弯曲菌,未见其它种属弯曲菌。所监测的6个环节均存在不同程度的弯曲菌污染,阳性率呈现先升高后降低的变化趋势。其中取内脏环节弯曲菌阳性率最高,为17.50%,阳性样品弯曲菌携带量为177.14±296.73CFU/100cm2;而环境样品中取内脏环节的地面样品阳性率最高,为100%,弯曲菌携带量为588.00±307.66CFU/100cm2。结论 猪肉屠宰加工过程中存在弯曲菌污染,以取内脏环节阳性率最高,预冷后阳性率明显降低;而环境样品的高污染率对猪肉屠宰加工过程中的交叉污染构成了很大威胁。     

PCR技术检测空肠弯曲菌的研究进展

空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是一种人畜共患病病原菌,可以使人和动物引发多种疾病。目前,检测C.jejuni采用的国标方法是传统的培养法,但C.jejuni培养条件苛刻,且培养法存在操作繁琐、特异性不强、费时等缺点。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)以其快速、准确、灵敏度高、特异性强的特点,现已广泛应用于C.jejuni的检测,并成为目前快速检测临床与食品中C.jejuni最常用的的方法。本文综述了近年来利用RCR技术,包括常规PCR、多重PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR、PCR-酶联免疫吸附法、最大几率数-PCR、PCR-限制性片段长度多态性、PCR-变性高效液相色谱、PCR-变性梯度凝胶电泳和磁捕获-荧光PCR方法检测C.jejuni的研究进展,并针对这些PCR技术的原理、检测效果、优点和缺点等方面进行了分析比较,为有效控制和预防该菌引起的疾病提供重要信息。     

多重PCR鉴定动物源空肠弯曲菌和结肠弯曲菌方法的建立

建立鉴定空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的多重PCR(mPCR)方法。方法 分别以16S rRNA、马尿酸酶和16S-23S rRNA基因为靶序列设计特异性引物,建立多重PCR方法检测37株菌株样品,同时采用ⁱⁿgene CAM nested PCR检测试剂盒检测验证,进行结果比较分析。结果 该多重PCR方法可扩增出空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的特异性条带,其他对照菌株均未扩增出条带,具有较好的特异性;检测敏感性可达0.81pg/μl空肠弯曲菌DNA,0.93pg/μl结肠弯曲菌DNA。多重PCR方法和试剂盒检测结果的符合率为100%,二者与国标GB/T 4789.9—2008方法的符合率达97%以上。结论 本试验建立的多重PCR方法操作快速方便、节约试验成本,具有较好的特异性、敏感性和重复性,可用于弯曲菌的鉴定。     

鸡肉中潜伏的致病菌——空肠弯曲菌

<正>英国食品标准局的调查显示,73%的零售鲜鸡肉携带空肠弯曲菌,大概有三分之一的人群一生中有可能被弯曲菌感染。空肠弯曲菌是什么?空肠弯曲菌是一种细菌,身长仅为1.5~3.5μm,比头发丝小多了,我们肉眼是看不见的,它的身材呈弯曲杆状、两端稍细。它可在低氧环境下生长。目前已发现的弯曲菌属有21个种和多个亚种,但人类感染多数是由空肠弯曲菌和结肠弯曲菌引起的,其中由空肠弯曲菌引起的约占90%。全世界每年由空肠弯曲菌引起的食源性腹泻病例达4~5亿人次。     

含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌

目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的最适添加量为10~4copies/PCR。所建立方法对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的灵敏度分别达到4.7copies/PCR和5.23copies/PCR;对115株空肠弯曲菌、49株结肠弯曲菌和42株非目标菌株在3种不同类型的实时荧光PCR仪上的特异性均达到100%;对鸡肉中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出限达到10CFU/25g,与传统检测方法一致。采用所建立的方法对50份市售生鲜鸡肉进行检测发现,空肠弯曲菌阳性率为12%(6/50),结肠弯曲菌阳性率为4%(2/50);传统国标检测方法除了1份空肠弯曲菌阳性样品未得到分离确认,其余PCR阳性样品均在平板上分离确认。结论该方法特异性强、灵敏度高、开放性好、含有内标可防止"假阴性",可应用于食品中2种重要致病性弯曲菌的快速同步检测。     

Fla-DGGE法对食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检测和分型

本文应用鞭毛蛋白基因flaA和flaB的变性梯度凝胶电脉(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)方法对食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌进行检测和分型。采用RBB(rpeated bead beating)、CTAB和丙酮-氯仿抽提三种方法提取样品基因组后进行fla-DGGE检测,结果完全一致。10份生鲜鸡、鸭肉样品中有8份含有空肠弯曲菌或结肠弯曲菌,其中3份含有两种或两种以上的空肠弯曲菌或结肠弯曲菌或它们的不同型别。克隆测序后结果表明,有7份样品被同一种空肠弯曲菌所污染,其中3份样品还被同一种结肠弯曲菌所污染,1份样品被污染情况严重,检测到含有一种结肠弯曲菌和三种空肠弯曲菌。Fla-DGGE方法快速、准确、灵敏度高,可用于食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测和分型。     

山东省7类食品利斯特氏菌污染状况调查

为调查我省利斯特氏菌对食品的污染状况 ,我们调查了 7类食品 315份试样 ,采用ＧＢ 4 789 30—94检验方法 ,检出利斯特氏菌 9株 ,检出率 2 9% ,其中生肉和蔬菜检出率最高 ,为 7 1%和 6 2 %。检出的 9株菌经鉴定均为无害利斯特氏菌 ,虽未检出单核细胞增生利斯特氏菌 ,但也说明了利斯特氏菌污染食品的程度 ,为预防该菌引起的食物中毒提供了参考依据。1　材料与方法1 1　试样　生肉、熟肉制品、乳 (生奶和消毒奶 )、乳制品 (酸奶和果奶 )、蔬菜、水产品、冷饮 (冰淇淋和含乳冰糕 ) ,除生奶外均为市售试样。1 2　菌株　单核细胞增生利斯特氏菌…     

空肠弯曲菌定量检测方法的建立和优化

目的 建立一种空肠弯曲菌定量检测方法,为食品安全风险评估提供准确的数据支持。方法 参照ISO/TS 10272—3和GB/T 4789.9—2008,基于MPN原理建立空肠弯曲菌定量检测方法,对定量加标的生鸡肉和鸡粪样品进行不同增菌培养基、不同培养环境和不同培养方式优化比对研究,用加标回收试验对建立的方法进行验证。结果 增菌培养基的优化选择:Preston肉汤对加标菌量10cfu/g的生鸡肉和鸡粪样品进行空肠弯曲菌检测的平均值分别为12.26和10.96MPN/g,Bolton肉汤检测的平均值分别为2.38和2.32MPN/g,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05);微需氧环境的优化选择:用三气培养箱法、产气袋法、抽气换气法和烛缸法对加标生鸡肉和鸡粪中的空肠弯曲菌检测的平均值分别为12.26和12.12MPN/g、12.26和10.96MPN/g、12.26和12.86MPN/g、10.82和12.12MPN/g,和三气培养箱法两两相比差异无统计学意义(P＞0.05);培养方式:静止培养法对加标生鸡肉和鸡粪空肠弯曲菌的检测值分别为15.8和15.2MPN/g,振荡培养法检测值分别为11.36和8.72MPN/g,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05);用该法对低、中、高浓度加标生鸡肉样品的回收率分别为115.25%、111.5%和95.0%。结论 此方法可以对高污染样品中空肠弯曲菌进行准确定量,特异度高,值得推广应用。     

2012—2013年成都市生鸡肉中弯曲菌调查分析

了解成都市零售环节鸡肉中的弯曲菌定量污染水平以及其随季节变化的趋势,为食品安全风险评估提供依据。方法 选择成都市及周边的大型超市和农贸市场作为采样点,采取未分割的新鲜鸡冷藏鸡胴体。用涂布平板法计数,用多重PCR进行鉴定。结果 采集255份样品,阳性数202份,检出率为79.22%;弯曲菌污染量＞500 cfu/g的样品占32.55%(83/255);农贸市场样品的阳性率高于超市样品;夏季阳性率高于其他季节;共分离到空肠弯曲菌300株、结肠弯曲菌393株和胎儿弯曲菌11株。结论 四川省零售环节鸡肉中弯曲菌的污染严重。     

空肠和结肠弯曲菌鞭毛蛋白基因fla A的检测

目的 运用一种快速、敏感、特异的检测空肠和结肠弯曲菌的方法.方法 以空肠和结肠弯曲菌所共有特异的鞭毛蛋白基因 fla A的一段高度保守序列为引物,用PCR法扩增fla A基因上的一段约1 700 bp的片断.用该引物对空肠和结肠弯曲菌的标准株、福建省的食品分离株进行PER扩增检测,并同时检测该PCR方法的敏感性.结果 扩增片断表现出极好的特异性,2株空肠和结肠弯曲菌标准菌株、8株分离自不同食品样品的空肠穹曲菌和结肠弯曲菌菌株均为阳性,且敏感性实验显示该PCR方法的反应体系最低检出菌量为6 CFU.结论 该方法快速、敏感、特异,可用于突发性食物中毒和暴发感染的调查.     

食源性空肠弯曲菌的分子分型及其遗传多样性分析

为了解在2012~2014年从中国不同城市分离到的食源性空肠弯曲菌的遗传多样性特征,本研究采用多序列位点分型(multilocus sequencing typing,MLST)的方法对分离到的33株食源性空肠弯曲菌进行分子分型。研究中,对33株菌株的管家基因使用7对不同的引物进行PCR扩增,并对扩增的产物使用凝胶电泳鉴定后进行测序。将测序结果同Pub MLST中Campylobacter数据库进行比对,以获得对应菌株ST型,并提交新的ST型数据。利用其MLST数据构建进化树和最小生成树。结果显示33株食源性空肠弯曲菌可以分为27个ST型,其中有14种为新的ST型,可形成11种克隆复合体,优势克隆复合体为CC22和CC45,部分菌株的CC型也曾在临床上发现。共存在91种核苷酸多态性位点,部分等位基因之间存在重组。这表明在2012-2014年间分离得到的菌株具有丰富的遗传多样性,并且有潜在致病风险。