肺癌组织中MDM2、P53蛋白的表达

目的:观察肺癌组织中MDM2、P53蛋白的表达及其相互关系。方法:用Westernblot方法,检测 31例肺癌组织及相应 21例癌旁 3cm组织和 12例癌旁 5cm组织中MDM2、P53蛋白的表达。结果:①肺癌组织中MDM2、P53表达量高于癌旁组织。②肺癌组织中MDM2与P53表达量之间呈正相关 (r=0. 432, P<0. 05)。③肺鳞癌组织中MDM2、P53蛋白增高表达率分别为 77. 3% (17 /22 )和 72. 7% ( 16 /22 );肺腺癌组织中 2者增高表达率均为100% (7 /7), 1例小细胞肺癌和 1例大细胞肺癌组织中MDM2蛋白表达均降低,而P53蛋白表达均增高。结论:MDM2过量表达可能是肺癌发生的一个重要标志,在肺癌的发生发展过程中可能有重要作用。     

Let-7在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达

［摘要］目的　研究Let-7基因在乳腺癌中的表达特征．方法　随机抽取28例乳腺癌患者收集其癌组织和癌旁正常组织，利用TRIzol提取总RNA，实时荧光定量PCR检测基因表达量．结果　Let-7前体在癌组织中的相对表达量（9.65±2.31），低于癌旁正常组织（10.0±52.81），P＝0.048，而Let-7基因则无显著变化．前体Let-7与最长行经（日）之间有依存关系（b＝0.875，P＝0.020）；初潮年龄与前体Let-7的表达在癌组织中的呈负相关（r＝-0.484，P＝0.049）， 在正常组织中呈正相关（r＝0.502，P＝0.048）．结论　Let-7前体在癌组织中的表达低于正常组织， 最长行经天数越长则Let-7表达越高．     

microRNA-34a在肺癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨microRNA-34a在肺癌细胞凋亡中的作用。 方法 将A549肺癌细胞株分为3组:microRNA-34a转染组、对照组和未转染组。分析microRNA-34a在A549肺癌细胞中的表达,microRNA-34a对A549肺癌细胞生长周期、细胞增殖、细胞凋亡的影响,microRNA-34a对A549肺癌细胞Bcl-2、P53和C-MYC蛋白以及mRNA表达的影响。 结果 miRNA-34a转染组microRNA-34a的表达明显高于对照组(P<0.05)。miRNA-34a转染组G₀/G₁细胞明显高于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组48 h和96 h的增殖率明显低于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的细胞凋亡明显高于对照组和未转染组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的Bcl-2蛋白和C-MYC蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05);miRNA-34a转染组的P53蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。miRNA-34a转染组的Bcl-2 mRNA和C-MYC mRNA表达水平明显低于对照组Bcl-2 mRNA和C-MYC mRNA表达水平(P<0.05);miRNA-34a转染组的P53 mRNA表达水平明显高于对照组P53 mRNA表达水平(P<0.05)。 结论 microRNA-34a抑制A549肺癌细胞增殖,促进A549肺癌细胞的凋亡,机制可能为下调Bcl-2和C-MYC基因,上调P53基因。      

原发性肺癌组织端粒酶hTERT基因表达检测的研究

目的通过检测原发性肺癌组织端粒酶hTERT基因表达水平,探讨其在肺癌中的诊断价值.方法采用相对定量RT-PCR法检测29例肺癌组织,29例癌旁组织,13例非癌性肺疾病组织中端粒酶hTERT基因的表达水平.结果端粒酶hTERT基因在肺癌组织、癌旁组织的表达水平高于非癌性肺疾病组(P＜0.05),在肺癌组织中的表达高于癌旁组织(P＜0.05).结论端粒酶hTERT基因参与了原发性肺癌的病理生理过程.采用RT-PCR法检测组织中端粒酶hTERT基因表达水平有助于临床上肺癌的诊断.     

长期吸烟对肺癌癌旁及周围肺组织结构和P53、VEGF蛋白表达的影响

目的 本研究旨在探讨吸烟对肺癌患者癌组织、癌旁组织以及周边组织P53和VEGF的表达,为吸烟者肺癌的早期诊断提供理论依据.方法 选择肺癌患者126病例,其中吸烟组96例,非吸烟组30例,所有病例临床资料完整,吸烟史明确,患者术前均未接受化疗、放疗或其他针对肿瘤的治疗.光镜下观察支气管黏膜上皮、肺癌组织、癌旁组织和周围组织等结构变化情况,免疫组织化学检测吸烟组及非吸烟组肺癌组织、癌旁组织及周边组织P53和VEGF蛋白的表达情况.所得数据采用SAS软件作统计学处理分析,比较各组间差异程度.结果 吸烟组肺泡腔不规则扩大,肺泡壁变薄或断裂,呼吸性细支气管呈囊状扩张,细支气管壁明显增厚,严重者支气管黏膜上皮排列紊乱、脱落;细胞表面的分泌物及杯状细胞和腔内黏液栓均较非吸烟组多.P53蛋白表达于细胞核,VEGF表达于细胞质以及新生血管内皮细胞,阳性均呈棕黄色颗粒状.癌组织P53、VEGF阳性表达均高于癌旁组织及周边组织(P＜0.05);吸烟组癌旁组织和周边组织P53、VEGF阳性表达均高于非吸烟组 (P＜0.05).P53、VEGF在吸烟组和非吸烟组肺癌组织中的表达均呈正相关,提示P53基因突变可能上调VEGF表达,突变型P53基因和VEGF在肺癌血管形成中可能具有协同作用.结论 吸烟可引起肺组织损害,并使肺组织P53和VEGF蛋白表达增强,P53和VEGF表达与肺组织损害呈正相关.     

p16基因甲基化及蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 探讨p16基因甲基化及蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达情况.方法 应用甲基化特异性PCR法(MS-PCR)及免疫组化SP法检测45例非小细胞肺癌组织、21例肺良性疾病组织中p16基因甲基化及蛋白的表达情况.结果 肺良性疾病中p16基因甲基化阳性率低于癌组织,差异有显著性(P=0.001),p16基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);肺良性疾病中p16蛋白阳性率高于癌组织,差异有显著性(P=0.007);p16蛋白表达与非小细胞肺癌临床分期、细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05).p16甲基化和p16蛋白表达缺失存在相关性(P=0.004).结论 p16基因甲基化及蛋白的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关.     

Survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达

目的探讨survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达及二者的相关性。方法选取2012年1月至2013年1月黄冈市中心医院收治的肺癌患者90例,另选取同期良性肺疾病患者30例,采用聚合酶链式反应检测肺癌组织、癌旁组织及良性肺疾病组织中survivin mRNA的表达水平,采用免疫组织化学方法检测p53蛋白的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系,应用Pearson相关性分析分析survivin mRNA和p53表达的相关性。结果肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率分别为71.1%(64/90)、15.5%(14/90)、16.7%(5/30),肺癌组织中survivin mRNA阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=13.241、12.893,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=1.141,P>0.05)。肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率分别为58.9%(53/90)、7.8%(7/90)、6.7%(2/30),肺癌组织中p53蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=16.317、16.078,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=0.984,P>0.05)。肺癌组织中survivin mRNA和p53表达与患者的生存期、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),但与患者的性别、病理分型、年龄无关(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关(r=0.942,P<0.05)。结论肺癌组织中survivin mRNA和p53蛋白表达升高,survivin mRNA与患者预后有关,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关。Survivin mRNA和p53可能参与了肺癌的发生和发展。     

食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭特性的相关性

目的:探讨食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭特性的相关性。方法:收集在本院接受根治性手术治疗的食管癌患者78例,取术中食管癌组织及癌旁正常组织标本。采用荧光定量PCR法测定标本组织中Slug基因及侵袭基因的mRNA表达量,采用western-blot法测定上皮-间质转化相关指标的蛋白表达量,采用Pearson检验法评估食管癌组织中Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化、侵袭活性的相关关系。结果:食管癌组织中Slug mRNA的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。食管癌组织中上皮-间质转化标志物E-cadherin的蛋白表达量低于癌旁组织,Vimentin、N-cadherin的蛋白表达量高于癌旁组织,促侵袭基因Ezrin、FAT10、Survivin、MCP-1、RhoA的mRNA表达量均高于癌旁组织,侵袭抑制基因DEC1、PTEN、p53的mRNA表达量均低于癌旁组织(P均<0.05)。食管癌组织中Slug mRNA的表达量与上皮-间质转化标志物E-cadherin的蛋白表达量呈负相关,与Vimentin、N-cadherin的蛋白表达量呈正相关,与促侵袭基因Ezrin、FAT10、Survivin、MCP-1、RhoA的mRNA表达量呈正相关,与侵袭抑制基因DEC1、PTEN、p53的mRNA表达量呈负相关。结论:食管癌组织中Slug表达量高于癌旁组织,且Slug表达量与癌细胞上皮-间质转化及侵袭活性直接相关。     

MicroRNA-590-5p、microRNA-103、microRNA-34c-5p、Dicer 及BRMS -1 基因在肺癌中的表达研究

目的 探讨microRNA -590-5p（miR -590-5p ）、miR -103、miR -34c -5p 、Dicer 及BRMS -1 在肺 癌中表达及相互间关系。方法 选取47 例肺癌患者的癌组织及癌旁正常组织,利用Trizol 提取总RNA,实 时荧光定量聚合酶链反应检测基因的相对表达量。结果 肺癌组织与癌旁正常组织miR -103、miR -34c -5p 、 Dicer 及BRMS -1 基因表达水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）,miR -34c -5p 与P53 呈正相关（P <0.05）, miR -103 与多药耐药相关蛋白呈正相关（P <0.05）,Dicer 与miR -34c -5p 、miR -103 及miR -590-5p 呈负相 关（P <0.05）。结论 在肺癌组织中Dicer 基因表达与miR -34c -5p 呈负相关,可能通过抑制癌基因的表达, 抑制肺癌的发生。     

TRIM29基因表达在非小细胞肺癌临床病理诊断中的意义

目的 探讨TRIM29基因表达与非小细胞肺癌临床病理的关系及意义.方法 用免疫组化Envision二步法检测251例非小细胞肺癌手术治疗患者癌组织(其中肺鳞癌127例、肺腺癌124例)和癌旁组织的TR.IM29蛋白表达,分析其与临床病理因素的关系.结果 251例非小细胞肺癌的癌组织TRIM29表达明显高于癌旁正常肺组织,TRIM29表达与肺鳞癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈正相关,与肺腺癌肿块大小、组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈正相关,TRIM29在肺鳞癌及腺癌中表达差异具有显著性,低分化肺鳞癌TRIM29表达强度明显高于低分化肺腺癌(以上均P＜0.01).结论 建议在常规肺癌病理诊断中组合免疫标记TRIM29,可提高病理诊断的正确率,对临床的分期及治疗具有参考价值.     

let-7a1和let-7c在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨人类微小RNA let-7a1和let-7c在肺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法收集53例肺组织手术标本及临床资料,其中包括肺癌组织44例（收集其癌组织和癌旁正常组织）和良性肺疾病组织9例。并收集病人吸烟史、肿瘤TNM分期、病理分化程度及有无淋巴结转移等。采用Trizol法提取总RNA,采用荧光定量PCR检测let-7a1和let-7c的表达,分析其在肺癌组织、癌旁正常组织及良性肺疾病组织中的表达差异及与临床特征的关系。结果肺癌组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于癌旁正常组织和良性肺疾病组织（P < 0.05）;癌旁正常组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于良性肺疾病组织（P < 0.05）。let-7a1表达与分化程度、吸烟和TNM分期有关（P < 0.05~P < 0.01）,与淋巴结有无转移无关（P>0.05）。let-7c表达与淋巴结转移、分化程度有关（P < 0.01）,与吸烟、TNM分期无关（P>0.05）。结论let-7a1和let-7c基因在肺癌组织中相对表达量降低,并且随临床分期进展、淋巴结转移呈明显下降趋势,提示两者与肺癌的发生、发展及转移密切相关,let-7a1和let-7c可能成为肺癌早期诊断生物标志因子,并可能成为肺癌的靶向治疗新的靶点,为高危人群的早期干预提供实验依据。     

microRNA-34a与非小细胞肺癌的关系及其可能调节机制

目的探讨miRNA-34a在非小细胞肺癌发生中的作用及其可能机制。方法选取56例经病理诊断确诊为非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织,RT-PCR法测定miRNA-34a及c-myc mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织的P53蛋白及c-myc蛋白的表达水平。结果癌组织的miRNA-34a的表达水平低于癌旁组织,c-myc mRNA表达及c-myc、P53蛋白表达阳性率高于癌旁组织（P〈0.05）。miRNA-34a与c-myc mRNA表达水平呈负相关关系（P〈0.05）。结论 miRNA-34a对非小细胞肺癌的发生具有一定的调节作用,可能是非小细胞肺癌发生的重要环节,miRNA-34a主要是通过与c-myc的结合而发挥其调节作用。     

非小细胞肺癌组织中Survivin、p16基因的表达及关系

目的 探讨凋亡抑制因子Survivin、抑癌基因p16在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达意义及关系.方法 采用免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合体(SABC)方法检测64例NSCLC组织及26例癌旁组织、15例肺良性疾病组织Survivin、p16基因的表达,并分析其相关性.结果 Survivin蛋白在NSCLC组织中阳性表达率70.31%,癌旁组织阳性表达率11.54%(P＜0.05),肺良性疾病中不表达.Survivin蛋白表达与NSCLC的分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关(P＜0.05).p16蛋白在肺良性疾病组织及癌旁组织中的表达与在NSCLC组织中的表达差异均有显著性(P＜0.05).p16蛋白表达阳性组、阴性组的Survivin蛋白表达阳性率差异有显著性(P＜0.05),且表达呈正相关(r=0.396,P＜0.005).结论 Survivin基因在NSCLC的发生、发展中起重要作用,有可能作为其早期诊断、治疗的靶基因之一.Survivin的过度表达与p16抑癌作用的失去可能在NSCLC的发病机制中有协同作用.     

CBP基因在非小细胞肺癌中的表达及其生物学意义

目的:研究CBP(CSK-binding protein)基因表达下降与人肺癌临床病理生理特征的关系,探讨CBP基因表达与肺癌肿瘤细胞发生、侵袭的相关性.方法:对50例非小细胞肺癌(NSCLC)标本(含癌旁组织)和10例肺良性病变组织应用单克隆抗体、免疫组化SP法检测CBP基因的蛋白表达情况.应用RT-PCR方法检测NSCLC中CBP的mRNA表达水平.结果:肺癌肿瘤组织中CBP基因表达水平显著低于癌旁组织和肺良性病变组织(P＜0.05).肺癌组织中CBP基因表达水平降低与肿瘤分期、淋巴结转移程度存在相关性(P＜0.05),与肺癌组织学类型、细胞分化程度以及患者的性别、年龄无关.结论:CBP基因可能参与了对肺癌肿瘤细胞Src家族成员激酶活性的负反馈调节,其表达下降可能与肺癌的发生、发展过程有关.     

非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响

目的:研究非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响.方法:收集100例非小细胞肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常组织,检测αVβ3的表达情况;培养肺癌细胞株A549,采用siRNA转染的方式敲低αVβ3的表达,而后检测促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达情况.结果:(1)肺癌组织中αVβ3的mRNA和蛋白含量均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)促增殖和抗凋亡基因:处理组细胞Bcl 2、Notch1、Cyclin E的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)侵入和血管新生基因:处理组细胞VEGF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:非小细胞肺癌组织中αVβ3表达量升高;siRNA敲低αVβ3表达后,可以抑制肺癌细胞株A549中促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达.     

P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2在非小细胞肺癌中的表达

目的:探讨P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、P53蛋白及c-erbB-2蛋白在术前未经治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及相互间的关系.方法:采用免疫组化法检测78例NSCLC癌组织及15例癌旁肺组织(距癌灶5 cm)中P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2的蛋白表达情况.结果:免疫组化显示P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2在肺癌组织中的阳性表达率分别是65.4%(51/78)、39.7%(31/78)、56.4%(44/78)、53.8%(42/78)及43.6%(34/78),均显著高于癌旁肺组织中的表达水平(P<0.05);MRP和LRP蛋白表达在不同病理类型(腺癌、鳞癌及大细胞癌)之间比较均具有显著性差异(P分别为0.008和<0.001),LRP及P53蛋白表达在不同病理分化程度之间具有显著性差异(P分别为0.025和0.026);c-erbB-2表达与P-gp、MRP、LRP、P53均有相关性(Spearman相关系数分别为0.317、0.401、0.519和0.341,P值分别为0.005、<0.001、<0.001和0.002),P53与MRP之间(Spearman相关系数为=0.260,P=0.022)以及LRP与MRP之间(Spearman相关系数为0.371,P=0.001)有相关性.结论:P-gp、MRP、LRP、P53及c-erbB-2这些蛋白的表达在NSCLC的多药耐药形成及肿瘤的发生发展中可能具有一定的协同作用.     

肺癌组织中α1,3 FUCT Ⅶ mRNA的表达及其与转移的关系

目的 探讨α1,3 FUCT Ⅶ基因mRNA在肺癌组织、癌旁正常肺组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测α1,3 FUCT Ⅶ基因mRNA在92例肺癌组织、20例癌旁正常肺组织中的表达.结果 α1,3 FUCT Ⅶ基因mRNA在肺癌组织中表达量为(0.67±0.15),在癌旁正常肺组织表达量为(0.45±0.11),差异有统计学意义(P<0.05).其中在腺癌组织(0.79±0.19)中表达最强,小细胞肺癌组织(0.68±0.17)中表达次之,鳞癌组织(0.51±0.12)中表达最弱,差异有统计学意义(P<0.05).α1,3 FUCT Ⅶ基因mRNA表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、组织学类型有关,与年龄、性别无关(P>0.05).结论 α1,3 FUCT Ⅶ基因mRNA表达可能与肺癌的发生及转移相关.     

HIF-1α在肺癌中的表达及临床意义

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在低氧培养条件下肺癌细胞株及肺癌组织中的表达及临床意义.方法:采用Transwell侵袭小室测定法检测缺氧对肺癌细胞侵袭力的影响,分别采用RT-PCR法和免疫印迹(Western blot)、免疫组化法测定缺氧条件下人肺腺癌细胞株A549、小细胞肺癌细胞株H446及60例肺癌组织和20例癌旁正常肺组织中HIF-1α的mRNA和蛋白表达.结果:两种肺癌细胞系在缺氧下侵袭力较正常时增强.随着缺氧时间的延长,肺癌细胞的HIF-1αmRNA和蛋白水平呈升高趋势(P<0.05或P<0.01).肺癌组织中HIF-1α的mRNA和蛋白阳性表达率分别为90.0%、75.0%,明显高于癌旁正常肺组织的30.0%、20.0%(P<0.01),有淋巴结转移的表达高于无淋巴结转移者,中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)肺癌组织中的表达高于早期(I-Ⅱ期)(P<0.05).结论:氯化钴诱导缺氧上调HIF-1α在肺癌细胞中的表达,使之进一步耐受缺氧.HIF-1α的过表达参与了肺癌的侵袭转移,HIF-1α可成为判断肺癌生物学行为的重要指标.     

miR-185-5p靶向AKR1C1抑制肺癌细胞的迁移和侵袭

观察miR-185-5p对肺癌细胞迁移、侵袭的影响,分析酮还原酶1家族成员C1(AKR1C1)在miR-185-5p调控肺癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法 RT-qPCR检测miR-185-5p在组织样本(人肺癌及对应癌旁组织)、细胞系(人肺上皮细胞系BEAS-2B和肺癌细胞系A549、H460)中的表达。按照处理方式不同将A549细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-185-5p组(转染miR-185-5p)、miR-185-5p+pcDNA组(共转染miR-185-5p和pcDNA)、miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组(共转染miR-185-5p和pcDNA-AKR1C1);Transwell和划痕实验检测各组A549细胞迁移和侵袭;在线预测网站Starbase预测miR-185-5p的下游靶基因;双荧光素酶报告基因实验检测A549细胞荧光素酶活性;蛋白免疫印迹实验检测各组A549细胞中AKR1C1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的蛋白表达。结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中miR-185-5p的表达显著降低(P<0.001);与BEAS-2B细胞比较,A549和H460细胞中miR-185-5p的表达亦显著降低(均P<0.001);与miR-NC组比较,miR-185-5p组A549细胞的miR-185-5p表达显著升高,迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著降低(均P<0.001),MMP-2、MMP-9蛋白的表达均显著降低(均P<0.001)。Starbase预测显示miR-185-5p与AKR1C1之间存在连续的互补结合序列;与miR-NC组比较,miR-185-5p组AKR1C1-WT细胞的荧光素活性显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-185-5p组细胞中AKR1C1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与癌旁组织比较,肺癌组织中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001);与BEAS-2B细胞比较,A549细胞中AKR1C1 mRNA和蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。与miR-185-5p+pcDNA组比较,miR-185-5p+pcDNA-AKR1C1组miR-185-5p表达显著降低(P<0.001)、迁移和侵袭细胞数及划痕愈合率均显著升高(均P<0.001)、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。结论 miR-185-5p可抑制肺癌细胞的迁移、侵袭,该作用与miR-185-5p靶向负性调控AKR1C1有关。     

微小RNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能分析

目的分析miRNA-200a对肺癌细胞增殖影响及抑癌基因功能影响。方法 Real-time PCR对正常肺支气管上皮细胞16HBE、肺癌细胞SK-MES-1、NCI-H520、A549及25例非小细胞癌癌旁组织与癌组织内miR-200a表达量检测,CCK-8法检测肺癌A549细胞增殖活性受miRNA-200a影响状况,生物信息学对miRNA-200a靶基因进行预测,双荧光素酶联合Western blot及Real-time PCR检验YAP1受miRNA-200a调控影响。CCK-8法检测肺癌549细胞受YAP1增殖影响。结果肺癌细胞株SK-MES-1、NCI-H520及A549内miR-200a表达量均低于正常细胞株16HBE,差异有统计学意义(P0.05)。miR-200a mimics组内A549细胞在48、72及96 h时其吸光度均低于Mimics-NC,差异有统计学意义(P0.05)。肺癌A549转染siRNA-NC或者siRNA-YAP1后,PCR检测显示siRNA-YAP1内YAP1 m RNA表达量为(0.37±0.06),siRNA-NC内YAP1 mRNA表达量为(1.03±0.07),差异有统计学意义(P0.05);Western blot显示siRNA-YAP1内YAP1蛋白表达量比siRNA-NC低;siRNA-YAP1内YAP1细胞吸光度在48、72及96 h时均低于siRNA-NC,差异有统计学意义(P0.05)。结论 miR-200a对肺癌细胞增殖的抑制作用主要是经过靶向作用YAP1基因来实现的,进而在肺癌内起到抑癌功能。