肾缺血预处理和双下肢缺血预处理对未成熟心肌作用的比较研究

目的：比较肾缺血预处理和双下肢缺血预处理对未成熟心肌的作用。方法：采用经典心脏缺血预处理（IP），肾缺血预处理（RIP）及双下肢缺血预处理（DLIP）兔Langendorff灌注模型比较3种方法对缺血／再灌（I／R）未成熟心肌损伤的效应，分成5组：正常对照（NC，n=6)：离体心脏仅灌注KH液70分钟；缺血／再灌（I／R,n=6)离体心脏灌注15分钟转为工作心15分钟后停灌45分钟，恢复灌注15分钟改为工作心30分钟，IP组（n=6)，离体心脏灌注15分钟转为工作心15分钟后反复2次缺血5分钟／再灌5分钟，然后重复I／R组缺血／再灌注方法；RIP组（n=6)，反复3次阻断左肾动脉5分钟，放开5分钟，然后重复I／R方法，DLIP组（n=6)；反复3次捆扎双下肢5分钟，松开5分钟，然后重复I／R组方法，以左心室功能恢复，心肌含水量，血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率，心肌组织ATP和丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD）活性作为观察指标，结果：IP，RIP及DLIP组在左心室功能恢复优于I／R组（P＜0．05），在ATP含量，SOD活性方面均优于I／R组（P＜0．01），在心肌含量低于IR／组（P＜0．05），在MDA含量，CK，LDH漏出方面均低于I／R组（P＜0．01），结论：肾缺血预处理与双下肢缺血预处理可诱发同等的心肌保护作用。     

缺血后处理对兔缺血再灌注心肌保护作用的信号转导机制研究

目的：建立缺血再灌注模型,观察JAK-STAT信号通路是否介导了缺血后处理对兔心肌的保护作用。方法：健康新西兰大白兔随机分为3组,（l）假手术组,开胸后穿线套环,不收紧结扎线。（2）I/R组,结扎冠状动脉左前降支（LAD）30min,再灌注180min。（3）缺血后处理组,结扎LAD 24 min时,用血管夹夹闭双侧股动脉5 min,松开1 min,再灌注直至180min;再灌注结束后伊文思蓝和TTC染色法测心梗面积,用原位化学法（TUNEL）法观察各组心肌细胞凋亡,免疫印迹法（WesternBlot）测各组心肌BCL-2及P-Stat3的表达。结果：（1）心梗面积：缺血后处理组（19.9±5.4%）较I/R组（29.9±4.6%）有明显减少（P〈0.05）,（2）各组心肌细胞凋亡的变化：I/R组、缺血后处理组的心肌细胞凋亡指数均较l组明显增加（P〈0.05）,（3）组的心肌细胞凋亡指数明显低于I/R组（P〈0.05）。（4）各组的心肌BCL-2蛋白表达变化：I/R组、缺血后处理组的心肌BCL-2的表达均较假手术组明显增加（P〈0.05）,缺血后处理组的心肌BCL-2的表达明显高于I/R组（P〈0.05）。（5）各组心肌P-Stat3蛋白表达：I/R组、缺血后处理组的心肌P-Stat3蛋白表达均较假手术组明显增加（P〈0.05）,缺血后处理组的心肌P-Stat3蛋白表达明显高于I/R组（P〈0.05）。结论：缺血后处理通过JAK-STAT信号通路的介导,上调BCL-2及P-Stat3蛋白的表达,抑制心肌细胞的凋亡,对缺血再灌注兔心肌产生保护作用。     

美托洛尔对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制研究

目的：探讨美托洛尔对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法取健康3～4个月雄性C57BL／6小鼠32只,分为4组（n＝8）,即对照组、美托洛尔组、缺血再灌注组（I／R组）和美托洛尔＋缺血再灌注组（美托洛尔＋I／R组）。检测各组小鼠心肌损伤情况、心肌细胞凋亡率、细胞色素c（Cyt C）的释放、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase‐3）活性及钙蛋白酶（calpain）活性。结果与I／R组相比,美托洛尔预处理后,显著减少了心肌梗死区与缺血危险区域的比率（P＜0．05）,而心肌缺血危险区域与左心室的比率并无明显变化;与对照组相比,I／R组心肌细胞凋亡率、心肌组织Cyt C的释放、Caspase‐3活性及calpain活性均明显增高（ P＜0．01）,美托洛尔预处理能抑制I／R损伤引起的上述变化。结论美托洛尔可能通过抑制心肌细胞内calpain的活化,从而抑制心肌细胞凋亡,最终减轻心肌的I／R损伤。     

灯盏花素预处理对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：观察灯盏花素预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法：40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、灯盏花素预处理Ⅰ组和Ⅱ组。灯盏花素预处理组大鼠于术前1周腹腔注射不同剂量的灯盏花素（25、50mg／kg／d）;采用结扎大鼠左冠状动脉前室间支的方法制备心肌缺血再灌注模型,结扎30min,再灌注2h;采用Annexin V／PI双染,流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况。结果：灯盏花素预处理可明显降低缺血再灌注大鼠心肌细胞的凋亡率（P〈0．05,P〈0．01）。结论：灯盏花素预处理可抑制心肌细胞凋亡,对缺血再灌注心肌细胞具有保护作用。     

吗啡后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨吗啡后处理对在体大鼠心肌缺血／再灌注损伤的保护作用。方法32只健康雄性SD大鼠随机分配至4个组（n=8）。假手术组（Sham组）：冠脉左前降支只套线,不结扎;缺血再灌注组（I／R组）：再灌注前5min给盐水1ml／kg;吗啡后处理组（MOR组）：再灌注前5min给予吗啡0．3mg／kg;缺血预处理组（IPC组）：先缺血5min再开放5min,反复3次,再进行冠状结扎。建立大鼠心肌缺血30min,再灌注120min动物模型,以血流动力学、心肌酶学、心肌梗死面积、心肌形态学为指标探讨吗啡后处理对再灌注心肌的作用。结果MOR组与IPC组可以降低缺血再灌注损伤引起的心肌酶学增高、显著降低心肌梗死面积（与I／R组比较,P〈0．05）。光学显微镜下I／R组呈现典型的心肌结构病理改变,MOR组和IPC组病理损伤程度较I／R组减轻。结论吗啡后处理可以减轻在体大鼠心肌缺血再灌注损伤,其心肌保护效果与缺血预处理相似。     

缺血预处理联合St.ThomasⅡ心麻痹液对兔未成熟心脏功能和病理学影响

目的：研究缺血预处理（IPC）对兔未成熟心肌缺血再灌注损伤的影响，并探讨其可能机制。方法：利用Langendorff模型灌注幼兔（14－21天）离体心脏。18只幼兔心随机分为2组，每组9只，IPC组经历5min缺血、10min再灌的IPC处理后，使用St.ThomasⅡ心麻痹液（STH）使心脏停跳；对照组只用STH停跳心脏。两组兔心均在生理体温(39℃）下接受45min缺血、40min灌注。观察复灌后的心肌酶释放、心肌能量、心脏功能及病理学变化。结果：与对照组相比，IPC组肌酸磷酸激酶同工酶（CK－MB）漏出量明显减少（P＜0．01），心肌ATP含量以保存（P＜0．05），再灌注末心脏左室发展压（LVDP）显著改善（P＜0．05）；光、电镜显示经过缺血预处理的心肌细胞损伤轻。结论：缺血预处理能明显减轻兔未成熟心肌缺血再灌注损伤，改善再灌注后心脏功能的恢复，其机制可能与保存再灌注后心肌细胞中ATP含量有关。     

苯那普利对大鼠缺血再灌注的影响

目的观察苯那普利对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法32只SD大鼠随机分为3组：假手术组、缺血再灌注组、苯那普利预处理组。大鼠在体结扎冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备心肌缺血再灌注损伤模型,测定血清肌酸激酶（CK）的含量,TTC染色后计算心肌梗死范围（MIS）,TUNEL法检测心肌细胞凋亡并用免疫组化方法测定抑凋亡基因（Bcl-2）和促凋亡基因（Bax）的表达。结果缺血再灌注损伤组较假手术组的CK明显增高,其凋亡指数增多,Bcl-2的蛋白表达减少而Bax的蛋白表达增加。苯那普利预处理组的CK较缺血再灌注组明显降低,其凋亡指数减少,Bcl-2蛋白表达增加而Bax的蛋白表达降低;心肌梗死面积明显减小。结论苯那普利预处理通过抑制心肌细胞的凋亡而对缺血再灌注的心肌起保护作用。     

异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas/Fasl表达的影响*

目的 探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Fas,Fasl表达的影响。方法 取32只日本大耳白幼兔随机分为4组：假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组：结扎 30 min, 再灌注2 h;异氟醚预处理组：缺血前吸入1%异氟醚30 min, 洗脱15 min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组：异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5 mg∕kg后处理同异氟醚预处理组。观察心肌细胞凋亡和Fas,Fasl蛋白表达情况,电镜观察细胞超微结构。结果 异氟醚预处理细胞凋亡明显较处理缺血再灌注组和格列苯脲组少（P<0.05）,异氟醚预处理组Fas,Fasl表达低于缺血再灌注组和格列苯脲组（P<0.05）,电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组。结论 异氟醚能明显降低幼兔缺血再灌注心肌细胞的凋亡,其心肌保护作用与促进K-ATP通道开放有关。     

恒定磁场对大鼠心肌缺血／再灌注损伤和无复流面积的影响

目的：观察恒定磁场干预对大鼠心肌缺血／再灌注损伤和无复流面积的影响．方法：将24只雄性sD大鼠随机分为4组：假手术组、缺血／再灌注组、50mT恒定磁场＋缺血／再灌注组及100mT恒定磁场＋缺血／再灌注组,每组6只．大鼠麻醉开胸,结扎冠状动脉前降支40min,再灌注4h．采用硫黄素染色评估缺血心肌再灌注后的无复流面积,Evan’s蓝和氯化三苯基氮四唑（TTC）染色法测定心肌梗死范围;全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶（CK）的水平,微粒子化学发光法测定血清肌钙蛋白I（cTnI）的水平．结果：50mT及100mT恒定磁场干预组的心肌梗死面积和无复流面积显著小于缺血／再灌注组（P〈0．05）．缺血／再灌注组大鼠血清CK和cTnI的水平与假手术组比较显著升高（P〈0．05）;而不同强度的恒定磁场干预＋缺血／再灌注组血清CK和cTnI的水平与缺血／再灌注组比较显著降低（P〈0．05）．结论：恒定磁场干预可减轻缺血／再灌注所致大鼠心肌的损伤和无复流面积．     

黄芪注射液预处理对兔未成熟心肌保护作用的研究

目的 探讨单纯黄芪预处理对兔未成熟心肌再灌注（I／R）损伤的影响。方法 24只幼兔（14－21d)随机分3组，每组8只，利用Langendorff模型灌注其离体心脏。平稳灌注30min后，向球囊缓慢注入生理盐水，调整至左室舒张末压（LVEDP）为10mmHg(1mmHg=0.133kPa)。对照组继续灌注15min；黄芪预处理组：则用黄芪注射液灌注15min。两组心脏均经历停灌30min（保温，保湿），缺血自动停跳及灌注40min复制全心I／R模型。观察各组的血液动力学，冠脉流出液心肌酶，心肌能量变化，病理学变化及分子生物学改变。结果 黄芪预处理组左心功能，冠脉流量恢复及再灌后心肌组织内ATP含量明显优于对照组，心肌酶值明显低于对照组，心肌细胞线粒体半守量分析显示预处理组线粒体损伤轻于对照组，心肌诱导型一氧化氮合酶iNOS高于对照组。结论 黄芪注射液预处理对兔未成熟心肌有保护作用。     

美托洛尔在大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的抗氧化作用

目的探讨美托洛尔在大鼠心肌缺血-再灌注损伤（ischemia reperfusioninjury，IRI）中的抗氧化作用。方法采用结扎左冠状动脉前降支30min，再灌注120min的方法建立大鼠心肌IRI模型。将24只Wistar大鼠随机分为假手术组、美托洛尔实验组和对照组3组，每组8只。连续监测肢体Ⅱ导联心电图，记录给药前、给药15min、缺血15min、缺血30min及再灌注30min、120min时的心率；测定再灌注末血清丙二醛（mMondiMdehyde，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione pemxidase，GSH—Px）的含量。结果美托洛尔可使再灌注末血清中MDA显著降低（P〈0.05），GSH—Px活性显著升高（P〈0．05）。结论美托洛尔在大鼠心肌IRI中具有抗氧化作用。     

一氧化氮在重复可逆性心肌缺血-再灌注所造成的心肌顿抑时对细胞超微结构的影响

目的：了解一氧化氮(NO)在重复可逆性心肌缺血—再灌注所造成的心肌顿抑时，对心肌细胞超微结构的影响。方法：健康新西兰兔l5只，随机分为3组(每组5只)：第一组为对照组，第二组在静脉内注射NO合成底物L—精氨酸(L—Arg组)，第三组在静脉内注射一氧化氮合酶抑制剂L—硝基—精氨酸(L—NNA组)。兔用戊巴比妥钠静脉注射麻醉后，结扎前降支制成心肌缺血--再灌注模型，用ESR法测定血液中NO含量，记录左心室最大上升速率dp／dt max。将实验动物缺血10min，共三次，第l、2次缺血后再灌注10min，第3次缺血后再灌注120min。取心肌组织，电子透射显微镜观察心肌细胞超微结构。结果：与对照组相比较，L—Arg组NO含量明显增高，dp／dt max下降明显，电镜检查心肌细胞损伤明显，表现在肿胀线粒体数目增多，线粒体肿胀明显，嵴凸模糊，个别肌丝模糊。而L—NNA组NO含量明显减少，dp／dt max下降较轻，电镜检查心肌细胞肿胀线粒体数目减少，线粒体肿胀减轻，肌丝清晰。结论：在心肌缺血再灌注时NO有加重心肌损伤的作用。     

环孢素A对大鼠缺血再灌注心肌嘌呤代谢的影响

目的:研究环孢素A( CsA)对大鼠心肌缺血再灌注时嘌呤代谢的影响及其可能的心肌保护机制.方法:48只大鼠随机分为3组:对照组、缺血再灌注组和药物处理组,每组16只.应用Langendorff离体心脏灌注模型对大鼠离体心脏进行逆行灌注.对照组应用K-B液持续灌注90 min.缺血再灌注组(再灌组):离体心脏逆行灌注平衡10 min,再持续灌注20 min后转变为30 min心脏缺血,之后30 min再灌注.药物处理组(CsA组):离体心脏逆行灌注平衡10 min,用含有0.2 mol/L CsA的K-B液灌注20 min后转变为30 min心脏缺血,之后30 min再灌注.每组取8只心脏进行TTC染色测心肌梗死面积;其余8只于总过程90 min后接取冠状动脉流出液2mL用于嘌呤碱各组分的测定及LDH活性的测定,并将心肌研磨后离心,上清用于测定嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNPase)的活性.结果:与缺血再灌注组相比,CsA组心肌梗死面积及冠脉流出液中LDH活性明显降低,嘌呤释放明显减少,次黄苷和腺苷明显增多,尿酸明显减少.CsA组心肌匀浆液中PNPase活性较再灌注组明显降低.结论:CsA在心肌缺血再灌注过程中对心肌具有保护作用,其机制可能是影响了心肌嘌呤的代谢过程.     

大鼠心肌缺血再灌注模型建立方法的改进

【目的】改进大鼠心肌缺血再灌注动物模型制作方法。【方法】雄性Sprague-Dawley大鼠麻醉开胸后，用310医用单丝线穿过冠状动脉，在结扎线下垫聚乙烯管，结扎缝线缺血30min，剪断缝线再灌注120min。可省却呼吸机。【结果】24只SD大鼠，行单纯冠状动脉结扎术模型组大鼠存活率为10／12，再灌注后模型组存活率为9／12。假手术组存活率为12／12。经过氯化三苯基四氮唑（TIE）染色，梗死心肌和正常心肌组织分界清晰。Nagar Olsen心肌组织特殊染色，光镜下对照组心肌组织染成黄色，而模型组心肌组织可见大片红染的阳性反应区。【结论】采用本方法制作大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型成功率较高，且操作简单、创伤小。     

厄多司坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤及心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨厄多司坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠30只,完全随机设计法分成伪手术组、缺血再灌注组及厄多司坦预处理组,每组10只.采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120...     

七氟醚预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠海马脑区NMDA受体的影响

 目的 观察七氟醚对心肌缺血再灌注损伤大鼠海马脑区N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA受体）亚单位NR1和NR2B mRNA表达的影响。方法 32只老年Wistar大鼠随机分为4组：对照组（A组）、假手术组（B组）、急性心肌缺血再灌注组（C组）和七氟醚预先给药组（D组）。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法定量大鼠海马脑组织NMDA受体亚单位NR1和NR2B的基因表达。结果 与A相比,C、D组NR1亚单位mRNA和NR2B亚单位mRNA基因的表达明显增加,与C相比,D组NR1亚单位 mRAN的表达降低。结论 七氟醚对老年心肌缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用可能与海马脑区NMDA受体NR1基因下调有关。     

参附注射液对大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2、Bax与c-fos基因蛋白表达的影响

目的 观察大鼠急性缺血再灌注损伤与凋亡相关基因Bcl-2、c-fos和Bax蛋白表达的关系及参附注射液(SF)的影响.方法 采用整体缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)模型,35只大鼠分为假手术组(C组)、生理盐水30 min对照组(IR 30)、生理盐水120 min对照组(IR 120)、SF 30 min组(SF 30)和SF 120 min组(SF 120),心肌缺血40 min再灌注30 min或120 min后,用免疫组化法检测Bcl-2、Bax和c-fos在心肌中的表达量.结果 与C组比较,IR组心肌Bcl-2、Bax和c-fos蛋白表达显著升高(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P＜0.01);与IR组比较,SF组Bcl-2蛋白表达显著升高(P＜0.01),Bax和c-fos蛋白表达显著降低(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P＜0.01).结论 SF对IR心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-fos蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比值,从而抑制心肌细胞凋亡有关.     

二苯乙烯苷上调 SIRT1蛋白防治心肌缺血再灌注损伤

目的：探讨二苯乙烯苷（ TSG）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。方法用手术线对大鼠冠状动脉左前降支结扎30 min,松开手术线后再灌注120min建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。将大鼠分为假手术组,缺血再灌注组,缺血再灌注＋TSG小剂量（10 mg/kg）干预组,缺血再灌注＋TSG大剂量（20 mg/kg）干预组。观察TSG对大鼠心脏形态学、心肌酶学和脂质过氧化及沉默信息调节因子2同源体1（SIRT1）蛋白的影响。结果TSG能改善大鼠心肌组织病理改变,显著降低心肌组织丙二醛（ MDA）含量,增强超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH-Px）的活性,并能够增加心脏组织SIRT1蛋白含量,以大剂量组（20 mg/kg）干预组效果明显。结论TSG对鼠心肌缺血再灌注损伤具有防治作用,其机制可能为上调SIRT1蛋白增强心肌的抗氧化能力。     

IL-17和ICAM-1在大鼠急性心肌缺血再灌注后无复流现象中的表达

目的 探讨前炎症因子白介素-17( interelenkin-17,IL-17)与细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在大鼠急性心肌缺血再灌注后无复流现象中的表达.方法 Wistar大鼠12只,随机分成2组:假手术组、损伤组,每组6只.损伤组给予冠状动...     

Protective effect of capsaicin on against myocardial ischemia-reperfusion injury of rat in vivo

OBJECTIVE: To explore whether the capsaicin offers protective effect and possible mechanism on against myocardial ischemia-reperfusion injury of rat in vivo. METHODS: Ligating the left anterior descending coronary artery for 45 min and loosing it for 120 min were performed to establish the rat model of local myocardial ischemia-reperfusion injury in vivo. Forty healthy male rats were randomly divided into control group, capsaicin group, capsazepine group, and S-3144 group. In 10 min and 5 min before ischemia, all drugs for this study were delivered into rat left ventricle (LV) via right carotid artery. Variations of left ventricular function were successively monitored with ECG (electrocardiogram). Levels of creatine kinase MB (CKMB) in serum were determined. Evans-blue and TTC were utilized to identify the area at risk and the infarct size of LV. RESULTS: In all groups, the variables of left ventricular developed pressure (LVDP) significantly decreased after ischemia and reperfusion (P < 0.05). Except capsaicin group, heart rates (HR) of three other groups markedly reduced with reperfusion for 120 min as compared to pre-reperfusion (P < 0.05). In capsaicin group, there were significant increases in HR and LVDP with reperfusion for 120 min when compared with the other three groups (P < 0.05). At the end of experiment, the levels of CKMB and infract size were lower in capsaicin group than in the other three groups (P < 0.05), and there was no statistical significance among the other three groups (P > 0.05). CONCLUSION: Pretreatment with capsaicin can attenuate myocardial ischemia-reperfusion injury, of which the likely mechanism is by stimulating capsaicin receptor or TRPV1 and further activating substance P receptor in the rat in vivo.