中国屠宰场生猪中致病性小肠结肠炎耶尔森菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的 对中国屠宰场生猪中致病性小肠结肠炎耶尔森菌脉冲场凝胶电泳(PFGE)带型分布进行分析,为该菌防控提供依据.方法 从11个省(直辖市、自治区)屠宰场采集猪咽拭子和猪回盲部肠内容物标本分离小肠结肠炎耶尔森菌,同时对致病性菌株进行PFGE分析.结果 采用PFGE分型用NotⅠ酶切后将763株致病性O∶3血清型菌株分为47个型别,其中K6GN11C30021带型是猪中携带的致病菌株优势PFGE型别,占56.49％(431/763);另外1株O∶9血清型菌株为K6GN11C90004型别.所有的屠宰场皆有多种PFGE带型,不同地区除具有各自的优势型别外存在交叉带型.结论 中国屠宰场生猪中致病性小肠结肠炎耶尔森菌PFGE带型多样,具有一定地域性特征.且猪咽部与回盲部肠内容物中能同时携带多种带型的小肠结肠炎耶尔森菌.应警惕猪中携带的小肠结肠炎耶尔森菌通过污染猪肉及其制品以及环境而感染人类,从而对公共卫生和食品安全构成威胁.     

天津蓟县致病性小肠结肠炎耶尔森菌分布调查

目的 了解天津蓟县致病性小肠结肠炎耶尔森菌菌株分布情况.方法 于2006年6月用常规方法从腹泻病患者、家畜的粪便样本中分离小肠结肠炎耶尔森菌,并进行生物化学鉴定、血清分型、相关毒力基因检测以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析.结果 从腹泻病患者和猪粪便中分离到的5株致病性小肠结肠炎耶尔森菌均为O:3血清型.全部携带毒力基因(ail、ystA、radA、virF),其中4株菌经脉冲场凝胶电泳分析属于同一带型(K6GN11C30021).另有1株带型为KGGN11C30026.结论 该县从腹泻病患者与宿主动物中分离到的致病性小肠结肠炎耶尔森菌有4株属于同一个克隆系,初步推断猪为当地小肠结肠炎耶尔森菌感染人群的主要来源.     

1997-2010年宁夏回族自治区小肠结肠炎耶尔森菌致病性的基因特征

目的 了解宁夏回族自治区小肠结肠炎耶尔森菌主要毒力基因分布情况和致病性小肠结肠炎耶尔森菌分子分型特征。方法 于1997-2010年在宁夏回族自治区共分离得到283株小肠结肠炎耶尔森菌,用PCR法分析其黏附侵袭位点基因(ail)、耐热肠毒素A基因（ystA）、ystB、黏附素基因（yadA）、毒力活化因子基因（virF）;应用限制性内切酶Not Ⅰ酶切致病性小肠结肠炎耶尔森菌染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),利用BioNumerics软件进行聚类分析。结果 209株O∶3、O∶9血清型小肠结肠炎耶尔森菌中ail、ystA、yadA、virF毒力基因阳性,ystB为阴性的占97.6％( 204/209);O∶8血清型和未开展血清分型的菌株5种毒力基因全部阴性;11株O∶5血清型有9株5种毒力基因全部阴性。将致病性菌株进行PFGE分型,根据染色体DNA的Not Ⅰ酶切图谱,将29株O∶3血清型分成12个PFGE带型,包含5株以上的优势PFGE带型有2种。180株O∶9血清型菌株分成13个PFGE带型,包含10株以上的优势PFGE带型有4种,各自是从同一地区猪与家鼠、猪与犬、猪与野兔分离。结论 宁夏地区O∶3、O∶9血清型小肠结肠炎耶尔森菌具有致病性,O∶3逐步成为如今的优势血清型;O∶5、O∶8与血清未分型的菌株无致病性。     

安徽省 2012 年小肠结肠炎耶尔森菌分离株特征分析

目的对安徽省2012年小肠结肠炎耶尔森菌分离株进行PFGE分型,分析菌株相关性。方法对22株菌株通过血清凝集实验和生物分型了解菌株生物学特征,采用PFGE对菌株进行分子分型,并分析PFGE与血清型和生物型的关系。结果 22株小肠结肠炎耶尔森菌分为11个生物型别,K6GN11C30021为优势PFGE型。结论 PFGE与血清型和生物型有一定相关性,提示PFGE可用于分析爆发流行和常规监测,追踪传染源。     

高邮市小肠结肠炎耶尔森菌监测结果分析

目的 调查高邮地区小肠结肠炎耶尔森菌的宿主动物分布、菌株分型和毒力相关基因携带状况。方法 对2021年在高邮市采集的腹泻患者粪便、各类畜禽粪便、苍蝇活体和屠宰场生猪组织等样本进行初筛,对阳性菌株开展生化鉴定、血清及生物分型和毒力相关基因荧光PCR鉴定。结果 从1 010份各类样本中累计检出小肠结肠炎耶尔森菌26株,总检出率为2.57%。其中猪粪检出率最高(10.39%),其次为腹泻患者粪便(1.75%)和苍蝇样本(1.67%),不同类型样本的阳性检出率差异有统计学意义(χ²=7.50,P<0.05)。分离菌株的血清型：O:5型12株(46.15%),O:3型6株(23.08%);生物型：3型20株(76.92%),2型4株(15.38%);毒力基因结果显示,19.23%的阳性菌株(5/26)携带ail、ystA、yadA、virF基因,3.85%的阳性菌株(1/26)携带ail、ystA基因。结论 高邮地区存在小肠结肠炎耶尔森菌流行分布,致病性及非致病性菌株同时存在,生物3型/血清O:3型为主要致病型别,猪是小肠结肠炎耶尔森菌致病性菌株最主要的带菌宿主。建议...     

浙江省义乌市鼠类中耶尔森菌调查与分析

目的 调查浙江省义乌市鼠疫疫源地啮齿动物中致病性耶尔森菌的分布情况,并分析菌株的生物学特征.方法 采集鼠粪便进行耶尔森菌分离,对分离获得的菌株进行生物分型、血清分型和毒力基因鉴定.结果 2005-2013年共检测3623份标本,分离到小肠结肠炎耶尔森菌74株,假结核耶尔森菌11株;耶尔森菌的检出率以春季最高(5.72％).68株小肠结肠炎耶尔森菌有生物1A型(55株)、生物3型(1株)2个型别;血清分型O∶5血清型有8株、O∶8血清型有2株;毒力基因检测有29株菌检出stB基因.结论 义乌市鼠疫疫源地内未检出鼠疫菌,但分离出假结核菌和小肠结肠炎菌;在鼠疫监测同时也对其他两种致病性耶尔森菌开展监测和相关研究,对鼠疫的监测有指导意义.     

浙江省部分地区小肠结肠炎耶尔森菌(动物株)分子生物学特征初探

目的：了解浙江省部分地区小肠结肠炎耶尔森菌的血清型别、毒力基因分布等情况。方法：利用常规细菌分离方法从家禽、家畜和鼠类粪便标本中分离小肠结肠炎耶尔森菌，并进行毒力基因检测，同时对血清型O：3、O：5和O：8的菌株进行脉冲场凝胶电泳分析。结果：2004～2005年，从全省各点采集的动物标本中共分离到22株小肠结肠炎耶尔森菌，分布于11个血清型，并以O：8和O：3为主。PCR检测将分离到的22株小肠结肠炎耶尔森菌毒力携带情况分为4型：Ⅰ型（ail^＋、ystA^＋、ystB^-、yadA^＋、virF^＋），Ⅱ型（ail^＋、ystA^＋、ystB^-、yadA^-、virF^-），Ⅲ型（ail^-、ystA^-、ystB^＋、yadA^-、virF^-），Ⅳ型（ail^-、ystA^-、ystB^-、yadA^-、virF^-）。脉冲场凝胶电泳分析，O：3型菌株显示有2种带型，O：5型菌株的带型完全相同，O：8型菌株的带型则存在明显差异。结论：浙江省的从动物分离的小肠结肠炎耶尔森菌以非致病性菌株居多，且存在一定的地区差异。猪是致病性小肠结肠炎耶尔森菌的重要携带者，应警惕致病性小肠结肠炎耶尔森菌通过猪感染人和其它动物以及环境的危险。     

温州市畜肉中小肠结肠炎耶尔森菌的污染现状与病原特征分析

目的 了解2020年—2021年温州市畜肉中小肠结肠炎耶尔森菌的污染现状及病原特征。方法 对2020年—2021年温州市食品安全风险监测中的畜肉样本进行小肠结肠炎耶尔森菌的分离鉴定、血清分型、生物分型、毒力基因检测、耐药性分析和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果 356份样本共检出小肠结肠炎耶尔森菌31株，检出率为8.71%。分离菌株血清型以O:5型为主，生物型以1A型为主。检出1株4/O:3型菌株携带毒力基因ail、ystA、yadA、virF,其余菌型菌株仅携带ystB或不携带任何毒力基因。分离株对头孢西丁、磺胺异恶唑耐药率最高，为32.26%,多重耐药株有4株，占12.90%。31株分离株经PFGE分型，共获得31种带型。结论 小肠结肠炎耶尔森菌是温州市畜肉中的潜在污染源，菌株耐药率处于较低水平但存在多重耐药株，PFGE带型呈多态性分布。     

腹泻病人标本分离小肠结肠炎耶尔森菌及其病原学研究

目的调查本地腹泻病人中小肠结肠炎耶尔森菌的感染现状,开展小肠结肠炎耶尔森菌的病原学研究,为制定相应的防治对策提供科学依据。方法参照中国CDC编《小肠结肠炎耶尔森菌的分离与鉴定手册》制定的检验程序,开展腹泻病人标本病原检测和微生物学研究。结果 2 193份腹泻病人标本中检出小肠结肠炎耶尔森菌40株。毒力基因检测其中O3型菌株的基因分布为ail+、yst A+、yad A+、vir F+、yst B-;PFGE分子分型显示腹泻病人和宿主动物的O3型菌株相似度为96.0%~100.0%。结论本地腹泻病人标本中检出了小肠结肠炎耶尔森菌,冬春季该菌的阳性检出率显著升高;O3型菌株均携带有上述毒力基因,具有典型的致病性特征;PFGE分子分型检测表明腹泻病人O3型菌株感染与宿主动物之间有密切的内在联系。     

2011～2012年赤峰市松山区动物中检出41株小肠结肠炎耶尔森菌

目的了解赤峰市松山区境内鼠类,家畜家禽携带小肠结肠炎耶尔森菌情况,为疾病预防控制工作提供科学依据。方法采集鼠类、家畜家禽的粪便、脏器等样品,进行小肠结肠炎耶尔森菌的分离、培养、鉴定和生物血清分型,并用PCR方法进行毒力因子检测。结果 2011～2012年共检验各类样品412份,检出小肠结肠炎耶尔森菌41株,皆来自猪咽拭子。2011年总检出率为16.02%,猪咽拭子的检出率高达28.28%。41株小肠结肠炎耶尔森菌中,携带了ail,ystA,yadA,virF,rfbc基因的3/O：3生物血清型菌株占95.12%;4/O：4生物血清型菌株占2.32%;其他占2.32%。结论赤峰市松山区境内的猪咽部携带小肠结肠炎耶尔森菌,猪是致病性小肠结肠炎耶尔森菌的重要携带者。     

中国六省致病小肠结肠炎耶尔森菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的 对中国致病小肠结肠炎耶尔森菌分离株进行脉冲场凝胶电泳分析。方法 参照美国疾病预防控制中心PulseNet实验方法对中国6省165株致病小肠结肠炎耶尔森菌进行脉冲场凝胶电泳分析，使用BioNumerics软件进行聚类分析，并按照PulseNet命名原则对带型进行命名。结果 将114株O：3血清型小肠结肠炎耶尔森菌分成25个带型；K6GNllC30012（50株）、K6GNllC30015（19株）及K6GNllC30016（10株）是其主要带型，三个主要带型之间聚类相似性很高。将51株O：9血清型小肠结肠炎耶尔森菌分为14个带型；其中K6GNllC90004（22株）与K6GNllC90010（13株）是其主要带型，K6GNllC90004与K6GNllC90010带型之间有一定的差异。O：3与O：9血清型的主要带型之间有明显的差异。结论 O：3血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于一个克隆系，且在不同地区和年代变异很小；O：9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌可能起源于两个不同的克隆系，且各自有一定的变异。O：3与O：9血清型的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系较远。     

江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌分布特征初步研究

目的了解江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌的分布特点和毒力特征。方法用常规方法从家畜家禽粪便标本中分离小肠结肠炎耶尔森菌，PCR法检测其五种毒力相关基因，同时对国内分离到的O：8血清型菌株进行脉冲场凝胶电泳分析。结果从该地区293份家畜家禽粪便标本中分离到91株小肠结肠炎耶尔森菌，分离率为31．06％。未分离到国内主要流行血清型O：3和O：9，其中有39．57％菌株毒力基因分布特征为：ail^-、ystA^-、ystB^-、yadA^-、virF^-，有60．43％菌株为ail^-、ystA^-、ystB^＋、yadA^-、VirF^-，两株国外引进的强毒菌株具有相同的脉冲图形，与国内分离到的O：8血清型菌株存在显著的差异。结论致病性小肠结肠炎耶尔森菌的分布具有局限性，江苏省南通地区小肠结肠炎耶尔森菌的分布可能以非致病菌为主。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌不同温度下生长预测模型的初步研究

目的研究小肠结肠炎耶尔森氏菌(以下简称耶氏菌)O:3和O:9血清型在增菌液MTSB中关于温度的生长模型。方法用液体稀释法计细菌总量,并应用此模型来预测耶氏菌O:3和O:9血清型在有效的生长温度下的生长速率,世代时间,迟缓期及不同时间的生长菌数.并比较相同条件下耶氏菌O:3与O:9血清型之间生长速率的差异。结果耶氏菌O:3血清型的最低生长温度为-17·8℃,耶氏菌O:9血清型的最低生长温度为-10·3℃,在增菌液MTSB中的生长模型:耶氏菌O:3血清型为M=0·0134(T-255·1866),耶氏菌O:9血清型为M=0·0173(T-262·7457)。结论在4~30℃的温度范围内,它们的生长速率都随着温度的升高而增加,而在4℃到15·7℃之间时,耶氏菌O:3血清型的生长速率大于耶氏菌O:9血清型,在15·7~30℃之间时,则耶氏菌O:9血清型的生长速率大于耶氏菌O:3血清型。     

徐州市小肠结肠耶氏菌的病原性实验研究

目的：研究徐州地区从腹泻病人、家养动物中分离的16株、5种血清型的小肠结肠耶氏菌的病原性。方法：用生化生物分型，自凝性（AA）试验、钙依赖性（CD）试验，PCR检测毒力基因来检验不同菌株的致病性。用ATB Expression自动鉴定系统对致病菌株做药敏试验。结果：仅2株狗源性菌与1株人源性菌为致病菌，他们均为生物3型／血清型O：3，二者耐药模型完全一致。结论：徐州地区，小肠结肠耶氏菌生物3型／血清型O：3是致病菌型，他在狗和人群之间分布关系密切，其他型别菌株可能不致病或潜在致病。     

Low prevalence of yadA-positive Yersinia enterocolitica in sows

Yersinia enterocolitica 4/O:3 is commonly isolated from fattening pigs in Finland, but its prevalence in sows is relatively unknown. The current study determined the prevalence of yadA-positive Y. enterocolitica in sows and fattening pigs with polymerase chain reaction (PCR) and culture methods. The strains were characterized with pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) using NotI DNA-restriction enzyme. Pathogenic Y. enterocolitica was detected in only 14% of sow tonsils compared with 56% of tonsils of fattening pigs. The prevalence varied between seven slaughterhouses from 0% to 30% in sows and from 30% to 87% in fattening pigs. A total of 37 NotI profiles were obtained from 148 Y. enterocolitica 4/O:3 strains isolated from 134 tonsil samples: eight profiles were obtained from 26 sow strains and 34 from 122 fattening pig strains. Two types predominated in both sows and fattening pigs. The prevalence of yadA-positive Y. enterocolitica in fattening pigs increased from 1995 versus 1999; the mean prevalence in five slaughterhouses for the 2 years was 33% and 64%, respectively. Seven NotI profiles, including the two common types, were found both years. In conclusion, pathogenic Y. enterocolitica was detected at a significantly lower rate in sows than in fattening pigs. Moreover, the prevalence of this pathogen in fattening pigs was significantly higher in 1999 than in 1995. Some Y. enterocolitica 4/O:3 strains persisting among slaughter swine were demonstrated to be very stable genetically. This study shows that fattening pigs are an important reservoir of different genotypes of Y. enterocolitica 4/O:3 strains.     

Epidemiological data on pathogenic Yersinia enterocolitica in Southern Germany during 2000-2006

Yersinia enterocolitica is the most common species causing enteric yersiniosis, which is still the third most frequently reported foodborne gastroenteritis in Europe. Y. enterocolitica generally causes sporadic human infections, and outbreaks are rare. The most important infection source of yersiniosis is believed to be contaminated pork and pork products. Data on the prevalence of pathogenic Y. enterocolitica in animals and foodstuffs are very limited and old; thus, more information on the extent and range of the prevalence of this enteropathogen in nonhuman sources is needed. In this work, prevalence of pathogenic Y. enterocolitica in different sources in Bavaria is presented. Further, the antimicrobial resistance of human and nonhuman strains is reported. The highest isolation rate of pathogenic Y. enterocolitica (67%) was found in tonsils of slaughter pigs. No pathogenic strains were isolated from cattle, sheep, turkey, and horses. ail-Positive Y. enterocolitica was detected in dogs (5%), cats (3%), and rodents (3%) by real-time PCR. Pathogenic Y. enterocolitica was isolated only from raw pork, especially from edible offal (51%). Surprisingly, 38% of game was contaminated with this pathogen when the samples were studied with PCR. Additionally, some raw pork sausages and one poultry sample were PCR positive. All pathogenic Y. enterocolitica isolates from nonhuman sources were belonging to bioserotype 4/O:3. Antimicrobial resistance of 60 human and 140 porcine strains of bioserotype 4/O:3 was tested by the agar disc diffusion method to 15 different antimicrobial agents. All Y. enterocolitica 4/O:3 strains were susceptible to most of the tested antibacterial agents.     

Different enteropathogenic Yersinia strains found in wild boars and domestic pigs

Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis strains isolated from wild boars and fattening pigs were characterized and compared with each other. In wild boars, ail-positive Y. enterocolitica strains belonged to bioserotypes 4/O:3 (36%, 5/14), 2/O:9 (29%, 4/14), and 2/O:5,27 (21%, 3/14). Additionally, two ail-positive strains were untypable. Among fattening pigs, the bioserotype 4/O:3 was dominating (91%, 71/78), and bioserotypes 2/O:5,27 (8%, 6/78) and 2/O:9 (1%, 1/78) were rare. inv-positive Y. pseudotuberculosis strains of serotypes O:1 and O:2 were isolated only from wild boars. Antimicrobial resistance patterns between wild boar and fattening pig strains differed. Most of the ail-positive Y. enterocolitica strains carried yst, hreP, and virF genes. Several genotypes of Y. enterocolitica strains were obtained by PFGE using NotI, ApaI, XhoI, and SpeI enzymes. All genotypes of wild boar strains differed from fattening pig strains. Especially strains of bioserotype 4/O:3 were clearly different with all four enzymes. These results show that wild boar strains differed from domestic pig strains. More wild boar strains should be isolated to show that wild boars and domestic pigs are reservoirs for different Y. enterocolitica and Y. pseudotuberculosis strains.     

2018年陕西省感染性腹泻患者中分离沙门菌的病原学特征分析

目的 了解陕西省腹泻监测病例中沙门菌的血清型别及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子型别特点。方法 对2018年陕西省14家哨点医院的临床腹泻患者中分离到的沙门菌进行血清学分析,并用Xba I 酶切进行PFGE电泳分析其分子型别特征。结果 2294份病例标本中检出沙门菌101株,检出率4.4%。沙门菌腹泻病例的高发时间为8月和9月,感染人群以≤3 岁婴幼儿为主,101株沙门菌有9株血清型未定,其余92株可分为8 种血清型,其中血清型为鼠伤寒沙门氏菌检出最高,其次为肠炎沙门氏菌。101株沙门菌经XbaI 酶切,可分为71种PFGE 带型,每种带型包含1～10 株沙门菌,其中鼠伤寒沙门菌共产生42 种带型,肠炎沙门氏菌共产生6种带型。结论 陕西省临床腹泻患者沙门菌血清型和PFGE带型呈现多样性,鼠伤寒沙门氏菌是陕西地区的优势菌。本研究建立了陕西沙门菌PFGE指纹图谱库,积累了沙门菌分子流行病学基线数据,为沙门菌引发疾病的处置和溯源提供了重要依据。