豚鼠螺旋蜗轴动脉SP能神经的结构

目的 观察豚鼠螺旋蜗轴动脉（ＳＭＡ）ＳＰ能神经支配的特点。方法 采用免疫组织化学ＡＢＣ法结合葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－镍染色技术及免疫透射电镜,探讨Ｐ物质（ＳＰ）在ＳＭＡ上的分布特点。结果 ＳＭＡ近端外膜上存在着大量ＳＰ－ＩＲ阳性神经元,在ＳＭＡ远端外膜上可见大量的ＳＰ－ＩＲ阳性神经纤维,相互交错,呈网状结构。结论 ＳＰ的耳蜗血管的调节过程中可能起着重要作用。     

心钠素在豚鼠耳蜗微血管的分布

目的:观察在豚鼠耳蜗微血管中心钠素(ANP)免疫反应产物的分布,为研究ANP在豚鼠耳蜗微循环中的作用提供形态学基础.方法:采用免疫组织化学ABC法检测ANP在正常豚鼠耳蜗微血管中的分布特征.结果:在耳蜗1～4转的血管纹、蜗轴螺旋动脉主干及底转分支均发现有ANP反应阳性产物;蜗轴螺旋动脉在2～4转的分支为阴性.结论:ANP在内耳微循环的血流量调节方面可能具有重要作用,其分布特点与功能密切相关.     

豚鼠耳蜗核SP阳性神经元向下丘的投射-HRP逆行追踪与免疫组化双标

目的 研究豚鼠耳蜗核P物质（SP）免疫反应阳性产物的分布特点及SP标记神经元向下丘投射方式。方法 采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行追踪及免疫组织化学技术。结果 SP免疫反应（SP－IR）阳性的纤维和终末主要分布在耳蜗背侧核,而SP－IR阳性神经元主要分布在耳蜗腹侧核,在腹侧核尚可见SP阳性终末包绕SP阳性胸体形成环形结构,一侧下丘中央核注入HRP后,对侧耳蜗核HRP标记细胞分布于耳蜗前腹核及背侧核,耳蜗后腹核呈阴性反应。同侧耳蜗后腹核HRP标记神经元数量也较少,在对侧耳蜗前腹核,HRP－SP双标神经元约占标记细胞的44％,SP单标细胞占标记细胞的50％,HRP单标细胞占6％。耳蜗背侧核内侧也可见少量的双标细胞。结论 SP是耳蜗核上行投射神经元的递质或调质。     

豚鼠耳蜗核内γ－氨基丁酸与谷氨酸免疫反应阳性结构的观察

目的：研究豚鼠耳蜗核γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫反应阳性结构的分布及与谷氨酸（Ｇｌｕ）阳性神经元的关系．方法：采用免疫组化ＡＢＣ和ＰＡＰ双标染色技术．结果：ＧＡＢＡ阳性神经元主要分布在耳蜗背侧核的浅层，多呈圆形．根据胞体的直径，可分成大、中、小三类．ＧＡＢＡ免疫反应阳性纤维和终末见于整个耳蜗核．阳性纤维呈网状、较细、无膨体，阳性终末呈点状．在耳蜗腹侧核，ＧＡＢＡ阳性的点状终末常常包绕未标记的神经元胞体，而这些神经元胞体经再次ＰＡＰ法染色，表明为Ｇｌｕ免疫反应阳性神经元．结论：①ＧＡＢＡ是耳蜗核的一种神经递质；②其在耳蜗腹侧核，可能与Ｇｌｕ阳性神经元胞体及近体树突接触，对Ｇｌｕ能神经元可能具有直接的抑制作用．     

豚鼠耳蜗血管纹萎缩与内淋巴电位的实验研究

目的研究血管纹萎缩与内淋巴电位（EP）的关系。方法29只豚鼠（29耳）,在测量了EP后,给予速尿80mg/kg后60min时再次测量内淋巴电位,然后处死动物,解剖出连同血管纹的螺旋韧带,并测量血管纹全长及萎缩部血管纹长度。结果29只豚鼠耳蜗血管纹均存在不同程度的萎缩,平均萎缩长度为4．19mm。血管纹萎缩长度与内淋巴电位值呈负相关（r=-0．479,P〈0．05）,注射速尿60min后EP恢复程度与血管纹萎缩长度呈负相关（r=-0．540,P〈0．05）。结论年轻豚鼠耳蜗血管纹存在不同程度的萎缩,血管纹萎缩长度与EP呈负相关,血管纹萎缩较长者豚鼠可能对速尿耳毒性损害易感性高。     

动脉成形术对血管表皮生长因子受体表达影响的免疫组化研究

目的：观察动脉成形术对血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达的影响,探讨ＥＧＦＲ与再狭窄的关系。方法：于兔右颈总动脉成形术前及术后２４,４８,７２ｈ,７ｄ和１４ｄ,取实验动脉段用免疫组化ＬＳＡＢ法检测ＥＧＦＲ的表达。结果：正常颈总动脉中膜未见ＥＧＦＲ阳性表达;动脉成形术后２４ｈ,中膜部分ＳＭＣ显示ＥＧＦＲ阳性表达;４８和７２ｈ中膜ＥＧＦＲ阳性表达均进一步增加;７和１４ｄ动脉中膜ＥＧＦＲ阳性表达的ＳＭＣ均较７２ｈ显著减少,但新生内膜中增殖的ＳＭＣ均显示大量ＥＧＦＲ阳性表达。阳性染色以胞膜处最明显。结论：动脉成形术使血管ＳＭＣＥＧＦＲ表达显著增加,再狭窄形成过程中ＳＭＣ增殖与ＥＧＦＲ有关。     

椎基底动脉供血不足与交感神经关系的MSCT评价

目的探讨多层螺旋CT（MSCT）在评价椎基底动脉供血不足（VBI）与交感神经关系中的价值。方法2007年4月至2008年4月间就诊的56例行颈部血管CT检查患者,男30例,女26例,年龄34～76岁,平均50．6岁。经I晦床排除有VBI症状者32例纳入第一组;经临床和辅助检查诊断为VBI,排除椎动脉本身疾病且有交感神经症状者24例纳入第二组。所有患者均按预订扫描计划进行平扫、增强和后处理,观察并记录横突孔的径线、面积、相应层面椎动脉、横突孔的面积和比值,结果由两位放射科医师采取双盲法观察。结果①测量了所有患者横突孔的长径、短径、面积和椎动脉面积以及横突孔与椎动脉的面积比值。②用横突孔与椎动脉的面积比值衡量了第二组中有交感神经症状的24例共38个椎动脉狭窄水平的比值,显示均大于正常对照组比值的上限。结论@MSCT能准确的测量横突孔和椎动脉的径线、面积和横突孔与椎动脉的面积比值。②利用横突孔与椎动脉的面积比值能评价交感神经在VBI中的作用。     

肝细胞癌血流灌注与血管内皮生长因子的相关性

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)CT灌注成像参数与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的相关性。方法以拟行外科手术切除的HCC19例为研究对象,术前采用64层螺旋CT扫描仪进行肝脏CT灌注扫描,采用斜率法计算CT灌注参数,包括肝动脉灌注量(hepatic arterial perfusion,HAP)、门静脉灌注量(hepatic portal perfusion,HPP)、总肝灌注量(total liverperfusion,TLP)和肝动脉灌注指数(hepatic arterial perfusionindex,HAPI)。收集外科手术后肿瘤组织标本,采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织VEGF表达情况,分析肿瘤组织血流灌注参数与VEGF的相关性。结果肝癌组织CT灌注参数HAP与VEGF表达显著相关,HPP、TLP和HAPI与VEGF表达无相关性。结论CT灌注成像可用于活体评价肿瘤血管生成。     

环氧化酶-2与血管内皮生长因子在喉癌的表达及意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）与血管内皮生长因子（VEGF）蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达的相关性。方法采用免疫组织化学SP法对76例喉癌组织与15例喉息肉进行COX-2与VEGF蛋白表达的染色，结合相关临床病理特征进行分析。结果COX-2与VEGF蛋白在喉癌组织的阳性表达率分别为51．32％和63．16％，均高于喉息肉（P〈0．01），二者均与喉癌浸润深度、组织分化程度密切相关，浸润越深、分化程度越差，表达越强（P〈0．05）；COX-2与淋巴结转移无明显相关（P〉0．05），VEGF则与淋巴结转移相关（P〈0．01），二者在喉癌组织的表达呈明显正相关（P〈0．05）。结论COX-2与VEGF在喉癌的发展中起重要作用，可能为喉癌的治疗提供新的靶点。     

卵巢上皮性癌中血管内皮生长因子-C和酪氨酸激酶受体B表达与微淋巴管密度的关系

目的：探讨血管内皮生长因子-C(VEGFC)、失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)在卵巢上皮性癌淋巴管形成和淋巴结转移中的作用、与临床病理生物学行为间的关系及两蛋白表达的相关性。方法采用免疫组织化学检测106例原发性卵巢上皮性癌、40例交界性上皮性肿瘤及40例良性上皮性肿瘤组织中VEGF-C和TrkB蛋白的表达,并测定肿瘤组织中微淋巴管密度。结果 VEGF-C在卵巢癌中的表达率为82．1%(87/106),明显高于良性肿瘤组35．0%(14/40)和交界性肿瘤组52．5%(21/40),差异有统计学意义(P<0．05);TrkB在卵巢癌中的表达率为74．5%(79/106),明显高于良性肿瘤组7．5%(3/40)和交界性肿瘤组27．5%(11/40),差异有统计学意义(P<0．05);D2-40标记的瘤内淋巴管密度( MLVD)在卵巢癌组为(14．25±3．57),明显高于良性肿瘤组(8．87±4．46)和交界性肿瘤组(11．74±5．32)(P<0．05)。在卵巢癌组中,VEGF-C和TrkB蛋白的表达呈正相关(r=0．574,P<0．05),VEGF-C、TrkB的表达与瘤组织内MLVD数呈正相关(r分别为0．488,0．510,P<0．05)。在肿瘤分化越低、临床分期越高、脉管内有癌栓及有淋巴结转移的卵巢癌组织中,TrkB和VEGF-C蛋白的阳性率越高,MLVD数越多(P<0．05)。结论 VEGF-C可能与TrkB在卵巢癌的发生发展过程中发挥着协调作用,促进卵巢癌中淋巴管形成及淋巴结的转移,联合检测VEGF-C、TrkB及MLVD可作为判断卵巢癌恶性程度、侵袭、预后的重要指标。     

面神经管法记录豚鼠耳蜗微音器电位的研究

比较圆窗法和面神经管法记录耳蜗微音器电位。方法圆窗法在乳突钻孔,将记录电极向骨孔深部插入;面神经经管法将记录电极经茎乳孔插入面神经管内。结果与圆窗法相比。面神经管法成率高,手术时间短,而波形和波幅无明显差异。     

电刺激大白鼠、豚鼠坐骨神经中枢端引起呼吸和心率的效应分析

以中等强度电刺激大白鼠、豚鼠坐骨神经中枢端,可引起呼吸加深加快及心率加快效应。横断大白鼠颈髓后,呼吸和心率变慢和电刺激大白鼠坐骨神经中枢端没有引起呼吸和心率增快的效应,这显示了呼吸和心血管机能的调节,除需要最基本的延髓呼吸和心血管中枢、大脑皮质、脑干和小脑存在与心血管和呼吸活动有关的神经元参与外,还与脊髓的低级反射中枢有关。以同样电强度刺激豚鼠颈交感干头端,只引起心率加快效应,对呼吸活动几乎无影响。     

纯化内耳组织抗原免疫致豚鼠自身免疫性梅尼埃病的实验研究

目的: 探讨4种纯化的内耳抗原免疫致梅尼埃病样内耳病变的情况,从而了解各抗原的致病性,并明确其在内耳的分布情况.方法: 70只豚鼠随机分成A、B、C、D、E 5组(A组10只,余4组各15只),以豚鼠内耳组织抗原的4种亚组分(相对分子质量依次为28 000、42 000、58 000和68 000)作为抗原,依次免疫B、C、D和E组豚鼠,观察听觉功能、前庭功能、血清特异性抗体水平和内耳形态学的改变,并应用免疫组化方法确定其在耳蜗的分布和表达.结果: 免疫前后A(对照)、B组平均听阈无显著性差异,亦未见明显的内耳病理形态学改变.免疫后B、C、D、E组血清特异性抗体水平显著升高.免疫后B组未发现听损动物,C组3只动物(4耳)、D组4只动物(6耳)、E组4只动物(6耳)出现听损,部分听损耳出现膜迷路积水和螺旋神经节细胞减少.免疫组化显示68 000蛋白抗体主要分布于血管纹,Corti器也有少量分布;28 000蛋白抗体主要分布于螺旋神经节;42 000和58 000蛋白则在螺旋神经节、血管纹和螺旋韧带部位均有分布.结论: 粗制内耳抗原中42 000、58 000和68 000亚组分均能独立诱发自身免疫性梅尼埃病样内耳病变,实验性自身免疫性梅尼埃病的致病内耳抗原组分可能并非一种.     

Tumor blood vessels formation in osteosarcoma: vasculogenesis mimicry

Background Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarooma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. Methods Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarooma were also performed. Results Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicel of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. Conclusion These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry.     

豚鼠圆窗置氯化物后同体及异体耳蜗神经动作电位对照研究

脉鼠５７只，分为同体对照与异体对照两组，暴露圆窗后在圆窗膜上置定量ＮａＣｌ或ＫＣｌ晶体，测试置药后不同时间耳蜗神经动作电位（ＡＰ）。结果，所有置药耳的ＡＰ阈值均升高。同体对照组置ＮａＣｌ的各时间组ＡＰ阈值无统计学差异；异体对照组置ＮａＣｌ耳的各时间组ＡＰ阈值随时间延长逐渐降低，同体对照组中置ＫＣｌ组与置ＮａＣｌ组相比无ＡＰ阈值差异；异体对照的ＫＣｌ组的ＡＰ阈值较ＮａＣｌ组高。结果提示：观察ＡＰ指标时最好采取异体对照设计。     

AKR1B10联合GPC-3在肝细胞癌免疫组化诊断中的应用

目的：探讨AKR1B10和GPC-3联合应用在提高肝细胞癌（HCC）免疫组化诊断敏感性和特异性的价值。方法：制备75例HCC组织芯片作为训练集,进行AKR1B10和GPC-3免疫组化,建立Logistic回归诊断模型,以此构建ROC曲线（受试者工作特征曲线）,利用其AUC(曲线下面积)对单个指标和联合指标的敏感性和特异性进行评估。将Logistic回归诊断模型用于200例HCC的测试集中,检测其有效性。 结果：1.训练集中,AKR1B10和GPC-3的AUC分别为0.773和0.800,联合诊断后的AUC提高至0.931;AKR1B10和GPC-3的敏感性分别为56%和61.3%,特异性均为98.7%,两者联合后的敏感性提高至88%,特异性为97.3%。2.测试集中,AKR1B10联合GPC-3对HCC诊断的敏感性和特异性分别为97%和96.5%。结论：AKR1B10联合GPC-3明显提高了HCC免疫组化诊断的敏感性和特异性,应在常规病理外检中合理组合使用。     

豚鼠形觉剥夺性近视视网膜组织中神经生长因子受体p75NTR和Caspase-3的表达

目的:探讨豚鼠形觉剥夺性近视视网膜神经生长因子受体p75NTR、Caspase-3表达的变化.方法:出生1周的豚鼠30只随机分为2组,正常组10只,实验组20只.实验组右眼为遮盖眼,通过单眼遮盖法建立豚鼠形觉剥夺性近视模型,左眼为自身对照眼,正常对照组取双侧眼球.检影验光检测屈光度,A超测量双眼眼轴长度.免疫组织化学法检测视网膜p75NTR与Caspase-3蛋白的表达,RT-PCR检测视网膜p75NTR mRNA的变化,TUNEL法检测视网膜神经细胞凋亡.结果:实验结束,遮盖眼屈光度加深、眼轴长度延长,可见凋亡细胞核.正常对照眼与自身对照眼屈光度与眼轴长度无明显变化,视网膜外核层及内核层几乎无p75NTR、Caspase-3阳性染色,无凋亡细胞.遮盖眼视网膜可见p75NTR、Caspase-3阳性表达、p75NTR mRNA增加和凋亡细胞.结论:形觉剥夺性近视视网膜p75NTR和Caspase-3的表达增加可能与视网膜神经细胞凋亡有关.