普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:采用CCK8法检测不同药物对U937细胞增殖率的影响,分别为普萘洛尔(0、200、400、800、1000、2 000μmol/L)作用24、48、72 h,阿糖胞苷单用(0、10、50、100、200、400、800 nmol/L)24 h,普萘洛尔(400μmol/L)联合阿糖胞苷(10、50、100、200、400、800 nmol/L)作用24 h。普萘洛尔(0、200、400、800μmol/L)作用U937细胞24 h后,用流式细胞术检测细胞的凋亡和周期、线粒体膜电位的变化,用碱性彗星实验检测DNA的损伤,Caspase-Glo试剂盒检测Caspase-3、8、9相对活性的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化。结果:普萘洛尔可以有效抑制U937细胞的增殖,其效应具有一定的时间(200、400μmol/L,P0.05)和剂量相关性(0、200、400、800μmol/L,P0.01),普萘洛尔还可协同阿糖胞苷的抗肿瘤效应。流式、彗星、Caspase、Western blot结果分别表明普萘洛尔可增加细胞凋亡率,增加G_0/G_1期和减少G_2/M期细胞比例,降低线粒体膜电位水平,诱导DNA损伤,增强Caspase3、8、9活性,上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,且在实验浓度范围内与剂量呈相关性(P0.05)。结论:普萘洛尔可抑制急性髓系细胞白血病U937的增殖并诱导其凋亡,这一机制可能与其诱导G_0/G_1期细胞阻滞、损伤DNA,激活内、外源性凋亡途径有关。     

伊马替尼联合槲皮素对K562细胞增殖和凋亡协同作用的机制研究

目的:探讨槲皮素联合伊马替尼对K562细胞增殖的影响以及诱导凋亡的机制。方法:将不同浓度的槲皮素、伊马替尼单药和联合用药作用于K562细胞,绘制协同曲线。将0.25μmol/L伊马替尼与25μmol/L的槲皮素联合作用于K562细胞,通过细胞计数检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期、线粒体跨膜电位的变化,蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达。结果:0.25μmol/L伊马替尼联合25μmol/L槲皮素对K562细胞有明显的协同抑制生长和诱导凋亡作用。两药联合处理能降低K562细胞线粒体跨膜电位,使胱天蛋白酶(caspase)9和胱天蛋白酶3发生剪切,并明显下调B细胞淋巴瘤(Bcl)2样蛋白1(Bcl-xl)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)蛋白的表达。结论:伊马替尼与槲皮素协同抑制K562细胞生长并诱导细胞凋亡,其机制主要通过下调Bcl-xl以及Mcl-1蛋白的表达,从而激活线粒体凋亡途径来实现的。     

苦参碱对白血病KG1a细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察苦参碱对人急性髓白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响.方法 CCK-8法和台盼蓝拒染色法检测苦参碱对KG1a细胞增殖抑制作用和细胞存活率;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆形成能力;流式细胞仪法检测作用前后KG1a细胞的凋亡率及细胞周期变化.结果 苦参碱能够抑制KG1a细胞增殖,随着药物浓度增大和作用时间延长,抑制率逐渐升高、存活率逐渐下降;作用后细胞克隆形成率明显低于对照组(P＜0.05);各浓度药物组均能诱导KG1a细胞凋亡;苦参碱作用后细胞大部分被阻于Go/G1期.结论 苦参碱能抑制KG1a细胞的增殖,改变其周期,诱导其凋亡.     

细胞色素C对白血病细胞增殖、凋亡及Survivin表达的影响

凋亡是细胞的程序性死亡,该过程的启动和实施涉及一系列复杂的生化反应并受多种分子调节。死亡蛋白酶(Caspase)是其中的一组关键分子,在凋亡过程中起着中心调控作用,而线粒体是导致Caspase级联反应活化和细胞凋亡的第二途径。     

炔类黄酮对白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响

在体外设定的不同浓度梯度和作用时间，以炔类黄酮分别作用于白血病HL-60细胞，倒置相差显微镜观察细胞形态学变化；MTT法检测细胞生长抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率；琼脂糖凝胶电泳（DNA ladder）检测染色体DNA断裂情况。发现实验组细胞出现皱缩、黏附性降低、染色体凝集和边集现象；细胞生长受到明显抑制；细胞凋亡率为29．74％；DNA Ladder可见明显梯形条带。提示炔类黄酮对HL-60细胞具有显著的抑制增殖及诱导凋亡作用。     

多克隆抗胸腺细胞球蛋白对白血病细胞增殖抑制及凋亡诱导作用

目的:探讨多克隆兔抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)对白血病细胞的生长抑制以及诱导凋亡作用。方法:体外培养Jurkat、Raji、HL-60、NB4、K562、U937细胞株以及15例患者原代白血病细胞。用50、100、150、200、250μg/mL终浓度的ATG在不同时间分别作用于以上细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞术测定细胞凋亡率。结果:ATG对Jurkat、Raji、HL-60细胞有明显的增殖抑制以及诱导凋亡作用,且高浓度ATG抑制作用更强。ATG对NB4、K562、U937细胞增殖抑制与诱导凋亡作用均不明显。15例初发白血病患者中7例的原代细胞经ATG作用后明显凋亡,凋亡率均>30%。结论:ATG具有广谱抗白血病作用,尤其是对淋巴细胞白血病作用较强,为其在异基因造血干细胞移植中的应用提供了实验依据。     

青蒿琥酯对白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的研究青蒿琥酯对髓系白血病细胞株K562的增殖抑制和凋亡作用,分析其抗肿瘤机制。方法体外培养K562细胞应用不同浓度的青蒿琥酯处理细胞,台盼蓝染色分析细胞活力,WST-1还原法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡和周期,采用免疫印迹技术分析Bax和Bcl-2表达。结果 K562细胞活力随着药物浓度的增加而下降,而FTY720对细胞增殖的抑制作用随药物浓度增加而增加。药物作用72 h,K562细胞的IC50值为95μmol/L;与对照组比较,50μmol/L和100μmol/L青蒿琥酯处理48 h导致S期细胞减少,G_2M期细胞增加;当浓度达到200μmol/L后,G_2M期细胞减少,但死亡细胞增加到39.65%。双染和流式细胞术分析发现,100μmol/L青蒿琥酯作用24 h后,早期凋亡细胞百分率增加;与对照组比较青蒿琥酯导致细胞内Bax表达增加。结论青蒿琥酯可通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖而发挥抗肿瘤作用,其线粒体途径可能参与细胞凋亡过程。     

克霉唑对急性早幼粒细胞白血病细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抗真菌药物克霉唑作为钙激活性钾通道阻断剂对人类急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过台盼兰拒染计数法检测了钙激活性钾通道阻断剂克霉唑对人APL细胞株NB4、APL患者原代细胞和骨髓基质细胞生存活力的影响,流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体的出现,AnnexinV/PI试剂盒和DAPI荧光染色检测细胞的凋亡情况,激光扫描共聚焦显微镜实时监测[Ca2+]i的变化。结果:克霉唑以浓度依赖方式显著抑制NB4细胞和APL原代细胞生长,在同样条件下骨髓基质细胞没有显著毒性。5μmol/L克霉唑作用72h后,细胞周期明显被阻滞于G0/G1期,S期显著减少,并出现亚二倍体峰。Annexin V/PI双标记和DAPI荧光染色证实克霉唑诱导NB4细胞和APL原代细胞凋亡,凋亡率分别为(30.5±3.9)%、(33.7±4.5)%。5μmol/L克霉唑引起[Ca2+]i荧光比值显著增高。结论:钙激活性钾通道阻断剂克霉唑诱导APL细胞凋亡,这为治疗APL提供了新的有希望的治疗方法,其机制可能与克霉唑调节细胞内钙水平有关。     

槲皮素对肺动脉高压大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的:观察槲皮素对肺动脉高压肺组织细胞凋亡的影响。方法:将成年雄性SD大鼠30只,随机分为三组:正常对照组(对照组)、野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压组(MCT组)和槲皮素预防组(预防组),每组10只。MCT组及预防组给予野百碱造模,对照组仅以等量0.9%氯化钠液注射,预防组在造模同时每天给予槲皮素100mg/(kg.d)灌胃,21d后测肺动脉压力并计算右心肥大指数,肺组织切片用免疫组化法和免疫印迹法观察大鼠肺组织细胞凋亡(Bcl-2)情况。结果:MCT组大鼠肺动脉平均压力[MCT组(42.13±6.28)vs.对照组(14.57±1.59),P0.05;MCT组(42.13±6.28)vs.预防组(20.32±3.85),P0.05]、右心肥大指数[MCT组(0.593±0.100)vs.对照组(0.241士0.050),P0.05;MCT组(0.593±0.100)vs.预防组(0.290±0.065),P0.05]、肺组织细胞的Bcl-2蛋白相对表达量[MCT组(0.964±0.009)vs.对照组(0.684±0.014),P0.05;MCT组(0.964士0.009)vs.预防组(0.849±0.009),P0.05]显著高于对照组及预防组;同时预防组大鼠肺动脉压力[预防组(20.32士3.85)vs.对照组(14.57±1.59),P0.05]、右心肥大指数[预防组(0.290±0.065)vs.对照组(0.241±0.050),P0.05]、肺组织细胞的Bcl-2蛋白相对表达量[预防组(0.849±0.009)vs.对照组(0.684士0.014),P0.05]高于对照组。结论:槲皮素具有减缓MCT诱导肺动脉高压大鼠肺组织细胞凋亡的作用。     

槲皮素对肾癌786-0细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

目的观察槲皮素对肾癌786-0细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的细胞,观察组加入不同浓度的槲皮素,对照组加入1‰的DMSO,每组设3个复孔。MTT法观察培养24、48、72 h时细胞的增殖活性,流式细胞仪检测培养48 h时的细胞凋亡率,Western blot法检测培养48 h时细胞内的磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及总Akt。结果槲皮素可明显抑制肾癌786-0细胞生长,并呈时间和剂量依赖性(P均<0.05);观察组细胞凋亡率与对照组相比明显增加(P均<0.05),且随剂量升高而增加;细胞内p-Akt表达水平,随槲皮素表达剂量增加而降低(P均<0.05)。结论槲皮素可显著抑制肾癌786-0细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制PI3K/Akt通路活性有关。     

槲皮素对结肠癌HT-29细胞增殖及周期的影响

目的:探讨槲皮素(Qu)对结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡影响的分子机制．方法:以40×10-6,80×10-6,160×10-6mol／L的槲皮素作用结肠癌HT-29细胞,以溶剂为对照组,采用MTT试验、流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察槲皮素对结肠癌细胞增殖,细胞周期,细胞凋亡,及Caspase-3 蛋白表达、Caspase-3、bcl-2、bax mRNA表达的影响．结果:40×10-6mol／L Qu明显促进HT-29细胞增殖(P<0．05),80×10-6,160×10-6mol／L Qu 明显抑制细胞增殖(P<0．05或P<0．01),呈时间 (?)效应．40×10-6,80×10-6,160×10-6mol/L槲皮素作用HT-29细胞72 h,其增殖率分别为 (111．8±9．6)％,(64．6±8.3)％和(26．1±5．7)％, G0／G1期细胞分别为(32．7±5．4)％、(58．1± 18．3)％和(71．6±20．8)％,S期细胞分别为(48．6 ±17．5)％、(27．4±13．4)％和(15．4±10．1)％,细胞凋亡率分别为(7．0±1．3)％、(15．6±3．6)％和(26．4±6．2)％,80×10-6,160×10-6mol／L能明显提高G0／G1期细胞(P<0．01),明显降低S期细胞(P<0．01),细胞凋亡明显增加(P<0．01)．80 ×10-6,160×10-6mol／L的Qu增加细胞中bax mRNA,Caspase-3 mRNA及其蛋白的表达,降低 bcl-2 mRNA的表达．40×10-6mol／L的Qu增加 Caspasc-3 mRNA表达,但其蛋白表达未见明显增加,细胞增殖明显增加．结论:槲皮素能促进结肠癌HT-29细胞增殖, 也能诱导细胞凋亡,其机制可能是通过上调 Caspase-3和bax表达,降低bcl-2表达来实现的．     

LncRNA-H19对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的探索长链非编码RNA-H19对急性髓系白血病细胞增殖和细胞凋亡的调控作用。方法采用RAN干扰技术对急性髓系白血病细胞系HL-60、THP-1和U937的LncRNA-H19进行表达沉默,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA-H19在细胞中的表达情况。用MTT检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果三种白血病细胞系分别被3条si-RNA干扰后,LncRNA-H19表达均明显下调。MTT结果显示,RNA干扰后,LncRNA-H19干扰细胞组的细胞增殖明显低于阴性对照组,而流式细胞术显示,siH19干扰细胞组的细胞凋亡明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论急性髓系白血病细胞中,LncRNA-H19具有调控急性髓系白血病细胞增殖和细胞凋亡的功能。     

槲皮素对胃癌细胞增殖的影响及机制探讨

目的观察槲皮素对胃癌细胞增殖的影响,并探讨可能的作用机制。方法采用不同浓度的槲皮素处理胃癌SGC7901细胞,以四氮唑盐（MTT）比色试验观察胃癌细胞增殖情况,以TRAP-ELISA方法检测胃癌细胞端粒酶活性,分别采用琼脂糖凝胶电泳法和TUNEL法检测胃癌细胞凋亡情况。结果槲皮素处理后胃癌SGC7901细胞增殖率及细胞端粒酶活性明显降低、细胞凋亡率增加,且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05）。结论槲皮素可抑制胃癌细胞增殖,可能机制为抑制端粒酶活性和诱导细胞凋亡。     

急性白血病细胞体外对Jurkat细胞凋亡的影响

为探讨白血病细胞凋亡相关基因 (Fas)的功能性表达情况 ,将 2 7例白血病患者的白血病细胞与 Jurkat细胞体外孵育后 ,用原位末端标记法 (TUNEL )测定单纯 Jurkat细胞 (对照组 )、不加和加入不同浓度抗凋亡相关基因配体 (Fas L)的 Jurkat细胞凋亡率。结果显示 ,不加抗 Fas L 急性非淋巴细胞白血病组 (ANL L 组 )与对照组比较 ,凋亡率明显增高 (P<0 .0 1) ,急性淋巴细胞白血病组 (AL L 组 )与对照组比较仅轻度增高 (P<0 .0 5 ) ,两者均随细胞浓度的增加而凋亡率增高 ;ANL L组加与不加抗 Fas L 相比凋亡率明显减少 (P<0 .0 1) ,随抗 Fas L浓度的增加而凋亡率减少 ,AL L 组加与不加抗 Fas L 相比凋亡率轻度减少 (P<0 .0 5 ) ,也随抗 Fas L 浓度的增高而减少 ,但不如 ANL L组凋亡率变化明显。提示急性白血病细胞存在 Fas L的功能性表达 ,ANL L较 AL L的 Fas L表达高     

卡维地洛对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的观察卡维地洛对肝星状细胞增殖与凋亡的影响。方法以不同剂量卡维地洛(CVD)作用于肝星状细胞(HSC-T6)。CCK-8法检测CVD对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测CVD对细胞凋亡的影响。统计学处理采用t检验。结果 CVD作用于HSC-T6后,CCK-8法检测模拟对照组细胞增殖抑制率为2.18±0.60,CVD10μmol/L组细胞增殖抑制率为6.30±1.44,CVD20μmol/L组细胞增殖抑制率为7.75±1.33。提示细胞增殖抑制率随CVD浓度的增高而增高。CVD10μmol/L组及CVD20μmol/L组与模拟对照组相比,差异有统计学意义。流式细胞术检测模拟对照组细胞凋亡率为(2.30±0.08)%,CVD10μmol/L组细胞凋亡率为(3.54±0.50)%,CVD20μmol/L组细胞凋亡率为(4.25±0.13)%,提示细胞凋亡率随药物浓度的增大而增加。CVD10μmol/L组及CVD20μmol/L组与模拟对照组相比,差异有统计学意义。结论 CVD可以抑制HSC-T6的增殖,促进HSC-T6的凋亡。     

细胞凋亡与白血病

细胞凋亡与白血病马东初，方军捷，张素芬细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）又称程序性细胞死亡不仅存在于正常组织与器官，调节着机体细胞生长与更新间的平衡稳定，也存在于各种肿瘤组织，与肿瘤的发生有密切的联系。它与白血病的关系也越来越引起人们的重视，我们就此问题...     

化疗药物诱导急性白血病原代细胞凋亡和杀伤作用的研究

为使最大限度消灭肿瘤细胞 ,最低限度损伤机体正常组织的化疗目标得以实现 ,一种以诱导肿瘤细胞凋亡为目标的新的治疗模式开始形成 ,从而对以往“筛选抑制细胞增殖敏感的药物来组成个体化化疗方案”的原则提出了挑战 ,但在临床应用中仍存在诸多疑问 ,如各种药物在体内诱导细胞凋亡的时间、剂量、效应关系 ,化疗药物不同剂量对诱导细胞凋亡的能力有无不同等。我们选取急性白血病 (AL)原代细胞为研究对象 ,模拟人体内用药情况 ,在短时间内观察药物诱导细胞凋亡及杀伤作用 ,试图对诸多问题作出回答。1　资料与方法1 .1　药品配制　根据公式 (…     

去甲肾上腺素对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨交感神经递质去甲肾上腺素（NE）对HSC细胞株（CSFC）增殖和凋亡的影响。方法体外培养CFSC,分为以下6组：（1）空白对照组,为单纯CFSC培养;（2）交感兴奋（NE）组;（3）交感抑制（酚妥拉明＋普萘洛尔）组;（4）α肾上腺素受体（AR）阻滞（酚妥拉明）组;（5）β1AR阻滞（CGP20712A）组;（6）β2AR阻滞（ICI118551）组。MTT法测定细胞增殖;TUNEL法观察CFSC凋亡状况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化。结果MTT法显示,NE对CFSC具有明显的促增殖作用,加入α-AR、β1AR、β2AR阻滞剂后细胞增殖均受到明显抑制。NE作用于CFSC 24h,TUNEL法显示CFSC的凋亡率显著低于对照组（6.60%±3.05%与12.60%±4.76%,P〈0.05）;加入AR阻滞剂后CFSC凋亡率升高,其中α-AR和β2AR阻滞剂作用最显著。同时,流式细胞仪显示加入NE后CFSC凋亡率也显著降低（2.29%±0.22%与3.06%±0.57%,P〈0.05）;与TUNEL结果一致。NE对细胞形态没有明显影响。结论交感神经递质NE对体外活化的CFSC具有促增殖作用,并且可以抑制CFSC的凋亡,可能主要通过α受体和β2体起作用。     

白藜芦醇对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的 探讨白藜芦醇对白血病K562细胞生长的影响及相关作用机制.方法 用不同浓度白藜芦醇作用于K562细胞,CCK-8法观察白藜芦醇对K562细胞生长增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法观察白藜芦醇对K562细胞凋亡的影响,PI染色法观察白藜芦醇对K562细胞周期的影响,Western blot法检测K562细胞中的Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Cyclin D1蛋白.结果 白藜芦醇作用后的K562细胞的增殖被抑制并且凋亡增加,呈时间-剂量依赖性;同时,凋亡相关分子Bcl-2、Bcl-xl表达下调,Bax表达上调;白藜芦醇作用K562细胞后,G1期细胞增多,S期细胞减少,细胞周期调节蛋白Cyclin D1表达下降.结论 白藜芦醇可抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与下调细胞内Bcl-2、Bcl-xl、Cyclin D1表达并上调Bax的表达有关.     

槲皮素对小细胞肺癌细胞株H446的凋亡调控作用

目的初步探讨槲皮素对人小细胞肺癌细胞株凋亡的影响。方法以不同浓度槲皮素培养H446细胞24 h后,运用免疫荧光染色法检测细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果以0、15、30、60μmol/L浓度的槲皮素作用于细胞株24 h后,细胞凋亡率分别为(1.30±0.32)%(12.95±0.08)%,(16.8±0.19)%,(25.81±1.01)%,各组间均值具有显著性差异(P0.01),并且随着槲皮素浓度的增加,H446细胞凋亡率逐渐增加,两者呈正性相关。采用免疫荧光染色法检测发现,随着槲皮素作用浓度的增加,抗凋亡蛋白BCL-2的表达信号亦逐渐降低。结论槲皮素对人小细胞肺癌细胞株有促进凋亡的作用,其机制可能与抑制抗凋亡蛋白BCL-2的表达有关。