乙醇酸氧化酶底物诱导实验

乙醇酸氧化酶底物诱导实验徐杰（华南师范大学生物技术研究所广州５１０６３１）关键词乙醇酸氧化酶；底物诱导；６６ｋｕ蛋白中图分类号Ｑ９４６．５我们用改进后的方法，即粗蛋白在柱层析前加人适量的ＦＭＮ，硫酸铰质量分数分布范围改为１５％一２５％，其余按［１１纯...     

乙醇酸氧化酶研究进展

概述乙醇酸氧化酶研究存在的问题和进展,指出乙醇酸氧化酶被认为只含单种亚基,但该观点难于解释不同植物乙醇酸氧化酶为何等电点（pI）相差较大。首次介绍乙醇酸氧化酶 是种至少有GOI(pI≈7.4)、GOⅡ(pI≈9.4)和GOⅢ(pI≈8.3)的同工酶,以及GOⅠ只含单种亚基,GOⅡ和GOⅢ则可能含两种亚基的新观点。     

乙醇酸氧化酶分子结构的研究和存在的问题

本文分析了乙醇酸氧化酶分子量相差很大的原因,但目前认为乙醇酸氧化酶为单一亚基所组成的观点难于解释为何乙醇酸氧化酶具有多个不是等电点,对等电点的正确认识将有助于揭示乙醇酸氧化酶分子结构。     

水稻乙醇酸氧化酶的纯化和特性分析

从水稻绿叶分离纯化得到一种单来基的乙醇酸氧化酶，其全酶分子量约为２６０ＫＤ，电泳特性表明该酶的ｐＩ〈８．３我们用改进的８％ＰＡＧＥ，结合Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ，测定水稻绍叶中还存在一种ｐＩ〉８．３的全酶Ｍｒ〉６６９ＫＤ的乙醇酸氧化酶。     

马铃薯乙醇酸氧化酶StGLO1对模拟水分胁迫的响应

为了解乙醇酸氧化酶在调控植物生长代谢及生物与非生物胁迫过程中发挥的作用。本研究以‘青薯9号’马铃薯为材料克隆乙醇酸氧化酶基因StGLO1,构建过表达载体并转化烟草,观察在干旱胁迫处理下转基因烟草和野生型烟草的长势,并测定了叶片中的游离脯氨酸、CAT、POD的含量以及转基因根茎叶中StGLO1基因的表达量变化,验证过表达StGLO1烟草在干旱胁迫下的响应。结果表明:StGLO1(GenBank登录号XM_006348318.2)基因CDS为1 116 bp,编码371个氨基酸;干旱胁迫下,转StGLO1基因烟草的生长优于野生型,转基因烟草StGLO1基因的表达量在叶片中最高;转基因烟草中的游离脯氨酸、CAT、POD的含量高于野生型,达到差异显著水平(P0.05)。该结果为进一步研究马铃薯干旱胁迫响应机制有一定参考价值,也丰富了马铃薯抗旱育种的基因资源。     

菠菜中高活性高等电点的乙醇酸氧化酶同工酶纯化方法的改进

通过缩短DEAE-celluloses柱长度,提高其洗脱液pH,可快速地从菠菜绿叶中纯化得到乙醇酸氧化酶同工酶,证实其具高活性113.0 U/mg·min和高等电点(pI)10.6.纯化后产率为0.14％,纯化倍数为66.5.经SDS-PAGE和毛细管电泳(CE-SDS)均只有40kD单带,说明已纯化至电泳纯.     

菠菜中不同等电点的乙醇酸氧化酶的提取和特性

从不同批次的菠菜绿叶中可纯化出5种不同活性和等电点（pI）的乙醇酸氧化酶（CO）．SDSPAGE表明它们均有40kD亚基,它们的比活会随蛋白浓度的增加而上升．第一种CO的pI〈8．3,比活为0．47U／mg,PAGE测定其全酶相对分子量（Mr）为280kD,280kD较稳定．第二种CO的pI〈8．3,但比活为3．44U／mg,PACE测定其Mr为560kD,但很快解聚为280kD．解释了前人报告CO的Mr大多为280kD．第三种CO的pI≈8．3,比活为8．4U／mg,放置后pI会下降至〈8．3,此时用PAGE测出其Mr为560kD．第四种CO的pI〉8．3,比活为27．8U／mg,放置pI也会下降为8．3．第五种CO的pI〉10．2,活性高达113U／mg,放置后其pI也会下降至〈8．3,由于CO的pI会下降,暗示低pI的CO可能并不存在于植物体内,而是实验中的娇作物．     

植物多酚氧化酶研究进展

多酚氧化酶是一类广泛分布于植物体内能催化多酚类氧化成醌类的质体金属酶－ＰＰＯ由核基因编码,在细胞质中合成,通过一定的方式转运质体内而成为具酶活性的形式,ＰＰＯ的底物存在于液泡,这种酶一底物的区域分布,使得ＰＰＯ在完整细胞内的生理功能难以确定,ＰＰＯ基因已分别从番茄、马铃薯、苹果、葡萄等植物中克隆成功,ＰＰＯ基因属于一个基因家族。     

模拟污水中氮,磷对水稻劝苗过氧化氢酶和乙醇酸氧化酶…

以水稻为材料，研究了不同深度的模拟污水中Ｎ、Ｐ对幼苗过氧化氢酶（Ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ，ＥＣ１．１１．１．６）、乙醇酸氧化酶（Ｇｌｙｃｏｌａｔｅｏｘｉｄａｓｅ，ＧＯ，ＥＣ１．３．３．１）、过氧化和物酶（Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＰＯＤ，ＥＣ１．１１．１．７）和叶绿素含量的影响。结果表明：低浓度Ｎ、Ｐ浓度分别超过８．５６ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１和０－０．２ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１范围）可诱导ＣＡＴ活性增大，而后下     

菠菜乙醇酸氧化酶基因家族的鉴定及表达分析

在菠菜全基因组中鉴定了菠菜(Spinacia oleracea L.)乙醇酸氧化酶(GLO)家族成员,并对其理化性质、亚细胞定位、基因结构、保守基序、同源关系及基因表达进行了分析,发现菠菜中存在5个SoGLOs蛋白,通过进化树分析,菠菜GLO蛋白与甜菜GLO蛋白亲缘关系较近.通过基因结构分析发现该家族基因由9～11个外显子构成.实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果表明:硝态氮仅能短期诱导SoGLOs的表达,而铵态氮可以持续抑制SoGLOs的表达,从而影响菠菜草酸的含量.在胁迫处理后,SoGLOs的表达均有明显变化,SoGLO1,SoGLO3和SoGLO5对盐胁迫的响应最明显,SoGLOs可能在菠菜的抗盐、耐高温、耐寒、抗旱以及抗氧化过程中起作用.植物激素的喷施普遍使SoGLOs的表达在短时间内增加,这可能引起菠菜体内草酸的快速积累.     

葡萄糖氧化酶发酵工艺的研究

本文通过摇瓶实验确定了自选青霉菌株Ｚ—Ｉ—Ｃ分批发酵生产葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）的适宜工艺条件，并在２．６立升台式发酵罐中进行了小试，监测了发酵过程中溶氧（ＤＯ）、ｐＨ、还原糖、菌体干重（ＤＣＷ）、氨基氮（ＮＨ２－Ｎ）和酶活等工艺参数的变化规律，为进一步提高ＧＯＤ的发酵产率提供了依据。     

植物Annexins研究进展

综述了植物膜联蛋白的结构与功能．植物膜联蛋白具有膜联蛋白家族的基本结构，但其三维结构与动物膜联蛋白有所差异．同动物膜联蛋白一样，植物膜联蛋白可能参与植物细胞的分泌作用、胞吐作用、液泡化过程及低温信号转导过程，也可能具有愈伤葡萄糖合成酶、ATPase／GTPase及过氧化物的活性．植物膜联蛋白可能与果实的成熟有关。     

植物微丝骨架研究进展

文章就植物花粉管、保卫细胞中微丝骨架以及微丝骨架与信号转导的一些研究进展作了简要介绍 .     

植物纤维的发生发育研究进展

植物纤维的形态和结构影响着纤维植物的结构与性质，与纤维植物的利用密切相关，本文从植物纤维发生发育的研究系统、研究技术和方法以及近年的研究进展方面进行了回顾，并对以后的研究重点提出了初步的构想以供商榷，     

AFLP标记在植物研究上应用

论述了AFLP分子标记技术原理及其特点,详述了AFLP－DNA指纹技术在植物研究中应用进展,并指出了存在的问题及其相应对策。     

荔枝保鲜过程中多酚氧化酶活性的抑制研究

荔枝保鲜过程中极易产生酶促褐变.本文采用分光光度法,研究了荔枝果皮的多酚氧化酶(PPO)的活性.考察了抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、双氧水等的褐变抑制效果,确定出以柠檬酸为抑制剂后,通过抑制剂浓度、pH值、温度等因素对多酚氧化酶活性的影响,得出各个影响因素的两个水平值,最后通过正交试验法确定出荔枝保鲜过程中多酚氧化酶抑制的最佳条件.     

生物矿化研究进展

生物矿化与一般无机相的结晶明显不同，其无机矿物的结晶严格受生物体分泌的有机基质的控制，是在有机基质膜板诱导下的晶体生长。近年来受到化学、物理与生物以及材料学等多学科的关注。本文综述了该领域的发展过程、目前研究现状及相关前沿课题。     

天然产物来源的黄嘌呤氧化酶抑制剂研究进展

高尿酸血症及痛风是当今社会的常见病、多发病,至今无法根治.尽管临床常用的降尿酸药物,如别嘌呤醇疗效确切,但副作用大,使其应用受到明显限制,故寻找新的安全、高效的降尿酸活性物质一直是研究热点之一;黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）是介导尿酸生成的重要酶;旨在对天然产物提取物、活性部位和单体成分抑制黄嘌呤氧化酶活性的研究成果进行综述.     

单胺氧化酶活性分析在HBV感染者中的应用

目的分析乙肝病毒(HBV)感染者血清单胺氧化酶活性,研究其临床应用价值.方法应用终点比色法检测血清单胺氧化酶(MAO)活性;ELISA法检测乙肝病毒标志物;PCR法检测HBv DNA;常规方法检测ALT.结果 ALT异常组,大三阳HBsAg(+),HBeAg(+),Anti-HBc(+)和小三阳HBsAg(+),Anti-HBe(+),Anti-HBc(+)合并HBV DNA阳性的HBV感染者MAO显著升高,而小三阳并HBV DNA阴性者MAO升高不明显;ALT正常组仅40例大三阳患者MAO升高明显,其他各组MAO大多在正常范围内.结论 HBV感染后,只要有病毒复制,就会破坏肝细胞,引起MAO升高.MAO活性分析对肝脏病情的判断有重要价值.     

植物表遗传学研究进展

本文综述了表遗传学这一新的分子生物学领域的提出及其在植物中的研究进展 ,阐述了DNA甲基化、组蛋白密码、RNA介导的基因沉默和PcG蛋白等表遗传因素在植物生长发育过程中对基因表达调控的重要作用 ,以及这些因素间存在的相互关系 ,并对表遗传学研究在植物中的发展前景做出了展望 .