血管平滑肌细胞表型转化的分子机制研究进展

血管内膜新生是血管成形术后再狭窄和动脉粥样硬化等心血管疾病的病理基础。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)具有高度可塑性,在众多病理因素下常发生表型转化(phenotypic switch),即由收缩型向合成型转化。研究表明,血管平滑肌细胞表型转化促进其增殖和迁移,从而参与血管内膜新生形成。本文主要综述了血管平滑肌细胞表型转化影响内膜新生的分子机制,为防治血管重塑性疾病提供理论依据。     

血管平滑肌细胞生长的负调控

血管平滑肌细胞生长的负调控戴生明，单综述缪朝玉，苏定冯审校（第二军医大学药理学教研室，上海２００４３３）中国图书分类号Ｒ３９２．２；Ｒ９７２血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）生长包括增殖（细胞数量的增加）和肥大（细胞体积的增加）。ＶＳＭＣ异常生长是高血压、动...     

中药调控血管平滑肌细胞增殖的研究进展

通过查阅国内近几年中医药对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的文献,综述了从中药复方、单味中药、中药有效组分等调控VSMC增殖的研究成果,探讨了中医药调控VSMC增殖及其机制,阐明了中医药通过调控血管平滑肌增殖治疗心血管病的机制。     

环孢素A和血管平滑肌细胞的Ca~(2+)调控

环孢素Ａ和血管平滑肌细胞的Ｃａ２＋调控李劲梁关永源（中山医科大学药理学教研室，广州５１００８９）中国图书分类号Ｒ３３１．３２；Ｒ９７９．５环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）是一种有效的免疫抑制剂，主要用于抗器官移植的免疫排斥反应和治疗自身免...     

仙茅苷对脂多糖诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

目的 观察仙茅苷（curculigoside,Cur）对脂多糖（LPS）诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）发生细胞增殖、迁移以及促进其表型转化的影响,并对其机制进行初步探讨。方法 体外分离培养大鼠血管平滑肌细胞,将血管平滑肌细胞 随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+不同浓度仙茅苷组及仙茅苷组。采用噻唑蓝(MTT)比色法观察并计算各组细胞增殖率;采用细胞划痕实验观察并计算细胞迁移率。应用 Western blot法检测各组细胞内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关蛋白表达情况。结果 与对照组相比,脂多糖组细胞增殖率、迁移率及细胞内核转录因子κB及基质金属蛋白酶9蛋白表达水平明显提高（P<0.001）,而α-平滑肌肌动蛋白表达明显降低（P<0.001）;与脂多糖组相比,脂多糖+仙茅苷组细胞增殖率、迁移率以及细胞内基质金属蛋白酶9、核转录因子κB蛋白表达水平明显下降（P<0.001）,α-平滑肌肌动蛋白表达水平明显上升（P<0.001）。结论 仙茅苷可明显抑制由脂多糖诱导的血管平滑肌细胞表型自收缩表型向合成表型转化,进而抑制血管平滑肌细胞的增殖与迁移能力。其作用机制可能与核转录因子κB信号通路相关。     

胞红蛋白调控血管平滑肌表型转换与高血压血管重建机制研究

目的 观察胞红蛋白调控血管平滑肌表型转换与高血压血管重建机制研究.方法 选择我院实验中心饲养12周龄雄性SD大鼠30只,体质量(200±20)g.分为3组:肾动脉缩窄高血压药物组、肾动脉缩窄高血压组、正常对照组;高血压药物组大鼠用血管紧张素Ⅱ一型受体(AT1R)拮抗剂阿利沙坦酯灌胃,免疫荧光定量PCR法及免疫印迹检测C...     

血管平滑肌细胞粘附分子的表达与心血管疾病的关系

粘附分子是指由细胞合成、存在于细胞膜或细胞外,介导细胞间、细胞与细胞基质粘附的一大类分子。与心血管疾病有关的粘附分子包括整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族。免疫球蛋白超家族成员细胞间粘附分子（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）和血管细胞粘附分子（vascular cell adhesionmolecule-1,VCAM-1）在白细胞向激活的内皮细胞粘附过程中起重要作用。血管内皮细胞表达粘附分子的作用已比较清楚,但几年前有人发现在动脉粥样硬化血管壁的内膜平滑肌细胞也表达ICAM-1和VCAM-1,这就引起了与这些分子相关问题的探讨。本文就ICAM-1和VCAM-1在血管平滑肌细胞表达的调节及在动脉     

酶消化法培养老龄SD大鼠血管平滑肌细胞

目的：采用酶消化法培养老龄SD大鼠血管平滑肌细胞,为血管疾病,特别是为动脉粥样硬化研究提供大量的原代平滑肌细胞。方法：无菌取老龄SD大鼠主动脉,0.2%Ⅱ型胶原酶消化分离细胞,采用自然纯化、差速贴壁纯化平滑肌细胞,免疫组化鉴定平滑肌细胞α肌动蛋白。结果：免疫组化染色显示细胞纯度在95%以上。结论：酶消化法分离获取SD大鼠平滑肌细胞方法简单,易掌握,采用本方法可稳定获得大量的平滑肌细胞供实验使用。     

淫羊藿通过调控多基因表达促进血管平滑肌细胞的凋亡

目的：研究淫羊藿影响血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的机理。方法：取家兔主动脉平滑肌进行细胞培养，培养基中加入不同浓度的淫羊藿后72小时收集细胞，流式细胞仪测定淫羊藿组和对照组的细胞凋亡率，荧光显微镜观察两组凋亡细胞形态变化，基因差示分析系统检测两组细胞多基因表达水平的改变。结果：各浓度的淫羊藿均引起细胞凋亡率高于对照组，并呈现剂量依赖关系；荧光显微镜观察到了典型的凋亡细胞核形态学改变；多基因差示分析显示，淫羊藿正调与人类原粒细胞系的KG-1基因的cDNA序列，人类DNA的CpG岛基因序列同源的基因表达，结论：淫羊藿通过影响多基因表达水平而促进血管平滑肌细胞的凋亡过程。     

雌激素对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :观察雌激素对血管平滑肌细胞 (SMC)凋亡的影响。方法 :以大鼠为对象 ,观察正常对照组、去卵巢组及去卵巢 +雌二醇治疗组大鼠血管平滑肌细胞凋亡的关系。结果 :雌二醇治疗组血管平滑肌细胞凋亡较去卵巢组相比明显减少(P>0 .0 5 ) ,与正常对照组比较差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :雌二醇对血管平滑肌细胞的凋亡有抑制作用 ,可能是其预防动脉粥样硬化的机制     

福辛普利对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用，并研究福辛普利对其的影响。方法：采用流式细胞技术测定在不同浓度和不同作用时间血管紧张素Ⅱ作用下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和福辛普利对其的影响。结果：血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用。福辛普利可抑制AngⅡ作用，对细胞凋亡有一定的影响，同时可影响凋亡调控基因的表达。结论：血管紧张素Ⅱ具有一定的的促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用，尤其大剂量作用较明显。而福辛普利可明显抑制AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用。     

静脉血管平滑肌细胞中的多倍体细胞分析

目的探讨流式细胞术分析静脉血管平滑肌细胞多倍体细胞的方法和意义。方法选取普通级健康成年日本大耳白兔2只,雄性,8月龄,大约3 kg;普通级SD大鼠2只,雄性,8周龄,大约200 g。人大隐静脉为2例心脏冠状动脉旁路移植术中修补血管所得。在麻醉日本大耳白兔和大鼠后开腹腔获取下腔静脉,采用多种酶组合的消化液消化兔、大鼠以及人的静脉血管得到适合流式细胞检测的静脉血管平滑肌单细胞悬液,用碘化丙啶标记细胞,利用细胞流式仪分析兔、大鼠以及人的静脉血管平滑肌单细胞悬液各5 000个细胞,检测细胞DNA含量,DNA含量翻倍的细胞为多倍体细胞。并利用荧光原位杂交技术（FISH）验证阳性对照HEK293细胞系中的多倍体的存在。结果流式结果显示分析的5 000个细胞中,阳性对照HEK293细胞的多倍体细胞为1 355个（27.1%）,从2例患者中取得的大隐静脉多倍体细胞为310个（6.2%）和250个（5.0%）;2只大鼠的下腔静脉平滑肌细胞中多倍体细胞为360个（7.2%）和450个（9%）;2只兔的下腔静脉平滑肌细胞中多倍体细胞分别为270个（5.4%）和305个（6.1%）。结论成年的静脉血管包括人大隐静脉的平滑肌细胞中普遍存在一定比例的多倍体细胞。     

他汀类药物与血管平滑肌细胞凋亡

血管平滑肌细胞（VSMC）的异常增殖和迁移在粥样斑块形成和冠状动脉介入治疗（PCI）后再狭窄中起非常重要的作用。他汀类药物不仅是一种有效的调脂药，同时还有多种调脂以外的作用。如他汀类药物可以抑制VSMC的增殖和迁移，并诱导其凋亡。临近病变部位的中层VSMC的凋亡可能造成斑块纤维帽容易破裂，进而引起斑块不稳定和临床事件。但研究证实他汀类药物有稳定斑块的作用，且新生内膜VSMC对他汀类药物诱导的凋亡作用比普通的血管中层VSMC更敏感。因此，他汀类药物的促新生内膜VSMC凋亡作用可能对预防PCI术后再狭窄起有益作用。具体作用机制以及临床上如何合理发挥此类作用尚待进一步研究。     

Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果 Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L~(-1)组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论 Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。     

丹参酮影响血管平滑肌细胞增殖研究进展

1 平滑肌细胞增殖的机制 1.1 血管平滑肌细胞增殖的病理机制①在动脉粥样硬化中的病理作用:血管平滑肌细胞由血管中膜伸入到血管内膜后,成为粥样斑块和纤维斑块的细胞成分.血小板源性生长因子(PDGF)由该细胞成分大量分泌,从而刺激血管平滑肌细胞增殖,导致管腔变细[1].②PTCA术后再狭窄中的病理作用:研究表明,在PTCA术后数小时至数天里,可以产生血管损伤.根据血管损伤时期,可分为前期与后期.由冠脉血管痉挛所致血管狭窄称之为前期血管损伤[2].当血管内皮受损后,血管中膜平滑肌细胞则由静止-收缩的状态改变成为增殖-合成的情况.在血小板源性生长因子等相关的细胞因子作用下加速增殖.从而加快血管平滑肌细胞向血管内膜迁移,最终导致血管狭窄甚至闭塞.     

尾加压素Ⅱ加重β-甘油磷酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的观察尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对血管钙化形成的影响。方法利用β-甘油磷酸制备钙化血管平滑肌细胞(VSMCs),测定细胞钙含量、碱性磷酸酶活性、45Ca摄入及骨钙素含量。结果β-甘油磷酸诱导的钙化细胞呈明显的形态转变。生长5～7d后,细胞由长梭形转变为骰子状;9～10d后,细胞聚集成多菊花状的多细胞结节,细胞颜色变暗,vonKossa染色阳性。UⅡ组上述形态变化加重。与对照组相比,用含β-甘油磷酸的钙化培养液处理10d的钙化细胞,其钙含量高2.38倍,ALP活性高6.79倍,45Ca沉积高2.13倍,骨钙素含量高49.3%(P<0.01)。UⅡ(10-10、10-9和10-8mol.L-1)与β-甘油磷酸同时孵育时,钙含量比钙化组分别高22.08%(P<0.05)、49.78%和87.56%(P<0.05),ALP活性高27.41%、56.31%和102.53%(P<0.01),45Ca摄入高68.32%、99.45%和115.36%(P<0.01),骨钙素含量高18.23%(P<0.05)、32.68%和44.65%(P<0.01),表明UⅡ呈浓度依赖性地促进钙化形成。结论尾加压素Ⅱ促进β-甘油磷酸诱导的大鼠VSMCs钙化形成。     

E1A激活基因阻遏子在不同表型血管平滑肌细胞中的表达

为探讨血管平滑肌细胞表型转换、分化过程中E1A激活基因阻遏子(CREG)的表达变化及其相关机制，采用PCR扩增的CREG片段插人pGEX-4T-1原核表达载体，纯化的CREG融合蛋白免疫家兔以制备多克隆抗体；以人胸廓内动脉平滑肌细胞(HITASY)为模型，[^3H]标记脱氧胸苷掺人法测定去血清培养HITASY细胞DNA合成变化；Western blot观察HITASY细胞在去血清培养过程中SM仅α-actin、calponin的表达，RT-PCR和Western blot分析去血清培养诱导CREG mRNA和蛋白表达变化；免疫组化观察CREG在细胞内的表达及定位。结果成功地构建了载体并得到抗CREG多克隆抗体。去血清培养可使HITASY细胞DNA合成明显降低。随去血清培养时间延长，除SM α-actin和calponin表达逐渐上调之外，CREG mRNA转录活性和蛋白翻译合成亦上调。免疫组化显示去血清培养后，CREG蛋白在细胞内表达并主要位于细胞核周。结论：去血清能促使HITASY细胞由合成表型向收缩表型转换，同时伴CREG mRNA和蛋白表达上调。     

氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡

AIM: To examine whether oxidized low density lipoproteins (ox-LDL) could induce apoptosis in rabbit aortic smooth muscle cells (VSMC). METHODS: Low density lipoproteins (n-LDL) were isolated from healthy human plasma by gradient ultracentrifugation and oxidized by CuSO4 10 mumol.L-1. VSMC were exposed to ox-LDL, n-LDL, or phosphate-buffer solution (PBS) as control. Morphological changes were observed under fluorescene microscope after Hoechst 33258 staining. Extracted DNA was electrophoresized on agarose gel. RESULTS: Incubation of VSMC with ox-LDL 300 mg.L-1, not n-LDL, for 24 h induced morphological apoptosis changes (chromatin condensation, nucleus fragmentation) and DNA fragmentation, which was furthered with the incubation time up to 48 h or at a concentration of 400 mg.L-1. Dextran sulfate, a scavenger receptor blocker and butylated hydroxytoluene (BHT), an antioxidant, exhibited no effect on DNA fragmentation. Lysophosphatidylcholine (LPC) at a concentration up to 125 mumol.L-1 (equivalent to ox-LDL 300 mg.L-1) did not elicit DNA fragmentation. CONCLUSION: Ox-LDL induced apoptosis in VSMC without involving oxygen free radicals and LPC.     

血管平滑肌细胞的增殖机制

血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)增殖是高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等疾病中重要的病理改变[1 ] 。目前认为其发生机制与ＶＳＭＣ增殖的正负调控因子平衡失调密切相关[2 ] 。本文从ＶＳＭＣ增殖调控的角度对近年来ＶＳＭＣ增殖机制研究新的进展作一综述。1　细胞外调控ＶＳＭＣ增殖过程中 ,一些特定的细胞以旁分泌作用或靶细胞以自分泌作用产生ＶＳＭＣ生长及分化的调节物。分子生物学研究已揭示许多细胞外的生长因子、血管活性物质与增殖有关 ,以血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)、成纤维细胞生长因子 (ＦＧＦ)、转化生长因子 β(ＴＧ…     

中药抑制血管平滑肌细胞迁移的研究进展

冠状动脉腔内血管成形术（percutaneous translual coronary angioplasty,PTCA）是目前治疗冠心病的主要措施之一,近期成功率在90%以上,但有30%～50%的患者在成功实施PTCA后的3～6个月内形成再狭窄（restenosis）[1],严重影响了病人的远期疗效。有多种因素参与RS的发生,其中血管平滑肌细胞（vascular mooth muscle cell,VSMC）,由损伤血管的中膜向内膜迁移是RS发生的重要机制之一[2]。如何有效抑制VSMC迁移一直是国内外研究的热点,但迄今尚未找到有效的途径。近年来国内的部分实验室开始研究中药对VSMC迁移的影响,并取得一定的进展,综述如下：