结直肠癌组织NDRG4基因启动子甲基化状态观察及其诊断效能分析

目的 观察结直肠癌组织N-Myc下游调节基因4(NDRG4)基因启动子甲基化状态,分析其对结直肠癌的诊断效能。方法 收集结直肠癌石蜡组织43例份,癌旁组织24例份。采用定量甲基化特异性PCR(qMSP)法检测组织NDRG4基因启动子甲基化状态,计算甲基化率;比较不同性别、年龄、肿瘤生长部位、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的结直肠癌患者癌组织甲基化率,绘制其诊断结直肠癌的受试者工作特征(ROC)曲线,评价其诊断效能。结果 结直肠癌组织和癌旁组织NDRG4基因启动子甲基化率分别为65.12%(28/43)和4.17%(1/24),P<0.01。不同性别、年龄、肿瘤生长部位、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的结直肠癌患者的癌组织甲基化率比较均无统计学差异(P均>0.05)。ROC曲线分析结果显示,NDRG4基因启动子甲基化率诊断结直肠癌的曲线下面积为0.823 2(95%CI:0.725 5～0.920 8,P<0.01),敏感度为65.12%(95%CI:49.01～78.54),特异度为95.83%(95%CI:76.88～99.7...     

Caveolin-2基因甲基化状态在胃癌组织中的检测

目的:探讨Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化与胃癌发生发展的关系.方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测33例胃癌组织及5例距肿瘤5 cm以上的癌旁正常胃组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化状态.结果:5例正常胃组织Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛均为甲基化阴性.33例胃癌组织中29例甲基化阳性,甲基化率为87.9%(29/33),其中20 例癌组织(60.6%)表现为完全甲基化,9例癌组织(27.3%)表现为部分甲基化.4例癌组织(12.1%)表现为甲基化阴性.统计学结果显示癌组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率显著高于正常组织.结论:胃癌组织中存在较高的Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率,甲基化可能与胃癌的发生有关.     

原发胃癌中p16基因及其甲基化状态、表达异常的研究

目的：检测胃癌组织中p16基因及启动了甲基化状态和p16蛋白表达情况。方法：选择p16基因及启动子区域,用PCR－SSCP、MSP（甲基化特异的PCR）法、测序和免疫组化等方法对100例胃癌患者的癌组织和癌旁组织进行检测。结果：71％的病例p16表达阴性,54％的病例具有p16基因启动子区的高甲基化,50％的病例同时有p16表达阴性和p16基因启动子区的高甲基化,无突变和纯合缺失检出。结论：提示p16基因启动子区域高甲基化是胃癌中p16基因失活的主要原因。     

错配修复基因hMSH2启动子甲基化与胃癌的关系

目的:探讨hMSH2基因启动子区5CpG岛高甲基化在胃癌发生过程中的作用.方法:应用甲基化特异性PCR(methylationspecific PCR,MSP)方法检测胃癌及非癌组织中hMSH2基因启动子区甲基化状态.结果:40例胃癌中hMSH2基因启动子区高甲基化24例(60%),其癌旁黏膜组织中有15例(37.5%)发生甲基化,14例慢性萎缩性胃炎组织中有5例(35.7%)发生甲基化,6例慢性浅表性胃炎组织中未见甲基化.四组甲基化水平相比,差别有统计意义(P＜0.05).胃癌组甲基化水平高于癌旁组,差别有统计意义(P＜0.05).癌旁组、慢性萎缩性胃炎组、慢性浅表性胃炎组三组甲基化水平相比,差别无统计意义.胃癌各临床病理参数组之间相比差别无统计意义.结论:胃癌组织中hMSH2基因启动子区高甲基化可能是导致其错配修复功能缺陷的重要原因之一;而错配修复功能缺陷在胃癌的发生中起着重要作用,但可能与其发展关系不大.     

胃癌Runx3基因的甲基化

目的:探讨Runx3基因甲基化与胃癌的关系方法:采用MSP法检测38例配对胃癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中Runx3基因甲基化的情况.结果:73.7%的胃癌组织中存在Runx3基因异常甲基化,而相应的癌旁正常组织和转移淋巴结中该基因的甲基化率分别为21.1%和65.8%.癌组织和转移淋巴结中Runx3基因甲基化的发生率显著高于癌旁正常组织(P<0.05).胃癌组织中,该基因甲基化与肿瘤大小显著相关(P =0.021),但与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度及生长方式等临床病理特征无关.结论:Runx3基因异常甲基化是胃癌发生、发展过程中的频繁事件,通过检测胃黏膜组织及淋巴结中该基因的甲基化情况,可能会对胃癌的早期诊断及判断淋巴结的微转移提供一定的参考价值.     

胃癌患者p16基因启动子甲基化检测及其临床意义

目的 探讨p16基因启动子CpG岛甲基化在胃癌发生、发展中的作用.方法 应用特异性甲基化PCR(MSP)检测58例胃癌及癌旁组织和30例正常胃黏膜组织中p16基因启动子CpG岛的甲基化状态,分析其与胃癌临床病理参数的关系.结果26例(44.8％)胃癌组织、5例(8.6％)癌旁组织也检测出甲基化的存在,30例正常胃黏膜组织标本中均未检测出p16基因甲基化的存在(P ＜0.05);p16基因甲基化与胃癌淋巴结转密切相关(P＜0.05).结论 p16基因启动子CpG岛甲基化可促进胃癌的发生、发展;此基因的异常甲基化可作为胃癌早期诊断的敏感指标.     

胃癌HOXB6基因异常甲基化及其表达

目的 检测胃癌组织中HOXB6基因是否存在异常甲基化，并探讨其与基因表达及临床因素的关系。方法 用联合重硫酸盐限制性分析法（COBRA法）对7种胃癌细胞系和73例胃癌中层得的胃镜下活检组织进行HOXB6基因的甲基化定量检测，并采用逆转录聚合酶链反应方法检测基因的表达及脱甲基化处理后基因的再表达，结果 7种胃癌细胞系中有4种异常甲基化，异常甲基化的细胞系基因表达减少或消失，并且脱甲基化处理后基因可以重新表达，73例胃癌患者的癌部位和非癌部位的活检组织中，20例癌组织甲基化阳性（27.40%)，而非癌组织中无1例阳性。结论 胃癌中HOXB6基因的异常甲基化与基因表达抑制密切相关。并且脱甲基化后基因可以再表达；胃癌组织中HOXB6基因异常甲基化具有高度特异性，可作为肿瘤标志物用于临床诊断。     

胃癌中抑癌基因PTEN甲基化状态的检测

胃癌发生涉及多种抑癌基因、癌基因的异常表达。PTEN作为一种广泛的抑癌基因，在多种肿瘤中存在失活现象。其失活原因除突变、缺失外，DNA异常甲基化可能是其失活的第三条途径。本研究采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌细胞和组织中PTEN基因甲基化状态，探讨其甲基化改变特点与临床病理特征的关系，为胃癌的发生机制提供分子生物学依据。     

胃癌中环氧合酶-2基因5′CpG岛去甲基化与蛋白表达的关系

抑癌基因CpG岛甲基化可导致基因转录沉默 (transcrip tionsilencing) ,同时CpG岛去甲基化往往伴随癌基因的转录活化[1,2 ] 。环氧合酶 2 (COX 2 )基因是诱导型基因 ,在正常组织中无表达 ,在肿瘤中过度表达 ;COX 2基因 5′端存在CpG岛 ,内有多个转录因子结合位点。Song等[3 ] 发现在胃癌细胞株中 ,5′CpG岛甲基化可抑制COX 2转录。因此 ,我们通过研究胃癌组织中COX 2基因转录起始点上下游CpG岛甲基化状态与COX 2蛋白表达的关系 ,揭示 5′CpG岛去甲基化在COX 2蛋白表达中的作用。　　一、材料与方法1.组织标本 :所有标本均为我…     

胃癌组织中肿瘤相关基因甲基化及其表达与叶酸和代谢酶MTHFR基因多态性的关系

目的:探讨人胃癌组织中癌基c-myc,抑癌基因p16INK4A,p21WAF1,错配修复基NhMLH1和hM2SH2的甲基化状态及其表达与叶酸、MTHFR基因多态性的关系．方法:胃癌38例手术切除标本的癌区、癌旁和外周正常黏膜组织,运用FOL ACS:180自动化学发光系统测定叶酸含量,PCR-RFLP技术检测MTHFR基因677(C→T)和1298(A→C)两个常见多态,并分别以Real—time RT-PCR和甲基化特异性PCR (MSP)技术检测肿瘤相关基因的表达和甲基化状态．结果:c-myc表达升高,p16INK4A,hMLH1和hMSH2表达降低的胃癌黏膜组织其基因启动子区异常甲基化．p21WAF1,hMSH2表达降低, p16INK4A高甲基化者叶酸水平明显降低,c-myc低甲基化和表达升高者中均存在低叶酸水平．MTHFR 677CC基因型的胃癌黏膜组织p16INK4A甲基化升高且表达降低,而其余肿瘤相关基因的甲基化及其表达与MTHFR两个常见多态均无明显相关性．结论:DNA甲基化在胃癌的发生、发展中具有重要作用,叶酸水平和MTHFR基因多态性通过影响部分肿瘤相关基因的甲基化状态而调控其表达．     

MAL基因在胃癌组织中的甲基化及其mRNA的表达

目的:研究MAL基因在胃癌和癌旁组织中的甲基化状态及其mRNA表达.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)和实时荧光定量RT-PCR法检测37例人胃癌组织及对应癌旁5 cm组织中MAL基因的甲基化状态和mRNA表达,并分别将其与各临床病理指标进行统计学分析.结果:37例胃癌组织中MAL基因甲基化率为78.4%.对应37例癌旁组织中MAL基因甲基化率为5.4%.癌组织与癌旁组织的甲基化率差异有统计学意义(P<0.01).胃癌组织中MAL基因甲基化状态与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、胃癌分化程度、临床分期无统计学意义(P>0.05).在胃癌组织与对应癌旁组织中MAL基因mRNA定量表达差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组织中MAL基因mRNA定量表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌分化程度、有无淋巴结转移、有无神经束浸润及肿瘤TNM分期无相关(P>0.05).结论:胃癌组织中MAL基因表达缺失或低下,并且存在高甲基化率,MAL基因发生甲基化可能与胃癌发生有关.     

正常上皮细胞特异性基因甲基化在胃癌发病机制中的研究

目的探讨正常上皮细胞特异性-1基因（NES1）在胃正常卜皮细胞和胃癌细胞株中的表达及其受甲基化调控的影响。方法分别培养胃癌细胞株MKN-28（高分化）、SGC-7901（中分化）、AGS（中分化）、MKN-45（低分化）、HGC-27（未分化）和原代正常胃上皮细胞。提取细胞RNA，荧光定量PCR检测NES1在各细胞株中的表达。以不同浓度的DNA甲基化酶抑制剂5＇-杂氮-2＇-脱氧胞嘧啶（5-azadC）处理胃癌细胞株，荧光定量PCR检测处理后NES1 mRNA表达。同时提取细胞基因组DNA，甲基化修饰后甲基特异性PCR（MSP）分析其CpG岛甲基化状态。结果NES1 mRNA在肿瘤细胞株中的表达较胃正常上皮细胞明显降低。甲基化检测显示，NES1在胃癌细胞株中均存在不同程度的外显子3CpG岛甲基化。NES1表达降低的胃癌细胞株经5-aza-dC去甲基化药物处理后NES1表达均有所上调。结论NES1在一些胃癌细胞株中的低表达与该基因外显子3CpG岛甲基化有关。5-aza-dC可使NESI表达降低的胃癌细胞株重新表达NES1 mRNA，再次证明了NES1基因在胃癌细胞株中的低表达与甲基化有关。NES1基因外显子3甲基化可能是胃癌细胞中NES1表达缺失的分子机制。     

DNA甲基化与胃癌的研究进展

DNA甲基化引起的基因表达沉默是导致胃癌发生的重要途径之一。过度甲基化可能是由于DNA甲基转移酶的过表达或是去甲基化活动的减弱所引起的,具体机制并未完全阐明。有研究发现,在胃癌组织中有许多基因启动子区发生了甲基化。此文对于近年来DNA甲基化与胃癌的研究进展作一综述。     

胃癌患者的CD1D基因甲基化异化及其临床意义

目的 研究CD1D基因在胃癌组织及胃液中的甲基化异化情况,探讨其对胃癌诊断及患者预后评估的价值.方法 选择2017年1 月至2018年8月海南省肿瘤医院内镜中心诊治的77例胃癌及慢性胃炎患者.胃癌组37例,包含早期胃癌15例和进展期胃癌22例.胃炎患者40例,分为慢性非萎缩性胃炎组(20例)和慢性萎缩性胃炎组(20例)...     

肿瘤相关基因高甲基化与胃癌的研究进展

表型遗传修饰在肿瘤发生过程中起着重要的作用。其中DNA高甲基化是研究得最多、最广泛的表型遗传修饰表达机制。通过胃癌与DNA甲基化和去甲基化、DNA甲基化和染色质结构关系的研究,揭示了DNA甲基化在胃癌形成过程中的重要作用。现就近年来肿瘤相关基因高甲基化与胃癌关系的研究进展作一综述。     

胃癌TIMP3基因启动子甲基化及其蛋白表达的研究

目的:探讨组织金属蛋白酶抑制因子-3(tissue inhibitor of metalloproteinase 3,TIMP3)基因启动子甲基化与其蛋白表达的相关性,并分析 TIMP3基因CpG岛异常甲基化与胃腺癌及其临床病理特征的关联性．方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)技术和免疫组织化学方法分别检测78例患者的胃正常黏膜组织、胃癌组织及转移淋巴结中,TIMP3 基因启动子甲基化和蛋白表达情况．结果:胃正常黏膜组织、早期、进展期胃癌组织和转移淋巴结中TIMP3基因启动子均有甲基化修饰,其阳性率分别为35．9％(28／78); 85．0％(17／20),89．7％(52／58);转移淋巴结 100％(78／78)．胃癌组TIMP3基因启动子甲基化率明显高于胃正常黏膜组(尸<0．05)．胃正常黏膜组织TIMP3蛋白表达全部为阳性(100％), 20例早期胃癌中,6例阳性(30％),58例进展期胃癌中,2例阳性(3．4％),在转移淋巴结中全部不表达(0％)．胃癌70例蛋白表达阴性的标本中,64例TIMP3基因启动子甲基化阳性 (91．4％),TIMP3蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关(P<0．01)．结论:启动子区CpG岛高甲基化是胃癌组织中TIMP3基因表达失活的主要机制,可能成为胃癌分子诊断与病期评估的标志之一．     

幽门螺杆菌感染、p16基因甲基化与胃癌的相关性研究

幽门螺杆菌（ Hp）感染与胃癌的发生有密切的关系, Hp已被国际癌症研究中心列为第一致癌因子 [1]。动物实验已证实, Hp慢性感染易引起胃粘膜组织向恶性转化 [2],但其致癌机制未明,更缺乏直接的分子生物学证据,本文通过研究 Hp感染与胃癌及胃粘膜炎性病变中抑癌基因 p165'CpG岛甲基化状态的相关性,以进一步探讨 Hp感染与胃癌发生的相关性及可能的机制。 　　一、材料与方法： (1)标本： 57例胃癌组织为本院 1998年 1月－ 1999年 9月手术标本（均为非贲门部胃癌）,并经病理确诊。男 30例,女 27例,年龄 24～ 67岁,平均 48.6岁,手…     

5-Aza-CdR体外诱导胃癌细胞系p16基因去甲基化及表达增强

目的: 观察去甲基化制剂--5-Aza-CdR对体外培养的胃癌细胞SGC7901 p16基因启动子区甲基化状态及表达的影响, 探讨胃癌细胞p16基因失活的机制及去甲基化制剂对p16基因表达的调控.方法:应用不同浓度的5-Aza-CdR(1×10-7, 5×10-7, 1×10-6, 5×10-6 mol/L)处理体外培养的胃癌细胞SGC7901后, MSP法检测用药前后细胞中p16基因的甲基化状态, RT-PCR及 Western-blot法检测用药前后细胞中p16基因mRNA及蛋白表达的变化.结果: p16基因在胃癌细胞系SGC7901中启动子区呈异常甲基化状态, 在mRNA及蛋白水平低表达. 经过1×10-7, 5×10-7, 1×10-6, 5×10-6 mol/L 5-Aza-CdR处理后, p16基因启动子区呈去甲基化状态, 各组mRNA及蛋白表达相应的比值分别与处理前的比例为2.21±0.36, 2.01±0.31;2.82±0.39, 2.22±0.33;2.98±0.42, 3.15±0.43及3.35±0.55, 3.75±0.61.结论:5-Aza-CdR能逆转胃癌细胞p16基因甲基化状态, 调控p16基因表达.     

胃癌与多肿瘤抑制基因甲基化的研究

目的：探讨抑癌基因ＭＴＳ１　５’端ＣｐＧ岛异常甲基化与原发性胃癌发病机制之间的关系。方法ＰＣＲ－甲基化检测法研究３１例胃癌标本和１９例正常胃组织中ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化情况。结果：有３５．５％（１１／３１）的胃癌标本和５．３％（１／１９）正常胃组织出现ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化,两者之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ＭＴＳ１基因５’端ＣｐＧ岛异常甲基化是其在原发性胃癌中的主要灭活机制,与胃癌的发生发展密切相关。