AG1478对大鼠脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生的影响

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478对大鼠脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生的影响。方法:SD大鼠60只,随机分为对照组,AG1478组和假手术组,各组20只。观察AG1478对大鼠脊髓损伤后磷酸化表皮生长因子受体(pEGFR)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达、髓鞘脱失、神经功能恢复及体重的影响。结果:AG1478组大鼠pEGFR和GFAP的表达较对照组明显减弱(P0.01),损伤区脱髓鞘范围明显较对照组减小(P0.01),BBB评分明显高于对照组(P0.01),体重较对照组增加更明显(P0.05)。结论:AG1478可能通过阻断星形胶质细胞上的EGFR通路抑制胶质增生,促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复。     

表皮生长因子受体抑制剂AG1478对大鼠脊髓损伤后突触再生微环境的影响

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478对脊髓损伤后突触再生微环境的影响。方法:SD大鼠60只随机分为AG1478组、对照组和假手术组。AG1478组和对照组采用重物坠落打击法建立大鼠脊髓损伤模型,假手术组仅暴露硬脊膜,不损伤脊髓;AG1478组在脊髓损伤局部给予AG1478治疗,对照组和假手术均给予二甲基亚砜作对照治疗。于术后14及28 d,观察各组大鼠脊髓损伤后磷酸化表皮生长因子受体(pEGFR)、硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、生长相关蛋白43(GAP-43)的表达;于术后1 d及1、2、4、6、8周,观察各组大鼠神经功能恢复和体重变化的差异。结果:AG1478组pEGFR、CSPGs和GFAP的表达明显低于对照组(P<0.01),而GAP-43的表达明显高于对照组(P<0.01)。AG1478组BBB评分明显高于对照组(P<0.01),且体重较对照组增加更明显(P<0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后局部应用AG1478治疗可明显改善损伤突触再生微环境,促进脊髓损伤神经功能的恢复。     

EGFR在大鼠呼吸机肺损伤中的作用研究

目的研究呼吸机所致肺损伤中表皮生长因子受体(EGFR)的激活作用。方法 24只清洁级雄性SD大鼠按照是否AG1478处理和是否机械通气将其分为DMSO自主呼吸组(n=6)、DMSO机械通气组(n=6)、AG1478 10mg/kg处理自主呼吸组(n=3)、AG1478 50mg/kg处理自主呼吸组(n=3)、AG1478 10mg/kg处理机械通气组(n=3)和AG1478 50mg/kg处理机械通气组(n=3)。20%乌拉坦腹腔注射麻醉大鼠;自主呼吸的大鼠不作处理,机械通气的大鼠接小动物呼吸机行机械通气,机械通气参数设置为潮气量(Vt)20ml/kg,呼吸频率40次/min,吸呼比(I∶E)为1∶2,呼气末正压通气(PEEP)为0,吸入气体为室内空气。皮下切开行股静脉穿刺置管,监测动脉血压、心率等。4h后处死,分别收集肺组织、肺灌洗液标本。结果 AG1478 50mg/kg处理机械通气组与DMSO机械通气组相比蛋白渗漏更低,而且比AG1478 10mg/kg机械通气更低,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞数量分析显示,AG147850mg/kg处理机械通气组与DMSO机械通气组相比中性粒细胞更低,而且比AG1478 10mg/kg处理自主呼吸组更低,差异均有统计学意义(P<0.01);AG1478 50mg/kg处理的大鼠巨噬细胞数量显著升高,均高于其他处理手段的大鼠。同样行机械通气的大鼠,AG1478组的肺血管渗漏水平与DMSO组相比更低。结论呼吸机相关肺损伤中,EGFR路径调节呼吸机诱导的肺损伤和与之相关的炎性反应,EGFR具有活化信号的作用,可调节呼吸机诱导的肺血管渗漏。     

肾细胞癌中survivin基因的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:探讨在肾细胞癌中survivin基因的表达及其与细胞凋亡的关系。方法:应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测41例肾细胞癌中survivin基因的表达与细胞凋亡情况。结果:41例肾细胞癌survivin阳性率为56.1%(23/41),9例正常肾组织survivin无表达,差别有显著意义(P<0.01)。Survivin表达与肾细胞癌病理类型无明显相关(P>0.05),与肾细胞癌病理分期和病理分级明显相关(P<0.05)。Survivin表达与调亡指数呈负相关(n=12,r=-0.58)(P<0.01)。结论:Survivin基因与肾细胞癌病程发展、恶性程度明显相关,对细胞凋亡有抑制作用,在肾癌的发生和发展中起重要作用。     

三氧化二砷对RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的：探讨三氧化二砷对白血病RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法：以不同浓度的三氧化二砷作用于体外培养的RAJI细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及瑞氏染色法观察细胞凋亡，TRAP—PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：三氧化二砷可显著地降低RAJI细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：三氧化二砷能抑制RAJI细胞的生长并诱导细胞发生凋亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

Fas/FasL诱导的细胞凋亡机制及其在肿瘤免疫方面研究的进展

Fas／FasL诱导的细胞凋亡机制是人体细胞自身新陈代谢进程中的一个重要环节，它是人体细胞这个“大家庭”清除衰老细胞的一个重要机制，也是机体的免疫系统清除异常细胞的一个有利武器。近年来的研究发现，Fas／FasL机制在肿瘤免疫逃逸机制中也扮演着重要的角色，因此也就成为了人们研究肿瘤免疫治疗的一个突破口。本文就近几年来在这方面研究的进展作一综述。     

熊果酸诱导Jurkat细胞凋亡及其作用机制的研究

本研究观察熊果酸（ursolicacid,UA）对人T细胞白血病／淋巴瘤细胞（Jurkat）凋亡的影响及其初步作用机制。用不同浓度uA在不同时间处理Jurkat细胞,采用细胞毒性试验（CCK8法）检测细胞增殖情况;应用荧光显微镜及流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量PCR检测PTENmRNA的表达水平。结果表明：uA在10-80μmol／L的浓度范围内能抑制Jurkat细胞的生长,并呈现剂量-时间依赖性;UA40、80μmol／L处理Jurkat细胞24、48h后,出现凋亡细胞,并可见其细胞核呈波纹状或折缝样,荧光染色增强。UA诱导Jurkat细胞凋亡的作用呈浓度依赖性,与同时间对照纽比较差异有统计学差异（P〈0．05）;与同时间对照组相比,UA能够增加PTEN mRNA的表达。结论：UA可以上调PTEN mRNA的表达．并可能通过此机制诱导Jurkat细胞凋亡。     

脐血CIK细胞诱导K562细胞凋亡的作用

我们用ｒｈＩＬ 2、ＣＤ3 单抗和干扰素的不同组合诱导脐血单个核细胞而获得细胞因子活化的杀伤细胞 (ＣＩＫ细胞 ) ,研究其诱导肿瘤细胞凋亡的作用 ,旨在探讨经多种细胞因子适当组合诱导的脐血单个核细胞是否既能提高杀瘤活性又能保留重建造血的功能 ,以期为恶性肿瘤的非手术疗法提供一种更为有效的方法。材料和方法1　材料 :ｒｈＩＬ 2、ＩＦＮ γ、Ｇ ＣＳＦ、ＣＤ3 单抗购自北京邦定生物制品公司 ;ＲＰＭＩ 16 40购自Ｇｉｂｃｏ公司 ;Ｋ5 6 2细胞购自武汉大学典型物培养中心 ;原位细胞凋亡检测试剂盒 (ＰＯＤ)购自德国宝灵曼公司。2　脐…     

RNA干扰靶向抑制EGFR对鼻咽癌细胞凋亡及坏死的影响

目的:观察RNA干扰(RNA interference,RNAi)靶向抑制鼻咽癌CNE2细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达对CNE2细胞辐射诱导的凋亡及坏死的影响.方法:用shRNA-EGFR转染人鼻咽癌细胞系CNE2,应用X射线照射转染EGFRSiRNA前后的细胞,MTT实验比较转染干扰质粒前后照射后细胞增殖变化,Annexin V/PI双标记法检测凋亡及坏死,并进行转染干扰质粒前后照射后凋亡及坏死率的比较.结果:shRNA-EGFR成功转染CNE2细胞.CNE2细胞干扰后照射较干扰前照射增殖减低.CNE2细胞干扰后照射较干扰前照射凋亡及坏死均增加;凋亡所占比例高过坏死.结论:抑制鼻咽癌细胞EGFR表达后,主要是通过提高辐射诱导的凋亡来抑制鼻咽癌细胞增殖.     

表皮生长因子受体和血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:观察表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法:应用免疫组织化学方法观察EGFR和VEGF在59例乳腺癌组织中的表达情况。结果:59例乳腺癌组织中,EGFR阳性率为93.2%(55/59),VEGF染色全部呈阳性(59/59),EGFR表达在乳腺癌组织分级和淋巴结是否转移之间比较差异有显著性(均P<0.05)。PR阳性组中VEGF表达水平较高(P<0.05),EGFR和VEGF两者的表达呈正相关(P<0.05)。结论:EGFR和VEGF在乳腺癌的生物学行为中起着一定的作用,研究两者联合表达有一定的临床意义。     

新型多聚体微泡携带舒尼替尼抑制人肾癌GRC-1细胞生长及促凋亡的实验研究

目的 观察新型多聚体微泡携带舒尼替尼对人肾癌GRC-1细胞生长及凋亡的影响.方法 将体外培养的人肾癌GRC-1细胞随机分为6组:空白对照组、单纯微泡组、单纯脂质体组、舒尼替尼组、新型多聚体微泡载舒尼替尼不联合超声组、新型多聚体微泡载舒尼替尼联合超声组.MTT法观察不同处理组细胞生存率,Sigma-FITC荧光染色及透射电镜检测细胞凋亡.结果 新型多聚体微泡载舒尼替尼联合超声组对人肾癌GRC-1细胞的生长抑制及促进凋亡作用强于其他处理组及对照组.结论 新型多聚体微泡携带舒尼替尼在超声作用下对人肾癌GRC-1细胞生长有明显抑制作用,并诱导细胞凋亡.     

非小细胞肺癌患者血浆表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义

目的 探讨表皮生长因子受体基因（EGFR）在多种肺部肿瘤中的突变情况及其临床意义.方法 对2006年6月至2012年6月入住我院的60例肺部肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法对患者血浆游离核酸EGFR基因外显子-19缺失以及外显子-21 L858R发生突变.对血浆EGFR基因突变与患者的性别、吸烟史、TNM分期、病理类型以及吉非替尼治疗客观有效率与疾病无进展等之间的关系加以分析.结果 （1）本组60例患者血浆标本共检测出EGFR基因发生突变数为29例,突变率为48.3％,且血浆EGFR基因突变多发生于肺腺癌患者中（P＜0.01）;（2）血浆中EGFR水平与肺部良性病变EGFR水平存在统计学差异（P＜0.01）,且肺鳞癌、肺腺鳞癌患者血浆中的EGFR水平与肺腺癌血浆中的EGFR存在统计学差异（P＜0.05）;（3）在本组34例接受吉非替尼治疗的患者之中,血浆EGFR基因突变呈阳性的患者的客观有效率与中位疾病无进展生存期均要明显优于血浆EGFR 的基因突变阴性患者（P＜0.01）.结论 EGFR基因在多种肺部肿瘤中的突变率接近50％,且血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地对EGFR基因出现突变的情况进行检测,且基因突变检测呈阳性患者对吉非替尼的反应率要显著地高于野生型患者.     

两种细胞因子受体在胰腺癌中的表达及临床应用价值

目的探讨胰腺癌组织中表皮生长因子受体（EGFR）和肝细胞生长因子受体（Met）基因和蛋白的表达情况，及其与胰腺癌临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化法检测78例胰腺癌组织和23例正常胰腺组织中EGFR和Met蛋白的表达情况，采用实时定量聚合酶链反应（RT-RCR）法检测 EGFR和Met-DNA的相对拷贝数。结果78例胰腺癌组织中，EGFR和Met蛋白的阳性表达率明显高于正常胰腺组织，差异均有统计学意义（ P＜0．05）。肿瘤直径大于4 cm患者、胰腺癌组织高中分化患者、出现远处转移患者、淋巴转移患者、肠系膜上血管侵犯患者、T N M分期为Ⅲ和Ⅳ期患者中EG FR和M et蛋白的表达均明显高于肿瘤直径小于或等于4 cm患者，胰腺癌组织低分化患者，未出现远处转移患者、未有淋巴转移患者、未出现肠系膜上血管侵犯患者、TNM 分期为Ⅰ和Ⅱ期患者，差异具有统计学意义（P＜0．05）。胰腺癌患者中，EGFR和Met-DNA 相对拷贝数均明显高于正常胰腺组织中EGFR和Met-DNA相对拷贝数，差异具有统计学意义（P＜0．05）。高表达EGFR和Met胰腺癌患者的平均生存时间均显著低于Met及EGFR低表达患者，差异具有统计学意义（P＜0．05）。Met和EGFR均高表达的患者的平均生存时间较Met或 EGFR单一高表达者的短，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论 EGFR和M et的表达与胰腺癌的临床病理相关指标密切相关，对二者的分析研究有助于对胰腺癌患者的预后作出预测，并对化疗药物新靶点筛选提供理论依据。     

表皮生长因子受体靶向治疗分子影像研究进展

表皮生长因子受体（EGFR）靶向治疗癌症需要准确评估肿瘤EGFR表达。分子影像技术以分子探针与细胞特定靶分子结合，通过PET/CT检测技术获取图像，可无创、准确、重复地实时评价靶分子表达。本文围绕PET各类EGFR分子探针研究进展进行综述。     

喉癌组织表皮生长因子受体表达的定位和定量研究

目的 为了阐明表皮生长因了受体（ＥＧＦＲ）在喉癌组织中表达的形态学定位及其表达量与非癌变组织的差别。方法 运用免疫组化Ｓ－Ｐ染色技术检测４５例喉癌和２１例声带息肉组织中ＥＧＦＲ的表达情况。对其中２１例喉癌和癌旁正常喉粘膜及１０例声带息肉采用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）进行ＥＧＦＲ－ｍＲＮＡ定量分析。结果 ＥＧＦＲ阳性的棕色颗粒主要定位于细胞膜,呈阳性着色的癌细胞弥漫性分布在喉癌组织中;而在     

骨髓增生异常综合征表皮生长因子受体的表达及其与细胞凋亡的关系

目的　探索骨髓增生异常综合征 (MDS)造血细胞中表皮生长因子受体 (EGFR)表达及其与细胞凋亡的关系。方法　取 18例MDS患者骨髓有核细胞经离心涂片机制片 ,用免疫酶标记方法(碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶系统 ,APAAP)及TdT介导的dUTP缺口末端 (荧光素 )标记 (TUNEL)法先后在同一标本上检测EGFR表达和凋亡信号。 9名正常人骨髓作对照。另外 ,18例MDS中有 15例、9名正常人中有 6名经流式细胞仪分选CD3 4+细胞并制备涂片后按上述方法进行EGFR和凋亡检测 ,并分析两者间的关系。结果　①MDS骨髓细胞EGFR表达 [(38.6± 2 4.6 ) %]高于正常对照 [(18.1±14 0 ) %](P <0 .0 5 ) ;②MDS细胞凋亡主要发生在EGFR阴性细胞 (16 .1%) ,EGFR阳性细胞中凋亡细胞仅占 1.4%(P <0 .0 1) ,EGFR表达与细胞凋亡呈负相关 (r =- 0 .70 1;tr=3.6 0 ;P <0 .0 1) ;③CD3 4+细胞EGFR表达阳性率RAEB RAEB t CMML组高于RA RAS组 ,分别为 (2 0 .6± 2 7.9) %和 (8.9±11 8) %,但差异无显著性 ,细胞凋亡率RAEB RAEB t CMML组低于RA RAS组 ,分别为 (18.2± 12 5 ) %和 (4 5 .2± 2 0 .5 ) %(P <0 .0 5 )。结论　MDS造血细胞过度表达EGFR。EGFR表达增高可能预示MDS的恶性增殖倾向并通过某种途径抑制细胞凋亡。因此抗EGFR治疗有希望成为治疗MDS     

表皮生长因子受体活化与胰腺癌细胞解离关系的实验研究

目的 明确表皮生长因子受体(EGFR)活化参与胰腺癌细胞解离调节的分子机制.方法 通过免疫荧光法检测仓鼠高转移株(PC-1.0)和低转移株(PC-1)胰腺癌细胞中EGFR、活化(磷酸化)EGFR (p-EGFR)、活化(磷酸化)丝裂原活化蛋白激酶激酶2 (p-MEK1/2)及活化(磷酸化)细胞外信号调节激酶1/2 (p-ERK1/2)的表达变化及其与胰腺癌细胞解离状态变化的关系.结果 胰腺癌细胞解离因子(DF)明显诱导低转移株胰腺癌细胞(PC-1)中EGFR、p-EGFR、p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达,同时诱导其细胞克隆解离.相反,AG1478(EGFR活化抑制剂)明显抑制高转移株胰腺癌细胞(PC-1.0)中EGFR、p-EGFR、p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达,同时诱导PC-1.0细胞聚集成细胞克隆.结论 表皮生长因子受体活化后激活MEK/ERK信号通路,从而参与胰腺癌细胞解离的调节.     

表皮生长因子受体在黑色素瘤紫杉醇耐药性中的机制研究

目的探究紫杉醇对黑色素瘤的作用机制及表皮生长因子受体（EGFR）信号通路在调节黑色素瘤侵袭与转移中的作用,揭示该信号通路与紫杉醇耐药的关系及相关机制。 方法以EGFR高表达的恶性黑色素瘤A375细胞为研究对象,采用流式细胞术、细胞迁移实验、MTT法和蛋白质印迹法,研究紫杉醇及表皮生长因子（EGF）通过EGFR信号通路对A375细胞凋亡、增殖和迁移的影响。 结果（1）细胞凋亡：紫杉醇诱导的A375细胞凋亡随浓度升高而增强（P＜0.001）,同时紫杉醇（0.1 μmol/L）抑制Bcl-2并增加了Bax的表达（P＜0.01）;EGFR抑制剂AG1478可明显增加A375细胞凋亡并增强紫杉醇的诱导效果及对Bcl-2和Bax的影响（P＜0.001）;EGF单独处理对A375细胞凋亡无明显影响,但其可抑制紫杉醇诱导的细胞凋亡（P＜0.05）及对Bcl-2和Bax的影响（P＜0.001）。（2）细胞增殖：紫杉醇（0.1 μmol/L）可显著抑制A375细胞增殖（P＜0.001）且该作用可被AG1478进一步增强但被EGF减弱（P＜0.001）。（3）细胞迁移：紫杉醇（0.1 μmol/L）可显著抑制A375细胞的迁移（P＜0.001）,该抑制作用可被AG1478进一步增强但被EGF减弱（P＜0.001）。 结论紫杉醇能够降低Bcl-2并增加Bax表达,从而诱导黑色素瘤A375细胞的凋亡并抑制其增殖和迁移,而这些抑制作用可被EGF激活的EGFR通路减弱。     

表皮细胞生长因子及其受体在难愈性溃疡组织中的表达特征

目的 :探讨表皮细胞生长因子 (EGF)及其受体 (EGFR)在正常皮肤、溃疡边缘和溃疡组织中的分布、表达特征及其与溃疡形成的关系。方法 :采用常规病理技术和免疫组织化学方法鉴定这两种蛋白在 8例难治性皮肤溃疡患者 8份不同类型的皮肤溃疡组织及其对应溃疡边缘和周围正常皮肤组织中的定位及表达量的变化规律。结果 :在正常皮肤中 ,EGF主要存在于表皮细胞、真皮成纤维细胞、毛囊上皮细胞和内皮细胞的胞浆和胞外基质中 ;而 EGFR的阳性信号则分布于这些细胞的细胞膜和胞浆中。从正常皮肤经溃疡边缘到溃疡中心 ,EGF及其受体的蛋白表达呈降低趋势 ,在溃疡组织中 ,EGF和 EGFR呈弱阳性表达 ,两种蛋白的阳性表达率分别降低至正常皮肤的 (7.1± 5 .2 ) %和 (8.8± 5 .5 ) % ,呈非常显著性差异 (P均 <0 .0 1)。结论 :溃疡创面难愈性修复可能与 EGF及其受体蛋白表达下降 ,细胞因子与受体结合发生障碍 ,修复信号不能正常传递有关。