长波紫外线照射对培养的正常人黑素细胞增殖及黑素合成的影响

目的 了解UVA对黑素细胞增殖及黑素合成的影响.方法 采用体外细胞培养技术、MTT法及NaOH法研究不同剂量UVA照射对黑素细胞增殖和黑素合成的作用.结果 随着照射时间的增加,黑素细胞的增殖率增加,黑素合成量也增加.结论 照射剂量在3.6J/cm²以内时,黑素细胞增殖率逐步上升,以后趋向稳定.在测定的照射剂量内,黑素合成量与照射剂量呈正相关.     

黑素生成素对黑素细胞增殖和黑素合成作用的研究

古巴学者Ｃａｏ报道胎盘中提取的黑素生成素临床治疗白癜风有效。为了探讨治疗机理，我们按Ｃａｏ法提取黑素生成素，用体外细胞培养方法，在黑素细胞培养中分别加入黑素生成素和胎盘肽，以不加黑素生成素的黑素细胞培养作为对照，用ＭＴＴ法测定细胞增殖情况；用Ｏｉｋａｗａ法测定黑素合成量；用透射电镜观察黑素小体的生成。结果表明，加黑素生成素后，黑素细胞促增殖率为４２．５％，加胎盘肽促增率为５．９％，二者有显著性差异     

过氧化氢对黑素细胞生物学作用的研究

目的:研究不同浓度的过氧化氢(H2O2)对体外培养的正常人表皮黑素细胞的生物学作用.方法:分别以0.05、0.1、0.5、1 mmo1/L的H2O2作用于体外培养的黑素细胞24 h,采用多巴氧化法测定酪氨酸酶活性;NaOH裂解法测定黑素合成;比色法测定丙二醛(MDA)含量.结果:正常人表皮黑素细胞经H202处理后,酪氨酸酶活性降低,黑素合成量减少,丙二醛含量增多,其中以0.5、1 mmol/L的H2O2作用明显,与对照组相比有统计学意义(P＜0.05).结论:H2O2在-定浓度时可抑制正常人表皮黑素细胞酪氨酸酶活性,减少黑素合成,并可致细胞过氧化损伤.提示H2O2在白癜风发病中可能起到一定作用.     

白细胞介素4对体外培养人黑素细胞增殖及黑素合成的影响

目的建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,观察不同浓度白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)对体外培养正常人黑素细胞的细胞增殖及黑素合成的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法测定不同浓度IL-4对黑素细胞增殖的影响,氢氧压钠(NaOH)裂解法测定黑素生成量,流式细胞仪检测黑素细胞的凋亡率。结果 IL-4对黑素细胞活力有抑制作用,能使细胞增殖能力降低,黑素合成减少,增加黑素细胞的凋亡率。结论 IL-4对体外培养的黑素细胞增殖及黑素生成都有抑制作用,这为临床应用IL-4治疗色素性疾病提供了实验依据。     

过氧化氢对体外培养的黑素细胞形态及功能的影响

目的:探讨过氧化氢(H2O2)对体外培养的黑素细胞形态和功能的影响。方法:向体外培养的正常黑素细胞中加入过氧化氢,检测不同浓度(0~0.5 mmol/L)和不同时间(0~60 min)的氧化应激对细胞形态及功能的影响。结果:过氧化氢的加入导致细胞形态的改变并抑制了细胞的增殖及黑素合成,且具有浓度和时间依赖性。结论:氧化应激可损伤细胞并抑制黑素细胞的增殖及黑素合成。     

过氧化氢与白癜风

白癜风患者表皮内过氧化氢聚集，氧化压力增大。过氧化氢通过对细胞的直接毒性作用、干扰表皮细胞生物喋呤代谢和抑制细胞酶功能等多种途径，破坏黑素细胞，使黑素生成障碍：清除表皮过氧化氢，能使白癜风白斑处表皮细胞空泡消失，形态恢复正常，白斑重新着色，因此，过氧化氢与白癜风的发病有着密切的关系。     

黑素生成素诱导小鼠成黑素细胞增殖和分化的研究

目的 观察从胎盘中提取的黑素生成素对小鼠成黑素细胞NCCmelb4M5增殖和分化的影响，从诱导成黑素细胞增殖和分化的角度，探讨其治疗白癜风的可能机制。方法 NCCmelb4M5细胞的增殖应用常规MTT法检测；倒置显微镜直接观察黑素生成素作用后细胞形态的变化。RT－PCR检测不同浓度黑素生成素作用后细胞表面分子表达的变化。结果 50，100，200 μg/mL的黑素生成素均可促进NCCmelb4M5细胞的增殖（P < 0.001），100 μg/mL作用效果最为明显；50，100 μg/mL黑素生成素可以刺激表面分子c-Kit和酪氨酸酶在NCCmelb4M5细胞中的表达由阴性转为阳性，并增加小眼畸形相关转录因子（MITF）在细胞内的表达。100 μg/mL的黑素生成素可明显诱导NCCmelb4M5细胞的形态从成黑素细胞向黑素细胞改变。结论 从胎盘中提取的黑素生长素可诱导NCCmelb4M5细胞由成黑素细胞向黑素细胞分化，这种诱导作用可能是使白斑复色的途径之一。     

不同浓度阿魏酸溶液对人表皮黑素细胞增殖的影响

目的:观察不同浓度阿魏酸溶液对体外培养的正常人表皮黑素细胞增殖的影响。方法:采用L-DOPA染色法鉴定正常人表皮黑素细胞;分别用0.01、0.1、1 mg/m L的阿魏酸溶液处理正常人表皮黑素细胞24 h、48 h、72 h,采用MTS法测定黑素细胞增殖活性。结果:与未用阿魏酸溶液处理的对照组相比,0.01、0.1、1 mg/m L阿魏酸在作用24、48、72 h后,黑素细胞增殖作用均受到抑制,差异均有统计学意义(P值均0.05);不同浓度与时间有交互作用(F=2.48,P=0.034),随着阿魏酸溶液浓度的增加及作用时间的延长,对黑素细胞的抑制作用增强。结论:阿魏酸溶液可以抑制正常人表皮黑素细胞的增殖,提示其在治疗黄褐斑等疾病方面具有良好的前景。     

含中药血清对体外黑素细胞增殖及黑素合成量的影响

目的　探讨含中药白净冲剂血清对黑素细胞 (MC)增殖及合成黑素功能的影响。方法　体外培养人MC,于对数生长期加 10%浓度的大鼠含中药白净冲剂血清培养 56h后,分别采用噻唑蓝法(MTT法)和NaOH法检测MC增殖及合成黑素的情况,并与大鼠转移因子注射后含药血清组作对照。空白对照大鼠血清为空白对照组。结果　中药白净冲剂及转移因子含药血清组对MC增殖较空白对照组有明显促增殖作用,合成黑素量显著增加,差异均有显著性 (P均<0. 01)。结论　含中药白净冲剂血清有促进MC增殖作用,并使MC合成黑素增加。     

芹黄素对过氧化氢所致黑素细胞凋亡的作用

目的采用过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞体外氧化应激模型探讨芹黄素对黑素细胞的抗氧化保护作用。方法采用MTT法测定不同浓度芹黄素预处理前后H2O2对正常人表皮黑素细胞活力的影响,An-nexin-V/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡情况,DCFH-DA流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)的含量。结果 250μmol/L的H2O2作用于黑素细胞24h,黑素细胞活力降低至(36.42±7.21)%,凋亡率增加至(48.82±12.55)%。0.6μmol/L,2.5μmol/L和10.0μmol/L芹黄素预处理1h后,H2O2所致细胞活力分别增加至(41.53±5.25)%,(45.33±6.28)%和(51.92±5.29)%,凋亡率减少至(42.25±7.69)%,(37.54±8.82)%和(32.25±58.28)%。250μmol/L的H2O2作用于黑素细胞2h后,黑素细胞ROS含量增加至空白对照组的(69.22±8.57)倍。10μmol/L芹黄素预处理1h后H2O2所致黑素细胞ROS含量为空白对照组的(54.48±5.03)倍,低于单用H2O2处理组。结论芹黄素可能通过减少ROS生成和抑制氧化应激对HO所致黑素细胞凋亡具有保护作用,其可能具有开发为治疗白癜风新药的前景。     

有机锗(Ge-132)对培养黑素细胞的影响

目的　探讨有机锗 (Ge 13 2 )对培养的黑素细胞的作用。方法　采用经典的黑素细胞培养方法并加以改良取得第二代完全纯化的黑素细胞 ,按浓度梯度方法向每组培养物中加入不同浓度的药物 ,检测细胞的增殖活性。结果　当培养基中Ge 13 2浓度大于 0 .0 8μg/m1时 ,细胞生长呈现以下变化 :细胞增殖活性下降 (P <0 .0 0 1) ;酪氨酸酶活性受到抑制 (P <0 .0 0 1) ;黑素细胞内黑素含量下降 (P <0 .0 0 1)。结论　Ge 13 2在较低浓度 ( >0 .0 8μg/ml)时对黑素细胞的生长有抑制作用。     

五倍子对角质形成细胞、黑素细胞和成纤维细胞体外增殖的影响

目的 了解中药五倍子治疗瘢痕疙瘩的药用成分和药用机制以及可能存在的不良反应。方法 用MTT比色试验研究五倍子单宁酸对正常人皮肤中的角质形成细胞、黑素细胞和成纤维细胞体外增殖的影响。并与秋水仙碱及红花和芦荟进行了比较。结果 ①五倍子单宁酸与五倍子生药醇提物对人成纤维细胞的增殖具有相似的抑制作用。在20μg/mL及以上质量浓度时,对人皮肤黑素细胞的抑制作用较大,其细胞增殖率是不加药对照组的73.6%～68%。在50μg/mL以下的质量浓度对人角质形成细胞的体外增殖有轻微的促进作用(111%～112%)。②红花生药醇提物和芦荟水提液在实验浓度下均可促进人角质形成细胞的体外增殖,芦荟水提液还可促进人成纤维细胞的体外增殖。结论 单宁酸是五倍子醇提物中的主要活性物质,其对黑素细胞的抑制作用提示五倍子单宁酸可能存在毒副作用。     

甲氧沙林对人毛囊黑素细胞增殖、活化和黑素合成作用的研究

目的 研究甲氧沙林对人毛囊黑素细胞活化、增殖和黑素合成的影响.方法 体外培养正常人毛囊黑素细胞,观察不同浓度甲氧沙林(10～500μmol/L)对毛囊黑素细胞形态、增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响.结果 50μmol/L甲氧沙林处理细胞7d后,毛囊黑素细胞树突明显增多延长,胞浆内出现较多棕褐色颗粒,酪氨酸酶活性和黑素含量增加显着高于对照组(P<0.01).结论 甲氧沙林能诱导毛囊黑素细胞树突增多延长,酪氨酸酶活性和黑素含量增加.     

甘草黄酮对黑素细胞生物学作用的比较

目的 研究甘草黄酮对体外培养的鼠黑素瘤B16细胞及人表皮黑素细胞的生物学作用。方法 建立正常人表皮黑素细胞培养体系和培养黑素瘤B16细胞,添加甘草黄酮后,测定黑素细胞活力、酪氨酸酶活性以及黑素含量的变化,并与氢醌的作用结果进行比较。结果 两种黑素细胞对药物的反应有所不同。与氢醌比较,甘草黄酮具有较强的浓度依赖性黑素合成抑制作用,且对黑素细胞的细胞毒性较小。结论 用体外培养的人黑素细胞作为研究对象与鼠黑素瘤B16细胞比较具有一定的差异;甘草黄酮可作为一种安全有效的皮肤美白物质。     

芳香维甲酸乙脂对紫外线诱导的人黑素细胞黑素合成的影响

为了研究芳香维甲酸乙酯（Ｒｏ１３－６２９８）对黑素细胞黑素合成的影响，为应用维甲酸治疗色素沉着性皮肤病提供实验依据。体外培养６例人正常黑素细胞，每日分别经１００ｍＪ／ｃｍ２的中波紫外线（ＵＶＢ）照射，每次照射后立即加入不同浓度（１０－９～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）的Ｒｏ１３－６２９８，于第２、４、６天分别用多巴氧化速率法和ＮａＯＨ溶解法测定细胞酪氨酸酶活性和黑素含量。结果：每日用１００ｍＪ／ｃｍ２的ＵＶＢ连续照射培养的黑素细胞，照射４天后细胞酪氨酸酶活性和黑素含量显著高于非照射组（Ｐ＜０．０５～０．０１）；在每次ＵＶＢ照射后加入Ｒｏ１３－６２９８，细胞酪氨酸酶活性和黑素含量则与非照射组无显著性差异；在非照射组未发现Ｒｏ１３－６２９８对细胞黑素合成有明显影响作用。结论：反复小剂量ＵＶＢ照射能通过提高酪氨酸酶活性来实现对培养黑素细胞黑素合成的诱导作用；Ｒｏ１３－６２９８在较低浓度能抑制ＵＶＢ对黑素细胞黑素合成的诱导作用     

α-硫辛酸对体外培养的黑素细胞影响的实验研究

目的　建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系 ,研究α 硫辛酸对体外培养的黑素细胞的影响。方法　采用MTT法测定α 硫辛酸对黑素细胞活力的影响 ,以左旋多巴为底物测定酪氨酸酶活性 ,NaOH裂解法测定黑素合成 ,并与茶多酚的结果进行比较。结果　α 硫辛酸对黑素细胞活力有抑制作用 ,能使细胞增殖力降低 ,酪氨酸酶活性减弱 ,黑素合成减少。结论　α 硫辛酸对体外培养的黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素生成都有抑制作用 ,这为临床应用α 硫辛酸治疗色素性疾病提供了实验依据。