黄柏炮制前后生物碱和柠檬苦素类成分的变化研究

目的分析黄柏在不同温度下进行模拟炮制后,不同炮制品中主要化学成分的变化情况,为解析黄柏不同炮制品的科学内涵提供参考依据。方法采用高效液相色谱法检测黄柏不同炮制品中生物碱类成分小檗碱、小檗红碱、黄柏碱、药根碱、巴马汀和柠檬苦素类成分黄柏内酯、黄柏酮。生物碱类成分检测的色谱条件为Ecosil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.1%磷酸水(50∶50)(每100 m L 0.1%磷酸水加十二烷基硫酸钠0.4 g);检测波长:284 nm;体积流量:1m L/min;柱温:35℃;进样量:3μL。柠檬苦素类成分检测的色谱条件为Ecosil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水–磷酸(45∶55∶0.2);检测波长:210 nm;体积流量:1 m L/min;柱温:35℃;进样量:10μL。结果直接烘制品、水润烘制品、酒润烘制品、盐水润烘制品在最佳炮制温度160℃下,总生物碱的质量分数分别为3.009 6%、2.993 1%、3.989 6%、4.537 9%,其中酒润烘制品和盐水润烘制品均较生品3.528 2%高,提示黄柏经辅料炮制后有利于生物碱类成分的溶出,且增加溶出率的是辅料盐和酒,而非水。当炮制温度达到160℃以上时,在相应炮制温度下的直接烘制品和水润烘制品中柠檬苦素类成分质量分数未见明显差异,酒润烘制品和盐水润烘制品随着温度的升高其质量分数相差较大,提示水对黄柏炮制过程中的柠檬苦素类成分基本没有影响,酒、盐炮制具有影响。结论黄柏经炮制后生物碱类和柠檬苦素类成分会发生量变和质变,辅料和温度对其成分的变化有直接的影响,本研究可为黄柏炮制后药性发生改变与其化学成分的变化具有相关性提供参考和依据。     

关黄柏的1H-NMR指纹图谱研究

目的 建立关黄柏的1 H-NMR指纹图谱,探索其质量控制的新方法.方法 运用核磁共振氢谱技术,对关黄柏总提取物、总生物碱提取物和总柠檬苦素提取物的指纹图谱进行对比分析研究.结果 关黄柏总提取物的1 H-NMR指纹图谱主要显示小檗碱、巴马汀的特征共振信号;关黄柏总生物碱提取物的1H-NMR指纹图谱主要显示小檗碱、巴马汀和黄柏碱的特征共振信号;关黄柏总柠檬苦素提取物的1 H-NMR指纹图谱主要显示黄柏酮、黄柏内酯的特征共振信号;图谱能够很好的表达出主要成分的特征信号.结论 1H-NMR指纹图谱可以作为关黄柏指纹图谱研究的辅助方法以控制中药质量.     

吴茱萸不同炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素含量测定

目的:考察不同炮制方法及炮制前后吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的含量变化情况。方法:采用高效液相色谱法,Hypersil ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-水-四氢呋喃-乙酸（41:59:1:0.2）;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长:225 nm;柱温:25℃。结果:吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素进样量分别在0.156～3.120μg（r=0.999 6,n=6）、0.116～2.320μg（r=1.000 0,n=6）、0.620～12.400μg（r=0.999 1,n=6）范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为97.2%（RSD=1.33%）、97.1%（RSD=1.56%）、97.3%（RSD=1.52%）。结论:不同炮制方法吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素含量不同,砂烫法优于其他炮制方法。     

基于双波长融合HPLC图谱的银屑病外用方中7种活性成分定量分析

目的:测定银屑病外用方中7个主要活性成分(新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷、柠檬苦素)含量。方法:采用Waters Xbrige BEH C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3.5μm),以水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～5 min, 17%B;5～10 min, 17%B→20%B;10～15 min, 20%B;15～25 min, 20%B→100%B),流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃,进样量5μL,检测波长为292 nm(0～19 min,新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷)、210 nm(19～25 min,柠檬苦素),使用MATLAB软件编程,对CSV格式数据进行双波长融合。结果:新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和柠檬苦素线性范围分别为39.06～1 250μg·mL^-1(r=0.999 9)、26.25～840μg·mL^-1(r=0.999 7)、18.64～59...     

HPLC程序波长法同时测定黄连解毒汤中栀子苷和4种黄酮类成分的含量

目的:建立一种同时检测黄连解毒汤中栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的 HPLC 方法。方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-5 mmol·L~(-1)磷酸二氢钠溶液(含0.05%磷酸,pH 3.0)(B)为流动相,线性梯度洗脱(0～8.5 min,86.5%B;8.5～17.0 min,86.5%B→80%B;17～30 min,80%B;30～40 min,80%B→60%B;40～51 min,60%B→52%B;51～55 min,52%B→42%B;55～60 min,42%B→86.5%B;60～65 min,86.5%B),流速1.0 mL·min~(-1),程序可变波长紫外检测(0～15 min,238 nm;15～50 min,276 nm)。结果:在58 min 内黄连解毒汤中栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素5种成分被完全分离;回归方程显示5种成分的峰面积与其浓度呈良好的线性;5种成分的加样叫收率(n=15)分别为102.2%,97.56%,98.61%,97.85%,98.41%;RSD 小于5.0%。结论:利用程序可变波长检测,建立了一种可靠的同时测定黄连解毒汤中5种标志性成分含量的 HPLC 方法。     

不同炮制方法对中药延胡索中有效成分含量的影响

目的:比较醋炙、醋煮、酒炙、醋烘等炮制方法对延胡索中有效成分含量的影响.方法:将延胡索生品分别经醋炙、醋煮、醋烘、酒炙后,以水超声法对不同炮制品提取,高效液相色谱法测定去氢紫堇碱、延胡索乙素成分的含量,乙腈:0.1%磷酸溶液=72:28作为试验的流动相,色谱柱AgilentC18色谱柱,柱温为室温,检测波长为282nm.结果:延胡索经不同炮制后生物碱去氢紫堇碱含量均有所升高,醋烘、醋炙、酒炙延胡索中延胡索乙素的含量有所上升,差异有统计学意义(P<0.05).结论:高效液相色谱法测定中药延胡索不同炮制品中的2种有效成分,操作步骤简单、重复性好,根据药材的治疗需要,采用醋烘、醋炙、酒炙等炮制方法可以增加延胡索有效成分的含量.     

炮制对黄柏中3种生物碱含量的影响

目的:考察炮制对黄柏中3种生物碱含量的影响。方法:选用高效液相色谱(HPLC)法测定3种炮制(酒炙、盐炙和炒炭)品中3种黄柏生物碱的含量。色谱柱为迪马C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(48∶52,每100mL含十二烷基磺酸钠0.1g),检测波长为265nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为室温,进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱、盐酸巴马汀和盐酸药根碱含量在炮制后普遍降低,以炒炭最为显著;也有个别特例。结论:黄柏在炮制后(酒炙品、盐炙品)仍然可以选择3种生物碱作为质量控制的指标。本方法简单、快速、准确,适用于同时测定黄柏炮制品中3种生物碱的含量。     

香薷HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析

目的:建立香薷的HPLC指纹图谱及其咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚7个成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0～17 min, 12%B→20%B;17～30 min, 20%B→30%B;30～40 min, 30%B→45%B;40～55 min, 45%B→54%B),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280、330 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:建立了香薷HPLC指纹图谱，共确定了14个共有峰，并指认其中5个共有峰，分别为咖啡酸(5号峰)、迷迭香酸(10号峰)、黄芩素-7-甲醚(12号峰)、香荆芥酚(13号峰)、麝香草酚(14号峰),17批香薷样品的相似度均>0.910;对17批药材中指认的7个成分进行含量测定，其质量浓度分别在1.04～52.0μg·mL^-1(r=0.999 3,n=5)、6.0～300.0μg·...     

反相高效液相色谱法同时测定五味香连丸中10种成分含量

目的 建立同时测定五味香连丸中盐酸小檗碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、木香烃内酯、去氢木香内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、芍药苷10种成分含量的反相高效液相色谱法。方法 色谱柱为Waters SunFire C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为含0.02%三乙胺的0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH至3.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为225 nm,进样量为10μL。结果 盐酸小檗碱、黄连碱、巴马汀、延胡索乙素、木香烃内酯、去氢木香内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素、芍药苷的质量浓度分别在6.852～51.39μg/mL、2.956～22.17μg/mL、2.918～21.88μg/mL、4.643～34.82μg/mL、4.871～36.53μg/mL、4.007～30.05μg/mL、4.519～33.89μg/mL、4.482～33.62μg/mL、2.724～20.43μg/mL、2.809～21.07μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.999 2,n=6);定量...     

双标线性校正法用于延胡索中5个生物碱的定性分析

目的:建立延胡索中巴马汀、小檗碱、脱氢延胡索碱、延胡索乙素和延胡索甲素5个生物碱的高效液相色谱(HPLC)方法,考察双标线性校正(LCTRS)法对其色谱峰定性分析的可行性。方法:采用HPLC法,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸水溶液(用三乙胺调pH 6.0)为流动相B,梯度洗脱(0～23 min, 20%A;23～35 min, 20%A→30%A;35～50 min, 30%A→80%A),流速为1.0 mL·min^-1,柱温为35℃,检测波长为280 nm,进样量为5μL;测定延胡索中5个生物碱在20根不同品牌和型号C₁₈色谱柱的实际保留时间,以巴马汀和延胡索甲素2个成分作为双标化合物,使用双标线性校正法定位各成分色谱峰,并用3根未知色谱柱进行方法验证。同时以中间色谱峰脱氢延胡索碱为参照物,采用相对保留时间法对其他4个成分色谱峰的保留时间进行预测。比较这2种方法的预测准确性和色谱柱的符合率。结果:在10批次样品中,5个生物碱成分均有较好的分离。其中采用双标线性校正法的色谱峰预测准确率和色谱柱符合率均为100%,均显著高于相对保留时间法,能够...     

黄柏与关黄柏的化学成分及生物活性研究进展

黄皮树Phellodendron chinense、黄檗P.amurense的干燥树皮分别作为黄柏、关黄柏入药,二者在2005、2010、2015年版《中国药典》被分别收录。从这两种药材中分离出来的化学成分主要包括生物碱类、柠檬苦素类、酚酸类、萜类、苯丙素类、挥发性类等,具有抗菌、抗癌、抗糖尿病、保护心脑血管等多种生物活性。综述近年来对黄柏、关黄柏化学成分、生物活性的研究进展,为进一步研究两者药效物质基础、药理作用及临床合理用药提供参考依据。     

关黄柏的超临界CO2萃取物成分分析及抗氧化活性研究

目的 分析关黄柏萃取物的化学成分并考察其体外抗氧化活性。方法 采用超临界CO2萃取技术获得关黄柏萃取物,应用GC-MS分析其主要化学成分。利用邻苯三酚自氧化体系,考察萃取物对超氧自由基的清除能力。结果 关黄柏萃取物得率为4.68%,主要有1,5-二甲基-1,5-环辛二烯（9.55%）、顺-1-醋酸基-7-癸烯（7.44%）、反,反-2,4-癸二烯醛（7.28%）等30个成分。该萃取物对超氧自由基有一定的清除作用,其IC50值为1.44 g.L 1。结论 关黄柏超临界CO2萃取物的化学成分种类多,且有一定的抗氧化活性。     

Narrowbore high performance liquid chromatography of berberine and palmatine in crude drugs and pharmaceuticals with ion-pair extraction using cobalt thiocyanate reagent

For the simultaneous determination of berberine and palmatine from Phellodendri Cortex, Coptidis Rhizoma and pharmaceuticals, a new narrowbore HPLC method was developed with a simple and selective sample clean-up using cobalt thiocyanate reagent. Samples were sonicated with 2% hydrochloric acid for 30 min and protoberberine-type alkaloids in the resulting mixture were extracted with cobalt thiocyanate reagent and dichloroethane. The aliquot of dichloroethane layer was evaporated and the residue was dissolved for HPLC analysis. The recoveries of berberine and palmatine from Phellodendri Cortex, and Coptidis Rhizoma were better than 90%. Calibration curves for berberine and palmatine were linear over the concentration range of 0.1-50 microg/ml. Limits of quantitation for berberine and palmatine were 0.5 ng. This sample preparation process can be used for the identification of protoberberine-type alkaloids from crude drugs and oriental pharmaceutical preparations.     

三种中草药制剂对肠道致病菌体外抗菌作用的分析

目的：探讨分析三种中草药制剂对肠道致病菌体外抗菌作用。方法以连续稀释法检测三种中草药制剂（黄柏、黄连、黄芩）的最低抑菌浓度。结果三种中草药制剂对大肠杆菌的最低抑菌浓度：黄柏为6.3 g/L,黄连为1.6 g/L,黄芩为6.3 g/L;对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度：黄柏为3.2 g/L,黄连为0.8 g/L,黄芩为1.6 g/L;对副溶血性弧菌的最低抑菌浓度：黄柏为0.8 g/L,黄连为0.8 g/L,黄芩为1.6 g/L;对沙门菌的最低抑菌浓度：黄柏为3.2 g/L,黄连为3.2 g/L,黄芩为12.5 g/L;对志贺菌的最低抑菌浓度：均为3.2 g/L。结论三种中草药制剂（黄柏、黄连、黄芩）对肠道致病菌体外抗菌作用较强。     

"一测多评"含量测定法对黄柏配方颗粒与黄柏饮片适用性研究

目的:考察"一测多评"法同步测定黄柏配方颗粒及黄柏饮片中5种相同成分含量的可行性和准确性。方法:利用HPLC法,以小檗碱为内标物,计算与黄柏碱、药根碱、巴马汀和黄柏酮的相对校正因子,通过相对校正因子计算黄柏配方颗粒4种成分的含量并在黄柏饮片中进行验证,比较"一测多评"法测定值与外标法实测定值的相似度。结果:在一定线性范围内,黄柏碱、药根碱、巴马汀和黄柏酮与内标物小檗碱的相对校正因子分别为0.235 0,0.890 7,0.739 8,0.769 8,且在不同试验条件下重复性良好(RSD=0.18%~0.63%);黄柏配方颗粒与黄柏饮片"一测多评"法含量和外标实测法含量值所得结果无显著性差异。结论:建立的一测多评方法可用于黄柏配方颗粒和黄柏饮片的定量分析和质量评价。     

黄柏与甘草及桑寄生共煎对小檗碱提取率影响的研究

目的 :研究黄柏与甘草及桑寄生共煎对小檗碱提取率的影响。方法 :采用高效液相色谱法对黄柏单煎和与甘草及桑寄生共煎液中小檗碱提取量进行测定 ;色谱柱为HypersilBDSC18,流动相为乙腈 -33mmol/L磷酸二氢钾 -三乙胺 (20∶72∶0. 1) ,检测波长为345nm ,柱温为25℃ ,流速为1. 0ml/min。结果 :黄柏与甘草及桑寄生共煎使小檗碱的提出率明显降低。结论 :对含有上述药物的制剂在制定提取工艺时 ,将黄柏单独煎煮提取较好。     

黄柏及其酒和盐炙品改善热证大鼠能量代谢及其机制的研究

目的：探索黄柏、酒黄柏及盐黄柏对热证大鼠能量代谢的作用规律。方法黄柏及其酒和盐炙品水煎液9.519、1.058 g/kg ig大鼠7 d,测定生制黄柏对2,4-二硝基苯酚所致热证大鼠肛温,以及血浆中三碘甲腺原氨酸（T3）、四碘甲腺原氨酸（T4）、促甲状腺激素（TSH）、促甲状腺激素释放激素（TRH）、肝组织中乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、肝糖原、Na+-K+-ATP 酶和 Ca2+-Mg2+-ATP 酶的含量。结果生黄柏、盐黄柏均可以降低热证大鼠肛温,而酒黄柏的作用不明显。生黄柏、盐黄柏可以有效降低热证大鼠的血浆中甲状腺功能轴（T3、T4、TSH、TRH）和肝组织中 LDH、SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的含量,并能增加热证大鼠肝组织中糖原含量,而酒炙后对能量代谢指标含量作用减弱。结论生黄柏能够改善热证大鼠的能量代谢,且与甲状腺途径有关。盐炙后寒性增强,对热证大鼠的能量代谢有进一步的改善作用,而酒炙后,缓和黄柏的寒性,对能量代谢改善效果不显著。     

比较两种黄柏组方二妙胶囊的抗炎作用

目的 研究由关黄柏和川黄柏组成的二妙胶囊对急性炎症模型的影响.方法采用组织胺诱发大鼠皮肤通透性增加、二甲苯诱发小鼠耳肿胀和角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等急性炎症模型,观察两种黄柏组成的二妙胶囊对3种炎症模型的抗炎作用.结果 由关黄柏组方的二妙胶囊(A组)有抑制组胺所致大鼠皮肤通透性增加、二甲苯所致鼠耳肿胀、角叉菜胶诱发大鼠足趾肿胀等作用.由川黄柏组方的二妙胶囊(B组)仅有抑制二甲苯所致鼠耳肿胀的作用.同剂量下,B组作用弱于A组.结论 A组抗急性炎症作用强于B组.     

染色黄柏中金胺O的检测方法研究

目的:对市售黄柏染色品中化工染料进行鉴定,并研究其定量检测方法。方法:采用TLC法、HPLC-PAD法、HPLC-MS法,对多批市售黄柏样品进行定性、定量分析。结果:经检测8批市售品,有7批检出金胺O,其含量在20～110mg/100 g。结论:黄柏染色用化工染料为金胺O,本文建立的检测方法,可满足定性定量检测的要求。