合成有机载体固定化猪胰脂肪酶性质研究

以丙烯酸（AA）为单体,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺（MBAA）为交联剂,W（乙醇）=95％为致孔剂反相悬浮聚合得到白色珠状聚合物载体材料,通过N-羟基丁二酰亚胺（NHS）在二环己基碳二亚胺（DCC）作用下脱水得到含酯基活化载体,从而在温和条件下以共价法固定化猪胰脂肪酶．研究得到固定化酶的最佳条件是200r／min,40℃固定1h．比较自由酶和固定化酶的最适温度和pH值,自由酶的最适温度为35℃,固定化酶的最适温度为40℃,提高了5℃;自由酶的最适pH值为8．5,固定化酶的最适pH值为9．5,提高了1个pH单位．连续使用5次固定化酶,仍具有75．7％的相对活力,4℃冰箱中贮存2个月活力未见明显下降,具有一定的工业应用价值．     

大孔疏水载体的制备及其在脂肪酶固定化中的应用

以苯乙烯(St)为功能单体,二乙烯基苯(DVB)为交联剂,采用固液联合致孔的方式,制备了疏水多孔载体。将多孔载体用于脂肪酶Candida sp.99-125的固定化,得780U/g的固定化活力。固定化使酶在30～50℃范围内热稳定性得到了明显的提高,最适反应温度提高了5℃,在pH6.0～9.0范围内酶的相对活力有所提高,最适pH不变仍为8.0。固定化酶单次催化油酸和十六醇的酯化率达98%,其操作稳定性好,连续间歇操作15批,酯化率仍可达到50%。     

高吸水树脂固定化脂肪酶的研究

以高吸水树脂为载体,采用物理吸附和戊二醛交联的方法固定化脂肪酶,比较了游离酶和固定化酶的最适pH值、温度、pH稳定性、热稳定性及操作稳定性;研究结果表明,吸附法和交联法固定化酶与游离酶相比催化活性提高了2倍以上,且其pH稳定性、热稳定性均高于游离酶。     

有机溶剂中脂肪酶固定化的研究

研究了在有机溶剂中的脂肪酶的固定化。并确定了固定化脂肪酶的条件,如载体、有机溶剂、初水量等。固定化脂肪酶的回收率达到48.30%且稳定性好,其半衰期为360h.     

地沟油固定化脂肪酶生产生物柴油

研究了地沟油和甲醇在三段式反应器中固定化脂肪酶上合成生物柴油。对地沟油的酸值、皂化值以及水含量进行了检测。考察了进料流速、溶剂、水含量对反映的影响。在40℃，正己烷作溶剂，添加水含量为地沟油质量的20％，每一段反应器中添加的甲醇与地沟油的摩尔比为1：1时，生物柴油产率为94％。     

固定化脂肪酶的动力学研究

以壳聚糖为载体,用物理吸附固定化脂肪酶,对影响固定化过程的各种因素进行了考察,确定了最优条件,并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7．0)稍低于游离酶(pH8．0),最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0．96h)是游离酶(0．32h)的3倍,在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。     

大孔树脂吸附固定化脂肪酶机理研究

目的 探讨大孔树脂吸附固定化脂肪酶机理.方法 选取4种不同树脂(XAD1180,XAD7HP,A568,XAD18),通过氮气低温吸附法对栽酶树脂的孔径分布情况进行分析,对吸附-交联法制备固定化脂肪酶的工艺条件进行考察.结果 XAD1180为最适的固定化载体,其最佳固定化条件为:给酶量1 400～1 600μg/mL,戊二醛浓度为0.05%(体积分数),缓冲液pH7.5,吸附温度30℃,吸附时间10 h.结论 XAD1180树脂为南极假丝酵母脂肪酶理想的吸附固定化栽体.吸附同时用戊二醛交联,可以起一定加固脂肪酶的作用.     

海藻酸钠固定化脂肪酶的制备及性质研究

本文采用海藻酸钠包埋法得到了固定化脂肪酶。通过条件优化得到了最佳固定化条件：海藻酸钠浓度1.5%,CaCl2浓度3%,固定化时间为1h。该固定化脂肪酶连续反应4批之后,酶活保持稳定,显示了较好的催化稳定性。     

磁性复合微球固定化脂肪酶的研究

用壳聚糖和二氧化硅共同包裹Fe3O4纳米粒子制得磁性高分子微球,并以此为载体,以戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,探讨了固定化过程中戊二醛浓度、固定化时间、固定化pH对固定化酶活力的影响.结果表明,固定化脂肪酶的最佳条件:时间为10h,pH为7.5,戊二醛的浓度为8％.同时还对固定化酶与游离酶的最适温度和最适pH作了测定,固定化酶的最适温度为50℃,比游离酶的最适温度为40℃,提高了10℃;固定化酶的最适pH为7.0,与游离酶的最适pH7.5相比,向酸性偏移了0.5.     

超声对固定化脂肪酶生物转化有机硅化合物的促进作用

超声作用可以促进固定化脂肪酶Ｌｉｐｏｚｙｍｅ催化有机介质中有机硅椁与脂肪酸的酯化反应。在超声频率２０ＫＨｚ时,以功率６０Ｗ作用３０秒、间歇３０秒的超声作用较为适宜。经过超声预处理后酶催化有机硅醇与脂肪酸脂化反应速率和转化率提高。对超声作用机理进行了探讨,超声作用对酶催化反应的促进是十分明显的．     

纳米TiO_2固载脂肪酶及其固载界面表征

以3种不同形貌的纳米TiO2为载体固定化脂肪酶,研究载体形貌、酶添加量、pH值、温度和时间对固载酶活性的影响.研究结果表明,纳米线形貌TiO2固定化效果最好,最优固定化条件为加酶量0.25g/25mL溶液、pH 7.0、固载温度40℃、固载时间6.3h.利用SEM、XRD、FT-IR等对固载酶及其界面进行表征,SEM和XRD结果表明,脂肪酶吸附于纳米线TiO2载体表面,且未改变纳米线TiO2的晶型结构;FT-IR表征表明固载酶含有脂肪酶的特征吸收峰;比表面积分析显示固定化后样品的BET明显减小,表明脂肪酶在纳米线TiO2表面进行物理型吸附.     

固定化脂肪酶催化小桐子毛油合成生物柴油

研究了以石油醚提取的小桐子毛油和甲醇为原料,利用固定化Candidasp.99-125脂肪酶催化反应合成生物柴油的可行性。考察了几种因素对酶法催化合成脂肪酸甲酯的影响。结果表明以小桐子毛油的质量为基准,在水含量为10%,溶剂量为2mL/g,脂肪酶量为20%,温度为40℃的条件下,3次流加甲醇,12 h后单批最高产率可达93%。在此条件下固定化酶连续使用14批,产率仍然可保持在70%以上。     

DM-130大孔树脂固定脂肪酶的研究

采用DM-130大孔树脂为载体，对脂肪酶进行了固定化，研究了固定化条件对催化活性的影响，得到了最佳固定化条件：温度为45℃，pH值为8.0，吸附时间为6h，载体与脂肪酶的质量比为30：1。     

固定化脂肪酶催化合成棕榈酸异辛酯的反应器制备研究

开发了填充床式固定化酶反应器合成高档化妆品原料棕榈酸异辛酯的生产工艺，以棕榈酸，异辛醇为原料，使用实验室自制的固定化假丝酵母脂肪酶99-125为催化剂。并对反应器的固定化酶用量，底物浓度，循环流速，填充柱径高比等操作参数以及稳定性进行了研究，反应12h最终的酯化率可达97%，固定化酶使用31批以后，12h酯化率仍然可以达到93%。     

一种新型氧化钛负载膜的制备及其光催化特性研究

利用双层粘接涂膜法在滤布等纤维材料上制作高活性的氧化钛负载膜,考察了氧化钛负载膜的稳定性和光催化活性,选择对环境有害物质雌二醇进行光催化降解,并且在相同条件下与粉末氧化钛悬浮液的光催化效果进行比较.结果表明:双层粘接涂膜法所制备的氧化钛负载膜稳定性高,经过连续48h的往复提拉和在50℃条件下重复洗涤24h,没有发现氧化钛粒子脱落;在360nm、1.5mw/cm2的近紫外光条件下,具有较高的催化效能,在对环境荷尔蒙雌二醇的光催化降解上显示了较强的降解特性;在相同条件下,与粉末氧化钛的降解效果相比没有明显差别.     

以卵清蛋白为载体的固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

以变性的卵清蛋白为载体, 用戊二醛为交联剂固定木瓜蛋白酶. 通过正交实验考察了固定化pH值、 交联剂戊二醛浓度、 交联时间和酶用量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适固定化条件： 5%戊二醛, pH 6.0, 交联时间20 h, 每克载体含酶量12 mg. 对比研究了游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶的性质, 所得到的固定化木瓜蛋白酶最适温度90 ℃, 最适pH 9.0, 米氏常数53.6　mg/mＬ, 其热稳定性及耐热性均较游离酶显著提高.     

Application of ring-opening metathesis polymerization in study of polymer molecular weight-mediated catalytic properties of immobilized lipase

Recently, significant efforts have been devoted into the study of the effect of hydrophobic supports on the catalytic properties of immobilized lipases. It seems that immobilization lipases on hydrophobic supports is a simple and efficient method to improve the catalytic activity of lipases. In this study, the hydrophobic poly(N-propyl-norbornene-exo-2,3-dicarboximide)s with well-controlled molecular weight were synthesized by the living ring-opening metathesis polymerization, and the lipases from Pseudomonas sp. were then immobilized on these hydrophobic polymer supports through the physical adsorption. The immobilized lipases exhibited higher activity and enantioselectivity for the transesterification of 2-octanol than those of free lipases. Furthermore, we investigated the polymer molecular weight-mediated catalytic properties of immobilized lipases. It was found that the catalytic activity and E value of the immobilized lipases increased with the increase of the polymer molecular weight. At the polymeric molecular weight of about 40kDa, the highest E value (58 at 54.2% of conversion, enantiomeric excess = 99%) was reached. After the molecular weight of polymers getting higher than 40 kDa, catalytic activity and E value of the immobilized lipase decreased. Supported by the Stake Key Development Program of Basic Research of China (Grant No.2007CB808000) and National Natural Science Foundation of China (Grant Nos. 50773028, and 20803028).     

响应面法优化洋葱伯克霍尔德菌固定化脂肪酶催化合成生物柴油工艺

以自制的洋葱伯克霍尔德菌固定化脂肪酶为催化剂,在微水相、无溶剂体系中研究了大豆油和甲醇合成生物柴油的工艺。在系统考察了酶用量、醇油比、含水量、反应温度、反应时间、甲醇流加方式等因素对甲酯得率影响的基础上,利用响应面试验设计优化了各主效因子,建立甲酯得率的二次回归方程,获得了最优的工艺条件：加酶量2.4%、加水量7.1%、反应温度40.4℃、反应时间10.7h、 醇油比4.5。在此条件下,实验测得甲酯得率为97.2%,与响应面模型预测值96.9%非常吻合,说明该优化方法有效、可靠。