双酚A对大鼠睾丸Leyding细胞的毒性作用

双酚Ａ ,又名 4 二羟基二苯基丙烷 ,属低毒性 ,是制造聚碳酸脂、环氧树脂、聚酚酚树脂及聚氧树脂的重要原料。近年来有报道表明其具有雌激素样作用 ,影响生殖功能[1,2 ] 。睾丸Ｌｅｙｄｉｎｇ细胞是合成和分泌睾酮的细胞 ,并具有高度的调节性 ,本实验在建立睾丸Ｌｅｙｄｉｎｇ细胞离体原代培养的基础上 ,对双酚Ａ的Ｌｅｙｄｉｎｇ细胞毒性进行了初步的探讨。1　材料与方法1 1　实验动物　成年雄性ＳＤ大鼠 ,体重 2 0 0 ｇ左右 ,由中英合资西普尔 /必凯 (ＳＩＰＰＲ ＢＫ)实验动物有限公司提供。1 2　含双酚Ａ培养液的制备　将双酚Ａ与吐温 8…     

PI3K/AKT信号通路与miR-203在食管癌中的研究进展

食管癌是原发食管上皮的恶性肿瘤,发病机制复杂.在食管癌中,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)是参与其中并经常被激活的信号通路之一,其异常激活可促进食管癌的发展.miR-203为小分子非编码RNA,长度为19～22个核苷酸,在多种恶性组织中表达异常.miR-203可通过与靶基因的3'UTR结合,在转录后...     

双酚A对雄性小鼠生殖系统的影响

工业时代的到来,给人类社会带来了高度的物质文明,但也给人类的生存环境带来了种种问题.越来越多的证据表明,存在于环境中一些人工合成的化学物质具有体内雌激素的生物效应,可以干扰鸟类、爬行类以及哺乳类野生动物或实验动物正常的内分泌功能,改变动物在发育和成年阶段胞内信号过程,并由此造成动物的雌雄性别的改变以及畸形等病变,人们称这类物质为环境雌激素、内分泌干扰剂、内分泌活性化合物或分泌干扰化合物等[1] . 环境雌激素是指一类外源性化合物进入机体后,具有干扰体内正常分泌物质的合成、释放、转运、代谢、结合等过程,激活或抑制内分泌系统功能,从而破坏其维持机体稳定性和调控作用的物质[2].在环境污染物中有许多物质具有雌激素活性.世界范围内对有关数据的统计目前尚无准确之论,大约有50～70种[3],主要有农药(如DDT及其代谢产物) 、工业化学物(如非离子表面活性剂和多氯联苯)、人工合成的药用雌激素(如DES)、植物雌激素( 如类异黄酮、玉米赤霉烯酮)和环境污染物(如二NFDA2NFDA3)[4].大量研究表明人和动物接触环境雌激素对健康可产生危害作用.BPA(bisphenol A),又称双酚A,是塑料工业制造聚碳酸脂、环氧树脂、聚酚树脂及聚氧树脂等的重要原料.近年来有报道,表明其具有雌激素样作用,影响生殖功能[5].但是,关于BPA对雌性生殖系统的影响研究较多,而对于雄性生殖系统的影响报道很少.因此,为了解BPA对雄性哺乳类生殖系统的影响及其作用机制 ,我们对染毒小鼠精子数量、活动力及形态,并对睾丸的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 活力、脂质过氧化物(LPO)含量进行了检测.     

丹参酮ⅡA对口腔鳞癌细胞生物学行为及PI3K/AKT信号通路的影响

目的 探究丹参酮ⅡA对口腔鳞状细胞癌(OSCC)SCC15细胞生物学行为和磷脂酰肌醇3激酶/磷酸化蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 将SCC15细胞分为对照组和实验1、2、3、4组,分别加入DMSO和2.5、5、10、20 mg·L^-1丹参酮ⅡA进行处理。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制率;用克隆形成试验检测细胞克隆形成率;用流式细胞仪及Annexin V/PI染色法分析细胞凋亡率;用Transwell试验分析细胞迁移和侵袭能力;用蛋白质印迹法检测细胞磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平。结果 对照组和实验1、2、3、4组细胞克隆形成率分别为(167.71±20.73)%、(113.42±14.60)%、(78.57±15.08)%、(49.14±5.33%)和(22.57±4.43)%;细胞凋亡率分别为(8.43±1.28)%、(17.46±1.65)%、(31.92±5.39)%、(49.98±7.47)%和(83.69±5.94)%;迁移细胞数分别为(151.33±15.36)、(118.67±...     

BPA通过PI3K/AKT通路对细胞增殖、迁移及凋亡的研究进展

<正>双酚A(bisphenol A,BPA)是环境中最常检测到的化学污染物之一,其广泛用于工业和日常用品的生产制造中,包括食品包装、水容器、牙科密封剂和热敏纸^[1-2]。BPA作为一种脂溶性的小分子物质,易经口服途径进入人体消化道,在消化道以简单扩散的方式进入人体血液、组织液以及各个组织器官^[3]。因此,双酚A广泛存在于人类的血清、乳汁、唾液、尿液、卵泡液和脂肪组织中^[4]。此外,BPA还能通过胎盘屏障进入胎儿体内^[5]。在我国,从普通人群采集的血液与尿液样本中,约有50%的血液样本和90%的尿液样本中检测到BPA[6]。BPA作为一种环境雌激素,     

黄芪多糖对黄嘌呤氧化酶诱导的肺癌A549细胞自噬及PI3K/AKT信号通路的影响

目的基于PI3K/AKT信号通路观察黄芪多糖(Astragaluspolysaccharide, APS)对人肺癌A549细胞自噬的影响。方法黄嘌呤氧化酶(XOD)建立自噬模型,分别以APS(100、200、400) mg·L~(-1)浓度及3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)进行干预;CCK-8法、透射电镜及Western blot分别检测APS对人肺癌A549细胞自噬模型增殖、自噬体及自噬标记分子的影响。结果与空白组比较,模型组细胞生长加快,自噬小体数量增多,模型组LC3B及PI3K蛋白表达增高,p62及AKT降低(P<0.05);与模型组比较,APS(200、400) mg·L~(-1)浓度组细胞生长减慢,自噬小体数量减少,LC3B及PI3K蛋白表达下降,p62及AKT显著性增高(P<0.05);与3-MA组比较,APS(200 mg·L~(-1))浓度组LC3B蛋白表达下降(P <0. 05),APS(400 mg·L~(-1))浓度组PI3K显著性下降(P <0. 05)。结论 APS可能通过下调PI3K/AKT信号通路的自噬而发挥抗肿瘤作用。     

小檗碱调节PI3K/AKT/FOXO1/Bim信号通路改善高糖诱导的足细胞损伤

目的探讨小檗碱通过调节PI3K/AKT/FOXO1/Bim信号通路改善高糖诱导的足细胞损伤。方法用指数生长期的足细胞进行实验,实验分为正常对照组、高糖模型组、小檗碱作用组:浓度分别为30、60、90μmol·L^-1。CCK-8法检测细胞的存活率;Annexin V FITC/PI双色标记检测细胞的凋亡率;Transwell小室法考察细胞的迁移能力;Western blot法分析细胞上PI3K、p-AKT、p-FOXO1、Bim和足细胞标志蛋白nephrin、WT-1的表达情况。结果CCK-8检测结果显示,不同浓度的小檗碱对足细胞增殖能力的促进程度不同;An-nexin V FITC/PI双色标记细胞凋亡结果显示,小檗碱对高糖诱导的足细胞凋亡具有抑制作用;Transwell小室实验结果显示,小檗碱对高糖诱导的足细胞迁移具有抑制作用;Western blot的结果得出,小檗碱能明显升高nephrin、WT-1蛋白的表达,降低PI3K、p-AKT、Bim蛋白的表达,明显升高p-FOXO1蛋白的表达。结论小檗碱能缓解高糖诱导足细胞的损伤,其可能的机制与保护足细胞PI3K/AKT/FOXO1/Bim的信号通路有关。     

雷公藤红素对致敏肥大细胞的抑制作用及其中PI3K/AKT/GSK3-β信号通路的影响

目的 研究雷公藤红素对P物质诱导P815肥大细胞致敏脱颗粒的抑制作用和对PI3K/AKT/GSK3-β通路的影响,探讨雷公藤红素对脱颗粒细胞模型抑制作用的机制.方法 P815细胞分为正常组、模型组、雷公藤红素各浓度组.CCK8法测定细胞增殖抑制率,RT-PCR检测雷公藤红素干预前后PI3K/AKT通路Pik3r3、Akt2、Gsk3b mRNA表达水平.结果 雷公藤红素浓度在0～2.0 μm,对P815细胞的增殖抑制率随着浓度升高而升高(P＜0.05),当雷公藤红素浓度＞2.0μm,浓度与细胞增殖抑制率并无明显关系(P＞0.05).雷公藤红素组的Pik3r3、Akt2的mRNA平均光密度值比分别为(0.753±0.637)和(0.378±0.277),与模型组相比,表达降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).雷公藤红素组的Gsk3b的mRNA平均光密度值比为(3.969±3.403),与模型组相比,表达增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 雷公藤红素对P815肥大细胞致敏脱颗粒反应的抑制功能,是通过减弱PI3K/AKT/GSK3-β信号通路的主要靶基因Pik3r3、Akt2的信号介导作用,增加下游促凋亡基因Gsk3β的表达,从而抑制P815细胞的致敏脱颗粒反应.     

Tetrachlorobisphenol A and bisphenol AF induced cell migration by activating PI3K/Akt signaling pathway via G protein-coupled estrogen receptor 1 in SK-BR-3 cells

Different subtypes of breast cancer express positively G protein-coupled estrogen receptor 1 (GPER1). Our previous studies found that tetrachlorobisphenol A (TCBPA) and bisphenol AF (BPAF) significantly promoted SK-BR-3 cell proliferation by activating GPER1-regulated signals. The present study further investigated the effects of TCBPA and BPAF on the migration of SK-BR-3 cells and examined the role of phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B (PI3K/Akt) and its downstream signal targets in this process. We found that low-concentration BPAF and TCBPA markedly accelerated the migration of SK-BR-3 cells and elevated the mRNA levels of target genes associated with PI3K/Akt and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signals. TCBPA- and BPAF-induced upregulation of target genes was significantly reduced by GPER1 inhibitor G15, the PI3K/Akt inhibitor wortmannin (WM), and the epidermal growth factor receptor (EGFR) inhibitor ZD1839 (ZD). G15 and WM also decreased cell migration induced by TCBPA and BPAF. The findings revealed that TCBPA and BPAF promoted SK-BR-3 cell migration ability by activating PI3K/Akt signaling pathway via GPER1-EGFR.     

雷公藤红素通过PI3K/AKT/mTOR信号通路对胃癌MFC细胞增殖和凋亡的影响

目的研究雷公藤红素对胃癌MFC细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响及其对胃癌MFC细胞增殖的抑制和促凋亡作用机制。方法分别设置对照组和雷公藤红素低、中、高剂量(5、10、20 mmol/L)组,采用MTT法检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞增殖的影响;采用流式细胞技术检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞周期的影响及MFC细胞凋亡的情况;Western blotting检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和PI3K、AKT和mTOR蛋白表达的影响;实时定量PCR检测雷公藤红素对胃癌MFC细胞内PI3K、AKT和mTORm RNA表达的影响。结果与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制胃癌MFC细胞的增殖(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著引起MFC细胞G2/M期阻滞(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著促进MFC细胞的凋亡(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制MFC细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白和PI3K、AKT、mTOR蛋白的表达(P0.05),显著促进MFC细胞内促凋亡蛋白Bax的表达(P0.05);与对照组比较,雷公藤红素能够呈剂量相关性地显著抑制MFC细胞内PI3K、AKT和mTORm RNA的表达(P0.05)。结论雷公藤红素能够抑制胃癌MFC细胞的增殖并促进胃癌MFC细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制胃癌MFC细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、AKT、mTOR等蛋白的表达而抑制胃癌MFC细胞的增殖,进而促进胃癌MFC细胞内促凋亡蛋白Bax的表达,同时抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,从而促进胃癌MFC细胞凋亡。     

PI3K/AKT信号通路在心房颤动中的研究进展

心房颤动（房颤）作为最常见的快速性心律失常,目前主要的治疗手段为抗凝、控制心室率、维持窦性心律。然而房颤的发生机制尚未阐明,上述治疗仍具有一定的局限性。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶（AKT）信号转导通路是参与房颤发生发展的重要通路,其可以通过介导心房纤维化、炎症反应、氧化应激、神经内分泌功能调节参与房颤发生发展的病理生理过程。深入研究PI3K/AKT信号转导通路在房颤中的作用,可为房颤的预防、治疗及预后评估提供有价值的指导。     

Homocysteine induces cell cycle G1 arrest in endothelial cells through the PI3K/Akt/FOXO signaling pathway

OBJECTIVE: High levels of homocysteine (Hcy) induce a sustained injury on arterial endothelial cells, which accelerates the development of thrombosis and atherosclerosis. Hcy specifically inhibits the growth of endothelial cells. The present study investigated the signaling pathways underlying this cell-cycle effect. METHODS: Human umbilical venous endothelial cells were treated with Hcy, and/or LY294002, okadaic acid, peroxovanadate (PV), antisense Akt, phosphorylation of Akt and FKHRL1 proteins. p27(kip1) protein levels were measured with Western blotting, and Akt kinase activity and cell cycle were measured with immunoprecipitation and flow cytometry, respectively. RESULTS: We demonstrate that Hcy induces dephosphorylation of Akt and FKHRL1 and upregulates the cyclin-dependent kinase inhibitors p27(kip1) in a time- and dose-dependent manner. Phosphatidylinositol-3 kinase (PI3K) activator PV and phosphatase 2A inhibitor okadaic acid could reverse it, which suggests it was dependent on PI3K activity. Moreover, Hcy induces cell cycle G1 phase arrest prevented by pretreatment with PV and okadaic acid. Transfection with specific antisense oligonucleotides to Akt further proves the observations. CONCLUSIONS: The studies implied that a novel signaling pathway, PI3K/Akt/FOXO, might play an important role in mediating cell cycle G1 arrest in endothelial cells.     

卵巢上皮性癌组织中miR-145与PI3K/AKT信号通路相关性的研究

目的研究miR-145、Akt和p-Akt蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相互关系。方法采用RT-PCR和Western blot检测miR-145、AKT和P-AKT蛋白在卵巢组织中的表达水平,分析miR-145、Akt和p-Akt蛋白三者的相关关系。结果(1)miR-145在正常卵巢、良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);在卵巢上皮性癌中的表达水平与FIGO分期和病理类型无关(P>0.05)。(2)p-Akt在正常卵巢、良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),在卵巢上皮性癌中的表达水平与FIGO分期有关(P<0.05),而与病理类型无关(P>0.05)。(3)miR-145与p-Akt的表达水平在卵巢组织中表达呈负相关(r=-0.492,P=0.001)。结论 miR-145与PI3K/AKT信号通路的活化可能在卵巢上皮性癌的发生及发展中起重要作用,并且二者呈负相关。     

磷脂酰肌醇-3磷酸激酶/AKT/雷帕霉素靶蛋白信号通路参与中枢神经损伤保护与修复的研究进展

中枢神经细胞对各种损伤刺激耐受差,损伤后神经修复困难.因此促进神经保护增强神经再生能力已成为神经治疗关键.磷脂酰肌醇-3磷酸激酶/AKT/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路是调节细胞周期的重要通路,在细胞增殖、生长、分化过程中起中心调控作用,在神经损伤过程中通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路可减少神经细胞死亡,促进神经修复.该文对PI3K/AKT/mTOR信号通路在中枢神经损伤保护作用、修复机制及可能风险作一综述,探讨将PI3K/AKT/mTOR信号通路作为靶点治疗中枢神经疾病.     

PI3K/AKT信号通路在银屑病发病机制中的研究进展

银屑病是一种免疫介导的多因素炎症性皮肤病,以表皮角质形成细胞异常增殖、毛细血管扩张、中性粒细胞浸润为主要病理表现。磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,AKT）信号通路在表皮细胞增殖、细胞自噬、血管生成、脂质代谢等过程中...     

Effects of bisphenol A on gap junctions in HaCaT cells as mediated by the estrogen receptor pathway

Bisphenol A (BPA) is widely used as the raw material for the production of plastics and paper products. People can be exposed to BPA through dermal contact, particularly for cashiers in contact with thermal paper every day. BPA is a known endocrine disruptor that has been shown to be carcinogenic. Many tumors show weak gap junctional intercellular communication (GJIC) function. The aim of this study was to investigate the effects and possible mechanisms of BPA's action on GJIC of human HaCaT skin cells. The results showed that BPA increased cell proliferation rates, prolonged GJIC photobleaching fluorescence recovery times and reduced overall fluorescence recovery rates at 0.01, 0.1 and 1 μm . BPA downregulated connexin (Cx)26 mRNA level at 0.1 μm . Estrogen receptor (ER) antagonist ICI 182 780 at 5 nm partially blocked the above effects of BPA indicating involvement of the ER pathway with BPA exposure. However, BPA did not influence Cx43 mRNA and protein levels. Our immunofluorescence data showed that Cx26 was expressed in the cytoplasm and plasma membrane, and was involved in the formation of gap junctions between adjacent cells, while Cx43 was expressed only in the cytoplasm. Therefore, our data indicate that Cx26 gap junctions may be involved in the GJIC inhibition caused by BPA. In conclusion, our results indicate that BPA can promote human skin cell proliferation, inhibit skin cell GJIC function but not formation and downregulate Cx26 mRNA levels partially through the ER pathway. We hypothesize that BPA can exhibit carcinogenicity by inhibiting GJIC.     

PI3K/Akt信号通路与肝纤维化

PI3K/Akt信号通路为细胞内重要信号传导通路之一,在促进细胞增殖、抑制凋亡的过程中发挥重要作用。PI3K/Akt信号通路与肝纤维化的发生、发展密切相关。通过干预PI3K/Akt信号通路,研究肝纤维化的发病机制和药物治疗是有意义的途径。该文就PI3K/Akt信号通路的构成、转导途径及其在肝纤维化中的作用作一综述。