金匮肾气丸对肾阳虚大鼠ACTH影响的实验研究

目的 :探讨金匮肾气丸不同浓度、不同时间对肾阳虚大鼠ACTH (促肾上腺皮质激素 )的影响。方法 :造模大鼠随机分成金匮肾气丸高、中、低剂量组 ,在喂药后不同时间(10d ,2 0d ,30d)观察对血浆ACTH含量的影响。结果 :各中药治疗组ACTH量均不同程度增高 ;金匮肾气丸高剂量组优于模型对照组 (P <0 0 5 ) ;金匮肾气丸低剂量组不明显 (P >0 0 5 ) ;金匮肾气丸中剂量组增高明显 ,与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,同时疗效优于高、低剂量组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :金匮肾气丸提高肾阳虚大鼠ACTH含量可能是其治疗肾阳虚的机理之一。     

金匮肾气丸防治小鼠肾阳虚的实验研究

目的:观察金匮肾气丸(熟地黄、炒山药、山茱萸、泽泻、茯苓、附子、肉桂)对羟基脲所致小鼠肾阳虚的影响.方法:以小鼠皮温、自主活动、负重游泳时间和耐冻试验死亡率为指标,观察小鼠的活动变化;以血清中SOD、GSH-PX、MDA水平为指标,观察脂质过氧化情况;测定血清中睾酮含量,观察动物的性激素变化.结果:金匮肾气丸能明显升高羟基脲所致肾阳虚小鼠的皮温、增加自主活动次数、延长负重游泳时间、增加耐寒试验小鼠的生存率,并使血清中SOD、GSH-PX活力增强、MDA含量降低、血清中睾酮含量亦明显升高,而且高剂量组小鼠的死亡率明显低于模型组.结论:本品对羟基脲所致的小鼠肾阳虚模型有明显防治作用.     

金匮肾气丸实验研究摄要

对金匮肾气丸在抗衰老、免疫功能、对性激素水平、物质代谢、"助阳"作用、血浆中分子物质含量、骨生长、抗庆大霉素耳毒性、抗突变、对微量元素变化的影响等方面的作用及其成分的实验研究进行综述.指出目前本方研究的不足和今后研究的方向.     

金匮肾气丸对肾阳虚大鼠垂体ACTH基因表达的影响

目的探讨金匮肾气丸(简称肾气丸)不同浓度、不同时间对肾阳虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)基因表达的影响。方法造模大鼠随机分成模型组,肾气丸高、中、低剂量组,在喂药后不同时间(10、20、30天),用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾气丸对垂体组织ACTH基因表达的影响。结果与模型组比较,肾气丸中、高剂量组大鼠血清ACTH水平升高(P<0．05或P>0．01)及垂体组织ACTH基因表达明显上调,差异有显著性(P<0．05);中剂量组与高、低剂量组比较明显增高(P<0．05或P<0．01)。结论肾气丸能上调ACTH基因表达可能是其治疗肾阳虚的机理之一。     

金匮肾气丸及其拆方对肾阳虚雌鼠卵巢功能的影响

目的探讨金匮肾气丸及其拆方（补。净阳、补肾阴、阴阳双补）对雌性肾阳虚大鼠卵巢功能的影响。方法将55只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、补阳组、补阴组、双补组,每组各11只。除正常组外,在大腿内侧肌肉丰厚处消毒后注射氢化可的松25mg,（kg·d）,连续12天。成模后第13天起各干预组按1mL／100g灌胃给药,每天1次,补阳组（补阳方,2．75g／kg）、补阴组（补阴方,6．25g／kg）、阴阳双补组（金匮肾气丸,6．75g／kg）,正常组、模型组给予等体积生理盐水,连续干预20天。干预结束后第2天眼眶取血,ELISA法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）含量。计算子宫、卵巢脏器指数（visceraindex,VI）,观察病理改变。结果双补组肾阳虚雌性大鼠一般状况改善,正常、模型、补阳、补阴、双补组体重增加分别为（35．0±12．5）、（16．7±7．4）、（20．2±6．9）、（18．3±3．6）、（29．4±12．2）g;子宫V1分别为（183．4±11．6）、（144．0±6．5）、（158．7±6．3）、（152．1±6．9）、（172．8±8．1）mg／100g;卵巢V1分另1为（32．9±2．4）、（22．6±1．1）、（25．0±1．4）、（23．0±0．4）、（31．4±3．3）mg／100g。与模型组比较,补阳组及双补组大鼠体重、卵巢VI增加（P〈0．05,P〈0．01）,各给药组子宫V1增加（P〈0．05,P〈0．01）。与两个拆方组比较,双补组各指标增加（P〈0．05,P〈0．01）。补阳组及双补组大鼠E。P水平提高（P〈0．05,P〈0．01）。正常、模型、补阳、补阴、双补组E,水平分别为（22．1±9．4）、（9．8±3．0）、（11．3±2．2）、（10．5±0．8）、（16．0±5．5）pg／mL;P水平分别为（14．6±7．5）、（4．3±1．8）、（8．3±2．8）、（5．9±2．9）、（9．5±3．4）ng／mL。与两个拆方组比较,双补组E：水平提高（P〈0．05,P〈0．01）。与补阴组比较,双补组P水平提高（P〈0．05）。与模型组比较,双补组各级卵泡数增多,病理性囊性卵泡数减少（P〈0．01）。补阳组及补阴组可见初级卵泡、次级卵泡,成熟卵泡较少。双补组各级卵泡总数明显多于补阳组及补阴组（P〈0．05）,病理性囊性卵泡明显少于补阴组（P〈0．05）。结论对于肾阳虚证,金匮肾气丸及其拆方所代表的不同补肾法均能不同程度改善受损的卵巢功能,但单一的补阳法或补阴法效果不佳,阴阳双补可提高疗效。     

金匮肾气丸对金匮肾气丸证患者免疫功能的影响

金匮肾气丸方出仲景《金匮要略》,是临床治疗肾气虚弱、命火不足证候的代表方剂。我们通过临床研究,观察了金匮肾气丸对金匮肾气丸证患者体内免疫功能的影响,发现该方可显著改善金匮肾气丸证患者的免疫功能,有效增强金匮肾气丸证患者的整体免疫机能。 1 临床资料 1.1 金匮肾气丸证诊断标准 根据文献记载及临床报道统计分析,将服用金匮肾气丸有效病例的临床症状,按出现频次多少分为特异性主症及一般性主症。其中特异性主症包括畏寒肢冷、神疲倦怠、腰膝酸软、气短而喘、性功能减退及夜尿频数等六项,每症按病情轻重及持续时间长短分别评…     

金匮肾气丸对金匮肾气丸证患者性激素水平的影响

观察了金匮肾气丸对于金匮肾气丸证患者性激素水平的影响 ,发现该方可显著升高男性金匮肾气丸证患者的血清睾酮 (T)水平 ,同时亦可使女性金匮肾气丸证患者的血清雌二醇 (E2 )水平明显上升。提示 ,金匮肾气丸通过良性调节金匮肾气丸证患者的体内性激素水平 ,而使“肾气”及“天癸”的非健康状态得以改善 ,也许是金匮肾气丸在多系统、多病种被广泛应用的内在机制之一     

金匮肾气丸对“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠精子质量的影响

以“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠为模型，观察金匮肾气丸对肾阳虚小鼠精子质量的影响。结果肾阳虚模型组小鼠与正常对照组相比，精子活率和精子密度明显下降（P〈0.05）；而金匮肾气丸给药组小鼠与模型组相比，精子活率和精子密度明显升高（P〈0.05）。表明金匮肾气丸可以改善肾阳虚小鼠的精子质量。     

金匮肾气丸对肾阳虚小鼠睾丸组织端粒酶活性的促进作用

目的探讨金匮肾气丸对肾阳虚小鼠睾丸组织端粒酶活性的影响。方法以"劳倦过度,房事不节"制备肾阳虚小鼠模型,随机分为模型组及金匮肾气丸治疗组(治疗组),每组15只,另选取15只正常雄鼠作为正常组。正常组常规饲养,每天灌胃蒸馏水0.1mL/10g;模型组造模同时每天灌胃蒸馏水0.1mL/10g;治疗组造模同时每天灌胃金匮肾气丸混悬液0.1mL/10g(浓度0.241g/mL)。共干预4周。4周后采用ELISA法检测各组小鼠睾丸组织端粒酶活性。结果 "劳倦过度、房事不节"法复制肾阳虚模型成功,同时金匮肾气丸对肾阳虚模型小鼠的体征有一定的改善作用。与正常组比较,模型组小鼠睾丸端粒酶活性降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组端粒酶活性升高(P<0.01)。结论 "劳倦过度、房事不节"肾阳虚小鼠睾丸端粒酶活性较之正常小鼠明显降低,金匮肾气丸可使肾阳虚小鼠睾丸端粒酶活性得以恢复。     

金匮肾气丸对肾阳虚动物模型影响的拆方研究

建立肾阳虚动物模型 ,对金匮肾气丸进行拆方研究。结果表明 ,肾气丸能显著提高阳虚小鼠T3、T4 水平 ,其作用机理可能与调节促进下丘脑—垂体—甲状腺轴有关。     

金匮肾气丸对颌下腺切除大鼠生精调控的作用及机理研究

目的探讨金匮肾气丸对颌下腺切除大鼠生精调控的作用和机理。方法 SD大鼠经灌胃腺嘌呤复制成肾阳虚伴生精障碍模型,切除颌下腺将大鼠复制成唾液缺乏伴生精障碍模型。大鼠经灌胃给予金匮肾气丸混悬液,观察1个生精周期后大鼠附睾内成熟精子的数量与睾丸曲细精管的参数,采用免疫细胞化学法结合图像分析系统观察生精细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况。结果金匮肾气丸作用1个生精周期后,与其他5个实验组比较,肾阳虚+肾气丸组大鼠曲细精管中生精细胞出现增殖,同时生精细胞内Bax表达下调和Bcl-2表达上调(P<0.01),与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肾阳虚合并颌下腺切除+肾气丸组、颌下腺切除+肾气丸组大鼠曲细精管中生精细胞有所增殖,但与肾阳虚合并颌下腺切除组、颌下腺切除组比较,差异无统计学意义(P>0.05),Bax和Bcl-2表达变化不明显(P>0.05)。结论金匮肾气丸能通过调控生精细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2,促进肾阳虚伴生精障碍模型大鼠生精细胞增殖,但对颌下腺切除的唾液缺乏伴生精障碍模型大鼠的Bax和Bcl-2表达基本没有调控作用,生精细胞增殖促进能力有限。     

金匮肾气丸对肾阳虚大鼠17α-羟化酶基因表达的影响

目的探讨金匮肾气丸对肾阳虚大鼠17α-羟化酶基因表达的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、金匮肾气丸组,采用腺嘌呤法造模。在用药后的不同时间(10、20、30d),用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肾上腺17α-羟化酶的基因表达。结果与模型组比较,金匮肾气丸能上调肾阳虚大鼠的肾上腺17α-羟化酶的基因表达(P<0.05,P<0.01),随着用药时间的延长,17α-羟化酶基因表达有逐渐增强的趋势。结论金匮肾气丸上调肾阳虚大鼠的肾上腺17α-羟化酶的基因表达是其治疗肾阳虚证的机理之一。     

肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴与垂体-性腺轴相关性研究

目的：了解肾阳虚时垂体-甲状腺轴及垂体-性腺轴功能之间的相互关系。方法：肌肉注射氢化可的松复制肾阳虚大鼠模型。采用分批宰杀的方法观察早期、中期和晚期肾阳虚大鼠垂体-甲状腺轴及垂体-性腺轴功能指标,对测试数据进行相关性分析,探讨垂体-甲状腺轴及垂体-性腺轴之闻的变化规律和特征。结果：正常组垂体-性腺轴激素中T与FSH有相关性且为负相关。模型组中期LH与FSH有正相关性。模型组垂体-甲状腺轴与垂体-性腺轴激素中T与偈H有显著正相关性,T4与T有正相关性。结论：肾阳虚时垂体-甲状腺轴与垂体-性腺轴不是相互抑制作用,而是平行关系,二轴同时受损．     

肾气丸"阴中求阳"配伍对肾阳虚大鼠细胞因子含量的影响

目的 用各拆方肾气丸灌胃肾阳虚大鼠,测定灌胃后各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,分析肾气丸"阴中求阳"的配伍治疗肾阳虚证的机理.方法 以氢化可的松25 mg/(kg·d)注射大鼠,连续12 d,同时以各肾气丸拆方组水煎液灌胃,于灌胃第21天,麻醉大鼠,心脏取血,离心取上清液,用ELISA法检测大鼠血清中IL-1β,IL-2,IFN-γ,TNF-α的含量.结果 与正常组比较,模型组IL-1β、IL-2的含量降低,经灌胃后,各拆方组大鼠血浆中二者的含量均有不同程度增加,其中阴阳双补2组含量高于补阳2组,阴阳双补1组含量高于补阳1组,且阴阳双补1组中IL-1β含量高于补阴1组,具有统计学意义.与正常组比较,模型组大鼠血浆中IFN-γ、TNF-α的含量降低,经灌胃后,各拆方组大鼠血浆中二者含量均有不同程度的增加,但增加并不显著.结论 肾气丸"阴中求阳"的配伍可能是通过增加血浆中IL-1β、IL-2的含量治疗肾阳虚证,故增加血浆中IL-1β、IL-2的含量,可能是肾气丸"阴中求阳"配伍治疗肾阳虚证的机理之一.     

温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究

 目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1.2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠垂体、卵巢及肾上腺作用的实验研究

目的：探讨雄激素致不孕大鼠发病机理和中药治疗作用。方法：采用光镜、电镜、细胞培养、免疫组化、放免测定等方法，对补肾药治疗前后的ＡＳＲ的垂体，卵巢、肾上腺的形态学及内分泌功能进行同步观察。结果：ＡＳＲ的腺垂体细胞浆内有“脂滴”、“粒溶”、“空泡”、“自嗜”、卵巢呈无排卵；肾上腺皮质网状带增生，同时促卵泡激素、促黄体激素明显低下（Ｐ〈０．０５￣０．００５）；睾酮、脱氰表雄酮明显升高（Ｐ〈０．０１￣０．     

二仙汤对肾阳虚大鼠垂体ACTH基因表达的影响

目的 :探讨二仙汤不同时间对肾阳虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素 (ACTH)基因表达的影响。方法 :造模大鼠随机分成模型组、二仙汤组 ,在喂药后不同时间 (1 0d ,2 0d ,30d) ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,检测二仙汤对垂体组织ACTH基因表达的影响。结果 :二仙汤可以上调垂体组织ACTH基因表达 (P <0 0 5 )。结论 :二仙汤通过上调ACTHmRNA表达治疗肾阳虚证是其作用机理之一。     

肾气丸对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的：观察不同浓度肾气丸水提液对体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖的影响。方法：应用全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠BMSCs,传代扩增,倒置显微镜进行细胞形态学观察,免疫组化法检测细胞表面抗原鉴定其表面标志。将BMSCs分为对照组及不同浓度肾气丸水提液干预组,采用MTT比色法观察其增殖情况。结果：采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs形态呈长梭形,呈集落样生长,免疫细胞化学鉴定,CD44、CD29阳性,CD34阴性。MTT检测结果显示,与空白对照组相比,肾气丸水提液干预24h后,4、2、1、0.5mg/ml浓度肾气丸干预组吸光度值均增高（P〈0.05）,其中2mg/mL肾气丸干预组增高明显;0.25mg/mL浓度肾气丸水提液干预组吸光度与空白组相比无差异（P〉0.05）。结论：本实验采用全骨髓贴壁法培养的骨髓基质细胞符合BMSCs的生物特性,可以用于BMSCs相关研究。在一定浓度范围内,肾气丸水提液可以提高BMSCs的体外增殖能力。