酶法全酯化合成富含EPA/DHA甘油酯工艺研究

以富含EPA/DHA的脂肪酸为底物,采用两步酶法合成富含EPA和DHA的甘油酯。首先,以T1脂肪酶为催化剂催化富含EPA/DHA的脂肪酸和甘油反应;在最优条件为:反应温度40℃,水分添加量为底物混合物的3%、甘油与脂肪酸摩尔比3∶1和酶添加量50 U/g底物混合物时,富含EPA/DHA的脂肪酸的转化率达到62%以上,此时产物中甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯的质量分数分别为10.52%、38.15%、25.64%。将游离酶催化酯化反应产物中的油相回收,利用自制的固定化CALB(LipozymeCALB L固定于环氧树脂ECR8285上)为催化剂,在真空条件下继续催化未反应的脂肪酸与偏甘油酯(甘油单酯和甘油二酯)继续酯化反应12 h,此时产物中甘油三酯、甘油二酯和甘油单酯的质量分数分别达到38.34%、51.02%、10.63%,没有检测到脂肪酸的存在。     

酶法催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油酯

采用国产固定化假丝酵母脂肪酶,催化乙酯型和甘油酯型鱼油酯交换制备富含EPA和DHA的甘油酯型鱼油,得到EPA和DHA总量超过45%的甘油酯。以5g甘油酯型鱼油为反应底物之一,考察了反应温度、时间、酶加量、底物质量比及加水量五个因素对酯交换反应的影响,利用正交实验优化,得到最佳反应条件为:反应温度60℃,反应时间24h,底物质量比为5:4,加酶量为80U,不向反应体系中加入水分。在该条件下得到的甘油酯中EPA和DHA的含量分别为33.40%和13.10%,并且脂肪酶重复利用7次仍能达到工艺目标。      

酶法合成富含DHA、EPA甘油三酯的研究

以甘油和PUFA乙酯为底物,通过酶催化酯交换反应合成富含DHA、EPA的甘油三酯。首先以叔丁醇为溶剂合成甘油酯混合物,优化后的条件为:选择Novozyme 435脂肪酶为催化剂,反应温度50℃,甘油与PUFA乙酯摩尔比1:3,底物在叔丁醇中的质量浓度为200 g/L,酶加量为底物质量的2%,在此条件下反应12 h后PUFA乙酯的转化率可达到51.5%。将在此条件下得到的反应混合物除去叔丁醇,在真空条件下继续反应24 h,PUFA乙酯转化率可达到87.8%。得到的产品混合物甘油酯组成为:甘油三酯67.1%,甘油二酯18.2%,甘油单酯2.1%。     

酶法合成EPA/DHA型卵磷脂

蛋黄卵磷脂和精制深海鱼油在正己烷介质中,lipolase固定化脂肪酶的作用下,通过发生酯交换反应,获得含有ω-3型多不饱和脂肪酸EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)的卵磷脂.研究表明,在正已烷介质(含微量水,V水:V正=1:1000)中,蛋黄卵磷脂和鱼油底物浓度比为1:4,脂肪酶酶活为6.9 U/mL,在45℃恒温水浴中磁力搅拌反应12 h,用气相色谱分析,得到的卵磷脂中EPA和DHA的含量分别为1.40%和5.43%,总含量为6.83%.     

酶法富集小黄鱼内脏鱼油中EPA和DHA甘油酯

目的：以小黄鱼内脏精炼鱼油为原料,通过脂肪酶选择性水解法富集二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）甘油酯和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）甘油酯。方法：采用气相色谱峰面积外标法定量测定EPA和DHA甘油酯总含量。通过单因素和响应面试验,考察反应时间、pH值、反应温度、加酶量等因素对富集效果的影响。结果：确定最佳工艺条件为反应时间4 h、pH 8.0、反应温度30 ℃、加酶量1.0%,在此条件下,EPA和DHA甘油酯总含量为21.65%,且4 个因素对EPA和DHA甘油酯富集的影响依次增强。结论：富集后鱼油理化指标和感官评价均优于精炼鱼油,EPA和DHA甘油酯总含量是富集前的1.74 倍,获得了天然的EPA和DHA甘油酯。     

脂肪酶催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯

采用脂肪酶催化乙酯型鱼油和甘油酯型鱼油进行酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯。对脂肪酶进行了筛选,并确定了两种脂肪酶TLIM和K酶用于后续研究。应用填充床反应器作为反应装置,采用正交试验对影响酯交换反应的几个主要因素条件进行了优化,得到了反应的最佳条件为:以K酶为催化剂,反应温度40℃,加酶量6%,反应时间18 h,底物摩尔比2.0∶1.0。同时,也得到了以TLIM酶为催化剂,获得最高含量EPA和DHA反应的最佳条件。     

Lipozyme~CALB L固定化及催化合成EPA/DHA甘油酯的研究

研究利用树脂对脂肪酶LipozymeCALB L进行固定化,然后将固定化酶用于催化富含二十二碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的脂肪酸乙酯与甘油进行酯交换反应合成甘油酯。在17种常用树脂中,环氧树脂(ECR8285)在缓冲液p H 5、缓冲液离子浓度1 mol/L、酶加量120mg/g(以载体质量计)时,通过共价结合固定化的LipozymeCALB L酶活力最高,可以达到22 967U/g,蛋白质吸附率为91.88%。以ECR8285固定化的LipozymeCALB L催化富含EPA和DHA的脂肪酸乙酯与甘油反应合成甘油酯,在叔丁醇体系中催化PUFA乙酯与甘油反应8 h后,PUFA乙酯的转化率可以达到51.1%;将叔丁醇回收后,在真空状态下继续反应24 h,PUFA乙酯的转化率可以达到91.7%,产物中甘油三酯的含量可以达到70%以上。     

神经网络优化富集EPA和DHA甘油酯的工艺研究

以军曹鱼内脏油为原料,采用脂肪酶OF水解法富集鱼油中EPA和DHA甘油酯,应用神经网络优化其水解工艺参数.结果表明:在缓冲溶液pH 7.0反应体系中,水油质量比3∶1、反应温度40 ～ 45℃和脂肪酶用量1.5％,富集鱼油中DHA与EPA总含量可达32.10％,富集的鱼油色泽亮黄,澄清透明,具有淡的鱼腥味,理化指标达到了SC/T 3502-2000精制鱼油的二级标准.     

脂肪酶水解低值鱼油富集EPA和DHA甘油酯的研究

以从南海盛产低值鱼蛇鲻中提取的鱼油为原料,采用脂肪酶选择性水解法富集鱼油中EPA和DHA,研究结果表明在pH 7的缓冲溶液反应体系中,按照水油质量比4:1加入鱼油,脂肪酶OF添加量为1%,然后充氮气密封,在40℃的恒温水浴中震荡反应16 h后,鱼油中的EPA和DHA总含量达到了34.1%;水解后鱼油的组分主要以甘油二酯为主,含量为63.3%;其次是甘油三酯和甘油一酯,含量分别为34.3%和2.4%.     

鱼油中EPA和DHA的酶法富集工艺研究

利用Sn-1,3特异性脂肪酶对食品级鱼油中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)进行富集,而后利用偏甘油酯脂肪酶除去上述步骤产生的甘油二酯、甘油一酯,后处理得到具有天然属性的精制鱼油。采用单因素实验考察特异性脂肪酶富集EPA和DHA过程中脂肪酶用量、纯化水加入量、水解时间及水解温度对富集EPA和DHA的影响。运用气相色谱分析精制鱼油的脂肪酸组成。结果表明:特异性脂肪酶富集过程的最优工艺条件为在pH 6条件下固定化Sn-1,3特异性脂肪酶用量1%～15%、纯化水加入量1%～10%、水解时间2～6 h、水解温度30～70℃,富集后EPA和DHA总量为40%～60%,产品收率在48%～75%;精制鱼油含有21种主要脂肪酸,其中EPA和DHA含量最多。     

米曲霉脂肪酶催化鱼油酯酯交换制备高含量EPA/DHA甘油酯的研究

利用米曲霉脂肪酶催化甘油酯型鱼油和乙酯型鱼油的酯酯交换反应制备高含量EPA/DHA甘油酯,考察了底物摩尔比、反应温度、酶添加量和摇床转速对酶催化反应的影响,得到了最优酶催化反应条件:甘油酯型鱼油与乙酯型鱼油摩尔比1∶3,酶添加量14%,反应温度70℃,摇床转速150 r/min。在最优的酶催化反应条件下反应18 h,产物甘油酯型鱼油EPA和DHA含量可达到39.72%。在优化条件下对米曲霉WZ007菌丝体重复使用6次,甘油酯型鱼油产品中的EPA和DHA含量仍保持在34.51%。     

酶促鱼油选择性水解制备EPA、DHA甘油酯的研究

研究了假丝酶母脂肪酶催化鱼油选择性水解反应 ,确定了油水比、脂肪酶浓度、反应温度、pH、激活剂、溶剂、反应时间、水解率等因素对反应的影响 ,同时对鱼油水解产物进行了分离和检测 ,使EPA、DHA在甘油酯型产品中含量达到 5 0 %以上     

单辛酸甘油酯的酶法合成

以Novo435固定化脂肪酶为催化剂,在无溶剂条件下催化甘油和辛酸合成单辛酸甘油酯。通过单因素试验确定加酶量、反应温度、反应时间三个因素的取值范围,并用响应面实验设计和分析方法对合成反应条件进行了优化。结果表明,在甘油辛酸摩尔比1:1、反应温度66.8℃、脂肪酶与反应底物质量比0.88%、无水的条件下反应11.5h,辛酸转化率达93.53%,单辛酸甘油酯含量为47.69%。     

酶法富集DHA、EPA的研究进展及产业化展望

DHA、EPA是具有多种生理活性的功能因子,对人体的健康具有重要作用。酶法富集DHA、EPA具有反应条件温和,绿色环保,安全性高的优点,成为近年来的研究热点。本文概述了近年来利用脂肪酶选择性催化DHA、EPA富集的相关研究进展,介绍了DHA专一性脂肪酶、EPA专一性脂肪酶、DHA和EPA专一性酶以及固定化酶技术在分离纯化上的应用,进而对酶法制备DHA、EPA的规模化生产做出展望。     

酶法合成高含量共轭亚油酸甘油酯

选用AB-8大孔弱极性树脂对脂肪酶进行固定化,固定化脂肪酶的活力为210U／g。用此固定化酶催化共轭亚油酸乙酯和大豆油合成富含共轭亚油酸（CLA）的改性大豆油,最佳反应条件为：底物摩尔比（n（CLA乙酯）：n（大豆油））1：0．33,酶加量21U／g,反应温度60℃。放大反应体系,对反应产物中的CLA含量进行检测分析表明,其含量可达37％。     

两步法合成桐油酸缩水甘油酯

研究了两步法合成桐油酸缩水甘油酯的主要反应条件,并用傅里叶变换红外光谱对目标产物进行了鉴定。结果表明:40 g桐油在KOH用量为8.5 g、采用90%甲醇为溶剂反应2 h的条件下,桐油酸钾的收率达到81%;在桐油酸钾与环氧氯丙烷摩尔比1∶4、反应时间4 h的条件下,桐油酸缩水甘油酯的收率可达92%,环氧值为4.7,接近理论环氧值4.8。     

酶法合成sn-2位富含DHA的中长链结构脂北大核心CSCD

采用两步酶法制备sn-2位富含DHA的中长链结构脂。首先,利用固定化脂肪酶Lipozyme 435催化DHA藻油发生醇解反应,溶剂萃取以获得富含DHA的单甘酯,再利用脂肪酶催化单甘酯和癸酸的酯化反应合成sn-2位富含DHA的中长链结构脂,并对中长链结构脂的组成进行分析。结果表明,最优酶法酯化反应条件为真空度0.05 MPa,单甘酯与癸酸摩尔比1∶3,固定化脂肪酶Lipozyme TL IM添加量为底物质量的8%,反应温度25℃,反应时间9 h。在最优条件下,酯化产物中甘油三酯(TAG)含量为96.55%,TAG脂肪酸组成中,DHA占总脂肪酸的40.04%,占sn-2位脂肪酸的72.15%。纯化的产品TAG中中长链结构脂占99.14%,含DHA的中长链结构脂占67.69%。     

酶法合成癸酸甘油酯及其产物分布的研究

以固定化假丝酵母脂肪酶为催化剂,研究了无溶剂体系中甘油和癸酸直接酯化合成癸酸甘油酯的反应条件.考察了反应加酶量,底物摩尔比,温度,甘油含水量,反应过程中脱水方式等因素对癸酸转化率及最终产物分布的影响.结果表明:织物直接吸附假丝酵母发酵液制备的固定化脂肪酶能有效地催化合成癸酸甘油酯.反应的最优条件为:甘油与癸酸的摩尔比为1:1.5,反应温度为40℃,甘油含水量为4%,加酶量为0.25g/g癸酸.在最优反应条件下,癸酸转化率可达到98%.经过处理,固定化脂肪酶可重复使用4次以上.     

差示扫描量热法对DHA、EPA甘油酯的热氧化动力学研究

利用差示扫描量热法(DSC)对DHA和EPA甘油酯的热氧化动力学进行了研究。通过对DSC曲线的分析表明:DHA和EPA甘油酯的酰基甘油组成较复杂,而脂肪酸种类较少。用Ozawa法和Kissinger法计算DHA和EPA甘油酯的热氧化反应动力学参数,两种计算方法得到的动力学参数具有一致性。     

高含量EPA/DHA甘油三酯的制备工艺

以EPA/DHA乙酯和甘油为原料,甲醇钠作为催化剂制备高含量EPA/DHA甘油酯。通过对反应温度、反应时间、甘油用量和催化剂用量的优化,得到制备EPA/DHA甘油三酯的最佳反应条件:温度为120℃,甲醇钠添加量为原料油的0.4%,甘油为原料油的7.0%,反应时间5 h。反应终止后产物中EPA/DHA甘油三酯含量可达47.0%以上,进一步经分子蒸馏精制后,终产物中EPA/DHA甘油三酯的含量高达75.0%以上。