氯喹抑制体外培养星形胶质细胞的激活

目的研究氯喹对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的抑制作用,为癫痫的治疗提供实验依据。方法分离新生SD大鼠海马,体外培养星形胶质细胞,经纯化鉴定后分为:对照组、戊四氮(PTZ)组、氯喹干预组(25、50和75 mg/L),经相应处理后,分别用MTT法、免疫荧光、Western blot测定星形胶质细胞数量及活性、星形胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及CyclinD1的表达量。结果与对照组比较,PTZ可激活星形胶质细胞的增殖,使GFAP、CyclinD1的表达量增加(P<0.05);与PTZ组比较,氯喹阻滞了PTZ激活的星形胶质细胞的增殖(P<0.05);氯喹可抑制PTZ激活星形胶质细胞异常增加的GFAP的表达;氯喹可抑制PTZ激活星形胶质细胞的CyclinD1的表达量(P<0.05);与对照组相比,3种结果均显示75 mg/L氯喹对体外培养星形胶质细胞激活的抑制作用较强,并可维持其在正常范围。结论氯喹具有抑制PTZ激活体外培养星形胶质细胞的作用,其可能通过抑制星形胶质细胞的增殖来发挥抗癫痫作用。     

戊四氮慢性致痫大鼠海马星形胶质细胞的激活

目的：研究慢性癫痫大鼠点燃时海马星形胶质细胞的激活情况。方法：采用免疫组化和双重免疫荧光标记法观察戊四氮慢性癫痫大鼠点燃后海马NF-kBp65和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的变化。结果：癫痫发作1 h,CA1区出现NF-kBp65-IR阳性细胞,4 h胶质细胞p65-IR维持在高水平,并持续至发作后12 h;发作1 h,CA1区GFAP-IR开始增强,4～8 h观察到明显浓染和突起增多的GFAP-IR阳性细胞,并持续至24 h;GFAP/p65一IR阳性细胞发作后1 h可观察到,4 h达最高峰,24 h恢复至对照组水平。结论：戊四氮致痫大鼠点燃时,星形胶质细胞的这种早期而持续的激活提示该细胞在慢性癫痫的复发中可能起到重要作用。     

托吡酯对急性癫痫大鼠海马星形胶质细胞的影响

目的研究急性癫痫大鼠海马结构内星形胶质细胞的激活情况及托吡酯对其的影响。方法采用免疫组织化学法观察马桑内酯急性癫痫大鼠及应用托吡酯治疗后海马结构内胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫细胞化学反应（immunoreactivity,IR）的变化。结果①与对照组相比,模型组和治疗组大鼠GFAP-IR阳性细胞数及积分光密度值均显著增J]I（P〈0.05）;②治疗组较模型组其GFAP-IR阳性细胞数和积分光密度值显著降低（P〈0.05）。结论星形胶质细胞在癫痫病理过程中起着重要作用,托吡酯可能通过直接和间接两方面的作用减轻星形胶质细胞的激活。     

罗格列酮对大鼠脑出血急性期小胶质细胞和星形胶质细胞的影响

目的:研究罗格列酮对大鼠脑出血后小胶质细胞、星形胶质细胞的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、大剂量干预组、小剂量干预组和假手术组。采用Ⅳ型胶原酶肝素生理盐水尾状核立体定向注射法建立大鼠脑出血模型,大剂量干预组给予罗格列酮2 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,小剂量干预组给予罗格列酮0.2 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,连续7 d。在术前和术后每日进行1次Longa神经功能缺损评分和尾部微量血糖测量,在术后第2天和第7天采用免疫组织化学检测脑小胶质细胞和星形胶质细胞。结果:大剂量干预组在术后第4天到第7天,小剂量干预组在术后第5天到第7天的Longa神经功能缺损评分低于对照组;大剂量干预组在术后第4天到第7天,小剂量干预组在术后第6天和第7天的微量血糖低于对照组;大剂量干预组术后第2天和第7天血肿周边活化的小胶质细胞较对照组增加,小剂量干预组术后第7天血肿周边活化的小胶质细胞较对照组增加;大剂量干预组和小剂量干预组术后第7天星形胶质细胞较对照组明显增加。结论:罗格列酮可以部分改善大鼠脑出血急性期神经功能,这可能与调节小胶质细胞和星形胶质细胞激活和功能有关。     

马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋 …

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星表胶质细胞伯胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明，整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强，并可见阳性细胞增生，胞体肥大，尤以齿状回门区和海分子腔隙层及始层为甚，此外，本实验还发现海胶质纤维酸性蛋白的阳性反应随发作后不同时间间隔（２ｈ～９ｄ）而不同，而直至发作后９ｄ胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组，此结果表明，马桑内酯所致癫痫     

马桑内酯所致慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白的表达

用免疫组织化学方法研究了系统应用马桑内酯所致的慢性癫痫大鼠海马中星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白的表达。结果证明,整个海马的胶质纤维酸性蛋白免疫反应明显增强,并可见阳性细胞增生、胞体肥大,尤以齿状回门区和海马分子腔隙层及始层为甚。此外,本实验还发现海马胶质纤维酸性蛋白的阳性反应强度随发作后不同时间间隔（２ ｈ～９ ｄ）而不同,且直至发作后９ ｄ,胶质纤维酸性蛋白阳性反应程度仍高于对照组。此结果表明,马桑内酯所致癫痫反复发作可使海马星形胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白的表达长期保持在较高水平。     

氯喹对体外培养星形胶质细胞激活的抑制作用

  目的 研究氯喹对体外培养大鼠海马星形胶质细胞激活的抑制作用,为癫痫的治疗提供实验依据。方法 分离新生SD大鼠海马,体外培养星形胶质细胞,经纯化鉴定后分组：a 对照组;b 戊四氮（PTZ）组;c 氯喹干预组（25mg、50mg、75mg/L）,经相应处理后,分别运用MTT法、免疫荧光、western-blot测定星形胶质细胞数量及活性、星形胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及CyclinD1的表达量,并分析比较各组星形胶质细胞激活情况。结果 与b组比较,MTT法显示氯喹阻滞了PTZ激活的星形胶质细胞的增殖（P<0.05）;免疫荧光结果显示,氯喹可抑制PTZ激活星形胶质细胞异常增加的GFAP的表达;western-blot结果显示氯喹可抑制PTZ激活星形胶质细胞的CyclinD1的表达量（P<0.05）;与a组比较,3种结果均显示75mg/L氯喹对体外培养星形胶质细胞激活的抑制作用较强,并可维持其在正常范围。结论 氯喹具有抑制PTZ激活体外培养星形胶质细胞的作用,其可能通过抑制星形胶质细胞的增殖来发挥抗癫痫作用。     

星形胶质细胞在癫痫发病机制中的研究进展

癫痫是神经系统常见疾病之一。星形胶质细胞活化作为癫痫的病理学标志,将极大程度地影响大脑控制细胞兴奋性能力。本文通过综合国内外最新研究进展,对星形胶质细胞介导的突触间隙神经递质的转运以及细胞因子的信号转导进行详细的阐述,以期对癫痫的治疗提供新策略。     

帕金森病大鼠黑质小胶质细胞及星形胶质细胞的变化

目的探讨帕金森病(PD)发病中黑质小胶质细胞和星形胶质细胞的变化。方法采用立体定向术将神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)注入大鼠右侧黑质和内侧前脑束内,制备大鼠PD模型。将制模成功的16只PD大鼠随机分为2周和8周模型组,另6只正常大鼠作为对照组。观察各组大鼠黑质致密带内多巴胺(DA)能神经元、OX-42(小胶质细胞的特异性标志物)及神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞的特异性标志物)阳性细胞的分布和形态变化。结果 2周和8周模型组损毁侧黑质致密部DA能神经元较健侧显著减少(P0.01),损毁侧OX-42阳性细胞的数量较健侧明显增加(P0.01),形态呈"阿米巴状"。损毁侧GFAP阳性细胞数量较健侧明显增加(P0.01),突起变短,染色加深。2周模型组和8周模型组DA能神经元及两种胶质细胞的变化情况相似。结论 PD大鼠模型中存在着小胶质细胞和星形胶质细胞的激活,且两种胶质细胞的活化程度在PD发病过程中的不同时间无明显差别。     

戊四唑致痫大鼠脑内缝隙连接的作用

目的: 研究缝隙连接(gap junction, GJ)在癫痫发病中的作用及机制。方法: 以戊四唑 (pentylene-tetrazol, PTZ)致痫大鼠模型为研究对象,采用免疫组织化学和实时定量RT-PCR技术,分别检测缝隙连接蛋白Cx32和Cx43在癫痫发作后不同时点皮层和海马神经元的表达。加用卡马西平(carbamazepine, CBZ)和甘珀酸(carbenoxolone, CBX)干预,观察二者对Cx32/43表达以及大鼠癫痫发作的影响。结果: 免疫组织化学染色显示PTZ致痫2 h后大鼠脑内Cx32/43阳性细胞开始增多,8 h后增多更为明显。实时定量RT-PCR示致痫2 h Cx32 mRNA迅速升高,5 h达高峰。Cx43 mRNA表达水平较低,但明显高于对照组。CBX显著抑制了Cx32/43的表达,CBZ对Cx32和Cx43的表达无明显影响。二者均抑制了大鼠的痫样发作。结论: GJ参与癫痫的发病过程,具有促进癫痫发作的作用。CBZ不影响Cx32/43的表达,表明其抗癫痫作用机制与阻断GJ 无关。     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织GDNF与NT-3表达的影响

目的:观察和探讨灵芝孢子粉干预后戊四氮(PTZ)致痫大鼠皮质和海马区胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和神经营养因子-3(NT-3)的变化,进一步研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组采用PTZ腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。实验后断头迅速取脑,采用免疫组化方法检测皮质和海马区GDNF和NT-3表达的变化;同时用Westernblotting检测海马各指标蛋白的变化。结果:灵芝孢子粉干预后,免疫组化显示:皮质和海马区GDNF和NT-3较癫痫模型组明显增加;Western blotting检测显示:海马中GDNF和NT-3表达较癫痫组显著增加。结论:灵芝孢子粉能够增强GDNF和NT-3的表达从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用。     

RCAN1/CaNA在颞叶癫痫患者及戊四氮动物模型中的表达变化

目的观察钙调神经磷酸酶调节因子1(RCAN1)及钙调神经磷酸酶A(CaNA)在颞叶癫痫患者及戊四氮(PTZ)致癫动物模型中的表达变化。方法收集颞叶癫痫患者手术切除的皮质,并纳入癫痫组(n=18);收集脑外伤患者手术切除的皮质,并纳入对照组(n=11)。30只SD大鼠随机分为模型对照组(MC)和PTZ组。分别应用Western blot和免疫组织化学染色检测RCAN1和CaNA的表达情况;应用免疫荧光染色对RCAN1进行定位;应用免疫共沉淀分析RCAN1与CaNA的相互作用。结果 RCAN1定位于神经元的细胞膜;在颞叶癫痫患者及癫痫模型中,RCAN1的表达水平较对照组明显下降(P<0.01),CaNA的表达水平较对照组明显增高(P<0.01);RCAN1与CaNA具有相互作用。结论在颞叶癫痫患者及癫痫模型中,RCAN1低表达,而CaNA高表达,提示RCAN1可能通过调控CaNA参与癫痫的形成。     

癫癎对雄性Wistar大鼠生殖系统的影响

目的：研究癫癎发作对雄性Wistar大鼠生殖系统相关指标的影响,企为临床癫癎男性患者提高生育质量提供依据.方法：运用氯化锂-匹罗卡品建立Wistar雄性大鼠癫癎模型,取血样、睾丸、附睾、精子分别测定其血清性激素、脏器系数、精子计数,观察精子活力及形态,分析癫癎对雄性大鼠生殖的影响.结果：癫癎造模成功组（A组）及癫癎造模未成功组（B组）的总睾酮（TT）及孕酮（P）水平均显著低于健康对照组（C组）,而A组TT水平又显著低于B组,A组大鼠孕酮（P）水平与B组比较差异无显著意义.而A组黄体生成素（LH）及卵泡刺激素（FSH）均显著高于B组及C组,A组大鼠泌乳素（PRL）水平显著高于B组及C组,雌二醇（E2）在三组间比较差异无显著意义.A组与C组及B组相比睾丸脏器系数（睾丸重/体重）显著降低.A组大鼠精子计数低于C组及B组.在精子活动率,A组及B组低于C组.在大鼠精子畸形形态的观察中,A组及B组中可观察到较多的精子头部畸形.结论：氯化锂-匹罗卡品建立的Wistar雄性大鼠癫癎模型对生殖系统的相关检测指标均有较明显的影响.     

Effects of L-lysine and its metabolites on pentylenetetrazol-induced seizures

Lysine and its metabolic intermediates were studied for their effect on pentylenetetrazol (PTZ)-induced seizures in mice. L-Lysine at dosages above 2 mmol/kg given i.p. significantly increased seizure protection and seizure latency (the time required to develop seizures after PTZ injection) with a peak effect dose at 10 mmol/kg. A pretreatment time of 15 min was required to significantly prolong seizure latency with a peak effect time of 45 min. D-Lysine at 10 mmol/kg i.p. afforded some seizure protection and significantly prolonged seizure latency but has a peak effect time of 15 min. When administered intracerebroventricularly, both L-lysine and piperidine at 0.1 mmol/kg prolonged seizure latency significantly, and increased seizure protection slightly. L-Pipecolic acid at the same dose given through the same route, however, shortened seizure latency significantly. L-alpha-Aminoadipic acid, on the other hand, had no significant effect. Lysine metabolites that prolonged seizure latency also increased seizure protection and decreased seizure death, and one that shortened seizure latency had the opposite effect. The anticonvulsant activity of lysine and its metabolites was explained on the basis of their connection with the GABAergic transmission.     

蝎毒对马桑内酯所致癫（间）大鼠的作用

目的研究蝎毒素对癫（间）的作用,为新药的开发利用提供理论基础.方法采用整体马桑内酯大鼠癫（间）模型,侧脑室埋管给药,记录皮层脑电图.结果蝎毒素能延长马桑内酯所致癫（间）发作的潜伏期,降低发作程度,缩短发作时间.结论蝎毒素对马桑内酯所致的大鼠癫（间）具有对抗作用.     

Daily changes in pentylenetetrazol-induced convulsions and open-field behavior in rats

Susceptibility to pentylenetetrazol (PTZ)-induced clonic convulsions was measured in rats over the 24-hr light-dark cycle at four-hour intervals. The results showed a higher sensitivity to PTZ around 2200 hr. Other groups of rats were exposed to a four-min open-field session. In the first two min of the session the animals were submitted to open-field environmental stimuli. The next two-min observation occurred with sound and light presented to the animals. Differences through the 24-hr period of the day for both sessions were seen. A reduction in rearing at 2200 hr and increase in defecation at 2200 hr and 0200 hr was observed.     

癫痫持续状态下幼年癫痫大鼠海马区星形胶质细胞：大麻素2型受体调控MAPK通路的作用

文题释义：癫痫持续状态：指连续癫痫发作、持续时间超过10-30 min以上或每次癫痫发作间隔时间短、没有意识清醒期,或者是出现了短暂的意识清醒马上又出现二次发作。分型如下：①局灶性癫痫持续状态：意识清醒,仅局部某个部位抽动或者感觉异常,对人体的影响相对较小;②全面性癫痫持续状态：在发作期间意识完全丧失或稍有缓解马上又出现意识丧失,对人体损害较大,易引起脑组织大量的缺氧,严重时可以造成患者的死亡,应及早干预。丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)：是众多信号蛋白的一种,其激活调控一系列细胞活动。活化的MAPK通过磷酸化核转录因子、细胞骨架蛋白及酶类等参与细胞增殖、分化、转化及凋亡的调节。背景：星形胶质细胞增生是癫痫的重要形态学改变,增生的胶质细胞可产生细胞因子,继而激活JAK/STAT信号转导进一步促进胶质细胞的增生,从而影响癫痫的发生及复发,星形胶质细胞和信号转导途径相互影响,在癫痫的发病中发挥重要作用。目的：探讨大麻素2型受体对癫痫持续状态幼年大鼠星形胶质细胞和MAPK通路ERK、p38、JNK蛋白激活的影响。方法：健康雄性SD大鼠40只(18-21 d龄),随机分为4组：正常对照组、癫痫模型组、大麻素2型受体激动剂JWH133组、大麻素2型受体拮抗剂AM630组,正常对照组仅给予生理盐水,其他各组大鼠腹腔注射氯化锂和匹鲁卡品建立癫痫模型,并分别进行不同干预。发生癫痫持续状态后24 h取脑组织,采用免疫荧光检测海马组织GFAP与p-ERK、p-p38、p-JNK的共表达,Real-time PCR检测海马组织GFAP mRNA的表达。结果与结论：①癫痫模型组GFAP/p-ERK、GFAP/p-p38共表达较正常对照组增多(P < 0.05),JWH133组较癫痫模型组减少(P < 0.05),AM630组较JWH133组增多(P < 0.05);②癫痫模型组GFAP/p-JNK共表达较正常对照组减少(P < 0.05),JWH133组较癫痫模型组增多(P < 0.05),AM630组较JWH133组减少(P < 0.05);③癫痫模型组GFAP的mRNA表达较正常对照组减少(P < 0.05),JWH133组较癫痫模型组有明显增多(P < 0.05),而AM630组GFAP的表达降低(P < 0.05);④结果表明,大麻素2型受体可以通过调控MAPK通路ERK、p38、JNK蛋白,从而影响癫痫持续状态下幼年癫痫大鼠海马区星形胶质细胞。ORCID: 0000-0001-5767-8662(曹庆隽)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的影响

目的: 通过观察右美托咪定(DEX)对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的影响,探讨DEX对抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法: 采用大脑中动脉栓塞法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、单纯脑缺血再灌注组、DEX预处理1组(缺血前30 min腹腔给予DEX 20 μg/kg)及DEX预处理2组(缺血前30 min腹腔给予DEX 40 μg/kg)。缺血再灌注24 h后,观察大鼠神经功能缺失评分,通过HE染色了解脑梗塞后脑组织的病理学变化,采用免疫组化和蛋白免疫印迹方法观察缺血后脑组织星形胶质细胞的变化。结果: DEX预处理能显著改善大鼠神经功能缺失评分,减小大鼠梗死面积,减少缺血区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞和肿瘤坏死因子α(TNF-α)阳性星形胶质细胞,降低GFAP表达水平。结论: DEX对缺血再灌注损伤的脑组织具有保护作用,其作用机制可能与抑制星形胶质细胞激活有关。